基本类型色谱方法及其分离机制 - 基本类型色谱方法及其分离机制

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色谱法的分离原理

色谱法的分离原理色谱法是一种用于分离混合物中成分的分析技术。

它基于不同成分在固定相和流动相之间的不同相互作用力而实现分离。

色谱法可以分为两大类：一类是液相色谱法（Liquid Chromatography, LC），另一类是气相色谱法（Gas Chromatography, GC）。

下面将分别从液相色谱法和气相色谱法的分离原理进行介绍。

液相色谱法分离原理：液相色谱法是基于样品与液相载体在固定相表面上的相互作用力而进行分离的。

液相色谱法涉及两种基本类型的分离机制：吸附色谱和分配色谱。

1.吸附色谱：吸附色谱利用物质在固定相表面吸附的差异实现分离。

固定相通常是多孔吸附剂，具有大量活性表面。

当样品溶液通过固定相时，各组分与固定相之间的相互作用力不同，导致各组分在固定相上的吸附速率不同。

吸附速率较快的组分会滞留更少的时间在固定相上，因此会更早地被洗出。

吸附色谱广泛应用于分离极性化合物。

2.分配色谱：分配色谱基于样品组分在两种不相溶的液体流动相之间的分配差异实现分离。

固定相是一种多孔材料，比如固定相经过表面改性的多孔硅胶柱。

当样品溶液通过柱子时，样品中的各组分会被分配到液相和固定相之间，各组分在两相中的分配系数不同，导致各组分的迁移速率差异。

分配色谱广泛应用于分离中性有机化合物。

气相色谱法分离原理：气相色谱法是一种基于样品在气相载体中迁移速率的不同实现分离的方法。

它是通过将样品蒸发成气体并通过固定相柱进行分离的。

气相色谱法涉及两种基本类型的分离机制：分布系数和不饱和反应。

1.分布系数：在气相色谱法中，物质在流动相（气态）和固定相（涂覆在柱子上的材料）之间的分布行为是分离的基础。

各组分的分布系数不同，导致了在固定相中的不同保留时间和分离。

2.不饱和反应：气相色谱法中还存在不饱和反应的分离机制。

不饱和反应是指样品组分与固定相表面之间发生的特定化学反应。

这种化学反应会影响组分的迁移速率，从而实现分离。

需要注意的是，色谱法的具体分离原理和分离机制会受到多种因素的影响，包括载体的特性、流动相和固定相的选择、操作条件等。

色谱分析基本原理..

一、色谱分析法基本原理色谱法，又称层析法。

根据其分离原理，有吸附色谱、分配色谱、离子交换色谱与排阻色谱等方法。

吸附色谱是利用吸附剂对被分离物质的吸附能力不同，用溶剂或气体洗脱，以使组分分离。

常用的吸附剂有氧化铝、硅胶、聚酰胺等有吸附活性的物质。

分配色谱是利用溶液中被分离物质在两相中分配系数不同，以使组分分离。

其中一相为液体，涂布或使之键合在固体载体上，称固定相；另一相为液体或气体，称流动相。

常用的载体有硅胶、硅藻土、硅镁型吸附剂与纤维素粉等。

离子交换色谱是利用被分离物质在离子交换树脂上的离子交换势不同而使组分分离。

常用的有不同强度的阳、阴离子交换树脂，流动相一般为水或含有有机溶剂的缓冲液。

排阻色谱又称凝胶色谱或凝胶渗透色谱，是利用被分离物质分子量大小的不同和在填料上渗透程度的不同，以使组分分离。

常用的填料有分子筛、葡聚糖凝胶、微孔聚合物、微孔硅胶或玻璃珠等，可根据载体和试样的性质，选用水或有机溶剂为流动相。

色谱法的分离方法，有柱色谱法、纸色谱法、薄层色谱法、气相色谱法、高效液相色谱法等。

色谱所用溶剂应与试样不起化学反应，并应用纯度较高的溶剂。

色谱时的温度，除气相色谱法或另有规定外，系指在室温下操作。

分离后各成分的检出，应采用各单体中规定的方法。

通常用柱色谱、纸色谱或薄层色谱分离有色物质时，可根据其色带进行区分，对有些无色物质，可在245-365nm的紫外灯下检视。

纸色谱或薄层色谱也可喷显色剂使之显色。

薄层色谱还可用加有荧光物质的薄层硅胶，采用荧光熄灭法检视。

用纸色谱进行定量测定时，可将色谱斑点部分剪下或挖取，用溶剂溶出该成分，再用分光光度法或比色法测定，也可用色谱扫描仪直接在纸或薄层板上测出，也可用色谱扫描仪直接以纸或薄层板上测出。

柱色谱、气相色谱和高效液相色谱可用接于色谱柱出口处的各种检测器检测。

柱色谱还可分部收集流出液后用适宜方法测定。

柱色谱法所用色谱管为内径均匀、下端缩口的硬质玻璃管，下端用棉花或玻璃纤维塞住，管内装有吸附剂。

色谱法的基本原理

设样品分子开始全部位于第0号塔板上，当色谱柱中通过N体积载气后，计算在第 n块塔板上出现某组分分子的概率。这个概率应该是考虑在塔板上某组分的一个分子出现在流动相中的概率(Mp) 等于在该塔板上流动相中组分分子的个数与整个塔板上组分分子个数之比。
假设色谱柱由5块塔板组成： (0号板,1号,2号,…4号板) 令N=5(N表示进入柱中载气的脉冲次数令组分进样量为：W=1 组分在柱内的分配过程是以气液色谱分
改变固定相，改变流动相，改变样品本身的性质（如衍生化法）
二区域宽度
（1）标准偏差σ （2）半峰宽 W1/2 （3）峰底宽度W
从色谱图中，可得许多信息： 1 色谱峰的个数，可判断所含组分的最少个数； 2 根据色谱峰的保留值，可以进行定性分析； 3 根据色谱峰的面积或峰高，可以进行定量分析； 4 色谱峰的保留值及其区域宽度，评价柱效依据；
t’R(z+n)---碳原子数为z+n的正构烷烃的调整保留时间
t’R(z) ≤t’R(x)≤ t’R(z+n) （通常 n=1）
规定正构烷烃的I 值是其他原子数的100倍，如：正庚烷I=700
色谱柱效能的参数
柱效：也叫柱效能。
tR 2 tR 2 n 5.54( ) 16( ) W1/ 2 W
选择性系数
KS

[ RSO3 X ] S [ X ] [ RSO3 H ] S [ H ] m
注：Ks与离子的电荷数、水合离子半径、流动相性质、离子交换树脂性质以及温度有关 next
图示

分离机制：依据被测组分与离子交换剂交换能力（亲和力）不同而实现分离 back
结论：

四种色谱的分离机制各不相同，分别形成吸附平衡、分配平衡、离子交换平衡和渗透平衡 K分别为吸附系数，狭义分配系数，选择性系数和渗透系数

[暨南大学课件][分析化学][教案PPT][精品课程]第十六章-第一节-色谱法概述-2

2020/6/17
空间排阻色谱法
▪ 根据空间排阻（steric exclusion）理论，孔内外同等大小的溶质分子处于扩散平衡状态：
Xm
Xs
▪ 渗透系数： Kp =Xs/Xm （0＜Kp＜1 ）由溶质分子的线团尺寸和凝胶孔隙的大小
所决定。在一定分子线团尺寸范围内，Kp与分子量相关，即组分按分子量的大小分离。
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吸附色谱法
➢ 流动相有机溶剂（硅胶为吸附剂） ➢ 洗脱能力：主要由其极性决定。 ➢ 强极性流动相占据吸附中心的能力强，洗
脱能力强，使k值小，保留时间短。
➢ Snyder溶剂强度o：吸附自由能，表示洗脱能力。o值越大，固定相对溶剂的吸附
能力越强，即洗脱能力越强。
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分配色谱法
▪ 洗脱顺序由组分在固定相或流动相中溶解度的相对大小而决定。正相液液分配色谱：极性强的组分后被洗脱。（库仑力和氢键力）
反相液液分配色谱：极性强的组分先出柱。
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二、吸附色谱法 (P346)
▪ 分离原理利用被分离组分对固定相表面吸附中心吸附能力的差别而实现分离。
▪ 吸附过程是试样中组分的分子(X)与流动相分子(Y)争夺吸附剂表面活性中心的过程，即为竞争吸附过程。
▪ 吸附色谱法包括气固吸附色谱法和液固吸附色谱法
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X m + nYa
Ka
=
[X a ][Ym ]n [X m ][Ya ]n
Ka
[Xa ] [Xm ]
Xa / Sa X m /Vm
（2）灵敏度高：
可以检测出μg.g-1(10-6)级甚至ng.g-1(10-9)级的物质量.

中药化学2.2 色谱分离技术

CH2 N O C CH2 CH2 CH2 H N C CH2 O H N CH2 CH2 CH2 CH2 CH2 CH2 H O C CH2 N CH2 CH2 C O H O H H3C O H3C CH3 CH3 O
聚酰胺吸附力的影响因素： 1:形成氢键的能力与溶剂有关水中＞有机溶剂中＞碱性溶剂中常用溶剂对聚酰胺洗脱能力顺序如下：水＜甲醇或乙醇＜丙酮＜稀氢氧化钠液或稀氨溶液＜甲酰胺或二甲基甲酰胺＜尿素水溶液。
注意温度超过150 ℃则游离硅醇基之间脱水形成硅氧醚结构丧失游离硅醇基的吸附能力。为酸性吸附剂适于分离中性或酸性成分。

常用硅胶：
硅胶H（不含黏合剂）硅胶G（含黏合剂）硅胶GF254(含煅石膏，另含有一种无机荧光剂)。硅胶GF254nm紫外光下呈强烈黄绿色荧光背景，在荧光背景下通过紫外光照射成分斑点为暗斑，常用于一般显色手段不易显色的成分的分离。
3、洗脱：
洗脱操作的目的是要将加入的样品中各个组分先后从上往下带出来，并能分开收集各成分。洗脱的过程中，上端溶剂不能干，分段收集是关键；作定性检查合并相同成分。 TLC时Rf为0.2－0.3的溶剂系统是最佳的洗脱系统，梯度洗脱。
4. 应用柱色谱分离能力比薄层分离能力更强，效果更好，尤其对结构相似、性质接近、采用薄层难以分离的成分分离效果好。
（一）吸附剂
4、常用的吸附剂
（1）硅胶SiO2•xH2O 多孔性的硅氧烷交链结构，极性吸附剂，吸附性较氧化铝稍低，既适于分离亲水性成分，又可用于分离亲脂性成分。其吸附作用的强弱取决于游离硅醇基的数目，也与含水量有关，含水量达17％以上，则失去吸附性，所以需110℃活化30分钟。
（一）吸附剂
例：求图中A、B、C三斑点Rf大小并判断三成分极性大小顺序。

色谱分离法

应用：分离半胱氨酸、分离含半胱氨酸（-SH)的肽段、分
离含-SH基的蛋白质或进一步分离该蛋白质中-SH基附近的肽段。
16.3.5 聚焦色层分离法(Focusing chromatography)
基于离子交换的原理，根据两性电解质分子间等电点的差别进行分离纯化的洗脱层析法。
当向层析柱内通入与柱内初始pH值不同的多缓冲剂时，柱内pH值缓慢改变，在轴向形成连续的 pH梯度，使料液中的溶质依据各自的等电点或者吸附或者脱附逐次向下移动，彼此之间得到分离。
16.2.5色谱分离的有关术语
死体积
保留时间（tR）和溶出体积（VR）反应样品在柱子中的保留或阻滞能力，是色谱过程的基本热力学参数之一。
16.2.5色谱分离的有关术语
④色谱柱的理论塔板数、塔板高度 Martin和Syng最早提出塔板理论，将色谱柱比作蒸馏塔，把一根连续的色谱柱设想成由许多小段组成。在每一小段内，一部分空间为固定相占据，另一部分空间充满流动相。组分随流动相进入色谱柱后，就在两相间进行分配。并假定在每一小段内组分可以很快地在两相中达到分配平衡，这样一个小段称作一个理论塔板，一个理论塔板的长度称为理论塔板高度H。经过多次分配平衡，分配系数小的组分，先离开蒸馏塔，分配系数大的组分后离开蒸馏塔。由于色谱柱内的塔板数相当多，因此即使组分分配系数只有微小差异，仍然可以获得好的分离效果。
16.3.3金属螯合层析
金属螯合层析技术在现代基因工程中常用于表达蛋白的分离
NH2
Ni
NH2
His
His His
His
protein
▁▁▁▂▃▄▅▆▇▇▆▅▄▃▂▁▁▁▁▂▃▄▅▆▇▇▆▅▄▃▂▁
16.3.3金属螯合层析
利用 IMAC 分离纯化生物大分子

简述常见色谱分离法的类型及基本原理

简述常见色谱分离法的类型及基本原理色谱分离法是一种常用的分离分析方法，其基本原理是利用不同物质在固定相和流动相之间的分配平衡，实现物质的分离。

根据分离原理的不同，色谱分离法可以分为以下几种类型：
1. 液相色谱法（LC）：该方法是最常用的色谱分离法之一，其基本原理是利用不同物质在固定相和流动相之间的分配平衡，实现物质的分离。

液相色谱法具有高分离效能、高灵敏度、高选择性等优点，被广泛应用于生物、医药、环保、化工等领域。

2. 气相色谱法（GC）：该方法利用不同物质在气相状态下的吸附和解吸特性，实现物质的分离。

气相色谱法具有高分离效能、高灵敏度、分析速度快等优点，被广泛应用于环保、化工、食品、医药等领域。

3. 高效液相色谱法（HPLC）：该方法是一种改进的液相色谱法，通过提高固定相的粒径和流动相的速度，提高分离效率和速度。

高效液相色谱法具有高分离效能、高灵敏度、分析速度快等优点，被广泛应用于生物、医药、环保、化工等领域。

4. 薄层色谱法（TLC）：该方法是一种简便的色谱分离法，通过在薄层板上分离样品，实现物质的分离。

薄层色谱法具有操作简单、分析速度快、灵敏度高等优点，被广泛应用于食品、环保、化工等领域。

5. 离子交换色谱法（IEC）：该方法利用不同物质在离子交换剂
上的吸附和解吸特性，实现物质的分离。

离子交换色谱法具有高分离效能、高灵敏度、分析速度快等优点，被广泛应用于生物、环境等领域。

不同的色谱分离法具有不同的原理和特点，应根据具体的分析需求选择合适的色谱方法。

色谱学堂知识点总结图

色谱学堂知识点总结图一、色谱分析的基本原理1. 色谱基本原理色谱是通过样品和固定相之间的相互作用来进行分离的一种方法。

在色谱中，样品首先与移动相（气相或液相）一起通过色谱柱，其中移动相被固定相吸附或分配，从而实现了分离。

通过控制固定相和移动相的性质，可以实现对不同成分的选择性分离。

2. 色谱柱选择色谱柱是色谱分析中的重要组成部分，不同的色谱柱具有不同的分离机制和适用范围。

常见的色谱柱类型包括气相色谱柱、液相色谱柱和超高效液相色谱柱。

选择合适的色谱柱对于获得良好的分离效果非常重要。

3. 色谱分离机理色谱分离是通过样品成分与固定相之间的相互作用来实现的。

常见的色谱分离机理包括吸附色谱、分配色谱和离子交换色谱。

不同的分离机理适用于不同类型的样品和分析需求。

二、色谱技术1. 气相色谱技术气相色谱是一种常用的色谱分析技术，它适用于易挥发性和热稳定的样品。

在气相色谱中，样品首先以气体状态注入色谱柱，然后通过气相载气移动，最终被固定相吸附或分配，从而实现分离。

2. 液相色谱技术液相色谱是一种应用广泛的色谱分析技术，它适用于非挥发性和热敏感的样品。

在液相色谱中，样品首先以溶液状态注入色谱柱，然后通过液相流动，最终被固定相吸附或分配，从而实现分离。

3. 超高效液相色谱技术超高效液相色谱是一种高效的色谱分析技术，它利用超高压将样品溶液通过色谱柱，从而实现快速、高分辨率的分离。

4. 色谱联用技术色谱联用是指将色谱分离技术与其他分析技术（如质谱、光谱等）结合起来，从而进行更为全面和准确的分析。

常见的色谱联用技术包括气相色谱-质谱联用、液相色谱-质谱联用、气相色谱-光谱联用等。

三、色谱分析方法1. 样品前处理样品前处理是色谱分析中的重要步骤，它包括样品的提取、浓缩、净化等过程，旨在提高分析的灵敏度和准确性。

2. 色谱条件优化色谱条件的优化对于获得良好的分离效果非常重要。

包括固定相的选择、移动相的配比和流速、色谱柱温度等因素的优化。

简述常见色谱分离法的类型及基本原理

简述常见色谱分离法的类型及基本原理色谱分离法是一类对物质进行分析和分离的重要手段，广泛应用于化学、生物化学、药品、环境等领域。

常见的色谱分离法主要包括气相色谱（Gas Chromatography，GC）、液相色谱（Liquid Chromatography，LC）、超高效液相色谱法（Ultra-High Performance Liquid Chromatography，UHPLC）、毛细管电泳（Capillary Electrophoresis，CE）等。

本文将分别对这些色谱分离法的类型和基本原理进行介绍。

一、气相色谱（GC）气相色谱是利用气相作为移动相进行分离的色谱分离法，适用于描写分析样品中挥发性和半挥发性有机化合物的组成和含量，对非极性化合物富有选择性。

其基本原理是将待分离的混合物通过一定方法进样，然后通过携带气体流动的固定相柱进行分离，使用检测器进行检测，最后形成色谱图。

GC分析主要有两种模式，即气定常模式和温度编程模式。

气定常模式：在气定常模式下，固定相的温度是恒定不变的。

样品经进样器进入柱状固定相，随着固定相温度的递增，各组分在柱中停留时间渐次增长，从而实现了分离。

温度编程模式：在温度编程模式下，固定相的温度是随时间递增的。

通过渐增柱温，可以改变各组分在柱中的停留时间，以实现对样品中组分的分离。

该方法因为能够提高分离效率，主要应用于复杂混合物的分析。

二、液相色谱（LC）液相色谱是液体相与固定相之间相互作用的色谱分离法，其基本原理是待分析的混合物通过一种液相载体进行分离，静止相可以是固体（固定相液相色谱，SPLC）或是液体（液-液色谱，LLC）。

LLC又可分为正相液相色谱（Normal Phase Liquid Chromatography，NPLC）和反相液相色谱（Reverse Phase Liquid Chromatography，RPLC）。

正相液相色谱：正相液相色谱是以极性固定相为静止相的液相色谱，常用的固定相有硅胶和氨基硅胶。

常见色谱分离法的类型和基本原理

常见色谱分离法的类型和基本原理
常见的色谱分离法包括气相色谱（GC）、液相色谱（LC）、超高效液相色谱（UHPLC）和离子交换色谱（IC）等。

1. 气相色谱（GC）：该方法将待分离的混合物溶解在气相载气中，然后通过柱中的固态填充物，利用物质在固相填充物和气相载气之间的分配不平衡来进行分离。

分离是根据样品中化合物在固相填充物上的相对亲/疏水性的不同实现的。

2. 液相色谱（LC）：该方法将待分离的混合物通过溶解在液相中，然后通过液相柱中的固相填充物进行分离。

液相色谱可以根据不同的机理分为几种类型，包括反相色谱、离子交换色谱、凝胶过滤色谱等。

3. 超高效液相色谱（UHPLC）：UHPLC是液相色谱的一种变种，使用更细小的颗粒填充物和较高的操作压力，以提供更高分辨率和更快的分离速度。

4. 离子交换色谱（IC）：IC主要用于分离和分析带有正负离子的化合物。

通过固相柱中的离子交换剂，将待分离的样品中的离子与固相交换剂之间的电荷相互作用进行分离。

这些色谱分离法的基本原理都是根据待分离样品中组分之间在不同相（固相和液相、气相和液相）中的分配行为或相互作用来进行分离。

有机化学实验中的色谱分离技术

有机化学实验中的色谱分离技术色谱分离技术是有机化学实验中非常重要的一种技术手段，能够帮助我们有效地分离和鉴定化合物。

本文将就有机化学实验中常用的色谱分离技术进行介绍和讨论。

1. 气相色谱（Gas Chromatography，GC）气相色谱是一种在气相载体气流的作用下，根据样品成分在固定液相中的分配系数不同而进行分离的色谱技术。

气相色谱广泛应用于有机分析实验中，尤其适用于分离和鉴定高沸点、不易挥发的有机化合物。

在气相色谱实验中，我们通常将待分离的样品溶解在挥发性良好的有机溶剂中，然后通过气相色谱仪进行分析。

通过调节柱温和载气流速等条件，可以实现对不同化合物的有效分离。

2. 液相色谱（Liquid Chromatography，LC）液相色谱是一种以液相为固定相的色谱技术，可以根据样品成分在固定液相中的分配系数不同实现分离。

在有机化学实验中，液相色谱广泛用于分离和纯化化合物，尤其适用于对极性或疏水性较强的化合物进行分析。

液相色谱具有分析速度快、分离效率高的优点，可用于有机化合物的定性和定量分析。

3. 离子色谱（Ion Chromatography，IC）离子色谱是一种专门用于分离带电离子或分子的色谱技术。

在有机化学实验中，离子色谱通常用于对含离子的化合物进行分析，如酸、盐等。

离子色谱技术在环境监测、食品安全和生物医学等领域有着广泛的应用。

4. 薄层色谱（Thin-Layer Chromatography，TLC）薄层色谱是一种简单方便、成本较低的色谱技术，常用于初步分析和快速检测。

在有机化学实验中，TLC可用于检测反应产物的纯度和化合物的分离。

通过在硅胶薄层板上吸附和分离待检测试样，再通过显色剂或紫外灯照射等方法进行检测，可以得到分析结果。

总的来说，色谱分离技术在有机化学实验中发挥着重要作用，为化学研究和分析提供了有效手段。

不同类型的色谱技术各有特点，可以根据实验需求进行选择和应用，帮助化学工作者进行高效分离和鉴定工作。

中国药科大学-分析化学课件-第17色谱分析

峰宽和之半
tR2 W1
tR1 W2
2
R 2(tR2 tR1) 1.177(tR2 tR1)
W1 W2
W1 2(1) W1 2(2)
讨论
• 设色谱峰为正常峰，W1≈W2= 4σ
R 1.0 tR 4 基本分离 R 1.5 tR 6 完全分离(定量分析前提）
R 1.0 完全未分开
调整保留体积VR’：保留体积与死体积之差，即组分停留在固定相时所消耗流动相的体积
VR'
VR
V0
t
' R
FC
注：VR' 与Fc无关；t
' R
1 Fc
V0 和 Vm、t0 和 tm 的区别
• V0 ：由进样器至检测器的流路中未被固定相占有的空间体积；流定相充满死体积所需的时间为t0 。
• Vm ：平衡时流动相在色谱柱中占有的体积，流动相经过色谱柱所需时间用tm 表示。
线性：对称峰凸形：拖尾峰
• 对称因子(symmetry factor)
——衡量色谱峰对称性
色谱峰
正常峰（对称）——fs在0.95~1.05之间
非正常峰前沿峰 ——fs小于0.95 拖尾峰 ——fs大于1.05
对称因子：（拖尾因子）
fs
W0.05h 2A
A B 2A
8.分离因子和分离度：—分离参数
➢吸附色谱：利用物理吸附性能的差异（固定相固体）
（ absorption chromatography）
➢离子交换色谱：利用离子交换原理（固定相离子交换树脂）
（ion exchange chromatography ）
➢空间排阻色谱：利用排阻作用力的不同（固定相凝胶）

简述各种基本类型色谱法的分离机制。

色谱法又称层析法，是一种分离和分析混合物的方法。

色谱法的基本原理是利用混合物中各组分在固定相和流动相之间的分配系数或亲和力的差异，使混合物中的各组分在两相中进行反复多次的分配，从而达到分离的目的。

以下是几种基本类型色谱法的分离机制：1. 吸附色谱法：利用固定相表面的吸附性质来分离混合物中的各组分。

混合物中的各组分在固定相表面上的吸附能力不同，因此在流动相的冲洗下，吸附能力弱的组分先被洗脱出来，吸附能力强的组分后被洗脱出来。

2. 分配色谱法：利用固定相与流动相之间的分配系数来分离混合物中的各组分。

混合物中的各组分在固定相和流动相之间的分配系数不同，因此在流动相的冲洗下，分配系数大的组分先被洗脱出来，分配系数小的组分后被洗脱出来。

3. 离子交换色谱法：利用固定相表面的离子交换性质来分离混合物中的各组分。

混合物中的各离子在固定相表面上的离子交换能力不同，因此在流动相的冲洗下，离子交换能力弱的离子先被洗脱出来，离子交换能力强的离子后被洗脱出来。

4. 凝胶色谱法：利用固定相的空间排阻效应来分离混合物中的各组分。

混合物中的各组分在固定相中的分子大小不同，因此在流动相的冲洗下，分子大小大的组分先被洗脱出来，分子大小小的组分后被洗脱出来。

5. 亲和色谱法：利用固定相与混合物中特定组分之间的特异性亲和力来分离混合物中的各组分。

混合物中的特定组分与固定相之间的亲和力不同，因此在流动相的冲洗下，亲和力强的特定组分先被洗脱出来，亲和力弱的特定组分后被洗脱出来。

这些基本类型色谱法的分离机制各不相同，但它们都利用了混合物中各组分在固定相和流动相之间的分配差异来实现分离。

选择合适的色谱法和条件可以根据混合物的性质和分离要求来确定。

分析化学

一、主要内容1．基本概念保留时间t R：从进样到某组分在柱后出现浓度极大时的时间间隔。

死时间t0：分配系数为零的组分即不被固定相吸附或溶解的组分的保留时间。

调整保留时间t R'：某组分由于溶解（或被吸附）于固定相，比不溶解（或不被吸附）的组分在柱中多停留的时间。

相对保留值r2,1：两组分的调整保留值之比。

分配系数K：在一定温度和压力下，达到分配平衡时，组分在固定相与流动相中的浓度之比。

保留因子k：在一定温度和压力下，达到分配平衡时，组分在固定相和流动相中的质量之比。

分离度R：相邻两组分色谱峰保留时间之差与两色谱峰峰宽均值之比。

分配色谱法：利用被分离组分在固定相或流动相中的溶解度差别或分配系数的差别而实现分离的色谱法。

吸附色谱法：利用被分离组分对固定相表面吸附中心吸附能力的差别或吸附系数的差别而实现分离的色谱法。

离子交换色谱法：利用被分离组分离子交换能力的差别或选择性系数的差别而实现分离的色谱法。

分子排阻色谱法：根据被分离组分分子的线团尺寸或渗透系数的差别而进行分离的色谱法。

涡流扩散：在填充色谱柱中，由于填料粒径大小不等，填充不均匀，使同一个组分的分子经过多个不同长度的途径流出色谱柱，使色谱峰展宽的现象。

纵向扩散：由于浓度梯度的存在，组分将向区带前、后扩散，造成区带展宽的现象。

传质阻抗：组分在溶解、扩散、转移的传质过程中所受到的阻力称为传质阻抗。

保留指数I：在气相色谱法中，常把组分的保留行为换算成相当于正构烷烃的保留行为，也就是以正构烷烃系列为组分相对保留值的标准，即用两个保留时间紧邻待测组分的基准物质来标定组分的保留，这个相对值称为保留指数，又称Kovats指数。

保留体积V R：是从进样开始到某组分在柱后出现浓度极大时，所需通过色谱柱的流动相体积。

调整保留体积V R'：是由保留体积扣除死体积后的体积。

保留比R'：设流动相的线速度为u，组分的移行速度为v，将二者之比称为保留比。

色谱分离化合物

色谱分离化合物色谱分离是一种广泛应用在化学和生物化学领域中的分离技术。

它利用不同化合物在固定相和液相之间的相互作用差异，通过柱、纸或薄层等材料将液体混合物中的化合物分离开来。

色谱分离可以用于分析物质的纯度、结构和组成成分等信息，广泛应用于食品、环境、药物、化妆品等领域。

色谱分离的原理是基于化合物在不同相之间的分配系数差异。

固定相是色谱柱中的填料材料，液相则是携带溶质的流动相。

当混合物进入色谱柱时，化合物会在固定相和液相之间进行分配。

根据其与固定相和液相之间的相互作用差异，不同的化合物将通过柱子以不同的速率通过，从而实现了分离。

常见的色谱分离方法包括气相色谱（Gas Chromatography，GC）、液相色谱（Liquid Chromatography，LC）和薄层色谱（Thin Layer Chromatography，TLC）。

气相色谱（GC）是一种将样品通过气相进行分离的色谱分析技术。

GC分离的基础是样品中各组分蒸发分子在固定相和流动相之间的分配系数差异。

在GC中，样品首先通过进样口进入气相色谱柱，然后在高温下挥发蒸发，并通过柱子分离。

GC常用于分析挥发性和热稳定的化合物，如有机溶剂、环境样品中的揮发性有机化合物、石油产品中的烃类等。

液相色谱（LC）是一种将样品溶解在液相中进行分离的色谱分析技术。

LC的主要步骤包括进样、柱子分离和检测。

在LC中，样品通常由进样器通过一个柱子，其中填有固定相，并使用一个携带溶质的流动相。

在柱子中，化合物与固定相通过吸附、分配等相互作用分离。

LC广泛应用于无机、有机、生物、药物等领域中。

薄层色谱（TLC）是一种简单而经济的色谱分离方法。

在TLC中，样品涂覆在一层薄而均匀的固定相上，随后通过流动相的溶剂前进。

在固定相的选择上，常见的填料材料有硅胶、氧化铝和聚脂片等。

不同化合物根据其与固定相的相互作用差异，在薄层上表现出不同的行为，从而实现分离。

色谱分离在科学研究和实际应用中起着重要的作用。

化学中的色谱分析方法

化学中的色谱分析方法色谱分析是一种在化学领域中广泛应用的分析技术，通过分离混合物中的成分并对其进行定量或定性分析。

色谱分析方法主要包括气相色谱（Gas Chromatography, GC）、液相色谱（Liquid Chromatography, LC）和超高效液相色谱（Ultra-high Performance Liquid Chromatography, UHPLC）等。

本文将重点介绍这几种色谱分析方法的原理、应用及特点。

一、气相色谱（Gas Chromatography, GC）气相色谱是一种在气相流动条件下进行分离的色谱技术。

其原理是利用气相载气将样品混合物分离成单独的组分，然后通过检测器进行检测和定量分析。

气相色谱广泛应用于食品、环境、药物、石油化工等领域。

气相色谱的主要特点包括分离效果好、分析速度快、灵敏度高、分辨率高等。

在实际应用中，气相色谱常用于分析挥发性有机物、气体成分、药物、食品添加剂等。

二、液相色谱（Liquid Chromatography, LC）液相色谱是一种在液相流动条件下进行分离的色谱技术。

其原理是利用固定相和流动相之间的相互作用将样品混合物分离成单独的组分，然后通过检测器进行检测和定量分析。

液相色谱广泛应用于生物、药物、环境、食品等领域。

液相色谱的主要特点包括适用性广、分离效果好、灵敏度高、分辨率高等。

在实际应用中，液相色谱常用于分析生物样品、药物、天然产物、环境污染物等。

三、超高效液相色谱（Ultra-high Performance Liquid Chromatography, UHPLC）超高效液相色谱是一种高效、快速的液相色谱技术。

其原理是利用超高压力将样品混合物快速分离成单独的组分，然后通过检测器进行检测和定量分析。

超高效液相色谱广泛应用于生物、药物、环境、食品等领域。

超高效液相色谱的主要特点包括分离效果好、分析速度快、灵敏度高、分辨率高等。

在实际应用中，超高效液相色谱常用于分析生物样品、药物、天然产物、环境污染物等。

分析化学课件-色谱分析法

围的面积。
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柱效参数
标准差(standard deviation；σ)：正态色谱流
出曲线上两拐点间距离之半，即0.607倍峰高处
的峰宽之半。σ的大小表示组分被带出色谱柱的分散程度。σ越大，组分越分散；反之越集中。半峰宽(W1/2)：峰高一半处的峰宽 W1/2=2.355σ 峰宽 (peak width；W)：色谱峰两侧拐点作切线
应用的科学领域：生命科学、材料科学、环境科学等。（科学的科学）
药学（药物分析）：各国药典收载了许多色谱分析方法。中国药典二部，700多，纯度检查、定性鉴别或含量测定，一部， 600多鉴别或含量测定。
第一节色谱法的分类和发展
一、色谱法的分类
按流动相的分子聚集状态分类: GC、LC、SFC 等。
附力越强。 ④分子中取代基的空间排列
三、离子交换色谱法
分离原理利用被分离组分离子交换能力的差别而实现分离。
分为阳离子交换色谱法和阴离子交换色谱法。
阳离子交换：
阴离子交换：
交换
RSO 3 H+ + Na+ 再生
RSO 3 Na+ + H +
离子交换通式： RNR+3 OH- + Cl
交换
分配系数与色谱分离
容量因子(capacity factor；k)：在一定温
度和压力下，达到分配平衡时，组分在固定
相和流动相中的质量(m)之比。（摩尔数？）
又称为质量分配系数或分配比。
还与固定相和流动相的体积有关。
容量因子与分配系数的关系
k
m s
CV ss
V K s
m CV
V
m
mm