淋巴细胞的功能检测一T细胞功能检测二B细胞功培训课件
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T、B淋巴细胞-PPT课件
↓ “单阳性”(SP，CD4+或CD8+ )TCRαβ T细胞
— 皮、髓质交界处
T细胞发育的阳性选择（positive selection）
CD4+CD8+T细胞＋胸腺上皮细胞（表面MHC分子）
如果与MHC-I结 合，最终分化为 CD8+T细胞
如果与MHC-II 结合则最终分化 为CD4+T细胞
如果与MHC分子不 结合或亲和力过高则 在胸腺皮质中凋亡
1.T细胞分化、成熟的场所 胸腺基质细胞与胸腺细胞的相互作用构
成了决定T细胞分化、增殖和选择性发育的胸 腺微环境。
2.自身耐受的建立与维持
➢胸腺细胞（未成熟的T细胞） 在胸腺微环境中，循被膜下 →皮质→髓质移行成熟
➢在移行过程中，胸腺细胞表 面分子发生变化：在被膜下 为CD4-CD8-双阴性（DN）细 胞；在皮质为CD4+CD8+双阳 性（DP）细胞；在髓质为 CD4+或CD8+单阳性（SP） 细胞。
阳性选择（获得MHC限制性）
单阳性细胞(SP， CD4+或CD8+T细胞）
阴性选择（获得自身耐受）
成熟的单阳性细胞
B淋巴细胞
是淋巴干细胞在鸟类法氏囊和哺乳类动物 的骨髓中分化成熟而来，故又称囊依赖性淋巴细 胞（bursa dependent lymphocytes) 或骨髓依 赖性淋巴细胞（bone marrow dependent lymphocytes)，均简称Ｂ细胞。
TCRγδ细胞主要存在于小肠粘膜上皮和 表皮，而外周血中仅占成熟T细胞的1%～5%。 因此TCRγδ细胞是皮肤粘膜局部抗病毒感染 的重要效应细胞；同时还具有抗肿瘤作用及 分泌细胞因子参与免疫调节。
— 皮、髓质交界处
T细胞发育的阳性选择（positive selection）
CD4+CD8+T细胞＋胸腺上皮细胞（表面MHC分子）
如果与MHC-I结 合，最终分化为 CD8+T细胞
如果与MHC-II 结合则最终分化 为CD4+T细胞
如果与MHC分子不 结合或亲和力过高则 在胸腺皮质中凋亡
1.T细胞分化、成熟的场所 胸腺基质细胞与胸腺细胞的相互作用构
成了决定T细胞分化、增殖和选择性发育的胸 腺微环境。
2.自身耐受的建立与维持
➢胸腺细胞（未成熟的T细胞） 在胸腺微环境中，循被膜下 →皮质→髓质移行成熟
➢在移行过程中，胸腺细胞表 面分子发生变化：在被膜下 为CD4-CD8-双阴性（DN）细 胞；在皮质为CD4+CD8+双阳 性（DP）细胞；在髓质为 CD4+或CD8+单阳性（SP） 细胞。
阳性选择（获得MHC限制性）
单阳性细胞(SP， CD4+或CD8+T细胞）
阴性选择（获得自身耐受）
成熟的单阳性细胞
B淋巴细胞
是淋巴干细胞在鸟类法氏囊和哺乳类动物 的骨髓中分化成熟而来，故又称囊依赖性淋巴细 胞（bursa dependent lymphocytes) 或骨髓依 赖性淋巴细胞（bone marrow dependent lymphocytes)，均简称Ｂ细胞。
TCRγδ细胞主要存在于小肠粘膜上皮和 表皮，而外周血中仅占成熟T细胞的1%～5%。 因此TCRγδ细胞是皮肤粘膜局部抗病毒感染 的重要效应细胞；同时还具有抗肿瘤作用及 分泌细胞因子参与免疫调节。
第9章-免疫细胞之二：T淋巴细胞和B淋巴细胞
（5）CD28/CTLA-4
CD28有两条相同的链组成，糖蛋白，表达于T细 胞、浆细胞及5％的CD3＋胸腺细胞表面。 CTLA-4（CD152）主要表达于激活的T细胞表面、 CTL表面。CD28／CTLA-4的配体为B7。
B7包括B7-1（CD80）、B7-2（CD86），为跨膜 蛋白。主要表达于B细胞、激活的单核细胞、树突 状细胞、激活的T细胞和NK细胞表面。
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B细胞的分化发育过程
阴性选择
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生发中心
*** T淋巴细胞
T细胞（T lymphocte）是机体内功能活跃的细胞群 体，介导细胞免疫应答，并辅助B细胞对TD抗原的 体液免疫应答。 来源于骨髓造血干细胞，在胸腺内分化、发育，成 熟的T细胞定居于外周淋巴组织。 在识别由APC提呈的特异性抗原后被激活、分化为 效应细胞和记忆细胞，参与适应性免疫应答和免疫 记忆的维持。
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**成熟B细胞特征
细胞表面同时表达mIgM和mIgD，并与Igα和Igβ 结合形成复合物。 表达由CD19、CD21和CD81组成共受体。 表达CR1、CKR和丝裂原受体等。
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B细胞在骨髓中的发育
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2. 外周发育
成熟的B细胞（Bn）迁移、定居与外周免疫器官。 若接受抗原刺激，B细胞即增殖、分化为浆细胞并 产生抗体，此即为B细胞的外周发育，亦称为B细 胞发育的抗原依赖期。
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Selection processes in the thymus (C)
清除自身反应性T细胞
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T细胞个体发育及谱系
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T细胞在胸腺中的选择过程
免疫学 第九章 淋巴细胞-PPT精选文档
3．按T细胞功能分类 • 辅助性T细胞（Th）： CD4 T细胞，分泌 细胞因子，分Th1和Th2细胞 。 • 细胞毒性T细胞（Tc）：为CD8 T细胞，主 要效应细胞，可特异性杀伤靶细胞。分为 Tc1和Tc2细胞
阳性选择的意义：使成就的T细胞具有识别、结合 MHC的能力，在识别抗原时显示MHC约束性。
• 阴性选择：阳性选择的T细胞的TCR与 MHC-自身抗原肽显示高亲和力的被清除， 只有显示低或中等亲和力的及无识别能力 的被留下。 • 意义：清除自身反应性T细胞。不会和自身 抗原起反应。
（二） 、T细胞受体
外周
干 细 胞
CD4-CD8-TCR-
TCR+
双阴性 T细胞
双阳性 T细胞
Ⅱ类分子 自身反应性
外周
不识别
MHC分子 无TCR被清除 被清除 被清除
阳性选择：双阳性T细胞在胸腺与各类细胞（DC、 Mф 等）的MHC互作，能结合且具低亲和力的T细胞 克隆被选择，可分化成T细胞。
与MHCⅠ分子 作用分化成CD8 TC，与MHCⅡ分子作 用分化成CD4 TC。
• 细胞种类的鉴定依据： 不同免疫细胞及同类细胞的不同分化阶段 可表达不同的种类和数量的表面膜蛋白或 分化抗原(CD)。 分化抗原是鉴定免疫细胞种类及分化状态 的标志。
免疫细胞均由骨髓的多能干细胞发育而来。
再生
多能干细胞
髓样干细胞
淋巴干细胞
B细胞
红细胞 血小板
肥大细胞 中性粒细胞 巨噬细胞 树突状细胞 浆细胞 T细胞
第九章 淋巴细胞
• • • • • • • • • • • •
授课时间：
两个学时
目的与要求
一、T淋巴细胞 1．掌握T细胞主要表面分子的结构和生物学作用 2．掌握T细胞亚群的分类及其功能 3．掌握T细胞在胸腺内的发育过程和机制 二、Ｂ细胞 1．掌握B细胞主要表面分子的结构和生物学作用。 2．了解B细胞亚类及其特点，熟悉B细胞的发育过程。 三、自然杀伤细胞 掌握NK细胞概念，了解其作用和意义。
淋巴细胞PPT课件
pre-TCR由β链和pre-Tα链组 成
6
没有TCR α链表达 CD3低表达
二、双阳性细胞时期
pre-T增殖活跃开始表达CD4和CD8，形成 CD4+CD8+双阳性（double positive, DP）T 细胞。
α链基因发生重排，开始表达有功能性的TCR。 CD3表达水平逐渐升高。
一、TCR-CD3复合体
TCR
类型：TCR、TCR
功能：特异识别MHC分子 提呈的抗原肽（3个CDR）
CD3
构型：和
免疫受体酪氨酸活化基序 （immunoreceptor tyrosine-based activation motif, ITAM）
功能：转导T细胞活化的第
T细胞一旦成熟，就随血液离开胸腺进入外周免 疫器官。
8
9
四、阳性选择
在胸腺皮质区发生的，双阳性T细胞与胸腺上皮细胞递呈的自 身肽-MHCⅠ/Ⅱ复合物反应；
不能与自身肽-MHC分子结合或亲和力过高的DP细胞被克隆 清除（95%左右的细胞），TCR与自身肽-MHC分子以适当的 亲和力结合的T细胞继续分化；
3
第一节 T细胞的分化发育
来自骨髓的祖T细胞（T lineage progenitor, pro-T）从胸腺皮髓交界处进入胸腺；
pro-T细胞首先移行至胸腺皮质外层，再逐渐向 深皮质区、皮髓交界和髓质区迁移并逐渐分化发 育成熟；
最终，发育成熟的T细胞进入外周淋巴器官。
4
胸腺微环境对于T细胞分化成熟的的重要性
5
一、双阴性细胞时期
在分化早期，T细胞经历祖T细 胞（pro-T cell）和前T细胞
（pre-T cell）。
6
没有TCR α链表达 CD3低表达
二、双阳性细胞时期
pre-T增殖活跃开始表达CD4和CD8，形成 CD4+CD8+双阳性（double positive, DP）T 细胞。
α链基因发生重排，开始表达有功能性的TCR。 CD3表达水平逐渐升高。
一、TCR-CD3复合体
TCR
类型：TCR、TCR
功能：特异识别MHC分子 提呈的抗原肽（3个CDR）
CD3
构型：和
免疫受体酪氨酸活化基序 （immunoreceptor tyrosine-based activation motif, ITAM）
功能：转导T细胞活化的第
T细胞一旦成熟，就随血液离开胸腺进入外周免 疫器官。
8
9
四、阳性选择
在胸腺皮质区发生的，双阳性T细胞与胸腺上皮细胞递呈的自 身肽-MHCⅠ/Ⅱ复合物反应；
不能与自身肽-MHC分子结合或亲和力过高的DP细胞被克隆 清除（95%左右的细胞），TCR与自身肽-MHC分子以适当的 亲和力结合的T细胞继续分化；
3
第一节 T细胞的分化发育
来自骨髓的祖T细胞（T lineage progenitor, pro-T）从胸腺皮髓交界处进入胸腺；
pro-T细胞首先移行至胸腺皮质外层，再逐渐向 深皮质区、皮髓交界和髓质区迁移并逐渐分化发 育成熟；
最终，发育成熟的T细胞进入外周淋巴器官。
4
胸腺微环境对于T细胞分化成熟的的重要性
5
一、双阴性细胞时期
在分化早期，T细胞经历祖T细 胞（pro-T cell）和前T细胞
（pre-T cell）。
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凋亡 (2 ) 颗 粒 酶
(1 ) 穿 孔 素
(3 )F a s / F a s L 途 径 C T L (大 )正 在 攻 击 肿 瘤 细 胞 (小 )
二、B淋巴细胞
• 来源于骨髓（鸟类来自于腔上囊）→在骨 髓或腔上囊内发育成熟→移行至外周淋巴 组织→执行特异性体液免疫应答，参与抗 原呈递。
–B细胞的分化发育
γδ T细 胞
低 5-15% 粘膜上皮 100% < 1% 20-50% > 50% 简 单 多 肽 、 H SP、 脂 类 、 多 糖 M HC类 似 分 子
C D 4+ T 细 胞 与 C D 8+ T 细 胞 的 比 较
C D 4+ T 细 胞 表型 识别抗原肽 MHC限制性 Th Tc C D 3+C D 4+C D 813-17A A M H C -II 类 分 子 +++ + C D 8+ T 细 胞 C D 3+C D 8+C D 48-10A A M H C -I 类 分 子 +++
(b ) C D 4 分 子 与 M H C - II 类 分 子 / 抗 原 肽 复 合 物 (p M H C ) 的 结 合 .
其他分子
CD28/CTLA-4：B7-1/B7-2 CD2（LFA-2，SRBC）：CD58（LFA-3） LFA-1：ICAM-1，2，3 CD40L：CD40
（三）T细胞亚群及其功能
等位基因排除：
若 等 位 基 因 （ 编 码 α或 β） 中 其 中 之 一 能重排成功，相应的另一基因被关闭。 以确保仅有一个基因产物。 最 终 获 得 功 能 性 的 α链 和 β链 组 合 成 TCR，表达于细胞表面。
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阳性选择(positive selection， PS)： 双阳性TC膜上的TCR如能与胸腺上皮
细胞上的自身MHC-Ⅰ、Ⅱ类分子以中等亲和力 结合，则能继续发育，分化为CD8+TC或 CD4+TC，否则凋亡。通过阳性选择， TC 获得 自身MHC限制性，并由DP逐渐发育为SP。
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22
3、阴性选择 T细胞获得自身耐受性
（2） T细胞 黏膜上皮 ，参与固有免疫。
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46
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47
2、根据T细胞状态
初始T （naive T cell，CD45RA） 致敏T（primed T cell） 效应T （effector T cell，IL-2R，CD45RO） 记忆T （memory T cell，CD45RO）
肽链 所在染色体
V
D
J
C
α
14
70~80
61
1
β
7
52
2
13
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
2
γ
7
12
5
2
δ
14
4
3
3
1
5’
V
D
J
3’
C
基因片段多数量性、选择的随机性和排列组合的多样性 TCR特异性数量达1015~1018。
一个T细胞表达一种TCR 一种TCR特异识别一种Ag表位
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18
未成熟T细胞的TCR基因为胚系基因（分隔状态、无转录活性）
CXCR5
TGF- IL-4
Th17
RORt CCR4,6
Tfh
Bcl-6 STAT-3 CXCR5
Th9
细胞上的自身MHC-Ⅰ、Ⅱ类分子以中等亲和力 结合，则能继续发育，分化为CD8+TC或 CD4+TC，否则凋亡。通过阳性选择， TC 获得 自身MHC限制性，并由DP逐渐发育为SP。
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22
3、阴性选择 T细胞获得自身耐受性
（2） T细胞 黏膜上皮 ，参与固有免疫。
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46
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47
2、根据T细胞状态
初始T （naive T cell，CD45RA） 致敏T（primed T cell） 效应T （effector T cell，IL-2R，CD45RO） 记忆T （memory T cell，CD45RO）
肽链 所在染色体
V
D
J
C
α
14
70~80
61
1
β
7
52
2
13
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
2
γ
7
12
5
2
δ
14
4
3
3
1
5’
V
D
J
3’
C
基因片段多数量性、选择的随机性和排列组合的多样性 TCR特异性数量达1015~1018。
一个T细胞表达一种TCR 一种TCR特异识别一种Ag表位
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18
未成熟T细胞的TCR基因为胚系基因（分隔状态、无转录活性）
CXCR5
TGF- IL-4
Th17
RORt CCR4,6
Tfh
Bcl-6 STAT-3 CXCR5
Th9
淋巴细胞免疫学课件ppt
总结词
淋巴细胞的发育与分化是一个复杂的过程，涉及多个 阶段和多种调控机制。从原始干细胞到成熟的淋巴细 胞，经历了基因重排、选择和分化等过程，最终形成 具有特定功能的淋巴细胞亚群。
详细描述
淋巴细胞的发育与分化是一个多阶段的过程，涉及基因 重排、选择和分化等多个环节。在发育过程中，淋巴细 胞的祖先是多能造血干细胞，通过基因重排产生具有不 同抗原受体的初始淋巴细胞。这些初始淋巴细胞在抗原 刺激和各种调控因子的作用下，经过选择、激活和分化 等过程，最终形成具有特定功能的T细胞、B细胞和NK 细胞等亚群。这些亚群在数量和功能上保持动态平衡， 以维护机体的免疫 够长期存活并在再次接触相同 抗原时快速反应。
B淋巴细胞的功能与作用
产生抗体
B淋巴细胞能够产生特异性抗体 ，这是其最主要的免疫功能。这 些抗体能够与相应的抗原结合， 形成免疫复合物，进而被吞噬细
胞吞噬清除。
抗原提呈
B淋巴细胞能够摄取并处理抗原 ，将抗原信息呈递给T淋巴细胞 ，从而启动特异性免疫应答。
淋巴细胞与巨噬细胞的作用
巨噬细胞在淋巴细胞激活和增殖中起关键作用，通过抗原提呈和细胞因子分泌来调 节淋巴细胞的反应。
巨噬细胞能够吞噬并消化外来病原体，将其抗原信息呈递给淋巴细胞，从而启动免 疫应答。
淋巴细胞与巨噬细胞的相互作用对于维持免疫平衡和清除病原体具有重要意义。
淋巴细胞与树突状细胞的作用
树突状细胞是抗原提呈的重要细 胞，能够高效地捕获并处理抗原
02
T淋巴细胞
T淋巴细胞的分类
αβT细胞
表达T细胞受体（TCR）αβ，是T细胞的主要 组成部分。
CD4+辅助性T细胞
分为Th1、Th2、Th17和调节性T细胞（ Treg）等亚群，具有不同的功能。
淋巴细胞的发育与分化是一个复杂的过程，涉及多个 阶段和多种调控机制。从原始干细胞到成熟的淋巴细 胞，经历了基因重排、选择和分化等过程，最终形成 具有特定功能的淋巴细胞亚群。
详细描述
淋巴细胞的发育与分化是一个多阶段的过程，涉及基因 重排、选择和分化等多个环节。在发育过程中，淋巴细 胞的祖先是多能造血干细胞，通过基因重排产生具有不 同抗原受体的初始淋巴细胞。这些初始淋巴细胞在抗原 刺激和各种调控因子的作用下，经过选择、激活和分化 等过程，最终形成具有特定功能的T细胞、B细胞和NK 细胞等亚群。这些亚群在数量和功能上保持动态平衡， 以维护机体的免疫 够长期存活并在再次接触相同 抗原时快速反应。
B淋巴细胞的功能与作用
产生抗体
B淋巴细胞能够产生特异性抗体 ，这是其最主要的免疫功能。这 些抗体能够与相应的抗原结合， 形成免疫复合物，进而被吞噬细
胞吞噬清除。
抗原提呈
B淋巴细胞能够摄取并处理抗原 ，将抗原信息呈递给T淋巴细胞 ，从而启动特异性免疫应答。
淋巴细胞与巨噬细胞的作用
巨噬细胞在淋巴细胞激活和增殖中起关键作用，通过抗原提呈和细胞因子分泌来调 节淋巴细胞的反应。
巨噬细胞能够吞噬并消化外来病原体，将其抗原信息呈递给淋巴细胞，从而启动免 疫应答。
淋巴细胞与巨噬细胞的相互作用对于维持免疫平衡和清除病原体具有重要意义。
淋巴细胞与树突状细胞的作用
树突状细胞是抗原提呈的重要细 胞，能够高效地捕获并处理抗原
02
T淋巴细胞
T淋巴细胞的分类
αβT细胞
表达T细胞受体（TCR）αβ，是T细胞的主要 组成部分。
CD4+辅助性T细胞
分为Th1、Th2、Th17和调节性T细胞（ Treg）等亚群，具有不同的功能。
免疫学 T淋巴细胞ppt课件
免疫学 T淋巴细胞
44
识别由8~10个残基组成的内源性抗原
肽，受自身MHC免疫Ⅰ学 T淋类巴细分胞 子限制
45
四、Th、CTL和 Treg细胞
❖ Th细胞：辅助T、B淋巴细 胞应答的功能亚群
❖ Th1、Th2、Th17
❖ CTL (Tc) 细胞：具有免 疫杀伤效应的功能亚群
❖ Tc1、Tc2
免疫学 T淋巴细胞
46
四、Th、CTL和 Tr细胞
❖ 调节性T细胞（Tr）：具有免疫抑制功能 的功能亚群，在免疫应答的负性调节和自 身免疫耐受中发挥作用
❖ 自然调节性T细胞（nTreg） 适应性调节性T细胞（iTreg）
Tr1
CD4+ CD25+ Foxp3+
Th3
免疫学 T淋巴细胞
47
TCRαβ
TCRαβ
T helper cells help other cells carry out their functions
第十章
T淋巴细胞
免疫学 T淋巴细胞
1
淋巴细胞（Lymphocyte）
❖ 淋巴细胞来源于
淋巴样干细胞，
是一个复杂不均
一的细胞群体，
根据其表面标志
和功能特征，分
为许多形态相似
功能不同的亚群
免疫学 T淋巴细胞
2
淋巴细胞（Lymphocyte）
❖ 淋巴细胞来源于淋巴 样干细胞，是一个复 杂不均一的细胞群体， 根据其表面标志和功 能特征，分为许多形 态相似而功能不同的 亚群
——赋予成熟T细胞具有识别、结合MHC的能力，使T细胞 在识别抗原时显示MHC限制性
免疫学 T淋巴细胞
35
T细胞的胸腺选择
免疫细胞功能检测技术课件.ppt
正常小鼠肝中枯否细胞可吞噬清除90% 炭粒，脾巨噬细胞约吞噬清除10%炭粒。据 此给小鼠定量静脉注射印度墨汁(炭粒悬液)， 间隔一定时间反复取静脉血，测定血中炭粒 的浓度，根据血流中炭粒被廓清的速度，判 断巨噬细胞的功能。
vv
(二)吞噬功能检测
巨噬细胞对颗粒性抗原物质具有很强的 吞噬功能，常用鸡红细胞(CRBC)、白色念珠 菌、酵母细胞等作为吞噬颗粒，用斑蟊敷贴 法收集人巨噬细胞或从腹腔渗出液获得鼠巨 噬细胞。
12～16
核大小、染色质 增大、疏松
增大、疏松
核仁
清晰、1～4个 有或无
有丝分裂
有或无
无
胞质、着色
增多、嗜碱
增多、嗜碱
浆内空泡
有或无
有或无
伪足
有或无
有或无
vv
未转化的淋巴细胞
6～8 不增大、密集 无 无 极少、天青色 无 无
2. 淋巴细胞转化的刺激物
非特异性刺激物： PHA ------T细胞 ConA -------T细胞 PWM -------T、 B细胞 LPS -------B细胞
体内抗体产生的特异性抗原有白喉类毒素、 破伤风类毒素、多价肺炎链球菌菌苗等。 将适量抗原皮下或肌肉注射免疫，并于免疫 前及免疫后1周、2周、3周分别采血，分离血 清，测定受检者免疫前后相应抗体的效价，判 断受检者体内B细胞的功能。
vv
三、NK细胞活性测定
形态法 酶释法 荧光法 同位素法 化学发光法
vv
(一) 细胞运动功能——趋化功能检测
1.原理：
vv
2. 方法： 滤膜渗透法（Boyden 小室法）
琼脂糖平板法
vv
(二)吞噬和杀菌功能测定 1．显微镜检查法：
vv
(二)吞噬功能检测
巨噬细胞对颗粒性抗原物质具有很强的 吞噬功能，常用鸡红细胞(CRBC)、白色念珠 菌、酵母细胞等作为吞噬颗粒，用斑蟊敷贴 法收集人巨噬细胞或从腹腔渗出液获得鼠巨 噬细胞。
12～16
核大小、染色质 增大、疏松
增大、疏松
核仁
清晰、1～4个 有或无
有丝分裂
有或无
无
胞质、着色
增多、嗜碱
增多、嗜碱
浆内空泡
有或无
有或无
伪足
有或无
有或无
vv
未转化的淋巴细胞
6～8 不增大、密集 无 无 极少、天青色 无 无
2. 淋巴细胞转化的刺激物
非特异性刺激物： PHA ------T细胞 ConA -------T细胞 PWM -------T、 B细胞 LPS -------B细胞
体内抗体产生的特异性抗原有白喉类毒素、 破伤风类毒素、多价肺炎链球菌菌苗等。 将适量抗原皮下或肌肉注射免疫，并于免疫 前及免疫后1周、2周、3周分别采血，分离血 清，测定受检者免疫前后相应抗体的效价，判 断受检者体内B细胞的功能。
vv
三、NK细胞活性测定
形态法 酶释法 荧光法 同位素法 化学发光法
vv
(一) 细胞运动功能——趋化功能检测
1.原理：
vv
2. 方法： 滤膜渗透法（Boyden 小室法）
琼脂糖平板法
vv
(二)吞噬和杀菌功能测定 1．显微镜检查法：
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12～16
核大小、染色质 增大、疏松
增大、疏松
核仁
清晰、1～4个 有或无
有丝分裂
有或无
无
胞质、着色
增多、嗜碱
增多、嗜碱
浆内空泡
有或无
有或无
伪足
有或无
有或无
未转化的淋巴细胞
6～8 不增大、密集 无 无 极少、天青色 无 无
2. 淋巴细胞转化的刺激物
非特异性刺激物： PHA ------T 细胞 ConA -------T 细胞 PWM -------T 、 B细
稳定、特异、抗原用量少； 可同时检测不同抗原诱导的不同抗体分泌，并可定 量；可检测组织切片中分泌抗体的单个细胞。
(四) 体内试验
?体内抗体产生的特异性抗原有白喉类毒素、 破伤风类毒素、多价肺炎链球菌菌苗等。 ?将适量抗原皮下或肌肉注射免疫，并于免疫 前及免疫后 1周、2周、3周分别采血，分离血 清，测定受检者免疫前后相应抗体的效价，判 断受检者体内 B细胞的功能。
一、T细胞功能的检测
?T细胞增殖试验 ?T细胞分泌功能测定 ?T细胞介导的细胞毒试验 ?体内试验
（一）T淋巴细胞增殖试验
1. 原理：
淋巴细胞
刺激物
DNA合成 母细胞
分化
细胞变大 细胞浆扩大 空泡 核仁明显 核染色质疏松
未转化和转化淋巴细胞的形态特征
转化的淋巴细胞
淋巴母细胞
过渡型
细胞大小(直径μm) 12～20
(四) 体内试验
?特异性抗原皮肤试验 ?PHA皮肤试验
二、B细胞功能检测
?B细胞增殖能力的试验 ?溶血空斑试验 ?B细胞抗体形成功能的检测 ?体内试验
(一)B细胞增殖能力的试验
抗IgM 细菌脂多糖 SAC的SPA
免疫细胞-淋巴细胞PPT课件
淋巴细胞的发育和分化是一个复杂的过程，受到多种基因和 信号分子的调控。
详细描述
在发育过程中，淋巴细胞经历了从祖细胞到前体细胞再到成 熟细胞的多个阶段。在这个过程中，不同的基因和信号分子 参与了细胞的分化和功能调节，以确保淋巴细胞能够有效地 发挥免疫防御作用。
02
T淋巴细胞
T淋巴细胞的特征和功能
特征
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱVS
病毒感染
NK细胞能够清除被病毒感染的细胞，从 而控制病毒的复制和传播，因此NK细胞 的功能异常与病毒感染的易感性有关。
05
淋巴细胞与其他免疫细胞的关系
淋巴细胞与巨噬细胞的关系
巨噬细胞在免疫应答中起到抗原提呈作用，能够吞噬、消化并降解外来病原体或 抗原，然后将抗原信息传递给淋巴细胞，激活淋巴细胞的免疫反应。
淋巴细胞在免疫系统中的作用
总结词
淋巴细胞在免疫系统中发挥核心作用，通过产生抗体、细胞毒性和调节免疫反 应等方式抵御外来病原体。
详细描述
T细胞主要通过细胞毒性和信号传递等方式清除被感染的细胞或异常细胞，而B 细胞则通过产生抗体来中和外来病原体，NK细胞则可以杀死被感染的细胞。
淋巴细胞的发育和分化
总结词
淋巴细胞与其他免疫细胞的关系
淋巴细胞与其他免疫细胞如自然杀伤 细胞、嗜酸性粒细胞等之间存在复杂 的相互作用和调控关系。
淋巴细胞通过释放不同的化学信号以 及与其他免疫细胞的相互作用，共同 维持免疫系统的平衡和稳定，防止病 原体入侵和感染。
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NK细胞的激活和调控
激活
NK细胞的激活需要信号转导通路的触发，如激酶、受体等，这些信号转导通路能够将外界刺激转化为细胞内的 反应。
调控
NK细胞的活性受到多种因素的调控，包括细胞因子、生长因子等，这些因素能够影响NK细胞的增殖、分化、功 能和凋亡。
详细描述
在发育过程中，淋巴细胞经历了从祖细胞到前体细胞再到成 熟细胞的多个阶段。在这个过程中，不同的基因和信号分子 参与了细胞的分化和功能调节，以确保淋巴细胞能够有效地 发挥免疫防御作用。
02
T淋巴细胞
T淋巴细胞的特征和功能
特征
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱVS
病毒感染
NK细胞能够清除被病毒感染的细胞，从 而控制病毒的复制和传播，因此NK细胞 的功能异常与病毒感染的易感性有关。
05
淋巴细胞与其他免疫细胞的关系
淋巴细胞与巨噬细胞的关系
巨噬细胞在免疫应答中起到抗原提呈作用，能够吞噬、消化并降解外来病原体或 抗原，然后将抗原信息传递给淋巴细胞，激活淋巴细胞的免疫反应。
淋巴细胞在免疫系统中的作用
总结词
淋巴细胞在免疫系统中发挥核心作用，通过产生抗体、细胞毒性和调节免疫反 应等方式抵御外来病原体。
详细描述
T细胞主要通过细胞毒性和信号传递等方式清除被感染的细胞或异常细胞，而B 细胞则通过产生抗体来中和外来病原体，NK细胞则可以杀死被感染的细胞。
淋巴细胞的发育和分化
总结词
淋巴细胞与其他免疫细胞的关系
淋巴细胞与其他免疫细胞如自然杀伤 细胞、嗜酸性粒细胞等之间存在复杂 的相互作用和调控关系。
淋巴细胞通过释放不同的化学信号以 及与其他免疫细胞的相互作用，共同 维持免疫系统的平衡和稳定，防止病 原体入侵和感染。
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NK细胞的激活和调控
激活
NK细胞的激活需要信号转导通路的触发，如激酶、受体等，这些信号转导通路能够将外界刺激转化为细胞内的 反应。
调控
NK细胞的活性受到多种因素的调控，包括细胞因子、生长因子等，这些因素能够影响NK细胞的增殖、分化、功 能和凋亡。
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淋巴细胞的功能检测一T细胞功能检测二 B细胞功
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第一节 淋巴细胞的功能检测
淋巴细胞功能测定可分为体内实验和体外 实验。体内实验主要是间接了解淋巴细胞对 抗原、半抗原或有丝分裂原的应答反应；体 外实验主要包括淋巴细胞对抗原或有丝分裂 原刺激后的增殖反应、细胞毒性试验及淋巴 细胞分泌产物的测定
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2．应用与方法学评价：
➢该方法既可检测抗体分泌细胞，又可检
测抗体分泌量。
➢优点：
稳定、特异、抗原用量少； 可同时检测不同抗原诱导的不同抗体分泌，并可定量； 可检测组织切片中分泌抗体的单个细胞。
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(四) 体内试验
➢体内抗体产生的特异性抗原有白喉类毒素、 破伤风类毒素、多价肺炎链球菌菌苗等。 ➢将适量抗原皮下或肌肉注射免疫，并于免疫 前及免疫后1周、2周、3周分别采血，分离血 清，测定受检者免疫前后相应抗体的效价，判 断受检者体内B细胞的功能。
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3．临床应用与评价
➢溶血空斑试验主要用于测定药物和 手术等因素对体液免疫功能的影响 ➢评价免疫治疗或免疫重建后机体产 生抗体的能力。
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(三) B细胞抗体形成功能的检测 ——酶联免疫斑点法
1.原理：
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形态学
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3H－TdR掺入 法
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(二) 溶血空斑试验 1. 原理：
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2. 方法学：
➢ 经典溶血空斑形成试验 ➢ 被动溶血空斑试验
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➢优点：3H-TdR掺入法敏感性高，客观
性强，重复性好。
➢缺点：但需一定设备条件，同时还存在
放射性核素污染问题。
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(二) T细胞分泌功能测定
体外培养的T细胞经各种丝裂原或抗原刺激
后,分泌各种细胞因子,可借助免疫学、细胞生
物学及分子生物学技术分别检测细胞因子含量、
➢优点：形态学方法简便易行，普通光 学显微镜便能观察结果，适于基层实验 室应用。 ➢缺点：是依靠肉眼观察形态学变化， 判断结果易受主观因素影响，重复性和 准确性较差。
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（2）3H-TdR掺入法
试验孔A均值
SI对照
570nm
孔A均值
570nm
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二、B细胞功能检测
➢B细胞增殖能力的试验 ➢溶血空斑试验 ➢B细胞抗体形成功能的检测 ➢体内试验
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(一)B细胞增殖能力的试验
抗IgM 细菌脂多糖 SAC的SPA
B细胞增殖
DNA合成期 + 3HTdR掺入
母细胞化
收集细胞
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检测β射线 淋巴细胞的功能B检细测胞一功T细胞功测能检定测二细胞内的3H－TdR9
（1）形态学检查法
转化率
转化的淋巴细胞数 10% 0
转化和未转化的胞淋数巴细
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方法学评价：
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淋巴细胞
➢T细胞（负责细胞免疫功能） ➢B细胞（执行体液免疫功能） ➢NK和K细胞（非特异性免疫作用）
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一、T细胞功能的检测
➢T细胞增殖试验 ➢T细胞分泌功能测定 ➢T细胞介导的细胞毒试验 ➢体内试验
淋巴母细胞 过渡型
细胞大小(直径μm) 12～20
12～16
核大小、染色质 增大、疏松
增大、疏松
核仁
清晰、1～4个 有或无
有丝分裂
有或无
无
胞质、着色
增多、嗜碱
增多、嗜碱
浆内空泡
有或无
有或无
伪足
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有或无
有或无
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未转化的淋巴细胞
6～8 不增大、密集 无 无 极少、天青色 无 无
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2. 淋巴细胞转化的刺激物
非特异性刺激物： PHA ------T细胞 ConA -------T细胞 PWM -------T、 B细胞 LPS -------B细胞
特异性刺激物： 异种抗原 同种组织抗原
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3. 检测方法
形态法：刺激物 淋巴细胞（4-6天） 同位素法：PHA 淋巴细胞（54h）
生物学活性或基因表达水平，以反映T细胞功
能。
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（三）T细胞介导的细胞毒试验
1.原理：
靶细胞抗原
T细胞 靶细胞
致敏CTL
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观察杀伤活力 淋巴细胞的功能检测一T细胞功能检测二 B细胞功
142.方法Fra bibliotek➢ 形态学方法：淋巴细胞+肿瘤细胞 计数残留肿瘤细胞 ➢ 同位素法 ：淋巴细胞（CTL）+含51Cr 的肿瘤细胞
肿瘤细胞破坏 51Cr 释放 测定γ射线
意义：
肿瘤患者CTL杀伤肿瘤细胞的能力
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淋巴细胞的功能检测一T细胞功能检测二 B细胞功
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图15-淋2巴细T胞细的功胞能检细测胞一T细毒胞试功能验检测示二 意图 B细胞功
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(四) 体内试验
➢特异性抗原皮肤试验 ➢PHA皮肤试验
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（一）T淋巴细胞增殖试验
1. 原理：
淋巴细胞
刺激物
DNA合成
分化
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母细胞
淋巴细胞的功能检测一T细胞功能检测二 B细胞功
细胞变大 细胞浆扩大 空泡 核仁明显 核染色质疏6 松
未转化和转化淋巴细胞的形态特征
转化的淋巴细胞
第二节 吞噬细胞功能检测技术 一、中性粒细胞功能检测 二、巨噬细胞功能检测
第三节 免疫细胞功能检测的临床应用
思考题 小结
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淋巴细胞的功能检测一T细胞功能检测二 B细胞功
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对淋巴细胞群，中性粒细胞、巨噬 细胞、树突状细胞等功能测定可以 有效评价机体特异性和非特异性免 疫功能。
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