细菌鉴定的总体思路ppt课件
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➢ 生化反应：触酶+，氧化酶-，硝还+，靛基质-，枸盐-， 明胶酶-，脲酶不定，不分解糖类，可形成类CAMP样 反应。
·
14
G-c(触酶、氧化酶、 O/F)
+ + o
脑膜炎奈瑟氏菌 淋病奈瑟氏菌
其他奈瑟菌
·
布兰汉菌属 金黄色奈瑟菌
15
革兰阴性双球菌
氧化酶+
葡萄糖 麦芽糖 硝还 DNA酶
脑膜炎 双球菌
·
7
几种常见葡萄球菌的鉴定
金葡 中间 表皮 腐生 溶血
凝固酶 甘露醇
+
+
+
-
-来自百度文库
-
-
+
-
d
尿素 d + -
新生 S S S R S
·
8
革兰阳性球菌 之链球菌
二、革兰阳性球菌，排列成链状，触酶（-） ： 根据溶血情况， 先做①七叶苷 ②6.5%NaCl ③肉汤。
❖β溶血：
1、 ① - ②- ③沉淀生长，加做杆菌肽S为化脓性链球菌 2、 ① - ②- ③微混，加做CAMP+为B群链球菌（无乳链球菌） 3、 ①- ②- ③沉淀生长，加做杆菌肽R，为β溶血性链球
临床常见细菌鉴定的思路
检验科 张诗海
·
1
细菌鉴定的指南
一、培养特性 1、温度 2、气体 3、营养要求 4、PH 5、湿度
·
2
细菌鉴定的指南
二、生长特性 1、生长速度 2、菌落特征 3、液体培养基的生长特性
三、细菌的形态与染色 四、生理及生化特性 五、血清学诊断 六、致病性试验：动物接种
·
3
细菌的分类及鉴定步骤
➢ 细菌的分类单位 由高到低 分7个层次 ， 界 门 纲 目 科属种
➢ 有的种还分血清型（如沙门菌及志贺菌 等）和生物型（如流感、副流感嗜血杆 菌1-8生物型等）还有噬菌体分型（如伤 寒沙门菌、铜绿等）。
·
4
细菌鉴定步骤
1、首先必须分离有单个菌落的纯培养 2、革兰氏染色，先确定是G-b，G+b，
G+c，G-c 3、如为G-b，G-c先做氧化酶试验，如为
绿色气球菌生化反应
试验
+%
试验
+%
试验
+%
触酶*
0
麦芽糖 100
阿拉伯糖 48
硝还*
0
蔗糖
100
棉子糖
19
七叶苷 * 100
乳糖
90
木糖
10
6.5%NaCl * 100
果糖
100
山梨醇
0
葡萄糖* 100
蕈糖
90
甘露醇*
86
水杨苷 76
*为确诊试验
·
12
革兰阳性球菌之—溶血孪生球菌
本菌染色多变，可以染成阴性，呈单个或成双、短链 排列。血板上35度培养24h形成较大的菌落，呈水滴 状，易融合生长，48h后菌落周围出现宽大的透明溶 血环，有自溶现象，类似肺炎链球菌的菌落。肉汤培 养中呈混浊生长，6.5%高盐肉汤中能生长。
致病性大肠埃希菌 克氏双糖、苯丙氨酸、葡萄糖酸盐 、甘露醇、IMViC、山梨醇。
迁徙生长，可能为变形杆菌 克氏双糖、尿素、苯丙氨 酸、葡萄糖酸盐、甘露醇、靛基质、麦芽糖。
灰凸的菌落，染色为典型的阴性球杆菌 克氏双糖、葡 萄糖、甘露醇、靛基质、枸橼酸盐、硝酸盐、丙二酸盐 、42℃。
灰黄色菌落 可能为嗜麦芽窄食假单胞菌 同氧化酶+ 生化试验。
生化反应：触酶-，氧化酶-，分解葡萄糖、果糖；不 分解乳、麦、菊、蔗、阿拉伯糖、甘露醇、卫矛醇； 七叶苷-，靛基质-。对青、氯霉素敏感，对丁胺卡那 耐药。
·
13
革兰阳性球菌之—马红球菌
➢ 马红球菌是马、猪和牛的致病菌，近来发现本菌也可 引起艾滋病、血液病和肾移植病人的肺部感染。
➢ 本菌为革兰阳性无动力杆菌，为多形态，有时呈杆状， 有时呈球状。在血平板上35℃ 24-48h，可长出淡桔红色 到粉红色的粘液样大菌落，不溶血。
G+c或G+b先做触酶，根据结果，选择 最少几项关键性鉴定试验。
·
5
G+c(动力、触酶、O/F)
-w/- F - + O/-
气
微
球
球
菌
菌
-+ F
葡 萄 球 菌
·
+/- - F
链 球 菌
6
革兰阳性球菌 之葡萄球菌
一、革兰阳性球菌，排列成葡萄状，触酶（+） ：
首先做血浆凝固酶试验、甘露醇、尿素及对新 生霉素的敏感性，如果确定不了，再加做麦芽 糖、蔗糖、蕈糖、木糖、硝酸盐，同时结合菌 落颜色和溶血情况。
·
20
革兰阴性杆菌手工鉴定的主要生化试验
2、氧化酶+
全套生化 克氏双糖、葡萄糖、甘露醇、靛基质、枸橼 酸盐、硝酸盐、七叶苷、乙酰胺。
可疑气单胞菌 克氏双糖、葡萄糖、甘露醇、靛基质、
注：杜克嗜血杆菌是软性下疳的病原菌，72h后才生长 细小的菌落，阴道分泌物培养时要注意。
·
18
革兰阴性杆菌手工鉴定的主要生化试验
涂片为革兰阴性杆菌，做氧化酶试验。 1、氧化酶- 做全套生化 克氏双糖、尿素、苯丙氨酸、葡萄糖酸盐、 葡萄糖、甘露醇、IMViC、硝酸盐
·
19
革兰阴性杆菌手工鉴定的主要生化试验
·
10
革兰阳性球菌
如D群链球菌和肠球菌要进一步鉴定：
D群链球菌
肠球菌
乳糖
山梨醇
+
-
牛链 马肠链
+ 棉子糖
+
-
甘露醇
+
-
粪肠球 禽肠球
·
屎肠球 坚忍肠球
11
革兰阳性球菌之—绿色气球菌
绿色气球菌是一种条件致病菌，它可引创面感染、败血症等。
绿色气球菌在血平板上生长灰色、光滑、有α 溶血的菌落。革兰染色为 G+C，排列呈四联状。
菌（非A、B） 4、 ①+ ② ③沉淀生长，加做杆菌肽R，为咽峡链球菌（草链中的一种）
·
9
革兰阳性球菌之—链球菌
❖ α 溶血：
1、 ① -或+ ②- ③沉淀生长，为草链 2、 ① - ②- ③混浊生长，加做胆汁溶菌试验+，菊糖+，
Optochin S，为肺炎链球菌
❖不溶血或α 溶血：
1、 ① + ②- ③混浊生长，为D群链球菌 2、 ① + ②+ ③混浊生长，为肠球菌
德 属胞 胞 杆
菌
菌
·
-+ +
-+ -
-+ +
弯
F
-
嗜军 曲
血团 杆
杆菌 菌
菌 属 属17
革兰阴性杆菌之—嗜血杆菌
嗜血杆菌为G-小杆菌，在巧克力平板上生长灰色、透 明的小菌落，似露滴状，有时呈球杆菌，有时呈丝状 ，一般情况下在血平板上不生长。
氧化酶（弱+），在血平板和MH上同时做卫星试验， 两种平板上均阳性，为副流杆菌嗜血杆菌，血平板上 阳性、MH上阴性，为流感嗜血杆菌。
+ + -
卡他布 兰汉菌
+ +
淋病 奈瑟菌
+ -
·
16
G-b(动力、氧化酶、触酶、O/F)
-+ + +/+-F
莫肠 拉杆 菌菌 属科
+ -- + + ++ + + ++ +
- fw- - 0/f
产黄 莫假
碱色 拉单 杆杆 菌胞 菌菌 属菌
-
+
-
+
+
-
+
+
+
f
F
O/-
巴 弧气 邻 不
斯 菌单 单 动
·
14
G-c(触酶、氧化酶、 O/F)
+ + o
脑膜炎奈瑟氏菌 淋病奈瑟氏菌
其他奈瑟菌
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布兰汉菌属 金黄色奈瑟菌
15
革兰阴性双球菌
氧化酶+
葡萄糖 麦芽糖 硝还 DNA酶
脑膜炎 双球菌
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7
几种常见葡萄球菌的鉴定
金葡 中间 表皮 腐生 溶血
凝固酶 甘露醇
+
+
+
-
-来自百度文库
-
-
+
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d
尿素 d + -
新生 S S S R S
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8
革兰阳性球菌 之链球菌
二、革兰阳性球菌，排列成链状，触酶（-） ： 根据溶血情况， 先做①七叶苷 ②6.5%NaCl ③肉汤。
❖β溶血：
1、 ① - ②- ③沉淀生长，加做杆菌肽S为化脓性链球菌 2、 ① - ②- ③微混，加做CAMP+为B群链球菌（无乳链球菌） 3、 ①- ②- ③沉淀生长，加做杆菌肽R，为β溶血性链球
临床常见细菌鉴定的思路
检验科 张诗海
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1
细菌鉴定的指南
一、培养特性 1、温度 2、气体 3、营养要求 4、PH 5、湿度
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2
细菌鉴定的指南
二、生长特性 1、生长速度 2、菌落特征 3、液体培养基的生长特性
三、细菌的形态与染色 四、生理及生化特性 五、血清学诊断 六、致病性试验：动物接种
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3
细菌的分类及鉴定步骤
➢ 细菌的分类单位 由高到低 分7个层次 ， 界 门 纲 目 科属种
➢ 有的种还分血清型（如沙门菌及志贺菌 等）和生物型（如流感、副流感嗜血杆 菌1-8生物型等）还有噬菌体分型（如伤 寒沙门菌、铜绿等）。
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细菌鉴定步骤
1、首先必须分离有单个菌落的纯培养 2、革兰氏染色，先确定是G-b，G+b，
G+c，G-c 3、如为G-b，G-c先做氧化酶试验，如为
绿色气球菌生化反应
试验
+%
试验
+%
试验
+%
触酶*
0
麦芽糖 100
阿拉伯糖 48
硝还*
0
蔗糖
100
棉子糖
19
七叶苷 * 100
乳糖
90
木糖
10
6.5%NaCl * 100
果糖
100
山梨醇
0
葡萄糖* 100
蕈糖
90
甘露醇*
86
水杨苷 76
*为确诊试验
·
12
革兰阳性球菌之—溶血孪生球菌
本菌染色多变，可以染成阴性，呈单个或成双、短链 排列。血板上35度培养24h形成较大的菌落，呈水滴 状，易融合生长，48h后菌落周围出现宽大的透明溶 血环，有自溶现象，类似肺炎链球菌的菌落。肉汤培 养中呈混浊生长，6.5%高盐肉汤中能生长。
致病性大肠埃希菌 克氏双糖、苯丙氨酸、葡萄糖酸盐 、甘露醇、IMViC、山梨醇。
迁徙生长，可能为变形杆菌 克氏双糖、尿素、苯丙氨 酸、葡萄糖酸盐、甘露醇、靛基质、麦芽糖。
灰凸的菌落，染色为典型的阴性球杆菌 克氏双糖、葡 萄糖、甘露醇、靛基质、枸橼酸盐、硝酸盐、丙二酸盐 、42℃。
灰黄色菌落 可能为嗜麦芽窄食假单胞菌 同氧化酶+ 生化试验。
生化反应：触酶-，氧化酶-，分解葡萄糖、果糖；不 分解乳、麦、菊、蔗、阿拉伯糖、甘露醇、卫矛醇； 七叶苷-，靛基质-。对青、氯霉素敏感，对丁胺卡那 耐药。
·
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革兰阳性球菌之—马红球菌
➢ 马红球菌是马、猪和牛的致病菌，近来发现本菌也可 引起艾滋病、血液病和肾移植病人的肺部感染。
➢ 本菌为革兰阳性无动力杆菌，为多形态，有时呈杆状， 有时呈球状。在血平板上35℃ 24-48h，可长出淡桔红色 到粉红色的粘液样大菌落，不溶血。
G+c或G+b先做触酶，根据结果，选择 最少几项关键性鉴定试验。
·
5
G+c(动力、触酶、O/F)
-w/- F - + O/-
气
微
球
球
菌
菌
-+ F
葡 萄 球 菌
·
+/- - F
链 球 菌
6
革兰阳性球菌 之葡萄球菌
一、革兰阳性球菌，排列成葡萄状，触酶（+） ：
首先做血浆凝固酶试验、甘露醇、尿素及对新 生霉素的敏感性，如果确定不了，再加做麦芽 糖、蔗糖、蕈糖、木糖、硝酸盐，同时结合菌 落颜色和溶血情况。
·
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革兰阴性杆菌手工鉴定的主要生化试验
2、氧化酶+
全套生化 克氏双糖、葡萄糖、甘露醇、靛基质、枸橼 酸盐、硝酸盐、七叶苷、乙酰胺。
可疑气单胞菌 克氏双糖、葡萄糖、甘露醇、靛基质、
注：杜克嗜血杆菌是软性下疳的病原菌，72h后才生长 细小的菌落，阴道分泌物培养时要注意。
·
18
革兰阴性杆菌手工鉴定的主要生化试验
涂片为革兰阴性杆菌，做氧化酶试验。 1、氧化酶- 做全套生化 克氏双糖、尿素、苯丙氨酸、葡萄糖酸盐、 葡萄糖、甘露醇、IMViC、硝酸盐
·
19
革兰阴性杆菌手工鉴定的主要生化试验
·
10
革兰阳性球菌
如D群链球菌和肠球菌要进一步鉴定：
D群链球菌
肠球菌
乳糖
山梨醇
+
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牛链 马肠链
+ 棉子糖
+
-
甘露醇
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粪肠球 禽肠球
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屎肠球 坚忍肠球
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革兰阳性球菌之—绿色气球菌
绿色气球菌是一种条件致病菌，它可引创面感染、败血症等。
绿色气球菌在血平板上生长灰色、光滑、有α 溶血的菌落。革兰染色为 G+C，排列呈四联状。
菌（非A、B） 4、 ①+ ② ③沉淀生长，加做杆菌肽R，为咽峡链球菌（草链中的一种）
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革兰阳性球菌之—链球菌
❖ α 溶血：
1、 ① -或+ ②- ③沉淀生长，为草链 2、 ① - ②- ③混浊生长，加做胆汁溶菌试验+，菊糖+，
Optochin S，为肺炎链球菌
❖不溶血或α 溶血：
1、 ① + ②- ③混浊生长，为D群链球菌 2、 ① + ②+ ③混浊生长，为肠球菌
德 属胞 胞 杆
菌
菌
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-+ +
-+ -
-+ +
弯
F
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嗜军 曲
血团 杆
杆菌 菌
菌 属 属17
革兰阴性杆菌之—嗜血杆菌
嗜血杆菌为G-小杆菌，在巧克力平板上生长灰色、透 明的小菌落，似露滴状，有时呈球杆菌，有时呈丝状 ，一般情况下在血平板上不生长。
氧化酶（弱+），在血平板和MH上同时做卫星试验， 两种平板上均阳性，为副流杆菌嗜血杆菌，血平板上 阳性、MH上阴性，为流感嗜血杆菌。
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卡他布 兰汉菌
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淋病 奈瑟菌
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G-b(动力、氧化酶、触酶、O/F)
-+ + +/+-F
莫肠 拉杆 菌菌 属科
+ -- + + ++ + + ++ +
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产黄 莫假
碱色 拉单 杆杆 菌胞 菌菌 属菌
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斯 菌单 单 动