实验十四小白鼠骨髓细胞的染色体制片

实验方法
• 沉淀加5毫升固定液1500rpm离心8分钟，留沉 淀。（反复2次） • 制备细胞悬液：沉淀加入0.5毫升新鲜固定液， 混匀制成细胞悬液。 • 滴片：用吸管吸取少量悬液，在离载玻片30cm 高度滴2滴于载玻片上，沿斜面吹散，再酒精 灯上微烤，晾干。 • 染色：用姬姆萨染液染色10-15分钟。冲洗，晾 干，显微镜观察。
观察
• 在显微镜寻找分散良好的中期分裂相。 小白鼠染色体一般呈“U”形，都为近端 着丝粒染色体。染色体数2n=40。
实验结果
Baidu Nhomakorabea
实验报告与思考题
• 根据实验过程分析实验结果，分析原因， 总结经验。 • 制备染色体标本时，为什么用秋水仙素， 作用是什么？ • 制片过程中，为什么要进行固定？
实验十四
小鼠骨髓细胞染色体 制备与分析
实验目的
• 掌握制作动物骨髓细胞染色体标本 的方法，练习染色体制片技术。 • 了解小鼠染色体的形态和数目。
实验原理
• 染色体（chromosome）在间期细胞中见不到， 它只在分裂细胞中出现。因此从理论上讲，任 何处于分裂状态的细胞都可以作为染色体标本 制备的材料。染色体在分裂中期是最典型的。 用适量的秋水仙素溶液注入动物体内，可抑制 分裂细胞纺锤体的形成，使分裂终止在中期， 积累大量的中期细胞，再通过常规的制片方法， 可获得动物染色体标本。
实验材料与试剂
• 材料：小白鼠。 • 试剂：秋水仙素，氯化钠低渗液，甲醇冰乙酸（固定液）生理盐水，姬姆萨染 色液。
实验方法
• 选择体重18-20克的健康小白鼠，在实验前3-4小时注 射秋水仙素（2ug/g体重）。 • 用颈椎脱臼法处死小白鼠，从背部剪开肢体皮肤和肌 肉，取出完整的股骨，用生理盐水洗净。 • 收集细胞：将股骨放入培养皿中（加入生理盐水）用 止血钳夹碎，吸取上清夜，移入离心管，1500rpm离 心8分钟，留沉淀。 • 低渗处理：用预热氯化钾溶液6毫升，轻轻混匀，37℃ 保温20分钟，加入新鲜固定液1毫升，预固定。