转铁蛋白与RGD共修饰脂质体用于脑胶质瘤靶向性研究

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修改意见:

1.本文中制备“RGD修饰脂质体”、“转铁蛋白修饰脂质体”是如何鉴定的？文章仅说明共修

饰脂质体的电镜鉴定，前两者的大小数据是如何得来的？文章未介绍清楚，如果是别人的试验结果建议删除。

本研究制备得到的RGD-LP和TF-LP也是通过马尔文激光粒度仪测定得到的粒径和电位，投射电镜只是作为脂质体的表征观察，对于测定粒径等参数不如马尔文粒度仪精确。因此文中只附上了共修饰脂质体的投射电镜图。

2. 本文所用电镜的型号、产地是什么？

本研究用到的投射电镜型号已经在文章中添加，并用红色标记。H-600IV型透射电子显微镜(Hitachi, Japan)

3. 全文图表及参考文献请按本刊格式修改、补充。

关于参考文献和图表已经按照要求进行了修改。

转铁蛋白与RGD共修饰脂质体用于脑胶质瘤靶向性研究

邵云，俞向荣，吴一平，姚建社，羊正祥

(214023江苏无锡, 无锡市人民医院神经外科)

[摘要]目的：构建转铁蛋白与整合素受体RGD共修饰脂质体并对其脑胶质瘤靶向性进行初步研究。方法：采用薄膜分散法制备RGD修饰脂质体，采用后插入法制备转铁蛋白与RGD共修饰脂质体，观察其形态，粒径，电位。并通过U87脑胶质瘤细胞摄取实验以及裸鼠脑组织离体成像实验考察脂质体的脑胶质瘤靶向性。结果：所制备的双配体脂质体粒径在RGD/TF-LP (120±8.5) nm，电位为（-5±1.15） mV。体外细胞摄取实验表明，U87脑胶质瘤细胞对共修饰脂质体的摄取效率分别是转铁蛋白修饰脂质体和RGD修饰脂质体的2.1倍和2.7倍。肿瘤球摄取实验以及裸鼠脑组织离体成像实验表明共修饰脂质体具有良好的肿瘤靶向性以及脑部肿瘤传递能力。结论：转铁蛋白与RGD共修饰脂质体具有一定的脑胶质瘤靶向性，是一种潜在的脑胶质瘤给药系统。

[关键词]转铁蛋白；RGD；脂质体；脑胶质瘤

Transferrin and RGD co-modified liposome for glioma targeting SHAO Yun,YU Xiang-rong,WU Yi-ping,YAO Jian-she,YANG Zheng-xiang

(Department of Neurosurgery , Wuxi People's Hospital , Wuxi 214023 ,China)

Abstract Objective: To prepare transferrin and RGD co-modified liposome and evaluate their glioma targeting efficiency in vitro and in vivo．Methods: The co-modified liposome was prepared by

film-ultrasonic method. The appearance，particle size，Zeta potential were evaluated. The cellular uptake by U87 cells in vitro and vivo imaging were used to evaluate the targeting efficiency. Results: The particle diameter of the co-modified liposome was （120±8.5）nm with the Zeta potential of （-5±1.15）mV. The result demonstrated that the co-modified

liposome uptaken by U87 were 2.1, 2.7 times higher than that of transferrin modified liposome and RGD modified liposome, respectively. The evaluation of tumor spheroid penetration and in vivo imaging show the co-modified liposome has the strongest fluorescence intensity. Conclusion: The co-modified liposome might serve as a promising glioma delivery system of antitumor drugs.

Key words: Transferrin; RGD; Liposome; Glioma

原发性中枢神经系统肿瘤的发病率不断增加，其中，神经胶质瘤占总发病数的77%～80%左右，是颅内最常见的恶性肿瘤[1]。手术治疗是脑胶质瘤临床治疗的首选方案。然而由于脑胶质瘤本身是侵润生长，不易与正常的脑组织区分，因此在手术过程中很难将肿瘤组织全部切除，为了杀伤肿瘤细胞还需要放射治疗和化疗。然而化疗药物很难到达脑部肿瘤组织还会产生很大的副作用。因此脑胶质瘤的治疗迫切需要新手段。

转铁蛋白受体是一种在正常细胞和肿瘤细胞表面都普遍存在的受体，但是在肿瘤细胞的表面（尤其是脑胶质瘤）转铁蛋白受体的表达是正常细胞的4～5倍[2]。整合素（Integrins）是一类细胞黏附受体分子，在有核细胞表面均广泛表

达，其中整合素α

v β

3

在神经胶质瘤、黑色素瘤、卵巢癌等多种肿瘤细胞及肿瘤

相关的内皮细胞表面高度表达，与肿瘤的血管发生，肿瘤转移及肿瘤的抗放射治

疗密切相关，因此整合素α

v β

3

常被用作肿瘤靶向的特异性靶点。已有研究表明，

精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸（Arg-Gly-Asp, RGD）的三肽序列能够特异性地识别含αv亚基的整合素家族，具有高度亲和力[3]。脂质体是由磷脂组成的具有双层膜结构的球形结构。能够在水相包载亲水性的药物，也能在脂质双层包载亲脂性的药物同时，脂质体可以很容易进行表面修饰，可以引入PEG延长循环时间，达到长循环的效果，也可以连接配体成为主动靶向脂质体。

本研究成功制备了转铁蛋白（TF）与RGD共修饰的脂质体，并对共修饰脂质体的靶向性进行了体内外评价。