HER2免疫组化检测的质量控制
胃癌HER2 免疫组化判读及报告SOP
胃癌HER2免疫组化判读及报告1. 目的：保证胃癌HER2判读的准确。
2. 责任人：负责胃癌治疗相关指标专项报告的责任医生。
3. 步骤：3.1 拿到切片后，常规核对编号、标识等资料；3.2 低倍镜（2×或4×）扫描整个切片（包括阴性及阳性对照片），查看有无掉片、皱褶、缺损等影响判读的情况；3.3 低倍镜观察，评估组织的质量，对癌组织进行大致定位，评估染色效果；3.4 观察阳性及阴性对照片的染色效果，如果正常，进行下一步观察；3.5 在10×显微镜观察，判断癌组织着色细胞的比例；3.6 20×显微镜（必要时40×）观察膜染色的完整性，染色的深浅，再按标准进行评分；3.7评分标准（中国胃癌HER2检测指南2011版）：3.7.1：手术样本评分标准0: 无着色或<10%肿瘤细胞膜染色；1+：≥10% 肿瘤细胞微弱或隐约可见膜染色；仅有部分细胞膜染色。
2+：≥10%肿瘤细胞有弱到中度的基底侧膜、侧膜或完全性膜染色。
3+：≥10%肿瘤细胞基底侧膜、侧膜或完全性膜强染色。
3.7.2：活检样本评分标准0: 任何肿瘤细胞无膜染色。
1+：肿瘤细胞团微弱或隐约可见膜染色（不管着色的肿瘤细胞占整个组织的百分比）。
2+：肿瘤细胞团有弱到中度的基底侧膜、侧膜或完全性膜染色（不管着色的肿瘤细胞占整个组织的百分比，但至少有5个成簇的肿瘤细胞着色）。
3+：肿瘤细胞的基底侧膜、侧膜或完全性膜强染色（不管着色的肿瘤细胞占整个组织的百分比，但至少有5个成簇的肿瘤细胞着色）。
3.8 报告的内容：患者信息，标本信息（病理号和蜡块号），标本类型，标本固定液的种类，标本固定前时间，标本固定的时间，抗体信息（克隆号及生产商），使用方法（检测方法及生产商），对照片情况，样本量是否足够用于评估，判读标准（胃癌HER2检测指南2011版），判读结果及结论，注释。
4. 质量控制：4.1 两名判读医生交互阅片，计算两人的一致率，需达95％以上；4.2 每月统计分析HER2评分的分布情况，与文献报道及既往本科室的HER2评分的分布不能有太大的偏差；4.3 每月分析HER2免疫组化与FISH结果的一致性，达到ASCO/CAP的标准。
免疫组化病理技术质量控制问题分析与对策
免疫组化病理技术质量控制问题分析与对策发布时间：2021-10-18T07:05:06.158Z 来源：《世界复合医学》2021年9期作者：付鑫[导读] 分析免疫组化病理技术在质量控制中所存在的问题，并提出措施。
付鑫沈阳市第四人民医院110000摘要：目的：分析免疫组化病理技术在质量控制中所存在的问题，并提出措施。
方法:共随机选择130份样本进行研究分析，采取摇号方式进行分组，前者为质量控制前，后者为实施质量控制后，对比其制片有效率。
结果：通过收集数据来看，实施质量控制后的观察组制片有效率明显有所提升。
（P＜0.05）。
结论：在进行制片时，只有做好免疫组化病理技术控制工作，才能切实提高质量及检验结果的精确性。
关键词：免疫组化病理技术；问题；措施引言：对于病理技术来言，只有充分认识其不足之处，并采取对应的解决措施，才能从根本推动其发展建设，这也是提高临床病理学质量的主要手段。
本次研究分析了免疫组化病理技术存在的问题，并采取相应措施，具体如下：1 资料与方法1.1一般资料在院内收治的患者中选取130例需进行切片检查的患者作为研究对象，并随机分为对照与观察两组，每组为65份切片。
研究中所选择的器材与试剂基本较为均衡（P＞0.05）。
1.2方法在进行切片前，需对130份样本采取脱水、透明、浸蜡、包埋等方式展开常规处理，在做好充分准备工作后就可展开后续操作，切片的尺寸一般控制在1.5cm×2.0cm，同时将切片分为数量对等的两组，对照组实施传统病理切片技术手段，观察组为采取质量控制后的切片操作模式。
在组别分类且已完成后，医护人员就需要利用显微镜对其两组的切片进行详细观察，在此过程中还应当对其病理质量展开对比，找出实际问题所在，并针对此问题采取相应的防治措施，以此来最大程度的提升制片质量，保证医学检测结果的精确性。
1.3 观察指标对所有切片样本的实际制片质量进行评估，并分为优、良、差三个等级，有效制片率=（优质＋良质总数）÷单组实验样本数。
乳腺癌her2标准
乳腺癌her2标准乳腺癌HER2检测标准主要包括以下几个方面：1. HER2基因扩增：荧光原位杂交（FISH）法是检测HER2基因扩增的金标准。
根据《2014年NCCN乳腺癌临床实践指南》和《乳腺癌HER2检测指南2014版》，FISH检测结果可分为以下三种：- 阳性：HER2基因拷贝数≥2.0；- 阴性：HER2基因拷贝数<2.0；- 模糊：HER2基因拷贝数在2.0~2.9之间。
2. HER2蛋白表达：免疫组化（IHC）法是检测HER2蛋白表达的主要方法。
根据《乳腺癌HER2检测指南2014版》，HER2蛋白表达可分为以下四种：- 阳性：细胞膜染色强度为3+，即大量细胞呈强阳性；- 阴性：细胞膜染色强度为0或1+，即少量或无细胞呈阳性；- 弱阳性：细胞膜染色强度为2+，即部分细胞呈阳性；- 不确定：细胞膜染色强度为1+或2+，但无法明确判断。
3. 检测策略：指南推荐采用IHC与FISH相结合的检测策略。
对于IHC检测结果为阳性的病例，需进一步进行FISH检测以确认HER2基因扩增状态。
对于IHC检测结果为阴性的病例，一般无需进行FISH检测。
4. 应用场景：所有乳腺原发性浸润性癌患者均应进行HER2检测。
复发灶和转移灶的HER2检测也有助于评估患者病情和选择合适的治疗方案。
5. 治疗指导：HER2阳性乳腺癌患者对某些靶向药物（如赫赛汀）敏感，治疗效果更佳。
HER2基因扩增状态和蛋白表达水平可作为预测药物治疗效果的重要依据。
在实际操作中，应遵循相关指南和规范进行HER2检测，以指导临床诊疗。
同时，加强临床病例沟通和实验室质量控制，确保检测结果的准确性和可靠性。
HER2检测试剂盒(免疫组化法)说明书-Agilent
DAB 显色液。 5% 3, 3’-二氨联苯胺四盐酸显色剂溶液。
3×500mL
2×5
抗原修复液（包含清洗剂）（10×）。 0.1 mol/L柠檬酸盐缓冲液，1% 吐温-20，pH 5.7。
质控切片
P04605CN_01_SK00121-2CN/2017.02 2/26
P04605CN_01
10 × 试剂瓶
外。该试剂盒所提供的材料足够用于最多 10 次免疫组化染色。
数量
说明
1×22 mL
过氧化物酶阻断剂。 3%的过氧化氢，含有15 mmol/L的叠氮钠（NaN3）。
1×12 mL
1×22 mL
兔抗人HER2多克隆抗体。 即用型亲和分离的抗体,保存在0.05 mol/L Tris/HCl, 0.1 mol/L NaCl, 1%BSA, 酒 石黄(Tartrazin), 专利蓝V(Patentblue V), 15 mmol/L NaN3, pH 7.2溶液中。 免疫原：合成的HER2蛋白的C-末端（细胞质部分）片段部分，并偶联至血蓝蛋 白上。
2×22 mL
阴性质控试剂。
与HER2抗体等价蛋白浓度下的正常兔血清免疫球蛋白成分，保存在0.05 mol/L Tris/HCl, 0.1 mol/L NaCl, 15 mmol/L NaN3, pH 7.2，并含有1%BSA稳定剂的溶液 内。
1×1mL
DAB底物缓冲液。 50 mM咪唑, 1mM N, N'-乙基双 (2-[2-羟基苯基]甘氨酸) (EDHPA), 0.1%乙基苯基 聚乙二醇（Nonidet P-40）, 0.02% 过氧化氢, 0.01% 氯化苯二甲烃铵, pH 7.5。
【检测原理】
HercepTest™检测试剂盒包含对常规处理的、石蜡包埋的样本进行两步法免疫组化染色 所需要的全部试剂。兔抗人 HER2 蛋白一抗孵育后，该试剂盒采用基于葡聚糖技术的即用型 显色试剂。该试剂包含羊抗兔二抗和偶联至葡聚糖多聚体骨架上的辣根过氧化酶分子。因此， 不需要再依次使用连接抗体，人免疫球蛋白显色试剂和胎牛血清之间的交叉反应也因为使用 固相吸附材料而消除。依次填加的色素原的酶转换，也使得显色反应发生于抗原所在部位。 标本需要复染和封片。反应结果在光学显微镜下观察。质控玻片包含 3 个福尔马林固定、石 蜡包埋的人类乳腺癌细胞系，染色强度分别在 0、1+、以及 3+，提供用于对染色结果进行 评估。这些细胞的染色强度与其所表达的受体密度一致。
免疫组化病理技术质量控制问题及对策分析
免疫组化病理技术质量控制问题及对策分析摘要：目的：研究免疫组化病理技术质量控制问题及对策。
方法：选择2020年01月－2021年12月到本院接受免疫病理诊断的患者50例，对全部患者实施常规病理免疫组化制片、免疫组化病理技术质控管理后制片。
结果：实验组总有效制片率49（98.00%）高于对照组37（74.00%），P＜0.05。
结论：运用免疫组化病理技术对疾病诊断价值较高，更需探析质量控制存在的问题，分析相关对策。
关键词：免疫组化病理技术；质量控制；问题；对策免疫组化病理技术是目前临床比较普遍运用的一种病理检测技术，此技术的运用可提高病理诊断准确度。
但需意识到，此种技术的运用对技术和操作技能要求高。
若是检测中任意一环发生问题，都会严重地影响到制片的效果。
为了保障免疫组化病理诊断的准确度，操作流程要按照病理流程开展，使得免疫组化流程更为科学。
这就需重点对技术质量控制，探析质控存在的问题，依照问题分析解决对策，旨在提升制片质量和有效概率[1]。
基于此，本文将分析免疫组化病理技术质量控制问题及对策，报道如下：1.一般资料与方法1.1一般资料选择2020年01月－2021年12月到本院接受免疫病理诊断的患者50例，对全部患者实施常规病理免疫组化制片、免疫组化病理技术质控管理后制片，患者平均年龄（46.14±2.31）岁，一般资料（P＞0.05），探析质控问题和解决对策，评估诊断价值。
1.2方法两组内患者均选取相同的实验试剂，其中包含：甲醛、无水乙醇、二甲苯、伊红染液、苏木素染液、DAB液等。
运用莱卡RM2235组织切片设备、樱花Tissue_TekVIP5Jr智能环保生物组织脱水设备、恒温干燥箱设备以及生物组织摊烤片机设备。
全部标本都接受常规的脱水处理、浸蜡处理以及包埋后切片处理等等，标本面积需控在1.5×2cm，切片厚度4—6um。
对照组操作是传统的切片操作，而实验组操作是质量控制之后的切片操作。
研究免疫组化病理技术质量控制措施
研究免疫组化病理技术质量控制措施发布时间：2021-05-26T08:51:58.095Z 来源：《健康世界》2021年3期作者：鞠学萍[导读] 目的研究在免疫组化病理技术质量控制时所使用的措施。
方法将本院自2019年5月~2020年5月收治的62例在我院住院的患者当作研究对象，根据是否进行质量控制进行分组，每组31例。
所有患者需要取胃肠组织样本进行病理化分析，参照组没有进行质量控制，使用常规方法切片；实验组实施质量控制管理，然后进行切片制作，对比两组有效制片情况。
结果对比有效制片情况，实验组有效制片率为96.77%，明显高于参照组（P＜0.05）。
鞠学萍大庆市第四医院 163712摘要：目的研究在免疫组化病理技术质量控制时所使用的措施。
方法将本院自2019年5月~2020年5月收治的62例在我院住院的患者当作研究对象，根据是否进行质量控制进行分组，每组31例。
所有患者需要取胃肠组织样本进行病理化分析，参照组没有进行质量控制，使用常规方法切片；实验组实施质量控制管理，然后进行切片制作，对比两组有效制片情况。
结果对比有效制片情况，实验组有效制片率为96.77%，明显高于参照组（P＜0.05）。
结论在进行免疫组化病理技术质量控制的时候，有效地进行质量控制管理，能够将免疫组化病理检验技术的质量提升，并提高有效制片率，为临床提供更加准确的参考数据，也便于检验。
关键词：免疫组化病理技术；质量控制；措施[Abstract] Objective To study the measures used in the quality control of immunohistochemical technique.Methods 62 cases of hospitalized patients in our hospital from May 2019 to may 2020 were selected as the research objects and divided into groups according to whether quality control was carried out，with 31 cases in each group.All patients need to take gastrointestinal tissue samples for pathological analysis，the reference group did not carry out quality control，using conventional methods of slicing；the experimental group implemented quality control management，and then slicing，compared with the two groups of effective slicing.Results compared with the effective production，the effective production rate of the experimental group was 96.77%，which was significantly higher than that of the reference group（P < 0.05）.Conclusion in the quality control of immunohistochemical pathology technology，effective quality control management can improve the quality of immunohistochemical pathology test technology，and improve the effective production rate，provide more accurate reference data for clinical，and also facilitate the test.[Key words] immunohistochemical technique；quality control；measures对于医院检验科来说，常见技术中就包含免疫组化病理技术，能够对病理组织进行有效的检验，从而为临床诊断和治疗疾病提供参考，有着非常重要的意义。
her2肺癌免疫组化判读标准
her2肺癌免疫组化判读标准
一、染色强度
染色强度是评估Her2蛋白表达水平的重要指标。
根据染色深浅程度，可以将染色强度分为0、1、2、3四个等级。
其中，0级表示无染色，3级表示染色最深且最明显。
在判读时，需要注意染色是否均匀，以及细胞核和细胞质的染色情况。
二、染色细胞比例
染色细胞比例是指染色阳性的肿瘤细胞所占的比例。
根据不同指南的规定，阳性细胞比例的阈值可能有所不同，一般在10%-30%之间。
因此，在判读染色细胞比例时，需要参考各指南的具体要求，同时注意观察阳性细胞分布的均匀性。
三、Her2蛋白定位
Her2蛋白主要定位在细胞膜上。
在判读时，需要注意Her2蛋白的定位情况，判断其是否主要集中在细胞膜上表达。
如果细胞膜上Her2蛋白表达明显，则有助于判断为Her2阳性；如果细胞质内Her2蛋白表达较多，则可能影响对Her2蛋白的正确判断。
四、Her2基因扩增
Her2基因扩增状态是判断Her2状态的重要指标之一。
通过荧光原位杂交技术（FISH）或比较基因组杂交技术（CGH）等分子生物学技术，可以检测Her2
基因的扩增状态。
根据基因拷贝数的不同，可以将Her2基因扩增状态分为阴性、低表达、中表达、高表达四个等级。
在判读时，需要注意基因拷贝数的准确性以及与染色强度和染色细胞比例的对应关系。
综上所述，Her2肺癌免疫组化判读标准需要综合考虑染色强度、染色细胞比例、Her2蛋白定位和Her2基因扩增等多个方面。
在判读时，需要注意各项指标的准确性以及相互之间的对应关系，以确保最终结果的可靠性。
免疫组化的标准化和质量控制
免疫组化的标准化和质量控制免疫组化是一项综合性的操作技术,是病理诊断的主要辅助手段之一，其影响因素复杂,包括技术人员是否熟练掌握整个实验的操作程序,抗体的特异性,检测方法的敏感性,组织的固定,抗原的修复及修复液的ＰH值等众多因素。
步骤较多,且环环相扣,加强质量管理和可信性尤为重要。
现就我科近年来免疫组化染色和具体操作过程中进行精细而有效的全程质控,具体操作规程和质控事项综述如下:一、标本的固定:标本的及时固定是最重要的环节,也是不可逆的，我科要求手术室设立专人专管制度,普通标本离体后要求手术室及时固定,特殊标本离体后及时送我科当天由取材医师及时剖开固定,淋巴结切开固定，乳腺标本每隔一厘米切开固定,胃肠标本剖开固定,首选１0%的中性缓冲福尔马林固定液固定，由于中性缓冲福尔马林液渗透力强,组织收缩小，能够使大多数抗原物质保存较好,提高免疫组织化学检测的阳性率.固定液的量一般为组织块体积的５-10倍,小标本固定时间为4—6小时，大标本固定时间为1８-２4小时，固定后水洗１0-20分,利用蜡块内抗原的长期保存。
二、脱水：我科在脱水程序中设置一个后固定步骤，弥补病理标本取材时固定不良造成的组织形态缺陷和抗原定位不良现象．同时建立以处理组织标本块数2０00块为标准的组织脱水试剂规范化更换制度，保证脱水质量是保证组织切片质量的前题,这一点对免疫组化染色尤为重要。
三、切片、烤片、脱蜡:切片厚度3—4个微米之间，淋巴结更薄些，切片完整，厚薄均匀,无皱褶和刀痕,烤片温度60摄氏度温箱烤片1-2小时,暂不染色的切片放置４摄氏度的冰箱,短时间保存，脱蜡必须干净。
四、选择优质的抗体及检测系统是优秀染片质量的保证，我科每月的组化切片为5０0左右，一直是手工操作，严格的操作规程非常重要，每一步细化到人，我科一直沿用中杉金桥的工作液试剂盒，效果稳定,参加多次省质控及全国质控都获得合格证书．五、抗原修复:我科一直采用高压修复,用大功率加热至沸腾后,将功率调至中档，再放入切片,加盖,加减压阀继续加热至冒气并维持2分钟后,撤火缓慢冷却。
免疫组化在临床诊断中的应用
免疫组化在临床诊断中的应用在临床病理诊断中，免疫组织化学（IHe）是一种很重要的技术和手段，从20世纪70年代开始，免疫组化技术就应用于病理诊断，对于诊断肿瘤、肿瘤分类、判断预后产生了巨大的影响，同时也扩展了人们对于各种疾病及肿瘤形成过程的认识，提高了病理诊断与研究水平。
但是，随着免疫组化的广泛应用，发现免疫组化技术存在一些局限性。
深入研究免疫组化原理和技术，必须熟悉各种抗体真阳性反应部位，实现实验室间免疫组化标准化，使免疫组化在病理诊断中发挥最大的辅助作用。
在病理诊断中，随着各种抗体新的用途不断被发现及越来越多的新型抗体的出现，免疫组化在肿瘤诊断及鉴别诊断、分类、预后判断等方面产生了重大的影响。
由于免疫组化技术也存在一些局限性，因此，深入研究免疫组化原理和技术，并努力实现规范化的操作，才能充分发挥免疫组化在病理的诊断及鉴别诊断、判断预后、指导临床治疗中的作用。
1.免疫组化技术观察组织切片中抗原的数量及其在组织中的分布情况，对抗原进行定位、定性及定量的研究，称为免疫组织化学，由于抗原与抗体特异性结合，因此通过免疫组化使标记抗体的显色剂（酶、荧光素、同位素、金属离子等等）显色来确定组织细胞内抗原（多肽和蛋白质）。
IHC所用标本主要为两大类:组织标本和细胞标本，其中制作组织标本最常用、最基本的方法是石蜡切片。
石蜡切片对于组织形态保存好，有利于各种染色对照观察，而且能长期保存；石蜡切片中使用的甲醛固定剂对组织内抗原暴露有一定的影响，但可进行抗原修复，是免疫组化中首选的组织标本制作方法。
2.免疫组化技术在临床诊断中的作用目前免疫组化技术应用于临床主要有以下几个方面：2.1肿瘤良恶性的判断对于反应性增生还是肿瘤性增生，可用免疫球蛋白（Ig）的轻链抗体检测B淋巴细胞增生的单克隆或多克隆性来区别。
在滤泡反应性增生时，滤泡反应中心的细胞不表达细胞凋亡蛋白（bc1-2）,be1-2阴性；而在滤泡性淋巴瘤中，由于90%以上肿瘤性滤泡细胞有bc1-2的高表达，bc1-2阳性。
HER-2染色在两种不同免疫组化染色平台结果不一致的分析
HER-2染色在两种不同免疫组化染色平台结果不一致的分析申敬伟董芳莉杨海军安阳市肿瘤医院病理中心，河南455000通信作者：杨海军，Email：【摘要】目的分析HER-2染色在两种不同免疫组化染色平台结果不一致的原因。
方法收集2019年1—9月本院病理科存档的肿瘤标本40例，25例浸润性乳腺癌和15例胃癌在Roche VentanaXT和Leica Bond Max全自动免疫组化仪上分别进行HER-2染色，其结果严格参照HER-2检测指南进行判读。
结果25例浸润性乳腺癌HER-2在Roche Ventana XT和Leica Bond Max全自动免疫组化仪的染色结果比较差异有统计学意义（P＜0.05），Kappa值0.135，一致性较差。
15例胃癌HER-2在Roche Ventana XT和Leica Bond Max全自动免疫组化仪的染色结果比较差异无统计学意义（P＞0.05），Kappa值0.186，一致性较差。
结论不同免疫组化染色平台染色效果存在一定的差异，为了提高病理切片质量，推进规范化操作流程，针对不同的抗体选用合适的染色平台。
【关键词】染色平台；免疫组织化学；HER-2Inconsistent analysis of HER-2staining results in two different immunohistochemical staining platformsShen Jingwei,Dong Fangli,Yang HaijunPathological Center,Anyang Tumor Hospital,Anyang455000,ChinaCorresponding author:Yang Haijun,Email:【Abstract】Objective To analyze the reasons of the inconsistent results of HER-2 staining in two different immunohistochemical staining platforms.Methods HER-2staining was performed in25cases of invasive breast cancer and15cases of gastric cancer on Roche Ventana XT and Leica Bond Max automatic immunohistochemistry autostainer,respectively,and the results were interpreted strictly in accordance with the HER-2guidelines.Results The staining results of HER-2 in Roche Ventana XT and Leica Bond Max staining platforms of25cases of invasive breast cancer showed statistically significant difference and poor consistency(P<0.05,Kappa=0.135).In15cases of gastric cancer,there was no statistically significant difference(P>0.05),but the consistency was poor(Kappa=0.186).Conclusion In order to improve the quality of pathological sections and promote the standardized operation process,appropriate staining platforms should be selected for different antibodies.【Key words】Staining platform;Immunohistochemistry;HER-2人表皮生长因子受体-2（HER-2）是定位于染色体17q12-21，32上的原癌基因-人表皮生长因子受体2基因（C-erbB-2基因）编码的相对分子质量为185000的跨膜受体样蛋白，具有酪氨酸激酶活性。
乳腺癌HER2免疫组化判读及报告SOP
广东省人民医院病理医学部病理科乳腺癌HER2免疫组化判读及报告SOP1.目的：保证乳腺HER2判读的准确。
2.责任人：负责乳腺癌治疗相关指标专项报告的责任医生。
3.步骤：3.1拿到切片后，常规核对编号、标识等资料；3.2低倍镜（2×或4×）扫描整个切片（包括阴性及阳性对照片），查看有无掉片、皱褶、缺损等影响判读的情况；3.3低倍镜观察，评估组织的质量，对浸润癌进行大致定位，浸润癌的大致范围，染色效果；3.4观察阳性及阴性对照片的染色效果，如果正常，进行下一步观察；3.5观察正常乳腺导管的着色情况，应该无染色或弱(至多弱－中度强度)染色，且整个切片对比鲜明，间质无着色，再进行下一步观察；3.6在10×观察，判断浸润癌着色细胞的比例；3.720×（必要时40×）观察膜染色的完整性，染色的深浅，再按标准进行评分；3.8评分标准（中国乳腺癌HER2检测指南2009版）：0: 无着色；1+：任何比例的浸润癌细胞膜的呈现微弱、不完整的细胞膜着色；2+：>10%的浸润癌细胞呈现弱－中等强度、完整但不均匀的细胞膜棕黄着色或<30%的浸润癌细胞呈现强且完整的细胞膜棕褐着色；3+：>30%的浸润癌细胞呈现强且完整的细胞膜棕褐着色；3.9报告的内容：患者信息，标本信息（病理号和蜡块号），标本类型，标本固定液的种类，标本固定前时间，标本固定的时间，抗体信息（克隆号及生产商），使用方法（检测方法及生产商），对照片情况，样本量是否足够用于评估，判读标准（乳腺癌HER2检测指南2009版），判读结果及结论，注释。
4.质量控制：4.1两名判读医生交互阅片，计算两人的一致率，需达95％以上；4.2每月统计分析HER2评分的分布情况，与文献报道及既往本科室的HER2评分的分布不能有太大的偏差；4.3每月分析HER2免疫组化与FISH结果的一致性，达到ASCO/CAP的标准。
HER2免疫组化检测的质量控制培训
质量控制培训效果评估
培训满意度
培训内容：是否全面、实用、易懂
培训方式：是否灵活、ຫໍສະໝຸດ 动性强培训效果：是否提高检测技能和准确率
培训反馈：是否及时、有效、有针对性
知识掌握程度
培训后，员工对HER2免疫组化检测相关知识的掌握程度
员工对检测结果的分析和解读能力
员工在实际操作中，对检测流程的熟练程度
员工对检测过程中可能出现的问题的解决能力
结果判读：根据染色强度和阳性细胞比例进行评分
01
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03
04
检测方法
免疫组化染色法：使用抗体与组织切片上的抗原结合，通过显色反应显示抗原的存在和分布
荧光免疫组化染色法：使用荧光标记的抗体与组织切片上的抗原结合，通过荧光显微镜观察抗原的存在和分布
酶联免疫吸附试验（ELISA）：使用酶标记的抗体与组织切片上的抗原结合，通过酶催化底物产生颜色反应显示抗原的存在和分布
实际操作能力
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操作流程：熟悉检测流程，掌握关键步骤
02
操作技巧：掌握操作技巧，提高检测效率
03
结果分析：准确解读检测结果，判断检测质量
04
问题解决：能够解决实际操作中遇到的问题，提高检测质量
谢谢
演讲人
HER2免疫组化检测的质量控制培训
01.
02.
03.
04.
目录
HER2免疫组化检测概述
质量控制要点
质量控制培训内容
质量控制培训效果评估
1
HER2免疫组化检测概述
检测原理
HER2蛋白表达：HER2基因扩增或过表达
免疫组化技术：利用抗体与抗原结合的原理进行检测
检测步骤：样本处理、抗体孵育、显色、结果判读
荧光原位杂交与免疫组化联合检测乳腺癌组织HER-2价值评价
荧光原位杂交与免疫组化联合检测乳腺癌组织HER-2价值评价摘要目的分析荧光原位杂交（FISH）与免疫组化（IHC）联合使用对乳腺癌患者HER-2检测的效果。
方法选取我院收治的乳腺癌患者96例作为实验组，另选取96名健康志愿者作为对照组，对比两种检测方法检测效果。
结果 FISH与IHC检出率差异较大，其中FISH能够阳性检出率远高于IHC，而IHC阴性检出率远高于FISH，两种方法合用检出正确率为100%。
结论 FISH、IHC联合使用能够有效避免假阴性和假阳性的发生，具有更高的检出准确率。
关键词乳腺癌；荧光原位杂交；免疫组化HER-2乳腺癌是目前影响女性生命健康的最常见的肿瘤，据世界卫生组织统计，乳腺癌的发病已经不仅局限于女性，在男性身上也发现了乳腺癌，对乳腺癌的研究刻不容缓，目前尚没有一种机制能够完全证明乳腺癌的发生、发展，但HER-2的异常是乳腺癌患者的共同特征，因此，把HER-2作为检出乳腺癌的重要指标[1]。
在本次研究中重点分析FISH、IHC联合使用对乳腺癌患者HER-2检测的效果，现将试验流程以及结果分析如下：1基本资料和分析方法1.1基本资料选取我院收治的乳腺癌患者96例作为实验组，另选取96名健康志愿者作为对照组，其入选标准是：年龄在23～65岁；均为首次接受治疗，具有较高的治疗依从性；除乳腺癌以外没有其他肿瘤疾病或心血管、心肝肾功能异常。
两组患者乳腺癌症状、发病位置等对研究没有影响。
1.2分析方法两组研究对象在入院以后按照分组进行试验，两组研究对象分别接受FISH、IHC两种方法检查，均采用乳腺石蜡切片标本检查，保证检测方法、时间等一致性，确保没有无关变量。
制作石蜡标本：取患者标本，浸泡福尔马林24h，然后采用酒精由低浓度到高浓度进行梯度脱水，然后浸蜡，包埋后切成石蜡片[2]。
FISH检测方法：取切片保温24h，采用高浓度大低浓度脱水，然后使用酸性亚硫酸钠处理、SSC洗片2次，蛋白酶孵育，再次洗片、脱水，然后风干后加入探针封片，保温24h杂交，再次洗片、乙醇（70%）浸泡，风干后滴加染色剂观察；IHC检测方法：取切片采用高浓度大低浓度脱水，使用PBS冲洗2次、高温修复、再次冲洗2次，加入过氧化物酶阻滞液中孵育，再次冲洗2次，滴加HER-2一抗孵育1h后再次冲洗2次，加入链霉菌抗生素-过氧化酶溶液孵育10min后再次冲洗2次，然后经过染色、二次复染、冲洗后封片观察[3-4]。
免疫组化病理技术质量控制问题分析与对策
免疫组化病理技术质量控制问题分析与对策【摘要】：目的研讨免疫组化病例基数质量控制问题分析与对策。
方法于2019年6月至2021年2月期间我院接治的51名住院患者，分为参照组（25名）和观察组（26名）。
参照组行传统切片，观察组行质量控制后切片。
将两种方法在病理诊断中的应用效果予以对比，并分析。
结果参照组中13名优质（52.0%），7名良好（28.0%），5名差（20.0%）；观察组中21名优质（80.8%），4名良好（15.4%），1名差（3.8%）。
观察组制片率96.2%（25/26）显著高于参照组80.0%（20/25）。
比对差异明显（P<0.05），有统计学意义。
结论通过质量控制可有效优化病理技术效果以及制片质量。
适合临床中使用推广。
【关键词】：免疫组化；病理技术；质量控制免疫组织技术是目前病理诊断的多见方式，病理技术步骤中，任何一个错误的环节都会造成制片质量降低，切片的好坏对于医生的诊断有着较大的影响，所以在应用免疫组化病理技术中，要格外注意质量控制[1]。
本文结合我院接治的51名患者，分组予以不同切片方法，比对诊断结果。
现报告如下。
1资料与方法1.1基本资料于2019年6月至2021年2月期间我院接治的51名住院患者，分为参照组（25名）和观察组（26名）。
参照组中16名男性，9名女性，年龄23至57岁，平均（41.3±2.7）岁；观察组中17名男性，9名女性，年龄24至59岁，平均（43.6±2.2）岁。
参照组和观察组的患者资料对比无显著差异（P>0.05），有对比价值。
1.2方法1.2.1参照组行传统切片。
①对样本予以脱水、透明、浸蜡、包埋处理，随后进行切片操作；②将石蜡切片进行烘烤，时间为30分钟即可，用二甲苯脱蜡后再进行蒸馏水清洗，清洗1次即可；③利用PBS清洗1分钟，在玻片组织上滴入Ki67和P53抗体，在4℃的环境下进行孵育；④第二天将切片用PBS洗涤，清洗3次即可，每次1分钟，在37℃的环境下进行孵育，时长为1小时；⑤配置DAB显色液，将玻片用PBS洗涤，清洗3次即可，每次3分钟，利用DAB予以分别染色，时间为1分钟、3分钟，完成后停止染色；⑥在显微镜下进行观察和记录。
乳腺癌HER-2免疫组化染色和判读存在的问题与对策
乳腺癌HER-2免疫组化染色和判读存在的问题与对策陈余朋;张声;王行富;翁丹枫;王鹏程【期刊名称】《临床与实验病理学杂志》【年(卷),期】2016(032)004【总页数】4页(P461-464)【关键词】乳腺肿瘤;HER-2;免疫组织化学【作者】陈余朋;张声;王行富;翁丹枫;王鹏程【作者单位】福建医科大学附属第一医院病理科,福州350005;福建医科大学附属第一医院病理科,福州350005;福建医科大学附属第一医院病理科,福州350005;福建医科大学附属第一医院病理科,福州350005;福建医科大学附属第一医院病理科,福州350005【正文语种】中文【中图分类】R737.9人类表皮生长因子受体-2(human epidermal growth factor receptor-2, HER-2)是乳腺癌预后和靶向治疗的重要预测指标，准确检测乳腺癌患者的HER-2状态对临床的诊疗具有重要的意义[1,2]。
目前国内外检测乳腺癌HER-2最常用的方法为免疫组织化学(immunohistochemistry, IHC)和荧光原位杂交技术(fluorescence in situ hybridization, FISH)检测，其中IHC检测易受到受检组织的固定时间、固定液选择、抗体试剂盒选择和染色结果判读等诸多因素的影响。
本文通过福建和江西两地区举办的“2014年多中心乳腺癌HER-2 IHC染色室间比对”结果进行总结，分析存在的问题以及采取相应的对策。
旨在提高乳腺癌HER-2染色和判读水平。
本次室间比对活动共8家三甲医院参加，其中福建省5家，江西省3家。
现将每家单位的染色及判读情况，以及所采用手工染色或全自动染色、机器型号、抗体类型、试剂盒、修复方法、孵育温度及时间等归纳如下(表1)。
分析总结染色中出现的问题：将乳腺癌HER-2(3+)染为(2+)、HER-2(2+)染为(0)、出现过度的胞质染色、膜染色不佳、染色偏弱、抗体漏加、边缘效应、个别掉片明显等现象。
乳腺癌免疫组织化学染色及质量控制分析
乳腺癌免疫组织化学染色及质量控制分析摘要】目的：对乳腺癌免疫组织化学染色及质量控制进行分析探讨，为今后的临床病理工作提供有价值的参考信息。
方法：选择2013年1月～2015年12月，我院收治的乳腺癌患者56例作为研究对象，取乳腺组织标本展开免疫组化学染色，并实施有效的质量控制措施，观察乳腺切片标本以及检验结果。
结果：乳腺组织切片没有出现收缩干裂现象，组织结构细胞形态相对清晰，能够对乳腺癌细胞、炎症细胞予以清晰的辨别。
HE染色鲜艳，细胞核染色结果显示，颜色为鲜明蓝色。
结论：免疫组化染色对乳腺癌的病理检查具有重要意义，染色结果可为临床诊断提供可靠的参考依据，值得关注并推广。
【关键词】乳腺癌；免疫组织化学染色；病理；质量控制【中图分类号】R655.8 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2016）13-0153-02临床上，乳腺癌为女性常见恶性肿瘤，临床诊断多依赖病理检查。
免疫组织化学染色为病理诊断中应用较广的一种诊断方式，为临床诊断中常用的辅助性参考指标，病理技师为免疫组化的操作者与质量控制的执行者，对免疫组化诊断的准确性具有重要意义[1]。
本次研究中，出于对乳腺癌免疫组织化学染色及质量控制进行分析探讨，为今后的临床病理工作提供有价值的参考信息，对我院收治的乳腺癌患者采取免疫组化法进行染色诊断，并对检查结果进行回顾性分析，结果汇报如下。
1.资料与方法1.1 一般资料研究中资料来源于我院收治、且符合病理诊断标准的乳腺癌患者，选择其中的56例作为研究对象，均为女性，年龄34～67岁，平均（47.6±12.1）岁。
1.2 方法1.2.1研究方法选择2013年1月～2015年12月，我院收治的乳腺癌患者56例作为研究对象，取乳腺组织标本展开免疫组化学染色，并实施有效的质量控制措施，观察乳腺切片标本以及检验结果。
1.2.2操作步骤实验试剂：PBS液,第一抗体为兔抗人雌激素受体（ER）、兔抗人孕激素受体（PR）、均为细胞核着色，兔抗人CerbB-2单克隆抗体，为细胞膜着色。
手术室病理HER-2检测标本送检的规范化管理
手术室病理HER-2检测标本送检的规范化管理韦爱芬;陶勇玲;季清芬【摘要】总结手术室病理HER-2检测标本送检的规范化管理体会.管理方法为加强手术室护士对病理HER-2检测标本重要性的认识,规范胃癌、乳腺癌病理HER-2检测标本的送检流程,强化细节管理.经过3年的规范化管理,乳腺癌、胃癌病理HER-2检测标本送检合格率达100％;2012年至2014年病理HER-2免疫组化质控检查全部为优秀,无因固定不及时和标本处理不当导致的免疫组化及分子原位杂交检测不合格,无标本丢失现象发生.【期刊名称】《护理与康复》【年(卷),期】2015(014)008【总页数】2页(P765-766)【关键词】手术室;标本;送检;管理【作者】韦爱芬;陶勇玲;季清芬【作者单位】丽水市人民医院,浙江丽水323000;丽水市人民医院,浙江丽水323000;丽水市人民医院,浙江丽水323000【正文语种】中文【中图分类】R197.323.2随着 HER-2单克隆抗体曲妥珠单抗在临床的广泛应用，以及其能明显改善胃癌及乳腺癌蛋白过表达患者治疗的有效率和生存率，因此，准确判定是否有HER-2蛋白过表达和基因扩增对于胃癌和乳腺癌的治疗及预后有着重要意义。
已有学者研究认为[1]，标本离体后不同时段固定对HER-2检测结果有着很大的影响。
然而在临床实际工作当中，对离体胃癌和乳腺癌标本进行及时规范的固定并没有得到重视。
手术室护士作为病理标本的第一接触者，能否妥善保管和正确处理胃癌、乳腺癌的手术标本，直接关系到病理诊断的准确性。
为保证病理HER-2检测标本送检质量，为临床治疗提供可靠的材料和依据[2]，从2012年开始，本院手术室特别针对HER-2检测的手术标本进行规范化管理，并取得了满意的效果，现报告如下。
1.1 背景资料本院系集医疗、教学、科研于一体的综合性三级甲等医院，手术室护理人员构成复杂，流动性大，包括本院护士、进修护士、轮转护士、实习护士等，经验不足以及对病理HER-2检测标本重要性及送检流程缺乏足够的认识，导致经常出现手术标本固定液不足或固定不及时，标本处理方法不正确等，使得病理HER-2检测标本送检质量稳定性差，影响了科研及标本检测的可重复性和准确性,存在一定的医疗安全隐患。
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苏州大学附属第一医院 郭凌川
1
内容提要
• HER2检测的质量控制和质量保证
– HER2检测质量的影响因素
• 检测前 • 检测中 • 检测后
– HER2检测的质量保证
• 内部质保 • 外部质保 • Ring研究
HER2检测的质量控制和质量保证
3
质量体系－定义
• 质量控制 （QC）
持续质量评价
• 严格遵守免疫组化或原位杂交操作步骤 • 设立对照组:
– 细胞系和组织标本免疫组化评分0/1+, 2+, 3+ ，2+需经原位杂交确定 • 若对照组检测未能达标，需重新进行实验
• 评价: – 若正常组织检测为阴性而肿瘤组织检测细胞膜膜染色阳性，则免疫组化检测 即以足够 – 胃癌或胃食管交界癌：选择代表性区域 – 不均匀: 选择代表性区域 – 异质性特异区域: 按最高分评分
标本固定较差1 染色不均
标本点状假阳性染色2 棕色点状染色为胞质染色而非胞膜染色
细胞质染色, IHC 02 弥散性非均一性细胞质染色
标本边缘假阳性染色1 肿瘤标本边缘染色而中心无染色
1. W Hanna供图; 2. Dako供图.
影响FISH检测结果之常见问题
标本制备
固定不完全1
片状染色;信号较弱或缺失
• 设立适当对照组
• 难以确定的检测病例 1) 重新检测2) 将免疫组化检测结果与原位杂交检测结果对比3) 咨询外部实验室
• 使用标准化检测报告表 • 记录任何:
– 与标准化标本处理步骤相违背的不当操作 – 难以确定病理诊断的病例
a) 对相关从业人员进行教育培训 b) 每年重新检测约5%的阳性和阴性病例 c) 参与Ring研究
《胃癌HER2检测指南》编写组 胃癌HER2检测指南 中华病理学杂志 2011;40(8):553-557.
影响HER2检测结果之因素: 检测前
过分固定1
持续性自发性荧光; 信号较弱或缺失
染色步骤
消化封闭不完全2
较强自发性荧光；背景亦呈现 较强非特异性染色
1. Abbott供图; 2. Ventana供图.
影响HER2检测结果之因素
报告内容
评分系统
取样
判读标准
检测后
使用图像 分析
HER2检测偏倚
组织处理固定时间源自检测前固定方式检测方 法验证
取样
HER2检测偏倚
检测前
HER2检测偏倚
Wolff AC, et al. J Clin Oncol 2007; 25:118–145.
影响HER2检测结果之因素: 检测前
组织处理方式
•提供新鲜及已定位之标本或切除后迅速经甲醛固定之标本
– 立即转送至备检实验室:
• 尽量缩短从标本切除至浸入10%NBF固定之间的时间，通常控制在20–30分钟以内
– 乳腺癌： 最多1小时
组织处理
– 胃癌： 20–30分钟之内
检测前
HER2检测偏倚
HER2检测偏倚
Wolff AC, et al. J Clin Oncol 2007;25:118–145; ; 《乳腺癌HER2检测指南（2009版）》编写组 乳腺癌HER2检测指南（2009版）中华病理学杂志 2009,38(12):836–840.
– 细胞系和组织标本免疫组化评分0/1+, 2+, 3+ 需经原位杂交确定 • 若对照组检测未能达标，需重新进行实验
• 评价: – 若正常组织检测为阴性而肿瘤组织检测细胞膜膜染色阳性，则免疫组化检测 即以足够 – 乳腺癌：仅浸润性肿瘤 – 不均匀: 选择代表性区域 – 异质性特异区域: 按最高分评分
查，从而决定是否进行相关改进 • 操作步骤的内部验证 • 每批实验都应进行 • 确保每个检测结果均准确
质保
• 旨在改善总体检测操作 • 与其他检测中心相比较
质控/质保原则（推荐）
内部质量控制 a) 染色
b) 评分
c) 实验室 d) 检测步骤 e) 记录
持续质量评价
• 严格遵守免疫组化或原位杂交操作步骤 • 设立对照组:
• 设立适当对照组
• 难以确定的检测病例 1) 重新检测2) 将免疫组化检测结果与原位杂交检测结果对比3) 咨询外部实验室
• 使用标准化检测报告表 • 记录任何:
– 与标准化标本处理步骤相违背的不当操作 – 难以确定病理诊断的病例
a) 对相关从业人员进行教育培训 b) 每年重新检测约5%的阳性和阴性病例 c) 参与Ring研究
实验条件 对照
实验试剂
检测中
抗原修复类型
检测仪器精准度 实验室步骤 检测人员
Wolff AC, et al. J Clin Oncol 2007;25:118─145.
HER2检测的影响因素：检测前
12
影响HER2检测结果之因素: 检测前
取样
组织处理 固定时间
Pr检e-测an前alytic 固定方式
Adapted by permission from Macmillan Publishers Ltd; Bilous M et al. Mod Pathol 2003;16:173─182. © 2003.
HER2检测质量的影响因素
8
影响IHC检测结果之常见问题
• 诸多因素会影响IHC结果的评估
Adapted by permission from Macmillan Publishers Ltd; Bilous M et al. Mod Pathol 2003;16:173─182. © 2003.
质控/质保原则（推荐）
内部质量控制 a) 染色
b) 评分
c) 实验室 d) 检测步骤 e) 记录
HER2检测偏倚
Wolff AC, et al. J Clin Oncol 2007; 25:118–145.
影响HER2检测结果之因素: 检测前
取样
– 原发性乳腺癌
• 最好为手术切除而非活检 标本，包含癌旁乳腺组织
• 避免细针穿刺活检取样
– 转移性乳腺癌
• 穿刺活检取样
– 胃癌
• 经内镜活检取样或经手术 切除之标本
– 用以确保HER2检测结果正确性的内部验证步骤
• 质量保证 （QA）
– 通过与其他实验室检测结果相比较而得到的检测技术评价的方式 （例如，外部控制）
Bilous M, et al. Mod Path 2003;16:173–182.
质量控制与质量保证有何区别？
质控
• 达到和/或维持目标质量 • 在检测中每个步骤均进行样品检