血常规(血细胞分析仪、直方图) ppt课件
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血细胞分析仪检测指标与临床应用
4Biblioteka Baidu
血细胞分析仪
血细胞分析仪实质上是指 对一定体积内血细胞数量及异 质性进行分析的仪器，包括血 细胞计数与分类、血红蛋白测 定及网织红细胞计数等众多分 析项目，是临床检验工作中最 常用的仪器。
5
40年代末，美国的库尔特(W.H.Coulter)发明了电阻抗法 粒子计数技术的设计专利。
8
全自动血细胞分析仪运用了较先进的计算机技术和机械 系统，菜单式操作程序，条码阅读，自动吸取样品，血液 在机器内部自动稀释，效率高，检测量准确，有利于质控， 减少了操作者实验室感染的几率。且大部分采用表面活性 剂法测血红蛋白，避免了氰化物对环境的污染，是全面取 代半自动血细胞分析仪的必然趋势。目前还有将全自动血 细胞分析仪与自动涂片染色机、电脑及应用软件组合而成 的血液分析工作站，将多台全自动血细胞分析仪、全自动 网织红细胞分析仪、自动涂片染色机、机械连接系统、电 脑、高性能应用软件组合为一体的血液分析流水线（如 HST-330模块式全自动血液分析流水线）等。
第四篇 实验诊断
血液检查
1
血常规检查
• 即全血细胞分析，可以对感染、炎症、手术后、 血液系统疾病、肝脾病等进行辅助诊断、监测 治疗效果等。
2
标本采集与要求
抗凝剂 ：EDTA-K2 静脉采血方法 ：4小时内测定 毛细血管采血方法 ：半小时内测定 手指血与静脉血有差异，条件允许尽可能静脉采血 尽可能同一体位（血红蛋白、血细胞比容、红细胞计数于站位时增加）、一定 时间和近似生理条件下采血
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操作时，位于小孔两侧的电 极产生恒定电流。根据欧姆定 律电压变化与电阻变化成正比， 电阻值又同细胞体积成正比， 血细胞体积越大，电压越高， 在甄别器上的脉冲幅度就越大， 各种大小不同细胞产生的脉冲 信号分别送入仪器内电脑的各 个通道，经运算得出各种细胞 参数。目前，多数仪器在给出 细胞数据结果的同时还提供细 胞群体大小分布情况图形，称 之为细胞体积直方图。
⑸联合检测型：采用多种现代高科技技术，如利用电阻抗、激光、高 频电磁波、流式细胞术和化学染色、特殊溶血剂等多方位联合检 测同一个血细胞。此类仪器功能多，特异性强、速度快、获得参
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2.电阻抗法血细胞分析仪
血细胞与等渗电解质溶液相比为相对的不良导体，其 电阻值大于稀释液的电阻值。当血细胞通过检测器小 孔管微孔的孔径感受区时，检测器内外电极之间的恒 流源电路上电阻值瞬间增大，造成两极之间电压的变 化，产生一个电压脉冲信号。每次检测中产生的脉冲 信号数，即相当于检测出的细胞数。
50年代初，第一台血细胞分析仪(Coulter A型)应用于临 床检验。当时这种仪器为一个通道，仅能进行红细胞、 白细胞计数，故称为血细胞计数仪或血球计数仪。
60年代，在原基础上增加一个比色系统，可同时测定白 细胞数、红细胞数、血红蛋白浓度、平均红细胞体积 和血细胞比容。
70年代，开发了血小板计数，此时可做全血细胞计数。
中间细胞
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血小板和红细胞共用一个小孔管。正常人红细胞体积和血小板 体积有明显的界限。因此血小板计数准确容易。当血细胞悬液中含 有异常血细胞（如小红细胞）时，划分界限不清。为使血小板计数 有较高的准确性，计算机对血小板和红细胞分布图进行判断，将血 小板计数的上限阈值判定线放在红细胞和血小板分布图交叉部分的 最低处计数 。
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各项红细胞指数的检测原理:根据仪器检测的RBC、
HCT和Hb的数据，经仪器内存程序换算出红细胞平均体 积(MCV)、红细胞平均血红蛋白的含量(MCH)和红细胞 平均血红蛋白浓度(MCHC)。
红细胞体积分布宽度(RDW)由血细胞分析仪在检测红
细胞数量的过程中 ,同时测量红细胞体积大小的差异获得， 是反映外周血红细胞体积异质性的参数。RDW能直接、 客观、及时地反映红细胞大小不等的程度，对贫血的诊断 有重要意义。
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血细胞分析仪在进行细胞分析时，将每个细胞的脉冲根据 其体积大小分配并存储在相应的体积通道中，每个通道收 集的数据被统计出相对数，表示在Y轴上，体积数据以飞升 (fl)为单位，表示在X轴上。可将白细胞体积从30～450fl分 为256个通道，每个通道1.64fl，依据体积大小分别将其放 在不同的通道中，得到白细胞体积分布直方图。初步确认： 第一群是小细胞区，主要是淋巴细胞，体积在35～90fl之 间；第二群是中间细胞群，主要是单核细胞，体积在90～ 160fl，；第三群为大细胞区，主要是中性粒细胞，它分叶 多，颗粒多，体积可大至160fl以上。
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按检测原理
⑴电容型：通过改变两电极之间电容量，获得脉冲信号进行计数。
⑵光电型：利用细胞和稀释液对光的吸收度不同，使光敏元件在细胞 通过时产生脉冲信号而计数。
⑶激光型：细胞受到激光的照射产生光吸收、光散射、发射荧光，得 到光学的、电子的信号进行计数。
⑷电阻抗型：利用血细胞的电阻大于电解质溶液(稀释液)的电阻，细 胞通过微孔时两电极之间的阻抗值增大，产生电压脉冲信号而进 行血细胞计数和体积测定。国内产品均为电阻抗型。
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血红蛋白测定原理:在稀释的血液中加入溶血
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70年代末80年代中，根据白细胞大小不同而产生的阻抗值 或散射量的不同，已能对细胞进行分类(两分群、三分 群或五分类)，且一次可报告13～14个分析参数及红细 胞计数、白细胞计数、血小板计数三个直方图。
80年代末，应用流式细胞术，开发了网织红细胞计数仪。 90年代初，网织红细胞检测技术应用到血细胞计数仪上。 90年代中期研制出的多功能、多参数、多分类全自动血细
胞分析仪及检测的全自动化，把临床血液学检验提高到 了一个全新的水平。
7
1.血细胞分析仪分型
按自动化程度可分为半自动血细胞分析仪和全自动血细胞分 析仪。
半自动血细胞分析仪需在主机外匹配稀释器，采集的血标 本经稀释器预稀释后再上机检测。这类仪器工作效率低，吸样 准确性差，多为手工加溶血素、混匀等，其加入量及放置时间、 因人为因素，随机误差较大，不利于质控，并且易发生“半堵 孔”或“堵孔”现象。90年代以来，在发达国家已被逐步淘汰， 国内用户也为数不多，趋于淘汰。
血细胞分析仪检测指标与临床应用
4Biblioteka Baidu
血细胞分析仪
血细胞分析仪实质上是指 对一定体积内血细胞数量及异 质性进行分析的仪器，包括血 细胞计数与分类、血红蛋白测 定及网织红细胞计数等众多分 析项目，是临床检验工作中最 常用的仪器。
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40年代末，美国的库尔特(W.H.Coulter)发明了电阻抗法 粒子计数技术的设计专利。
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全自动血细胞分析仪运用了较先进的计算机技术和机械 系统，菜单式操作程序，条码阅读，自动吸取样品，血液 在机器内部自动稀释，效率高，检测量准确，有利于质控， 减少了操作者实验室感染的几率。且大部分采用表面活性 剂法测血红蛋白，避免了氰化物对环境的污染，是全面取 代半自动血细胞分析仪的必然趋势。目前还有将全自动血 细胞分析仪与自动涂片染色机、电脑及应用软件组合而成 的血液分析工作站，将多台全自动血细胞分析仪、全自动 网织红细胞分析仪、自动涂片染色机、机械连接系统、电 脑、高性能应用软件组合为一体的血液分析流水线（如 HST-330模块式全自动血液分析流水线）等。
第四篇 实验诊断
血液检查
1
血常规检查
• 即全血细胞分析，可以对感染、炎症、手术后、 血液系统疾病、肝脾病等进行辅助诊断、监测 治疗效果等。
2
标本采集与要求
抗凝剂 ：EDTA-K2 静脉采血方法 ：4小时内测定 毛细血管采血方法 ：半小时内测定 手指血与静脉血有差异，条件允许尽可能静脉采血 尽可能同一体位（血红蛋白、血细胞比容、红细胞计数于站位时增加）、一定 时间和近似生理条件下采血
11
操作时，位于小孔两侧的电 极产生恒定电流。根据欧姆定 律电压变化与电阻变化成正比， 电阻值又同细胞体积成正比， 血细胞体积越大，电压越高， 在甄别器上的脉冲幅度就越大， 各种大小不同细胞产生的脉冲 信号分别送入仪器内电脑的各 个通道，经运算得出各种细胞 参数。目前，多数仪器在给出 细胞数据结果的同时还提供细 胞群体大小分布情况图形，称 之为细胞体积直方图。
⑸联合检测型：采用多种现代高科技技术，如利用电阻抗、激光、高 频电磁波、流式细胞术和化学染色、特殊溶血剂等多方位联合检 测同一个血细胞。此类仪器功能多，特异性强、速度快、获得参
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2.电阻抗法血细胞分析仪
血细胞与等渗电解质溶液相比为相对的不良导体，其 电阻值大于稀释液的电阻值。当血细胞通过检测器小 孔管微孔的孔径感受区时，检测器内外电极之间的恒 流源电路上电阻值瞬间增大，造成两极之间电压的变 化，产生一个电压脉冲信号。每次检测中产生的脉冲 信号数，即相当于检测出的细胞数。
50年代初，第一台血细胞分析仪(Coulter A型)应用于临 床检验。当时这种仪器为一个通道，仅能进行红细胞、 白细胞计数，故称为血细胞计数仪或血球计数仪。
60年代，在原基础上增加一个比色系统，可同时测定白 细胞数、红细胞数、血红蛋白浓度、平均红细胞体积 和血细胞比容。
70年代，开发了血小板计数，此时可做全血细胞计数。
中间细胞
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血小板和红细胞共用一个小孔管。正常人红细胞体积和血小板 体积有明显的界限。因此血小板计数准确容易。当血细胞悬液中含 有异常血细胞（如小红细胞）时，划分界限不清。为使血小板计数 有较高的准确性，计算机对血小板和红细胞分布图进行判断，将血 小板计数的上限阈值判定线放在红细胞和血小板分布图交叉部分的 最低处计数 。
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各项红细胞指数的检测原理:根据仪器检测的RBC、
HCT和Hb的数据，经仪器内存程序换算出红细胞平均体 积(MCV)、红细胞平均血红蛋白的含量(MCH)和红细胞 平均血红蛋白浓度(MCHC)。
红细胞体积分布宽度(RDW)由血细胞分析仪在检测红
细胞数量的过程中 ,同时测量红细胞体积大小的差异获得， 是反映外周血红细胞体积异质性的参数。RDW能直接、 客观、及时地反映红细胞大小不等的程度，对贫血的诊断 有重要意义。
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血细胞分析仪在进行细胞分析时，将每个细胞的脉冲根据 其体积大小分配并存储在相应的体积通道中，每个通道收 集的数据被统计出相对数，表示在Y轴上，体积数据以飞升 (fl)为单位，表示在X轴上。可将白细胞体积从30～450fl分 为256个通道，每个通道1.64fl，依据体积大小分别将其放 在不同的通道中，得到白细胞体积分布直方图。初步确认： 第一群是小细胞区，主要是淋巴细胞，体积在35～90fl之 间；第二群是中间细胞群，主要是单核细胞，体积在90～ 160fl，；第三群为大细胞区，主要是中性粒细胞，它分叶 多，颗粒多，体积可大至160fl以上。
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按检测原理
⑴电容型：通过改变两电极之间电容量，获得脉冲信号进行计数。
⑵光电型：利用细胞和稀释液对光的吸收度不同，使光敏元件在细胞 通过时产生脉冲信号而计数。
⑶激光型：细胞受到激光的照射产生光吸收、光散射、发射荧光，得 到光学的、电子的信号进行计数。
⑷电阻抗型：利用血细胞的电阻大于电解质溶液(稀释液)的电阻，细 胞通过微孔时两电极之间的阻抗值增大，产生电压脉冲信号而进 行血细胞计数和体积测定。国内产品均为电阻抗型。
15
血红蛋白测定原理:在稀释的血液中加入溶血
6
70年代末80年代中，根据白细胞大小不同而产生的阻抗值 或散射量的不同，已能对细胞进行分类(两分群、三分 群或五分类)，且一次可报告13～14个分析参数及红细 胞计数、白细胞计数、血小板计数三个直方图。
80年代末，应用流式细胞术，开发了网织红细胞计数仪。 90年代初，网织红细胞检测技术应用到血细胞计数仪上。 90年代中期研制出的多功能、多参数、多分类全自动血细
胞分析仪及检测的全自动化，把临床血液学检验提高到 了一个全新的水平。
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1.血细胞分析仪分型
按自动化程度可分为半自动血细胞分析仪和全自动血细胞分 析仪。
半自动血细胞分析仪需在主机外匹配稀释器，采集的血标 本经稀释器预稀释后再上机检测。这类仪器工作效率低，吸样 准确性差，多为手工加溶血素、混匀等，其加入量及放置时间、 因人为因素，随机误差较大，不利于质控，并且易发生“半堵 孔”或“堵孔”现象。90年代以来，在发达国家已被逐步淘汰， 国内用户也为数不多，趋于淘汰。