HER2免疫组化检测的质量控制

Adapted by permission from Macmillan Publishers Ltd; Bilous M et al. Mod Pathol 2003;16:173─182. © 2003.
质控/质保原则（推荐）
内部质量控制 a) 染色
b) 评分
c) 实验室 d) 检测步骤 e) 记录
HER2检测偏倚
Wolff AC, et al. J Clin Oncol 2007; 25:118–145.
影响HER2检测结果之因素: 检测前
取样
– 原发性乳腺癌
• 最好为手术切除而非活检 标本，包含癌旁乳腺组织
• 避免细针穿刺活检取样
– 转移性乳腺癌
• 穿刺活检取样
– 胃癌
• 经内镜活检取样或经手术 切除之标本
查，从而决定是否进行相关改进 • 操作步骤的内部验证 • 每批实验都应进行 • 确保每个检测结果均准确
质保
• 旨在改善总体检测操作 • 与其他检测中心相比较
质控/质保原则（推荐）
内部质量控制 a) 染色
b) 评分
c) 实验室 d) 检测步骤 e) 记录
持续质量评价
• 严格遵守免疫组化或原位杂交操作步骤 • 设立对照组:
HER2免疫组化检测的质量控制
苏州大学附属第一医院 郭凌川
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内容提要
• HER2检测的质量控制和质量保证
– HER2检测质量的影响因素
• 检测前 • 检测中 • 检测后
– HER2检测的质量保证
• 内部质保 • 外部质保 • Ring研究
HER2检测的质量控制和质量保证
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质量体系－定义
• 质量控制 （QC）
Adapted by permission from Macmillan Publishers Ltd; Bilous M et al. Mod Pathol 2003;16:173─182. © 2003.
HER2检测质量的影响因素
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影响IHC检测结果之常见问题
• 诸多因素会影响IHC结果的评估
实验条件 对照
实验试剂
检测中
抗原修复类型
检测仪器精准度 实验室步骤 检测人员
Wolff AC, et al. J Clin Oncol 2007;25:118─145.
HER2检测的影响因素：检测前
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影响HER2检测结果之因素: 检测前
取样
组织处理 固定时间
Pr检e-测an前alytic 固定方式
过分固定1
持续性自发性荧光; 信号较弱或缺失
染色步骤
消化封闭不完全2
较强自发性荧光；背景亦呈现 较强非特异性染色
1. Abbott供图; 2. Ventana供图.
影响HER2检测结果之因素
报告内容
评分系统
取样
判读标准
检测后
使用图像 分析
HER2检测偏倚
组织处理
固定时间
检测前
固定方式
检测方 法验证
取样
HER2检测偏倚
检测前
HER2检测偏倚
Wolff AC, et al. J Clin Oncol 2007; 25:118–145.
影响HER2检测结果之因素: 检测前
组织处理方式
•提供新鲜及已定位之标本或切除后迅速经甲醛固定之标本
– 立即转送至备检实验室:
• 尽量缩短从标本切除至浸入10%NBF固定之间的时间，通常控制在20–30分钟以内
– 乳腺癌： 最多1小时
组织处理
Βιβλιοθήκη Baidu
– 胃癌： 20–30分钟之内
检测前
HER2检测偏倚
HER2检测偏倚
Wolff AC, et al. J Clin Oncol 2007;25:118–145; www.her2testing.org; 《乳腺癌HER2检测指南（2009版）》编写组 乳腺癌HER2检测指南（2009版）中华病理学杂志 2009,38(12):836–840.
持续质量评价
• 严格遵守免疫组化或原位杂交操作步骤 • 设立对照组:
– 细胞系和组织标本免疫组化评分0/1+, 2+, 3+ ，2+需经原位杂交确定 • 若对照组检测未能达标，需重新进行实验
• 评价: – 若正常组织检测为阴性而肿瘤组织检测细胞膜膜染色阳性，则免疫组化检测 即以足够 – 胃癌或胃食管交界癌：选择代表性区域 – 不均匀: 选择代表性区域 – 异质性特异区域: 按最高分评分
• 设立适当对照组
• 难以确定的检测病例 1) 重新检测2) 将免疫组化检测结果与原位杂交检测结果对比3) 咨询外部实验室
• 使用标准化检测报告表 • 记录任何:
– 与标准化标本处理步骤相违背的不当操作 – 难以确定病理诊断的病例
a) 对相关从业人员进行教育培训 b) 每年重新检测约5%的阳性和阴性病例 c) 参与Ring研究
– 用以确保HER2检测结果正确性的内部验证步骤
• 质量保证 （QA）
– 通过与其他实验室检测结果相比较而得到的检测技术评价的方式 （例如，外部控制）
Bilous M, et al. Mod Path 2003;16:173–182.
质量控制与质量保证有何区别？
质控
• 达到和/或维持目标质量 • 在检测中每个步骤均进行样品检
标本固定较差1 染色不均
标本点状假阳性染色2 棕色点状染色为胞质染色而非胞膜染色
细胞质染色, IHC 02 弥散性非均一性细胞质染色
标本边缘假阳性染色1 肿瘤标本边缘染色而中心无染色
1. W Hanna供图; 2. Dako供图.
影响FISH检测结果之常见问题
标本制备
固定不完全1
片状染色;信号较弱或缺失
• 设立适当对照组
• 难以确定的检测病例 1) 重新检测2) 将免疫组化检测结果与原位杂交检测结果对比3) 咨询外部实验室
• 使用标准化检测报告表 • 记录任何:
– 与标准化标本处理步骤相违背的不当操作 – 难以确定病理诊断的病例
a) 对相关从业人员进行教育培训 b) 每年重新检测约5%的阳性和阴性病例 c) 参与Ring研究
– 细胞系和组织标本免疫组化评分0/1+, 2+, 3+ 需经原位杂交确定 • 若对照组检测未能达标，需重新进行实验
• 评价: – 若正常组织检测为阴性而肿瘤组织检测细胞膜膜染色阳性，则免疫组化检测 即以足够 – 乳腺癌：仅浸润性肿瘤 – 不均匀: 选择代表性区域 – 异质性特异区域: 按最高分评分
《胃癌HER2检测指南》编写组 胃癌HER2检测指南 中华病理学杂志 2011;40(8):553-557.
影响HER2检测结果之因素: 检测前