不同桑种桑叶总黄酮含量分析
野生桑叶与药用桑叶中总黄酮的含量比较
野生桑叶与药用桑叶中总黄酮的含量比较石少明;袁琦【期刊名称】《柳州职业技术学院学报》【年(卷),期】2015(15)4【摘要】Objective: to determine the content of total flavonoids from mulberry leaves and compared with wild medicinal in mulberry leaves. Methods: the extraction of Flavonoids from mulberry leaves by ultrasonic method in the sample, the content of total flavone was determined by UV spectrophotometry. Results: the content of flavonoids in the concentration of 20~70mg•mL-1 range, good linearity, mulberry leaves. The average recovery was 97.5%, RSD was 1.81%. Conclusion: the wild mulberry leaf flavonoid content of medicinal mulberry leaf bought more than pharmacies.%采用超声波法提取样品桑叶中的黄酮类化合物，利用紫外可见分光光度法测定其总黄酮的含量。
比较野生桑叶与药用桑叶中总黄酮的含量。
结果表明，黄酮含量在浓度20~70mg•mL-1范围内，线性关系良好，桑叶的平均加样回收率97.5%， RSD为1.81%，所测的野生桑叶比药店买回药用桑叶的黄酮含量高。
【总页数】4页(P64-67)【作者】石少明;袁琦【作者单位】柳州职业技术学院环境与食品工程系，广西柳州545006;河南大学药学院河南开封475001【正文语种】中文【中图分类】S888.2【相关文献】1.福建不同产地三叶青叶中总黄酮含量比较 [J], 范世明;陈琳;林婧;于虹敏;黄学城;许文;陈丹;黄泽豪2.桑叶中黄酮类化合物、氨基酸、桑多酚的含量变化探讨 [J], 杨普香;管帮福;黎小萍3.桑叶中黄桐和多糖含量比较分析 [J], 陈芳艳;梁永彬4.春季和秋季4个种源青钱柳叶中总黄酮及粗多糖含量比较 [J], 郑敏;黄颖;汪建中;丁满萍;李晓红;邵剑文5.广东桑种与其它桑种的桑叶多糖含量比较及影响因素分析 [J], 廖森泰;邢东旭;邹宇晓;刘吉平;唐翠明;吴娱明因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
安徽地方桑树品种桑叶中总黄酮含量的测定
主要步骤
桑叶的预处理 ：干燥粉碎，过60目筛，置于 80℃ 烘箱中备用 黄酮的提取：索氏提取器中加入石油醚进行脱 脂，脱脂后再用索氏提取器用甲醇提取，提取 液用旋转蒸发器蒸干、乙醇定量50ml 以芦丁为对照品，确定吸收波长，绘制标准曲 线 测定桑叶总黄酮的吸光值，并计算出黄酮含量
标准曲线
讨论
本实验采用索氏提取法用石油醚脱脂、 甲醇提取出总黄酮，以芦丁为对照品， 在波长为504nm时，用紫外分光光度法 测定总黄酮的含量，本方法简单易用， 操作简单、分光光度法准确度较高、重 现性良好。希望本实验能为桑叶资源的 开发与利用提供一定的帮助。
致谢
本次实验以及论文的完成，首先要感谢 老师的指导与帮助，还有对我帮助过的 老师、整个毕业设计期间和我密切合作 的同学，在这里表示最诚挚的谢意!
吸光值（Abs） 1.2 1 0.8 0.6 0.4 0.2 0 -0.2 1 -0.102 2 0.143 3 4 5 6 0.413 0.628 0.861 1.076 吸光值（Abs）
芦丁标准对照品标准曲线
标准曲线：A=12.125C—0.0995
安徽地方桑树品种供试品中总 黄酮的吸光值与含量
大
孪
枝
桑
试验结果与分析
可以看出安徽地方桑树品种桑叶中总黄酮含量 的差距是比较大的，含量较低的是泗五，质量 百分比分别为0.4737﹪，最高的是孪枝桑，为 0.7965﹪，含量最高值与最低值有近二倍的差 距。 本实验测定不同品种桑叶总黄酮含量的差异较 大，可能与不同品种的生物学特性及生理生化 代谢差异有关，而且环境温湿度、光照、降雨 量和土壤类型等因素对不同桑品种的桑叶总黄 酮含量也可能会产生方桑树品种桑叶 主要试剂：芦丁标准品 、石油醚、甲醇 乙醇，NaNO2溶液，NaOH溶液等试剂， Al2（NO3）3溶液，均为分析纯 主要设备仪器：烘箱，索氏提取器， RE—52C旋转蒸发器，TU—1800SPC紫 外分光光度计
不同品种桑叶总黄酮含量的测定
制约 了其 开发和 利 用 。 因此 ， 该 试 验对 不 同桑 品 种总 黄 酮含
量 进 行测定 ， 旨在 筛选 出具 有较 高药 食开发价 值 的桑 品种 。
１ 材 料 与 方 法
１ ． １ 试验 材料 、 仪 器 与 试 剂
后再 加 入 ４ ｍＬ的 ４ ％Ｎ ａ Ｏ Ｈ 溶液 ， 混匀 ， 用５ ０ ％乙醇 稀释 至 刻度 。 放置 １ ５ ｍｉ ｎ ， 在５ １ ０ ａ ｍ 下 测定 吸 光度 。 根 据标 准 曲线
１ ． ５
氢 氧化钠 、 无水 乙醇均 为分 析纯 试 剂 。
１ ． ２ 试 验 方 法
ｌ １ ． ７ ８ ７ ￣Ｖ ３ ｘ Ｍ
式（ １ ） 中， ｙ是吸光度值 ， ｔ 是样 品提取 液定容体积 （ ｍＬ ） ，
是测 定吸 光度 用 样液 的 定容 体积 （ ｍ Ｌ ） ， Ｖ 测定 吸 光度 用
样液 的体 积 （ ｍ Ｌ） ， Ｍ 是样 品质 量 （ ｇ ） 。 ２ 结 果 与 分 析 ２ ． １ 芦 丁 标 准 曲线 和 方 程
数为 ２ ９ ％。 其 中道 真 桑、 特优 ２号 、 川一１ ６总黄 酮含 量 高 ， 生长优 势 明显 ， 因而具 有较 高的 药食 用 途开发 利 用价值 。 关键 词 桑 叶 ； 品种； 总黄 酮 ； 紫外 分光 光度 法
中 图分 类号 Ｒ ２ ８ ４ 文献 标识 码 Ａ 文章 编号 １ ０ ０ ７ — ５ ７ ３ ９（ ２ ０ １ ７ ） ０ ３ — ０ ２ ２ ３ — ０ １
下以 ４ ２ ０ Ｗ 功 率超 声 波 提 取 ４ ０ ａｉ ｒ ｎ， 过滤 ， 将 滤 液 转 移 至
１ ０ ０ｍＬ容 量 瓶 ， 滤瓶用 ７ ０ ％的 乙醇 洗 涤 ３ ～ ５次 ， 加 ７ ０ ％乙
不同桑树品种资源多酚及黄酮类物质测定
桑树是落叶性多年生木本植物，属于桑科（Ｍｏｒａｃｅａｅ），桑属（ＭｏｒｕｓＬ＿）。
作为药用始载于《神农草本经》，桑叶苦、甘、寒，归肺、肝经，具疏散风热、清肺润燥、平肝明目、凉血止血之功效。
随着科技的不断发展和进步，桑树学科的研究和桑树栽植已不仅仅是单纯为了养蚕，而是向养蚕、养人、养生等药食多途径发展。
多酚、黄酮类是桑叶主要活性成分，具有多种生物学功能。
近年来，各地纷纷开展桑树不同部分、不同季节黄酮类物质测定工作。
桑树作为药食两用食品，由于不同品种、不同产地、不同季节等因素存在，将导致其主要活性成分差异性。
本试验对本所１２个资源品种（栽培桑或实生桑）多酚及黄酮类物质进行测定，为其在药食方面开展应用提供理论依据。
１材料与方法１．１材料选取云南省农科院蚕蜂研究所桑树品种园１１个品种和野外１个品种（见表１），分别于春（２００７年４月２５日）、夏（２００６年６月２５日）、秋（２００６年９月１８日）３个时期，每个品种分别采枝条的上、中、下叶片若干，冷藏于冰箱待测。
仪器采用７２１分光光度计；试剂有硫酸亚铁、洒石酸钾钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钾，均为分析纯。
１．２样品制备配制１％ＡｌＣｌ３、洒石酸铁溶液１００ｍｌ、ｐＨ＝７．５缓冲溶液２００ｍｌ。
称取冷藏桑叶５ｇ，切碎放入烧杯，用１００ｍｌ沸水冲泡并水浴加热３０ｍｉｎ，冷却至室温，过滤，滤液移入１００ｍｌ容量瓶中，用蒸馏水定容，摇匀即为测试液。
１．３测定方法取１１支容量瓶分别从０～１０标记，０号用缓冲液为对照，１～１０号加待测液３ｍｌ，洒石酸铁溶液分别加０．１、０．２、０．３、０．４、０．５、０．６、０．７、０．８、０．９和１．０ｍｌ，用湲冲液补足１０ｍｌ，在７２１型分光光度计λ＝５４０ｎｍ处测定试液光密度，以确定３ｍｌ待测液与酒石酸铁反应完全时所需该液量计算多酚量。
取１１支容量瓶从０～６号标记，０号以水为对照，１～１０号各加入１ｍｌＡｌＣｌ３溶液，分别加待测液０．５、０．６、０．７、０．８、０．９、１．０、１．１、１．２、１．３、１．４和１．５ｍｌ，用蒸馏水补足１０ｍｌ，摇均在７２１型分光光度计λ＝４２０ｎｍ处测定供试液光密度，以确定待测液与１ｍｌＡｌＣｌ３反应完全时所需该液量计算黄酮类含量。
华桑种质资源桑叶总黄酮含量的分析
华桑种质资源桑叶总黄酮含量的分析【摘要】目的分析不同华桑种质资源桑叶总黄酮含量的差异，为桑叶资源的利用提供科学依据。
方法采用甲醇提取，分光光度法测定。
结果测定的10份华桑种质资源中，保靖4号桑叶总黄酮含量最高，为（71.67±2.96）mg/g；德江15号桑叶总黄酮含量最低，为（44.56±1.66）mg/g。
结论华桑桑叶总黄酮含量较高，同属华桑的不同桑种质桑叶总黄酮含量差异极显著，但同一原生境的种质桑叶总黄酮含量相近。
【关键词】桑叶总黄酮含量分光光度法Abstract：ObjectiveTo obtain some basic data for the utilization of mulberry leaves (Folium Mori)， the total flavonoid content of mulberry leaves from different Morus cathayana germplasm resources were determined， and the differences were analyzed. MethodsAfter extracted with methanol the total flavonoid was determined and analyzed by spectrophotometry.ResultsAmong the ten accessions of Morus cathayana germplasm resources determined， Baojing 4 had the highest content (71.67±2.96)mg/g， and Dejiang 15 had the lowest content(44.56±1.66)mg/g of total flavonoid. ConclusionThe total flavonoid content of Morus cathayana is very high. Much variation can be seen in total flavonoid content of the germplasm resources from Morus cathayana. But the content of the germplasms resources from the same habitat is similar.Key words：Folium Mori； Total flavonoid content；Spectrophotometry桑叶为桑科（Moraceae）桑属Morus L.植物的叶，中国大部分地区均有栽培生产，以南方蚕桑主产区产量最多，如江苏、浙江、安徽、四川等，现全国桑树栽植面积约80万ha。
不同品种桑叶总黄酮含量的测定
不同品种桑叶总黄酮含量的测定作者：张芳王晓红罗泽虎来源：《现代农业科技》2017年第03期摘要为了适应桑树多元化发展对药食专用品种的需求，采用了分光光度法对贵州省蚕业研究所贵阳桑园基地的60个桑品种桑叶中总黄酮含量进行了测定。
结果表明：桑叶总黄酮含量分布在14.765～52.269 mg/g之间，平均含量为27.078 mg/g，品种间差异较大，变异系数为29%。
其中道真桑、特优2号、川-16总黄酮含量高，生长优势明显，因而具有较高的药食用途开发利用价值。
关键词桑叶；品种；总黄酮；紫外分光光度法中图分类号 R284 文献标识码 A 文章编号 1007-5739（2017）03-0223-01长期以来，栽植桑树主要被用来养蚕，随着经济的不断发展，这种单纯的栽桑养蚕形式已不符合农业多元化发展趋势，随着科研人员对桑树研究的深入，桑叶的营养价值和药用价值已越来越引起人们的关注，黄酮类物质是桑叶发挥功效的主要活性成分之一，具有多种生物学功能[1-4]。
桑树产品属于药食两用食品，但药食专用桑品种资源的缺乏严重制约了其开发和利用。
因此，该试验对不同桑品种总黄酮含量进行测定，旨在筛选出具有较高药食开发价值的桑品种。
1 材料与方法1.1 试验材料、仪器与试剂1.1.1 材料。
桑叶采于贵州省农科院蚕业研究所贵阳桑园基地，采集时间为2016年7月19—25日，采摘部位为桑树中部枝条叶片。
采摘的桑叶用自来水冲洗，除去泥沙等杂物，再用双蒸水冲洗干净，风干后置于恒温鼓风干燥箱中，105 ℃杀青 5 min，然后在60 ℃恒温箱中烘至恒重，粉碎，过60 目筛，干燥桑叶粉分别装入密封袋备用。
1.1.2 仪器。
鼓风干燥箱（天津市泰斯特仪器有限公司）；JH电子精密天平（赛多利斯科学仪器有限公司）；超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）；多功能粉碎机（天津市泰斯特仪器有限公司）；紫外/可见分光光度计（上海元析仪器有限公司）。
1.1.3 试剂。
不同品种桑叶中3种活性物质含量测定及综合评价
6 0 目 筛 ，干 燥 桑 叶 粉 分 别 装 人 密 封 袋 备 用 。试
剂 ：芦 丁 、福 林 酚 试 剂 、蒽 酮 、没 食 子 酸 、乙酸乙
、 糖、 酸、 酸 、 酸 、 氧
、
无 水 乙 醇 、碳 酸 钠 、蒸 馏 水 。 1. 2 主 要 仪 器 与 设 备
鼓 风 干 燥 箱 （天 津 市 泰 斯 特 仪 器 有 限 公
度 [4]。以 芦 丁 为 标 准 ，按 上 述 同 样 条 件 显 色 和
测 定 吸 光 度 ，作 出 标 准 工 作 曲 线 线 性 回 归 方 程
为 ：Y = 1 1 . 7 8 7 X —0.0031，R2= 0 . 9 9 9 4 。
1.3.2 酚含量
称 取 桑 叶 粉 1. 000 g 于 100 m L 锥 形 瓶 中 ， 加 体 积 分 数 7 0 % 乙 醇 3 0 m L ，在 60 C 条件下以 400 W 功 率 超 声 波 提 取 6 0 m in ，抽 滤 ，将 滤 液 转 移 至 100 m L 棕 色 容 量 瓶 ，7 0 % 乙 醇 定 容 至 刻
测 定 吸 光 值 [7]。 以 没 食 子 酸 为 标 准 ，按 上 述 同
样 条 件 显 色 和 测 定 吸 光 度 ，作 出 标 准 工 作 曲 线
线 性 回 归 方 程 为 ：Y = 83. 70X — 0. 2 662，R2 =
0.9972。
1.3. 3 多 糖 含 量 测 定
称 取 桑 叶 粉 样 品 ！5"" g ，加 人 W m Y 蒸 馏 水 ，超 声 波 280 W 、80 C 下 提 取 10 m in ,离心 10 m in ，上 清 液 过 滤 人 100 m L 容 量 瓶 中 ，定 容 [ ] 。吸 取 样 品 提 取 液 0. 5 m L 于 20 m L 刻度
不同产地桑叶总黄酮总多酚含量及抗氧化活性的研究
不同产地桑叶总黄酮总多酚含量及抗氧化活性的研究
邓巧玲;刘梦文;沈静;吐尔逊阿依·达吾提;陈宣世;徐维盛;肖辉
【期刊名称】《中国食品添加剂》
【年(卷),期】2024(35)3
【摘要】通过超声提取8个产地的桑叶(新疆吐鲁番、新疆喀什白桑、喀什药桑、四川宜宾、安徽亳州、安徽太和、广东化州、陕西商洛)及中检院标准品桑叶中的总黄酮、总多酚,对9种桑叶提取的总黄酮、总多酚含量进行测定,并比较其抗氧化活性。
采用单因素实验研究料液比、提取溶剂浓度、超声功率、提取时间等影响因素对桑叶总黄酮和总多酚含量提取率的影响。
结果显示,料液比1∶60 g/mL,乙醇浓度60%,超声功率200 W,提取时间30 min为最佳提取工艺。
宜宾、吐鲁番桑叶的总黄酮、总多酚含量较高;宜宾、吐鲁番、亳州桑叶抗氧化能力较强。
各产地桑叶总黄酮及总多酚含量与抗氧化活性存在正相关。
本研究可为不同产地的桑叶开发提供依据。
【总页数】8页(P130-137)
【作者】邓巧玲;刘梦文;沈静;吐尔逊阿依·达吾提;陈宣世;徐维盛;肖辉
【作者单位】新疆医科大学公共卫生学院;中国疾病预防控制中心营养与健康所【正文语种】中文
【中图分类】TS202.1;R15
【相关文献】
1.桑叶发酵前后总黄酮、总酚酸含量变化及抗氧化活性研究
2.不同产地桑叶总酚、黄酮含量及抗氧化活性比较
3.窝儿七不同提取物中总黄酮总酚含量及其抗氧化活性的研究
4.黄色洋葱皮不同溶剂多酚提取物的总酚、总黄酮含量及抗氧化活性
5.不同产地沙棘中总黄酮、总多酚含量测定及其抗氧化活性研究
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不同桑树品种资源多酚及黄酮类物质测定
０６ ０ 、 ．、．、 ．、 ．、．、．、 ． ．、． ０８ ０ １ １１ １ １ １ ７ ９ ０ ２ ３ ４和 １ ｄ ． 。用 蒸 ５Ⅱ
选 取 云 南 省农 科 院蚕 蜂 研 究 所 桑 树 品种 园 １ １
个 品种 和野外 １ 品种 （ 个 见表 １ ， ） 分别 于 春 （ ０ ７年 ２０ ４月 ２ ５日）夏 （０ ６年 ６月 ２ 、 ２０ ５日）秋 （ ０ ６年 ９月 、 ２０ １ ８日） 时期 ， 个 品种分 别采 枝条 的上 、 、 叶 ３个 每 中 下
馏 水 补 足 １ ｌ Ｏｍ ，摇 均 在 ７ １型分 光 光 度 计 ｋ ４０ ２ ＝２ ｎ ｍ处 测定 供试 液光 密 度 ， 以确定 待测 液 与 ｌ ｌＩＩ ｍＡＣ， 反应完 全 时所 需该液 量计 算黄酮类 含量 。
应用价值 ， 为扩大推广提供可靠依据 ， 笔者在绍兴市
农业局等有关单位的支持下 ， ２ ０ 年春期进行 了 于 ０６ 该品种的农村试养， 现把相关情况总结如下。
龄 ２ ． 各龄眠中温度均分别下降 ０ ５ ２ 蔟中 ２ ℃， ５ ． ～ ℃； ７ 的 日平 均 温 度 ：试 验种 为 ２ ～ＣＣ，对 照 种 为 ２ ～ ３２ ４
冲液补 足 １ ，在 ７ １ Ｏｍｌ ２ 型分 光 光度计 ｋ５ ０ｎｆ处 ＝ ４ ｒ ｌ
１ 材 料 与 方 法
１１ 材 料 ．
测定试液光密度 ，以确定 ３ｍ 待测液与酒石酸铁反 ｌ 应 完全 时所需该 液量计 算 多酚量 。 取 １ 支容量瓶从 ０ ６ １ ～ 号标记 。 号以水为对照， ０
片若 干 ，冷 藏于 冰箱待 测 。仪器 采用 ７ １ 光 光度 ２分 计 ； 剂有硫 酸亚 铁 、 石酸钾 钠 、 酸氢 二 钠 、 酸 试 洒 磷 磷 二 氢钾 ， 为分析 纯。 均
不同产地桑叶总酚、黄酮含量及抗氧化活性比较
１ ０ ． ０ ｍＬ ， 加水 定容 ， 摇匀 ， 放置 ｌ ５ ｍ ｉ ｎ ， 在５ １ ０ ｌ ｌ ｍ 处 测 吸光 值 。桑 叶样 品 中的总 黄酮 含量 以芦 丁标 准 品
计， 结 果表 示为 ｍｇ Ｒ Ｅ ／ｇ Ｄ Ｗ。
１ ． ２ ． ３ 桑 叶提取 液体 外 抗氧 化能 力 的测定
为空 白 ， 在７ ６ ０ ｎ ｍ 处测 定吸 光值 。桑 叶样 品 巾的 多
酚 含量 以没 食 子酸 标 准 品计 ， 结果表示为 ｎ ａ ｇ Ｇ Ａ Ｅ ／
ｇ ＤＷ 。
２ ０ １ ５年 １ ０月 ２ ０ 日采集 四川 、 江西 、 湖北 的 “ 农 桑１ ４号 ” 和“ 强桑 ｌ 号” 桑叶 ， ６ ０ ￣ Ｃ 烘干 ， 粉碎 ， 过６ ０ 目筛 备用 。
没食 子酸 、 芦丁 、 抗坏血酸 、 Ｔ ｒ ｏ ｌ ｏ ｘ 、 Ｄ Ｐ Ｐ Ｈ、 Ａ Ｂ Ｔ Ｓ 等标 准 品购 自 Ｓ ｉ ｇ ｍ ａ ， 无水 乙醇 、 过 二硫酸钾 、 亚 硝 酸钠 、 硝 酸铝 、 氢氧化钠 （ 分 析纯 ） 等试 剂 购 自国 药
集 团有 限公 司 。 １ ． １ ． ３ 仪 器
料都 是桑 科植 物桑 Ｍｏ ｒ ｕ ｓ ａ ｌ ｂ ａ Ｌ ． 的干 燥 叶 ， 而 未 标 明具 体 的桑树 品种 。
选取 不 同产地 相 同 品种 桑 叶 为材 料 ， 对 桑 叶 的 总酚 、 黄酮 含量 及抗 氧化 活性 进行 比较 研究 ， 为 不 同
叶粉 ０ ． ５ ｇ ， 置５ ０ ｍ Ｌ离 心 管 中 ， 加 ７ ０ ％ 乙醇 ３ ０ ｍＬ ， 超声（ ３ ０ ０ Ｗ） 提 取 ２次 ， 每次 ３ ０ ｍ ｉ ｎ ， 合 并 提 取 液， 以７ ０ ％ 乙醇定 容至 １ ０ ０ ｍＬ ， ４ ￣ Ｃ保存 。 １ ． ２ ． ２ 总酚 和 总黄酮 含量 的测 定 ｊ
五种桑品种桑口十总黄酮含量的分析
止渴 ” 饮桑 茶保健 的养生之 道 也 由来 已久 。 国桑 叶 。 我
资源极为 丰富 ，主要分布 在长江 、珠江和 黄河 三大流 域。 《 据 中国桑树 品种 志 》记 载 ，我 国有 白桑 （ ｒ ｓ Ｍｏｕ ａ ａ ．、鸡 桑 （ ｒｓ ｕｔ ｌ 、广 东桑 （ ｒ ｓ ｌ ） ｂＬ Ｍｏｕ ｓ ａｉＥ） ａ ｒ ｓ Ｍｏｕ
２２ 样 品溶 液 的制备 ． 取 干燥至恒 重 的桑叶 ，粉碎 ，过 ５号筛 ，精 密称 取 ５ ，置索 氏提取 器 中，加 甲醇 ６ ｍＬ ｇ ０ ，于恒温 水浴 锅 上提取 ４ ，滤过 ，定容 于 １ ０ ｈ ０ ｍＬ量 瓶 中。精 密量 取 ｌ ，置于 ２ ｍＬ量瓶 中 ，加 水至 ６ Ｌ，加 ５ ｍＬ ５ ｍ ％亚 硝酸钠 溶液 ｌ ，摇 匀 ，放 置 ６ ｉ ，加 １ ％硝酸 铝 ｍＬ ｍｎ ０ 溶液 ｌ Ｌ，摇 匀 ，放置 ６ ｎ ｍ ｍｉ，加 ｌ ｌ ｍｏ Ｌ氢氧化钠 溶 ／ 液 １ｍＬ，加 甲醇 定容至 ２ ｍｌ ０ ５ ，摇 匀 ，放置 １ｍｉ， ５ ｎ
ａ ｏ ｕｐ ｒａ ．、黑桑 （ ｒｓ ｉｒ ．、 桑 （ ｒｓ ｔ ｐ ｒｕｅ ） ｒ Ｒ Ｍｏｕ ｇａ ） 鲁 ｎ Ｌ Ｍｏｕ
１ 试药自某 某桑 园， ０９
样 品经 干燥后 备用 。芦丁 对照 品 （ 中国药品生物 制 品 检 定所 ，供含量 测定用 ） ；亚硝 酸钠 ，硝酸铝 ，氢 氧化 钠 ，甲醇 等 ，离子水 。
吕玉 兰 丘振文 黄春 莲
（ 广州中医药大学第一附属 医院，广 东 广州，５００ ） １４ ５
中图分类号 ：１ ８ 文 献标 识码 ：Ａ 文章编 号 ：１７－８０ （００ ８０ ９－２ １ ４ ２ ６ ４７ ６ ２ １ ）０ －０ ６０ 【 摘 要 】 目的：建 立桑叶 总黄 酮含 量 的测定方 法 ，比较 不 同品种 桑叶总黄 酮含 量的差 异。方 法：以 甲醇 为溶剂 ，采用索氏提取桑叶总黄酮，利用分光光度法测定桑叶总黄酮含量。结果：总黄酮浓度在 ２ ～ ０ ｇ ｌ ． ６￣ ／ ０ ｍ 范围内呈现 良 好的线性关系，ｒＯ ９ ７ ＝ ． ９ ；平均回收率为 １１ ６ ９ ０ ． ％，Ｒ Ｄ ０ １ ０ Ｓ ＝ ． ％；五种桑种桑叶的总黄酮含量相 ９ 差较 大，含量最 高的为 白桑 （ ５１ｍｇｇ ，而含 量 最低 的为黑 桑 （ ６０ ／ ） ４． ２ ／） ３．５ ｇ 。结论 ：该方 法操 作 简便 、结 果 ｍｇ 可 靠 、重现 性好 ，适 于桑叶总 黄酮含量 测定 ；五 种 桑品种 桑叶 的总黄 酮含 量相 差较 大 ，以白桑 的总黄 酮含量 最
不同桑品种的桑叶多酚和黄酮含量的测定
分别吸取 1． 0 mL 提取液，加入 5． 0 mL 水、 1． 0 mL福林试剂和 3． 0 mL 10% 碳酸钠溶液，混 匀，静置 2 h，显色，在 765 nm 波长下测定试样溶 液的吸光度。 1． 2． 3 桑叶黄酮的提取及测定 准确称取 5 g 桑叶粉，用 60% 的乙醇在 80℃ 的水浴锅中浸提 3 h。用 4 层 纱 布 过 滤 浸 提 液，将 滤 液 浓 缩 至 50 mL，待用。取浓缩液 15 mL，5 000 r·min － 1 离心 30 min，取上 清，使 用 60% 乙 醇 定 容 至 100 mL， 供试。
多酚是植物中的酚类次生代谢产物，在植物 叶、果、皮、根中广泛存在，桑树中约占桑叶干重的 1% ～ 3% 左右［1］。桑叶多酚具有抗辐射、抗衰老 等功能［2 ～ 5］，可以应用于非酒精性脂肪性肝病的 治疗［6］。黄酮类化合物主要包括芦丁、槲皮素和 异槲皮苷等成分，能清除自由基［7］、降血糖［8］、降 血压［9］等 作 用。 安 康 学 院 多 年 来 收 集 和 保 存 了 数百份国内外各地不同地域来源的桑树资源，其 中多数品种的综合利用价值尚未得到基于有效成 分的评估。笔者对 15 个不同桑品种的桑叶多酚 和黄酮进行提取及含量测定，为综合评估桑树种 质资源的利用价值以及深入研究和开发桑资源提 供理论基础。
陕西农业科学 2019，65（ 01） ： 78 － 80
Shaanxi Journal of Agricultural Sciences
不同来源桑黄子实体总黄酮含量的比较
不同来源桑黄子实体总黄酮含量的比较摘要】目的考察不同来源桑黄总黄酮含量。
方法以黄酮的提取率为考察指标，利用超声波法提取总黄酮。
结果桑树桑黄总黄酮提取率为13.68%，杨树桑黄提取率为6.98%，白桦桑黄提取率为2.04% ，黑桦桑黄提取率为1.08% 松树桑黄提取率为0.63%。
结论不同品种桑黄总黄酮含量依次为：桑桑黄>杨桑黄>白桦桑黄>黑桦桑黄>松桑黄。
桑黄属担子菌亚门、多孔菌科（Phellinus），又称桑臣、桑耳、胡孙眼、孔菌等，是一种珍贵的药用真菌，有“森林黄金”之美称。
在我国传统中药中用于治疗痢疾、盗汗、血崩等[1]。
目前市场商品性“桑黄”物种混乱[2]，由于寄主不同、菌株来源不同等因素，开发利用时产生真菌生理活性物质含量不同，本实验通过超声辅助提取方法，对市面常见的桑树桑黄（Phellinus yucatanensis）、杨树桑黄（Phellinus vaninii）、白桦桑黄（Phellinus igniarius）、黑桦桑黄（Phellinus igniarius）以及松桑黄（Phellinus pini）子实体中的总黄酮含量加以比较，寻找适合开发利用的桑黄品种。
1仪器与试剂1.1仪器 KQ-250B型超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）；UV-2401型紫外可见分光光度计（日本岛津公司）；BP221S型电子天平（德国赛多利斯公司）；20AT高效液相色谱仪（日本岛津公司）。
1.2试剂桑树桑黄、杨树桑黄、白桦桑黄、黑桦桑黄、落叶松桑黄（延吉市长白山特产经营部)；95%分析纯乙醇（上海试剂总厂工贸公司）；芦丁对照品（南京泽朗植提）。
2实验方法2.1 提取方案准确称取60目各个品种桑黄子实体粉末15 g，加入70%乙醇450ml，室温浸泡12 h后超声提取，残渣用相同浓度和体积的乙醇再超声提取一次，合并两次提取液，回收乙醇，浓缩液60℃烘干，得到各品种桑黄提取物。
用分光光度法测定不同品种桑枝总黄酮含量
100 %。
140 表 1 重复性 、 精 密度及稳定性试验结果
蚕
业
科
学
2006; 32 ( 1)
T able 1 T est resu lt of repea tab ility prec is ion and stability
取样数 Sam p le 1 2 3 4 5 6 7 8 9 X SD R SD 重复性试验 R epeatab ility test 质量比 / ( m g g- 1 ) M ass ratio 精确度试验 质量比 / ( mg 4 4 4 4 4 P recision test g- 1 ) M ass rat io 338 340 349 325 340 稳定性试验 静置时间 /m in T i me 10 15 25 35 40 50 Stab ility test 质量比 / ( m g g- 1 ) M ass rat io 3 3 3 3 3 3 892 885 789 753 707 681
Deter m ination on Total F lavonoids Content i n Ramulus m ori of D ifferent Varieties by Spectrophotom etry
WU Zhi P ing
1
JIANG Nai Zhen
2
2
TAN Jian-Zhong
3
Institute of T raditional Ch inese M ed icine, Soocho w University, Suzhou J iangsu 215125, China )
A bstrac t
T o apply of spec trophotom etry in the quantitative ana lysis o f to tal flavono ids in R amulus m ori, deter m ination on
不同桑树品种资源多酚及黄酮类物质测定
不同桑树品种资源多酚及黄酮类物质测定
柴建萍;谢道燕
【期刊名称】《蚕桑通报》
【年(卷),期】2007(38)3
【摘要】桑树是落叶性多年生木本植物。
属于桑科（Moraceae），桑属（Morus L_）。
作为药用始载于《神农草本经》，桑叶苦、甘、寒，归肺、肝经，具疏散风热、清肺润燥、平肝明目、凉血止血之功效。
随着科技的不断发展和进步。
桑树学科的研究和桑树栽植已不仅仅是单纯为了养蚕，而是向养蚕、养人、养生等药食多途径发展。
多酚、黄酮类是桑叶主要活性成分，具有多种生物学功能。
【总页数】2页(P15-16)
【作者】柴建萍;谢道燕
【作者单位】云南省农业科学院,蚕蜂研究所,云南,蒙自,661101;云南省农业科学院,蚕蜂研究所,云南,蒙自,661101
【正文语种】中文
【中图分类】S8
【相关文献】
1.不同品种不同部位的桑叶中多酚和黄酮类物质含量 [J], 刘春莲;李东升
2.六种蜂花粉多酚和黄酮类物质含量测定及抗氧化性的研究 [J], 张红城;董捷;李慧;李春阳
3.不同茧色类型家蚕品种资源的茧壳和蚕蛹的总黄酮含量及蚕蛹的黄酮类物质组成分析 [J], 刘影侠;杜贝贝;岳玲;黄涛;司马杨虎;徐世清
4.几种桑树内生真菌的分离及其培养物中黄酮类物质含量的测定 [J], 柴建萍;谢道燕;储一宁;黄平
5.桑树中多酚与黄酮类物质的测定 [J], 朱正华;朱良均;闵思佳
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桑树总黄酮含量变化规律分析
桑树总黄酮含量变化规律分析李瑞雪;王钰婷;胡飞;王伟;高新文;汪泰初【摘要】采用Al(NO3) 3-NaNO2分光光度比色法,综合不同桑树品种、桑树不同部位以及不同季节等因素,分析桑树总黄酮含量的变化规律,为富含总黄酮药食用途桑品种育种及其开发利用提供生物资源.结果表明,4个桑属22个桑品种桑叶的总黄酮含量差异极显著(P＜0.01),含量变幅为25.79～ 63.14 mg/g,湖桑199桑叶总黄酮含量最高,杂选花叶桑叶总黄酮含量最低;皖桑1号等5个桑树品种不同季节桑叶的总黄酮含量以春季最高,夏季最低,差异显著(P＜0.05);同一季节桑叶的总黄酮含量,远高于枝条、树干基部树皮等部位,差异极显著(P＜0.01);树干基部树皮总黄酮含量显著高于枝条(P＜0.05).【期刊名称】《中国蚕业》【年(卷),期】2015(036)004【总页数】5页(P30-34)【关键词】桑品种;桑叶;枝条;树干;树皮;比色法;总黄酮;富集规律【作者】李瑞雪;王钰婷;胡飞;王伟;高新文;汪泰初【作者单位】安徽省农业科学院蚕桑研究所,安徽合肥230061;江苏科技大学,江苏镇江212003;安徽省农业科学院蚕桑研究所,安徽合肥230061;安徽省农业科学院植保研究所,安徽合肥230000;安徽省农业科学院蚕桑研究所,安徽合肥230061;安徽省农业科学院蚕桑研究所,安徽合肥230061;安徽省农业科学院蚕桑研究所,安徽合肥230061【正文语种】中文【中图分类】S888.2我国是世界蚕桑生产的发源地，自然生态环境复杂多样，形成了丰富的桑树品种，有着极大的桑树资源优势。
除了桑叶可用于饲喂家蚕，桑皮还可以造纸，桑椹可食用，其叶、枝、果、根皮等均可以入药［1］。
现有研究表明，桑树含有种类丰富的化学成分［2－4］，具有降血糖、降血压、抗氧化、抗肿瘤、抗病毒等多种生物活性及药理作用［5－8］，其中黄酮类化合物就是其主要的功能成分之一［9－11］，也是衡量桑、蚕药用价值的重要指标之一，一直是国内外研究的热点。
华桑种质资源桑叶总黄酮含量的分析
桑叶为桑科（ ｍｃａ ） Ｍｏ ｅｅ 桑属 Ｍｏ ｓ ， ｒ 植物 的叶 ， ｕＬ 中国大部分 １ 仪器与材料 地 区均有 栽培生产 ， 以南方蚕 桑主产 区产量最 多， 江苏 、 如 浙江 、 １１ 仪器 Ｔ ｅ ｏＳ ｅｔ ｎ ｅ ｉ 【 外可见 分光光 度计 ， ． ｈｒ ｐｃｒ ｉ Ｈ ｋｏ ０紫 ｍ ｏｃ ｓ 索 安徽 、 四川 等 ， 现全 国桑 树栽 植 面积 约 ８ ０万 ｈ 。桑 叶不 仅 是家 氏提取器 ， ａ 电热恒温水浴锅 ， 电热恒温干燥箱 ， 电子天平。 蚕 的唯一饲料 ， 且也是 重要 的传 统 中药 ， 而 桑叶 入药 首见 于 《 神 １ ２ 试剂 石油醚 （０—９ ￣ 、 ． ６ ０Ｃ） 甲醇 均为分 析纯 。５ ％亚硝 酸钠 农本草经》 被列为 中品ｕ 。作为 一种发 散 风热 药 ， 叶在 中 国 溶液 、０ ， 桑 １ ％硝 酸铝溶液 、 ｍ ＬＬ氢氧化钠溶 液采用 分析 纯试剂 自 １ ｏ／ 及其它一些国家被广 泛应 用。桑 叶苦 、 、 ， 甘 寒 归肺 、 肝经 ， 用于 配 。芦丁标准 品购 自中国医药上 海化学试剂公司。 常 ． 共计 １ ０份材料 ， 治疗风热感 冒、 温病初起 ， 热燥 咳， 肺 喉痧 、 喉红肿 、 痛 ， 咽 牙 目赤 １３ 材 料 桑叶材料采 自国家种质镇 江桑 树圃 ， ｒｓ ｔａａ ａＨ ｎ１， ｃ 肿痛 、 风眼下 泪， 阳眩 晕 、 目昏花 ， 肝 眼 出血 ， 自汗 、 汗 ， 痧 等 均属于华桑 Ｍｏｕ ａｈｙ ｎ ｅｓ．经 中国农业科 学院蚕业研究 盗 风 症 。桑叶具有降糖降脂 、 氧化 Ｊ抗肿瘤等 多种活性 。 所 潘 一 乐 研 究 员 鉴 定 。 Ｊ 抗 、 近年来对桑 叶化学成分 的研究表 明， 叶 中含有黄 酮类 、 桑 生物 碱 ２ 方法 与结 果 ． ２ｏ 类、 苯丙素类 、 有机酸类 、 甾体及 三萜类等多种化合物 。黄酮类化 ２ １ 标准 品溶 液制备 精 密称取 １０Ｃ常压 干燥 至恒重 的芦 丁 ３ ｇ 以少量 甲醇溶解 ， １０ ｍ 量瓶 中， 甲醇定容 至 １０ｍ ， ０ｍ ， 置 ０ ｌ 用 ０ ｌ 合物是桑 叶的重要活性成分之一 。 中国的桑 属植物有 １ ５个种 ４个变种 Ｊ其 中入药 者多 为 白 摇匀静置 ， ， 配成含 芦丁 ０ ３ｍｇｍ 的标准溶 液。 ． ／ ｌ ． 揉碎 ， 称取 ５ｇ 置索 氏提取器 ， 桑 Ｍｏｕ ｌ ， 。 笔 者 通 过 对 不 同 桑 种 桑 叶 总 黄 酮 的 含 量 的测 ２ ２ 供试 品溶液 制备 干燥 桑叶 ， ｒｓ ｂ ｓ ａａ ｊ 加 ０ ｌ于恒 温水 浴 锅上 ９ ￣ 提取 ３ ｈ 过 滤定 容于 ０Ｃ ， 定分 析 ， 现 华 桑 Ｍｏｕ ａｈ ｙｎ ｍｓ ， 穗 桑 Ｍｏｕ ｉｉ 中， 甲醇 １０ｍ ， 发 ｒｓｃｔａａ ａＨｅ １ 长 ． ｒｓｗｔｏ ｔ— ０ ｌ 得 Ｆｍ ａ ｄ ｌ Ｈ ｎ —Ｍａｚ等 野 生 种 质 资 源 的 桑 叶 总 黄 酮 含 量 较 高 ， 一 １０ｍ 量 瓶 中 ， 供 试 品 溶 液 。 ｔ ｚ． 进 ． ｌ 置于 ２ ｌ ５ｍ 量瓶 中， 加水 至 ６ 步选取不 同原 生境 的 １ ０份华桑 种质资源 ， 用分光光 度法测定 ２ ３ 测定液制备 取供 试液 １ｍ ， 采 ｍ， ５ ｌ加 ％亚硝酸钠溶液 １ｍ ， ｌ混匀 ， 置 ６ｍ ｎ 加 １％硝酸铝溶 放 ｉ； ０ 了桑叶总黄酮含量 ， 为野生资源 的合理利 用提供科学依据 。 液 １ ｌ混匀 ， 置 ６ｍｉ； １ｍ ｌＬ氢氧化钠 溶液 １ ｌ以 甲醇 ， ｍ 放 ｎ加 ｏ ／ ０ｍ ， 定容 至 ２ ｌ混匀 ， 置 １ ｉ， ５ｍ ， 放 ５ｍｎ 得测 定液 。 收稿 日期 ：０ ７１ －９ 修 订 日期 ：０ ８０ —７ ２ ０ —０２ ； ２ ０ －１１ ２ ４ 标准 曲线 绘制 精密 量取 标准 品溶液 ０ ０ １ ０ ２ ０ ３ ０ ． ． ，． ，． ， ． ， 基 金 项 目 ： 家 茧 丝 绸 发 展 风 险 基 金 第 五 批 发 展 性 项 目 （ 茧 协 办 ４ ０ ５ ０ ６ ０ｍ ， 国 国 ． ，． ，． ｌ分别置 于 ２ ｌ ５ｍ 量瓶 中， “ ． ” 的方法制成 按 ２３ 项 ［０ ３ ４ ２０ １ ０号 ） ； 测 定 液 。 以不 加
野生桑叶与药用桑叶中总黄酮的含量比较
娜
精密称取 芦丁标准 品 ０ ． ０ １ ０ ５ １ ｇ ，置 ５ ０ ｍＬ容 量瓶 中 ，缓 慢加体积分数 为 ７ ０ ％７ １醇并 使其溶解 ，定
湖
容至刻度 ，振荡摇 匀 ，配制成 Ｏ ． ２ １ ０ ２ ｇ ・ Ｌ 一 １的标准 品溶 液 ，备用 。
桑叶 （ Ｍｕ ｌ ｂ ｅ ｒ ｒ ｙ ｌ ｅ ａ ｖ ｅ ｓ ）又 叫铁 扇 子 ，为桑 科 （ Ｍｏ ｒ ａ ｃ ｅ ａ ｅ ）桑 属 植 物 桑 （ Ｍｏ ｒ ｕ ｓ ａ ｌ ｂ ａ Ｌ ． ）的叶 ［ １ １ ，采
收除去杂质后 ，晒干。桑叶甘 、苦 、寒 。归肺 、肝经 。具有疏散 风热 ，清肺润燥 ，清肝 明 目的作用 。 用于风热感 冒 ，肺热燥 咳 ，头晕头痛 ， 目赤 昏花 ，收载 于 ２ ０ １ ０ 版 中国药典 （ 一部）罔 。据测定 ，桑 叶 的主要成 分除水 以外 。还含有 丰富的蛋 白质 、碳水 化合物 、无 机盐 、维生 素 以及人 体所需 的多种微 量元素 ，具有 降血压 、降血脂 、抗 衰老 、增加耐力 、降低胆 固醇 、抑制肠 内有害 细菌繁殖 和过氧化 物产生 等独特 的功效 ，对人体有 良好 的保健作 用 。近年来 ，广 西区蚕业技 术推广 总站对桑 绿茶研 究 取得 的成功 ，使废弃 的桑叶变废为宝 ，为桑蚕业 的综合 利用开辟 了一条新途径圈 。国内外很 多研 究结 果表 明桑 叶具有很好 的降血糖 功能 ．在临 床常用桑 叶或桑 叶为主 的处方 治疗糖 尿病 ，并 取得满 意效
果 。现代药 理研究证 明桑 叶可 以抑制血糖 上升 ，防治和治疗 糖尿病 ” 。桑 叶中含 有黄酮及 其苷 、
生物碱 、多糖 、挥发油 、各种氨基酸 、微量元 素等０ ２ ］ ，成分 比较复杂 ，黄酮类成分是 主要有效 成分之
不同品种不同生长期桑叶中生物碱类与黄酮类化学成分的积累动态分析评价
不同品种不同生长期桑叶中生物碱类与黄酮类化学成分的积累动态分析评价作者：张丽丽白永亮宿树兰欧阳臻刘利郭盛钱大玮段金廒来源：《中国中药杂志》2014年第24期[摘要] 对不同品种、不同生长期的11个品种88个桑叶样品中生物碱类、黄酮类资源性化学成分的积累动态进行分析评价，以期探讨桑叶的适宜采收期及桑叶的资源化利用途径。
采用UPLC-TQ/MS联用技术对桑叶中的生物碱类、黄酮类成分进行分析评价。
结果表明，不同品种、不同生长期桑叶中的生物碱类、黄酮类成分含量差异较大，随着物候期的顺延，生物碱类成分的含量呈总体下降趋势，10月份后大幅下降;黄酮类成分的含量变化较小，10月份之后亦呈下降趋势。
广东桑中黄酮类成分远高于生物碱类成分，而鸡桑则相反;华桑和蒙桑中生物碱类成分在7-8月间迅速下降;白桑中的生物碱类、黄酮类成分含量均处于中等水平。
综合分析，药用桑叶的适宜采收期在9月底10月初。
研究结果为桑叶的合理采收及资源化利用提供了科学依据。
[关键词] 桑叶;生物碱类;黄酮类;积累动态[收稿日期] 2014-06-22[基金项目] 国家自然科学基金项目（81373889）[通信作者] 段金廒，Tel/Fax：（025） 85811116，E-mail： dja@ 桑叶为桑科植物桑Morus alba L.的干燥叶。
初霜后采收，除去杂质，晒干。
具有疏散风热，清肺润燥，清肝明目之效。
用于风热感冒，肺热燥咳，头晕头痛，目赤眼花[1]。
桑叶中含有生物碱类、黄酮类、甾醇类、多糖类等多种类型活性成分并具有降血糖、抗高血压、降血脂、抗动脉粥样硬化等多种药理作用[2-11]，因而近年来越来越多地受到国内外学者的关注。
传统入方桑叶有嫩桑叶和霜桑叶2种，如桑麻丸中使用嫩桑叶，代茶饮中使用霜桑叶（《医方简义》）。
《新编中药志》中记载，桑叶霜降（10月下旬）后采收，嫩叶在夏季茂盛时采收。
关于桑叶中效应成分的积累动态评价尚未见报道，本文采集7～12月共6批，每批11个品种88个桑叶样品，以探讨其生物碱类和黄酮类成分的变化规律，为桑叶的合理采收提供科学依据。
主要桑品种桑叶黄酮化合物含量的比较分析
主 要桑 品种 桑 叶 黄酮 化 合 物 含 量 的 比较 分 析
黄 健
（ 扬州市蚕桑站 ２ ２ ５ ０ ０ ０ ）
闵 星
（扬州市江都区环境保护局）
陆春燕
（ 江都区蚕桑 指导所 ）
摘 要 本文通 过测定扬州市江都曹王蚕种场桑园内“ 育７ １ ． １ ” 、 “ 新一之濑” 、 “ 湖桑 ３ ２ 号” 三个主要栽植 的桑 品种 桑叶总黄酮化 合物
２ ． ２ 绘 制标 准 曲线
桑叶， 对蚕 桑生 产综 合开 发具 有重要 意义 。
１ 供 试 材 料 与 仪 器 试 剂
１ ． １ 供试 材料
。
试 验用 桑 叶 采 自扬 州 市 江都 曹 王蚕 种 场 桑 园 ，
品种 为 “ 育７ １ ． １ ” 、 “ 新 一 之濑 ” 、 “ 湖桑 ３ ２号 ” ， 每个 品种 桑 田单对 角线 取样 ３棵 ， 作为 取样 的样 点 ， 取 叶 位 置为从 枝梢 向下 第 ３片 叶 。采 样 时 间 为 ２ ０ ０ ８年
＋０． Ｏ０ ０ ６８ ６ ０１ ４ ５３． ｒ＝０． ９９ ９ ９ ５０ ８ １ ２ ４１ ７
该 回归方程 在 ０—１ ５ ０ ｍ ｇ ／ ｇ范 围 内呈 现 良好 的 线性 关 系。
以测 定液 浓度 为纵 坐标 、 吸光度 为横 坐 标 ， 绘 制
江 莩争卫 ２ ０ １ ３ 年第２ 期
黄 酮类物 质 是 包括 黄 酮 、 黄酮醇 、 二氢黄酮 、 二 氢 黄酮 醇 、 异黄酮、 二氢 异 黄酮 、 查耳酮 、 花 色素 等具 有 ｃ ６ 一Ｃ ３ 一ｃ ６结构 的 一类 化 合 物 ， 在 植 物 界 中分 布 广泛 。 ｌ １ 桑 树 是 黄 酮 类 物 质 含 量 较 高 的 树 种 之
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表明，桑叶具有降糖降脂［３，４］、抗氧化［５］、抗肿瘤［６］等多种 活性。近年来对桑叶化学成分的研究表明，桑叶中含 有黄酮类、生物碱类、苯丙素类、有机酸类、甾体及三萜 类等多种化合物。黄酮类化合物是桑叶的重要活性成 分之一。中国的桑属植物有 １５ 个种 ４ 个变种［７］，但不 同桑种桑叶总黄酮的含量分析未见报道。笔者采用分 光光度法首次测定了不同桑种桑叶总黄酮含量，对桑 叶总黄酮含量的种属差异性进行分析，为桑叶资源的 充分合理利用提供科学依据。
测定液 １ ２ ３ ４ ５
ＡＢＳ ０．７１８ ０．７２３ ０．７３１ ０．７１４ ０．７２７
表 １ 重复性试验结果 样品含量／（ｍｇ·ｇ－１） ３０．３６８ ３０．５８１ ３０．９２１ ３０．１９８ ３０．７５１
平均值／（ｍｇ·ｇ－１） ３０．５６４
ＲＳＤ／％ ０．９５
表 ２ 稳定性试验结果Ⅰ
测定时间
桑叶为桑科（Ｍｏｒａｃｅａｅ）桑属（Ｍｏｒｕｓ Ｌ．）植物的叶， 中国大部分地区均有栽培生产，以南方蚕桑主产区江 苏、浙江、安徽、四川等省最多。桑叶入药首见于《神农 本草经》，列为中品［１］。作为一种发散风热药，桑叶在中 国及其它一些国家被广泛应用。桑叶苦、甘、寒，归肺、 肝经，具有疏散风热、清肺润燥、平肝明目、凉血止血之 功效。常用于治疗风热感冒、温病初起，肺热燥咳，喉 痧、咽喉红肿、牙痛，目赤肿痛、风眼下泪，肝阳眩晕、眼 目昏花，出血，自汗、盗汗，风痧等症［２］。现代药理研究
ｍｌ，分别置于 ２５ ｍｌ 量瓶中，按 １．６ 的方法制成测定 液。以不加标准溶液的相应溶液为空白，在波长 ５０５ ｎｍ 处测定吸光度值，得到标准液浓度（ｙ）与吸光度（ｘ） 之间的回归方程。 ２ 结果与分析 ２．１ 最大吸收波长选择
取标准溶液和供试液各 １ｍｌ，分别置于 ２５ ｍｌ 量 瓶中，按 １．６ 的方法下平行制备标准溶液及供试液的 测定液。以不加标准溶液或供试液的相应溶液为空白， 在 ２００￣８００ ｎｍ 波长范围内进行连续波长扫瞄，结果 标准液及供试液在 ４００￣ ６００ ｎｍ 范围有最大吸收。遂 对 ４００￣ ６００ ｎｍ 范围进行了进一步的连续波长扫瞄， 标准液及供试液均在 ５００￣ ５１０ｎｍ 有最大吸收，对这 一范围进行了再次扫瞄，结果表明标准液及供试液均 在 ５０５ ｎｍ 有最大吸收，并且不受桑叶中色素等脂溶 性成分的影响，选择 ５０５ ｎｍ 为测定波长。 ２．２ 提取溶剂及提取方法的选择
首次
１０ｍｉｎ 后
２０ｍｉｎ 后
３０ｍｉｎ 后
４０ｍｉｎ 后
５０ｍｉｎ 后
吸光度
０．７２２
０．７１６
０．６９０
０．６６６
０．６６４
０．６２５
指数／％
１００
９９．１７
９５．５７
９２．２４
９１．９７
８６．５７
·４９０·
Ｃｈｉｎｅｓｅ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｂｕｌｌｅｔｉｎ Ｖｏｌ．２４ Ｎｏ． １ ２００８ Ｊａｎｕａｒｙ ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｃａｓｂ．ｏｒｇ．ｃｎ
ＡＢＳ ０．８６５ ０．８６２ ０．８６０ ０．８６３ ０．８６１
测得值／（ｍｇ·ｍｌ－１） ０．０７３２ ０．０７３０ ０．０７２８ ０．０７３１ ０．０７２９
表 ５ 回收率试验结果
原来值／（ｍｇ·ｍｌ－１） 加入值／（ｍｇ·ｍｌ－１） 回收率／％ 平均回收率／％
１０１．６７
１００．００
０．０６１
基金项目：国家茧丝绸发展风险基金第五批发展性项目“蚕桑功能活性物质利用研究”（国茧协办〔２００３〕４０ 号）。 第一作者简介：刘利，男，１９７３ 年出生，四川宣汉人，博士，副研究员，主要从事桑树种质资源及其利用研究。通信地址：２１２０１８ 江苏省镇江市四摆渡， 中国农业科学院蚕业研究所。Ｔｅｌ： ０５１１－８５６１６５７０，Ｅ－ｍａｉｌ： ｔｏｕｃｈｌｉｕ＠１６３．ｃｏｍ。 通讯作者：潘一乐，男，１９４４ 年出生，浙江长兴人，研究员，博士生导师，主要从事桑树种质资源研究。Ｅ－ｍａｉｌ： ｍｕｌｂｅｒｒｙ１＠ｓｉｎａ．ｃｏｍ。 收 稿 日 期：２００７－１０－２１，修回日期：２００７－１１－０６。
农业工程科学
为了考察供试液的稳定性，分别于提取 １ｄ 及 ５ｄ 后，将提取液（供试液）中加入显色剂，测定其吸光度 值，结果如表 ３。
表 ３ 稳定性试验结果Ⅱ
测定时间
首次
１ｄ 后
５ｄ 后
吸光度
０．７２２
０．７１９
０．７１１
指数／％
１００
９９．５８
９８．４８
说明提取液不加入显色剂时稳定较好，而加入显 色剂后稳定性较差，须在 ３０ ｍｉｎ 内尽快测定为宜。
Ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｔｈｅ Ｔｏｔａｌ Ｆ ｌａｖｏｎｏｉｄ Ｃｏｎｔｅｎｔ ｉｎ Ｆｏｌｉｕｍ ｍｏｒ ｉ ｆｒ ｏｍ Ｄｉｆｆｅｒ ｅｎｔ Ｓｐｅｃｉｅｓ Ｌｉｕ Ｌｉ， Ｐａｎ Ｙｉｌｅ
（Ｓｅｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ， Ｃｈｉｎｅｓｅ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ， Ｚｈｅｎｊｉａｎｇ ２１２０１８）
２．５ 精密度试验 称取干燥桑叶 ５ｇ，按 １．５ 及 １．６ 的方法制备 ５ 份
测定液，测定吸光度值，并计算总黄酮含量及 ＲＳＤ 值， 结果如表 ４。 ２．６ 回收率试验
取精密度试验的供试液各 １ｍｌ，分别置于 ５ 只 ２５ ｍｌ 量瓶中，分别加入标准液 １ｍｌ，再按 １．６ 的方法制成 测定液，测定吸光度值，计算测定液总黄酮浓度、回收 率及 ＲＳＤ，结果如表 ５。
精密称取 １２０℃常压干燥至恒重的芦丁（ｒｕｔｉｎ）３０ ｍｇ，以少量甲醇溶解，置 １００ ｍｌ 量瓶中，用甲醇定容至 １００ ｍｌ，摇匀静置，配成含芦丁 ０．３ ｍｇ／ｍｌ 的标准溶液。 １．５ 供试品溶液制备
干燥桑叶，揉碎，称取 ５ｇ，置索氏提取器中，加甲 醇 １００ ｍｌ，于恒温水浴锅上 ９０℃ 提取 ３ｈ，过滤定容于 １００ ｍｌ 量瓶中，得供试品溶液。 １．６ 测定液制备
Ａｂｓｔｒ ａｃｔ【： ＯＢＪＥＣＴＩＶＥ】Ｔｏ ｐｒｏｖｉｄｅ ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ ｂａｓｅｓ ｆｏｒ ｔｈｅ ｕｔｉｌｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｍｕｌｂｅｒｒｙ ｌｅａｖｅｓ （Ｆｏｌｉｕｍ ｍｏｒｉ）， ｔｈｅ ｔｏｔａｌ ｆｌａｖｏｎｏｉｄ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ ｍｕｌｂｅｒｒｙ ｌｅａｖｅｓ ｆｒｏｍ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｓｐｅｃｉｅｓ ｗｅｒｅ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ， ａｎｄ ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｄｉｆｆｅｒ－ ｅｎｃｅｓ ａｍｏｎｇ ｓｐｅｃｉｅｓ ｗｅｒｅ ａｎａｌｙｚｅｄ．【ＭＥＴＨＯＤ】Ｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｒｙ ｗａｓ ｕｓｅｄ ｆｏｒ ｔｈｅ ｔｏｔａｌ ｆｌａｖｏｎｏｉｄ ｃｏｎｔｅｎｔ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ａｎｄ ａｎａｌｙｓｉｓ， ａｆｔｅｒ ｅｘｔｒａｃｔｅｄ ｗｉｔｈ ｍｅｔｈａｎｏｌ．【ＲＥＳＵＬＴＳ】Ｔｈｅ ｔｏｔａｌ ｆｌａｖｏｎｏｉｄ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ Ｍｏｒｕｓ ｗｉｔｔｉｏｒｕｍ ａｎｄ Ｍｏｒｕｓ ｃａｔｈａｙａｎａ ｌｅａｖｅｓ ｗｅｒｅ ６３．９２±０．４８ ｍｇ／ｇ ａｎｄ ６１．１７±０．４８ ｍｇ／ｇ ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ， ｗｈｉｃｈ ｗｅｒｅ ｈｉｇｈｅｒ ｔｈａｎ ｔｈａｔ ｏｆ ａｌｌ ｏｔｈｅｒ ｓｐｅｃｉｅｓ ｖｅｒｙ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ． Ｔｈｅ ｔｏｔａｌ ｆｌａｖｏｎｏｉｄ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ Ｍｏｒｕｓ ａｌｂａ ｌｅａｖｅｓ ｗａｓ ３５．６７±０．４０ ｍｇ／ｇ， ｗｈｉｃｈ ｗａｓ ｖｅｒｙ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｌｏｗｅｒ ｔｈａｎ ｔｈａｔ ｏｆ ａｌｌ ｏｔｈｅｒ ｓｐｅｃｉｅｓ． 【ＣＯＮＣＬＵＳＩＯＮ】Ｔｈｅ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓ ｏｆ ｔｈｅ ｔｏｔａｌ ｆｌａｖｏｎｏｉｄ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ ｍｕｌｂｅｒｒｙ ｌｅａｖｅｓ ａｍｏｎｇ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｓｐｅｃｉｅｓ ｗｅｒｅ ｖｅｒｙ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ． Ｔｈｅ ｗｉｌｄ ｓｐｅｃｉｅｓ ｓｕｃｈ ａｓ Ｍｏｒｕｓ ｗｉｔｔｉｏｒｕｍ ａｎｄ Ｍｏｒｕｓ ｃａｔｈａｙａｎａ ｈａｖｅ ｖｅｒｙ ｌａｒｇｅ ｐｏｔｅｎｔｉａｌ ｕｔｉｌｉｚａｔｉｏｎ ｖａｌｕｅ． Ｋｅｙ ｗｏｒ ｄｓ： Ｆｏｌｉｕｍ ｍｏｒｉ， ｔｏｔａｌ ｆｌａｖｏｎｏｉｄ ｃｏｎｔｅｎｔ， ｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｒｙ
以上重复性试验、精密度试验、回收率试验表明，
表 ４ 精密度试验结果
测定液
ＡＢＳ
样品含量／（ｍｇ·ｇ－１）
平均值／（ｍｇ·ｇ－１）
ＲＳＤ／％
１
０．７１６
３０．２８３
２
０．７２８
３０．７９３
３
０．７２０
３０．４５３
３０．５２１
０．６７
４
０．７１９
３０．４１０
５
０．７２５
３０．６６６
测定液 １ ２ ３ ４ ５
农业工程科学
中国农学通报 第 ２４ 卷 第 １ 期 ２００８ 年 １ 月 ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｃａｓｂ．ｏｒｇ．ｃｎ
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１ 材料与方法 １．１ 试验时间、地点
试验于 ２００５ 年 ６ 月份在中国农业科学院蚕业研 究所完成。 １．２ 材料
桑叶材料采自国家种质镇江桑树圃，分属 １１ 个种 ２ 个变种，共计 １３ 份材料，经中国农业科学院蚕业研 究所潘一乐研究员鉴定。 １．３ 仪器、试剂
Ｔｈｅｒｍｏ Ｓｐｅｃｔｒｏｎｉｃ Ｈｅλｉｏｓ α紫外可见分光光度 计，索氏提取器，电热恒温水浴锅，电热恒温干燥箱，电 子天平。
石油醚（６０￣９０℃）、甲醇均为分析纯。５％亚硝酸钠 溶液、１０％硝酸铝溶液、１ｍｏｌ／Ｌ 氢氧化钠溶液采用分析 纯试剂自配。芦丁标准品购自中国医药上海化学试剂 公司。 １．４ 标准品溶液制备
分别以乙醇、甲醇为提取溶剂，又分别用石油醚脱 脂、不脱脂，进行了提取溶剂及提取方法的选择。结果 表明，先用石油醚脱脂，再用溶剂提取，并不能提高桑 叶总黄酮的得率；分别用乙醇和甲醇作提取溶剂，总黄 酮的提取效率相当。因此，拟以甲醇提取，用硝酸铝显 色法，在 ５０５ ｎｍ 测定桑叶总黄酮的含量。 ２．３ 重复性试验