土壤中分离霉菌

土壤中分离霉菌

培养基（ms加乳酸和抑菌物质）1ml量

土豆200g蔗糖30g 琼脂20g

大量元素母液50ml铁盐、微量元素、有机成分母液各10ml

乳酸5g氯霉素0.1g

---------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- 1、实验器材的准备与灭菌

*用报纸包扎好所需的培养皿等工具进行灭菌

*加热至160℃～170℃维持2小时

*用高压灭菌锅制备无菌水

*准备好取土的工具及酒精

---------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- 2、药品的称量

*用分析天平准确称量元素和药品

*称量后溶解配制成母液

*在进行少量药品的称量

---------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- 3、其他药品的称量

* 用天平称取土豆100g

*蔗糖30g

*琼脂20g

*放入抑菌物质0.1g

*乳酸5g

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---------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- 4、培养基的制备

* 取少量的水加入切好的土豆煮沸后过滤

*加入蔗糖和琼脂煮沸至琼脂溶解

*放入取好的大量元素等搅拌

*放入抑菌物质和乳酸

*加水至1L煮沸后即可

---------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- 5.培养基的分装

*把制作好的培养基倒入试管并进行包扎

*共倒入14支即可培养基为1/3到1/2之间

*剩下的倒入锥心瓶中

*包扎好准备灭菌

---------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- 6、灭菌

*打开高压灭菌锅加入适量的水

*把培养基放入锅内

*关闭灭菌锅后调整好压强和温度进行灭菌

*压力0.105pa121度20min

*灭菌后取出培养基

*取出后的试管放斜，锥形瓶中的进行培养皿倾倒

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7、

*台面进行清理及灭菌后打开风扇及照明灯

*从包好的报纸中取出灭菌后的培养皿

*在酒精的火焰旁左手微微打开培养皿左手倾倒

养基

*倾倒完成后待培养基冷却后翻转培养基

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8、无菌检测

*将倾倒好之后的培养皿和斜面放入恒温培养箱

*调节好温度28-30度

*培养1天后检查是否污染

---------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- 9、土样选取

*选三出距离超过200米的取样点

*把铲子和所需要的器具用酒精消毒

*把土壤挖开15厘米以下取一两勺土

*用灭菌后的纸包好

---------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- 10、无菌水分装

*取灭过菌的试管和和移液管进行分装

*在超净工作台上进行分装

*每支试管7ml无菌水

---------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- 11、泥土的稀释

*准确称取1g土样

*放入100ml无菌水中稀释

*震旦30min

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