人血免疫球蛋白中甘氨酸含量测定法
甘氨酸检验标准操作规程
⽢氨酸检验标准操作规程1. ⽬的建⽴⽢氨酸检验标准操作规程，规范操作。
2. 范围适⽤于⽢氨酸的检验。
3. 依据：中国药典2010版⼆部。
4. 职责4.1 起草：QC 审核：质量保证部负责⼈批准⼈：质量管理负责⼈。
4.2QC实施本规程。
4.3QA监督本规程的实施。
5. 内容5.1 性状本品为⽩⾊⾄类⽩⾊结晶性粉末；⽆臭，味甜。
本品在⽔中易溶，在⼄醇或⼄醚中⼏乎不溶。
5.2 鉴别5.2.1 鉴别（1）5.2.1.1 试液及仪器⼀般实验仪器。
5.2.1.2 分析步骤取本品与⽢氨酸对照品各适量，分别加⽔溶解并稀释制成每1ml中约含10mg的溶液，作为供试品溶液与对照品溶液。
吸取上述两种溶液各2µl分别点于同⼀硅胶G薄层板上，以正丙醇-氨⽔(7:3)为展开剂，展开约10cm，晾⼲，在80℃⼲燥30分钟，喷以茚三酮的正丙醇溶液（1→100），在105℃加热⾄斑点出现，⽴即检视。
供试品溶液所显主斑点的位置和颜⾊应与对照品溶液的主斑点的位置和颜⾊相同。
5.2.2 鉴别（2）5.2.2.1 试液及仪器⼀般实验仪器和红外可见分光光度仪。
5.2.2.2 分析步骤⽤红外分光光度仪检测，采⽤压⽚法，取残渣约1～1.5mg，置玛瑙研钵中，加⼊⼲燥的溴化钾或氯化钾细粉约200～300mg（与供试品的⽐约为200:1）作为分散剂，充分研磨混匀，置于直径为13mm的药⽚模具中，使铺展均匀，抽真空约2min，加压⾄（0.8×106）kPa（约8～10T/㎝2），保持压⼒2min，撤去压⼒并放弃后取出制成的供试⽚，⽬视检测，⽚⼦应呈透明状，其中样品分布应均匀，并⽆明显的颗粒状样品。
亦可采⽤其他直径的压膜制⽚，样品与分散剂的⽤量需相应调整以制得浓度适合的⽚⼦。
测定。
本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱（光谱集929图）⼀致。
5.3 检查5.3.1 酸度5.3.1.1 试液及仪器⼀般实验仪器。
5.3.1.2 分析步骤取本品1.0g，加⽔20ml溶解后，依法测定（附录Ⅵ H），pH值应为5.6～6.6。
甘氨酸含量测定和甲硫氨酸含量测定
甘氨酸含量测定和甲硫氨酸含量测定甘氨酸（Glycine）和甲硫氨酸（Methionine）是人体必需的氨基酸，分别在蛋白质合成、生物降解和代谢途径中发挥重要的作用。
因此，准确测定甘氨酸和甲硫氨酸的含量对于研究生物学功能以及调控人体健康具有重要意义。
甘氨酸是最简单的氨基酸之一，其含量测定可以采用不同的分析方法。
其中，光谱法是一种常用且简单的测定方法，通过检测甘氨酸溶液在特定波长下的吸收光强度来确定其含量。
甘氨酸溶液在190-210nm波长范围内有一个特征吸收峰，根据其吸收峰的强度可以计算出甘氨酸的浓度。
除了光谱法，还可以使用高效液相色谱法（HPLC）等方法来测定甘氨酸的含量。
HPLC是一种分离和定量目标物质的高效分析方法，通过将甘氨酸溶液通过带有特定色谱柱的系统进行分离，然后通过检测器检测分离出来的甘氨酸峰的面积或峰高来计算其含量。
甲硫氨酸是一种含有硫原子的氨基酸，其含量测定相对较为复杂。
一种常用的测定方法是使用高效液相色谱法与紫外检测器结合，该方法可以通过特定的色谱条件使甲硫氨酸与其他氨基酸分离，然后利用紫外检测器检测甲硫氨酸的峰面积或峰高来进行计算。
此外，还可以使用气相色谱法或质谱法等方法来测定甲硫氨酸的含量。
总之，准确测定甘氨酸和甲硫氨酸的含量对于了解其在生物体内的功能以及人体健康状态具有重要意义。
不同的分析方法有各自的特点和适用范围，需要根据实际需求选择合适的测定方法进行分析。
同时，为了保证测定结果的准确性和可靠性，还需要注意样品的预处理、仪器的校准与标定等操作步骤，以及对结果进行统计学分析的工作。
甘氨酸(Gly)检测
甘氨酸（Gly）检测
甘氨酸（Glycine, Gly），又称为α-氨基乙酸，是一种非必须氨基酸。
甘氨酸
是内源性抗氧化剂还原性谷胱甘肽的组成氨基酸，机体发生严重应激时常外源
补充，有时也称为半必需氨基酸。
在中枢神经系统，尤其是在脊椎里，甘氨酸
是一个抑制性神经递质。
甘氨酸(Glycine)以往一直被认为是除了GABA以外最
重要的抑制性神经递质。
甘氨酸在CNS中分布广泛，在神经信号的传递以及参
与各种生理和病理反应中起着的重要作用。
迪信泰检测平台采用高效液相色谱(HPLC)和液质联用(LC-MS)法，可高效、精准的检测甘氨酸的含量变化。
此外，我们还提供其他氨基酸及其代谢物检测服务，以满足您的不同需求。
HPLC和LC-MS测定甘氨酸样本要求：
1. 请确保样本量大于0.2g或者0.2mL。
周期：2~3周
项目结束后迪信泰检测平台将会提供详细中英文双语技术报告，报
告包括：
1. 实验步骤（中英文）
2. 相关质谱参数（中英文）
3. 质谱图片
4. 原始数据
5. 甘氨酸含量信息
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LC-MS氨基酸测定项目样本报告，点击查看>。
人免疫球蛋白中甘氨酸含量控制研究
实验报告甘氨酸的含量测定
甘氨酸的含量测定——电位滴定法生药1011 第四组一、应用范围：本方法采用滴定法测定甘氨酸原料药中甘氨酸的含量。
本方法适用于甘氨酸原料药。
二、方法:供试品无水甲酸溶解后，加冰醋酸，照电位滴定法，用高氯酸滴定液滴定，并将滴定的结果用空白试验校正，根据滴定液使用量，计算甘氨酸的含量。
三、原理：和一COOH，为两性物质，在水溶液中，它的酸式电氨基酸分子中含有一NH2离和碱式电离的趋势都很弱(如氨基乙酸其羧基上的氢Ka=2．5×10-10，氨基作为碱Kb=2．2×10-12)，因此无法准确滴定。
作滴定剂，结晶紫为指示剂准确但在非水介质(如冰乙酸)中，可以用HC104滴定氨基酸，产物为氨基酸的高氯酸盐，呈酸性。
结晶紫在强酸介质中为绿色，pH=2左右为蓝色，pH>3时为紫色，可以指示此反应的滴定终点。
(由紫色到蓝色到蓝绿到绿色到黄色变化)四、实验材料1、试剂：（1）冰醋酸（2）无水甲酸（3）高氯酸滴定液（0.1mol/L）（4）结晶紫指示液（5）基准邻苯二甲酸氢钾2、仪器设备：电位滴定仪、酸度计或电位差计、容量瓶、烧杯、磁力搅拌器、搅拌子等五、操作步骤1.高氯酸滴定液（0.1mol/L）试样制备配制：取无水冰醋酸（按含水量计算，每1g水加醋酐5.22mL）750mL，加入高氯酸（70~72%）8.5mL，摇匀，放冷，加无水冰醋酸适量使成1000mL，摇匀，放置24小时。
若所测供试品易乙酰化，则须用水分测定法测定本液的含水量，再用水和醋酐调节至本液的含水量为0.01%~0.2%。
2.结晶紫指示液取结晶紫0.5g，加冰醋酸100mL使溶解。
3.标定：取在105℃干燥至恒重的基准邻苯二甲酸氢钾约0.16g，精密称定，加无水冰醋酸20mL使溶解，加结晶紫指示液1滴，用本液缓缓滴定至蓝色，并将滴定结果用空白试验校正。
每1mL高氯酸滴定液（0.1mol/L）相当于20.42mg的邻苯二甲酸氢钾。
甘氨酸测定实验报告
一、实验目的1. 学习甘氨酸的提取和鉴定方法；2. 掌握分光光度法测定甘氨酸含量的原理和操作步骤；3. 提高实验操作技能，培养严谨的科学态度。
二、实验原理甘氨酸（Gly）是一种氨基酸，具有两性性质，在酸性条件下，甘氨酸会发生两性离解，生成甘氨酸正离子和氢离子。
在特定波长下，甘氨酸正离子与显色剂反应，形成有颜色的配合物。
根据配合物的吸光度与甘氨酸浓度成正比的关系，可以测定甘氨酸的含量。
三、实验仪器与试剂1. 仪器：紫外-可见分光光度计、移液器、容量瓶、试管、烧杯等。
2. 试剂：甘氨酸标准溶液、盐酸、氢氧化钠、显色剂、蒸馏水等。
四、实验步骤1. 标准曲线绘制（1）配制一系列不同浓度的甘氨酸标准溶液，浓度为0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2 mg/mL。
（2）取适量甘氨酸标准溶液于试管中，加入一定量的盐酸，使溶液pH值调至6.5。
（3）加入显色剂，混匀，室温下放置5分钟。
（4）以蒸馏水为空白，在特定波长下测定吸光度。
（5）以甘氨酸浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。
2. 样品测定（1）准确称取一定量的样品，加入适量盐酸，使溶液pH值调至6.5。
（2）加入显色剂，混匀，室温下放置5分钟。
（3）以蒸馏水为空白，在特定波长下测定吸光度。
（4）根据标准曲线，计算样品中甘氨酸的含量。
五、实验结果与分析1. 标准曲线绘制以甘氨酸浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。
根据线性回归方程，得到标准曲线的方程为：y = 0.0176x + 0.0068，相关系数R² = 0.997。
2. 样品测定根据标准曲线，计算样品中甘氨酸的含量。
设样品中甘氨酸浓度为x mg/mL，根据标准曲线方程，有：x = (y - 0.0068) / 0.0176计算得到样品中甘氨酸浓度为0.9 mg/mL。
六、实验结论通过本实验，成功绘制了甘氨酸标准曲线，并测定了样品中甘氨酸的含量。
实验结果表明，本实验方法操作简便、准确度高，适用于甘氨酸的测定。
甘氨酸检验操作规程
甘氨酸检验操作规程1.目的：建立甘氨酸测定操作规程，便于检验人员规范操作。
2.范围：适用于配制各种氨基酸注射液的甘氨酸测定。
3.责任：质检科检验员对实施本规程负责。
4.程序：4.1性状：白色结晶性粉末，无臭、味甜。
4.2鉴别试验4.2.1本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱（光谱集929图）一致。
4.3 酸度（pH值）测定4.3.1测定范围：5.9～6.44.3.2配制溶液：取本品1.0g，加新沸过的冷水20ml，溶解。
4.3.3操作步骤：在pH计上测定（操作见pH值测定操作规程）4.4溶液的透光度测定4.4.1测定范围：>99.0%4.4.2溶液配制；取本品1.0g，加水20ml溶解。
4.4.3操作步骤：照分光光度法，在430nm波长处测定其透光率（操作见分光光度法测定操作规程）。
4.5氯化物测定4.5.1测定范围：<0.007%4.5.2试剂和试液：6mol/L HCL：取54ml盐酸稀释至100ml，即得。
4.5.3操作步骤：4.5.3.1称取本品1.0g，置50ml纳氏比色管中，加水溶解至25ml，再加稀硝酸10ml，加水使成40ml，摇匀，再加入硝酸银液(0.1mol/L)1.0ml，用水稀释至50ml，在暗处放置5分钟，作样品管。
4.5.3.2以标准氯化钠溶液7ml，作对照液，用4.5.3.1同样方法同时操作，作对照管。
4.5.3.3两管以黑色为背景底，从上方向下观察比较，所产生的浑浊度，样品管应浅于对照管。
4.6硫酸盐测定4.6.1测定范围：<0.006%4.6.2试剂和试液：4.6.2.1稀盐酸溶液：取盐酸23.4ml，加水稀释至100ml，即得。
4.6.2.2 25%氯化钡试液：取氯化钡25g，加适量的水溶解，并稀释至100ml，即得。
4.6.2.3标准硫酸钾溶液：1ml＝100µg4.6.3操作步骤：4.6.3.1称取本品2.5g，置50ml纳氏比色管中，加水溶解成40ml，加稀盐酸2ml，摇匀；加入25%氯化钡溶液5ml，用水稀释使成50ml，充分振摇，放置10分钟，作为样品管。
人免疫球蛋白中甘氨酸含量控制研究
人免疫球蛋白中甘氨酸含量控制研究林海;杨景麟;田洪;潘震宇;肖炳燚;肖菁;姚亮元【期刊名称】《中国药物评价》【年(卷),期】2013(30)4【摘要】目的:人免疫球蛋白中甘氨酸含量的检测和控制方法.方法:本次实验研究采用紫外分光法与RF-HPLC方法对人免疫球蛋白中的甘氨酸含量进行了对比研究,检测波长338 mm,通过外标法对甘氨酸水平进行了计算.结果:人免疫球蛋白中甘氨酸衍生化范围在0.05至0.15 g/L之间,甘氨酸回收率在96%至101%之间,其直线相关系数为0.9996至1.0000,不同操作者检测结果对比无明显差异.结论:紫外分光法与RF-HPLC法检测结果对比无明显的统计学差异(P<0.05),通过RF-HPLC方法对人免疫球蛋白中甘氨酸含量进行检测和控制,具有较高的准确性和稳定性,因而应用价值较高.【总页数】3页(P196-198)【作者】林海;杨景麟;田洪;潘震宇;肖炳燚;肖菁;姚亮元【作者单位】湖南省食品药品检验研究院,湖南,长沙,410001;湖南省食品药品检验研究院,湖南,长沙,410001;湖南省食品药品检验研究院,湖南,长沙,410001;湖南省食品药品检验研究院,湖南,长沙,410001;湖南省食品药品检验研究院,湖南,长沙,410001;湖南省食品药品检验研究院,湖南,长沙,410001;湖南千金湘江药业股份有限公司,湖南,株洲,412011【正文语种】中文【中图分类】R927.2【相关文献】1.骨化三醇注射液中甘氨酸含量测定方法研究 [J], 靳文仙;李艳贞;刘欢;吴赟;阎卉;王成港2.高效液相色谱法测定狂犬病人免疫球蛋白制品中甘氨酸含量 [J], 高莉萍;盛凤仙;浦奕奕3.复方甘草甜素注射液中甘氨酸含量测定的方法研究 [J], 刘丽娜4.广东眼镜蛇蛇胆的鉴别及质量控制的研究Ⅳ：广东眼镜蛇蛇胆中牛磺酸、甘氨酸、牛磺胆酸和甘氨胆酸的测定 [J], 何子安;孙方人;陈玉珍;章光远5.甘氨酸生产新工艺中Cl^-含量测定方法的研究 [J], 毛建卫;崔艳丽因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
人免疫球蛋白
人免疫球蛋白Ren MianyiqiudanbaiHuman Immunoglobulin本品系由健康人的血浆，经低温乙醇蛋白分离法或经批准的其他分离法分离纯化，并经病毒灭活处理制成。
含适宜稳定剂，不含防腐剂和抗生素。
1 基本要求生产和检定用设施、原料及辅料、水、器具、动物等应符合“凡例”的有关要求。
2 制造2.1 原料血浆2.1.1 血浆的采集和质量应符合“血液制品生产用人血浆”的规定。
2.1.2 低温冰冻的血浆保存期应不超过3年。
2.1.2 每批投产血浆应不少于1000人份。
每批应由1000名以上供血浆者的血浆混合而成。
2.1.3 组分Ⅱ、组分Ⅱ+Ⅲ沉淀或组分Ⅰ+Ⅱ+Ⅲ沉淀应冻存于-30℃以下，并规定其有效期。
2.2 原液2.2.1 采用低温乙醇蛋白分离法或经批准的其他分离法制备。
原液生产过程中不得加入抗生素或防腐剂。
2.2.2 经纯化、超滤、除菌过滤后即为免疫球蛋白原液。
2.2.3 原液检定按3.1项进行。
2.3 半成品2.3.1 配制制品中可加适宜的稳定剂。
按成品规格以注射用水稀释蛋白质浓度，并适当调整pH值及钠离子浓度。
2.3.2 半成品检定按3.2项进行。
2.4 成品2.4.1 分批应符合“生物制品分批规程”规定。
2.4.2 分装应符合“生物制品分装和冻干规程”规定。
2.4.3 规格每瓶含蛋白质150mg、300mg。
蛋白质浓度为10%。
应为经批准的规格。
2.4.4 包装应符合“生物制品包装规程”规定。
2.5 病毒去除和灭活生产过程中应采用经批准的方法去除和灭活病毒。
如用灭活剂（如有机溶剂、去污剂）灭活病毒，则应规定对人安全的灭活剂残留量限值。
3 检定3.1 原液检定3.1.1 蛋白质含量可采用双缩脲法(附录Ⅵ B第三法)测定，应大于成品规格。
3.1.2 纯度应不低于蛋白质总量的90.0%（附录Ⅳ A）。
3.1.3 pH值用生理氯化钠溶液将供试品蛋白质含量稀释成10g/L，pH值应为6.4～7.4(附录Ⅴ A)。
实验报告甘氨酸的含量测定
实验报告甘氨酸的含量测定
摘要：本文介绍了甘氨酸含量测定的常规试验方法，其基本过程为：
样品的前处理，滴定反应，滴定终点检测。
实验中，使用大孔吸附管柱把
样品复现前的特征分子分离，然后通过紫外分光光度法进行定量检测，来
测定样品中的甘氨酸含量。
实验结果表明，当样品浓度在20mg·L-1与
500mg·L-1之间时，相关系数R2均大于0.999，精密度RSD小于3%，回
收率范围在90.9%～104.1%，说明所测结果可靠准确，可满足测定要求。
关键词：甘氨酸；大孔吸附管柱；紫外分光光度法；滴定
1引言
甘氨酸是衡量蛋白质质量的重要指标，同时也是人体重要的必需氨基酸。
甘氨酸作为抗生素的原料，对改善人体免疫力、促进细胞代谢有重要
的作用，是生命活动不可缺少的一部分。
由于甘氨酸具有丰富的生物活性，使得其进入到药物和食品领域，成为一种重要的营养补充剂。
甘氨酸在食
品中的含量测定，不仅有助于食品行业的检测与研究，还可以为食品安全
监测提供参考依据。
实验报告甘氨酸的含量测定
甘氨酸的含量测定——电位滴定法生药1011 第四组一、应用范围：本方法采用滴定法测定甘氨酸原料药中甘氨酸的含量。
本方法适用于甘氨酸原料药。
二、方法:供试品无水甲酸溶解后，加冰醋酸，照电位滴定法，用高氯酸滴定液滴定，并将滴定的结果用空白试验校正，根据滴定液使用量，计算甘氨酸的含量。
三、原理：和一COOH，为两性物质，在水溶液中，它的酸式电氨基酸分子中含有一NH2离和碱式电离的趋势都很弱(如氨基乙酸其羧基上的氢Ka=2．5×10-10，氨基作为碱Kb=2．2×10-12)，因此无法准确滴定。
作滴定剂，结晶紫为指示剂准确但在非水介质(如冰乙酸)中，可以用HC104滴定氨基酸，产物为氨基酸的高氯酸盐，呈酸性。
结晶紫在强酸介质中为绿色，pH=2左右为蓝色，pH>3时为紫色，可以指示此反应的滴定终点。
(由紫色到蓝色到蓝绿到绿色到黄色变化)四、实验材料1、试剂：（1）冰醋酸（2）无水甲酸（3）高氯酸滴定液（0.1mol/L）（4）结晶紫指示液（5）基准邻苯二甲酸氢钾2、仪器设备：电位滴定仪、酸度计或电位差计、容量瓶、烧杯、磁力搅拌器、搅拌子等五、操作步骤1.高氯酸滴定液（0.1mol/L）试样制备配制：取无水冰醋酸（按含水量计算，每1g水加醋酐5.22mL）750mL，加入高氯酸（70~72%）8.5mL，摇匀，放冷，加无水冰醋酸适量使成1000mL，摇匀，放置24小时。
若所测供试品易乙酰化，则须用水分测定法测定本液的含水量，再用水和醋酐调节至本液的含水量为0.01%~0.2%。
2.结晶紫指示液取结晶紫0.5g，加冰醋酸100mL使溶解。
3.标定：取在105℃干燥至恒重的基准邻苯二甲酸氢钾约0.16g，精密称定，加无水冰醋酸20mL使溶解，加结晶紫指示液1滴，用本液缓缓滴定至蓝色，并将滴定结果用空白试验校正。
每1mL高氯酸滴定液（0.1mol/L）相当于20.42mg的邻苯二甲酸氢钾。
实验报告甘氨酸的含量测定
实验报告甘氨酸的含量测定一、实验目的：本实验旨在通过紫外分光光度法测定一系列甘氨酸溶液中甘氨酸的含量，并通过实验得到的数据来建立甘氨酸浓度与吸光度之间的标准曲线。
二、实验原理：1.原理简介紫外分光光度法是利用物质在紫外可见光区域内吸收光的特性对其浓度进行分析的方法。
其基本原理是：当物质溶液通过一个具有连续或非连续频谱的紫外光源时，溶液中的物质会吸收一部分波长范围内的光，而未被吸收的光会通过检测器。
根据比尔-朗伯定律，溶液中物质的吸光度与其浓度之间存在一个线性关系，可以用来建立浓度与吸光度之间的标准曲线，从而通过吸光度的测定来计算溶液中物质的浓度。
2.背景知识甘氨酸（glycine）是一种非必需氨基酸，常用于制备缓冲溶液和生物技术中。
甘氨酸的分子式为C2H5NO2，摩尔质量为75.07 g/mol。
3.实验步骤和条件(1) 准备一系列甘氨酸的浓度为10.0-100.0 mg/L的标准溶液；(2) 使用紫外可见分光光度计在219 nm波长下选择最佳检测波长；(3)分别测定标准溶液的吸光度，获得浓度与吸光度之间的线性关系；(4)测定未知样品的吸光度，并利用标准曲线计算其浓度。
三、实验步骤：1.实验器材准备：(1) 甘氨酸标准溶液：分别称取10.0, 20.0, 30.0, 40.0, 50.0 mg 的甘氨酸溶解于100 mL 的蒸馏水中，得到10.0-100.0 mg/L 的标准溶液；(2)pH7.0的磷酸盐缓冲液；(3)紫外可见分光光度计；(4)紫外可见比色皿。
2.实验步骤：(1)在紫外光源下选择最佳检测波长，记录波长；(2)分别量取不同浓度的甘氨酸标准溶液，置于比色皿中；(3)使用紫外可见分光光度计测定各标准溶液的吸光度，并记录；(4)绘制标准曲线，将吸光度与甘氨酸的浓度绘制在同一坐标系中，进行线性拟合；(5)测定未知样品的吸光度，并利用标准曲线计算出甘氨酸的浓度。
四、实验结果与分析：本实验选择了219 nm的检测波长。
中国药典比较
题目：2010版《中国药典》与2005版《中国药典》相比有什么区别？一．无菌检查（共32处）1.2010版药典增加对人员的要求2.无菌检查人员必须具备微生物专业知识，并经过无菌技术的培训。
3.2010版药典规定了防止污染的措施不得影响供试品中微生物的检出4.2010版药典规定了日常检验还需要对环境进行监控5.对于选择性培养基，药典2010版去掉了中和剂的规定性推荐。
其用量同验证试验。
6.培养基药典2010版删除了硫乙醇酸盐流体培养基用于培养好氧菌、厌氧菌的规定7.删除了改良马丁培养基用于培养真菌的规定8.对于菌液制备中药典2010版增加了“菌悬液在室温下放置应在2小时内使用，若在2~8℃可在24小时内使用。
黑曲霉孢子悬液可保存在2~8℃，在验证的贮存期内使用。
”9.药典2010版修订了黑曲霉的孢子悬液制备方法，规定应使用含0.05％（v/v）聚山梨酯80的0.9％无菌氯化钠溶液稀释10.在稀释液、冲洗液及其制备方法中，药典2010版增加了“3.根据供试品的特性，可选用其他经验证过的适宜的溶液作为稀释液，冲洗液”11.在方法验证中，2010版药典将“该药品”改为“该产品”。
应为医疗器具扩大适用范围。
12. 在方法验证中的菌种及菌液制备，2010版药典将大肠埃希菌（Escherichia ）[CMCC（B）4 4102]的菌液制备。
13.在方法验证中的薄膜过滤法中，2010版药典，增加了“取每种培养基规定接种的供试品总量按薄膜过滤法过滤”即明确了2005版药典的“将规定量的供试品按…..”。
14.去掉了“或使用中和剂如β-内酰胺酶、对氨基苯甲酸”15.在检验量中，2010版药典去掉了“采用直接接种法时”16.在阳性对照中，2010版药典去掉了“（大肠埃希氏菌的菌液制备…..的灵敏度检查中的金黄色葡萄球菌）”将2005版的“阳性对照菌的菌悬液制备同培养基灵敏度检查”改成了“阳性对照菌的菌悬液制备同方法验证试验，”。
高效液相色谱法测定狂犬病人免疫球蛋白制品中甘氨酸含量
高效液相色谱法测定狂犬病人免疫球蛋白制品中甘氨酸含量高莉萍;盛凤仙;浦奕奕【期刊名称】《中国药业》【年(卷),期】2012(021)013【摘要】Objective An HPLC method was established for the determination of glicine in human Rabies Immunoglobulin. Methods A Shim-Pack CLC-ODS column was used with the mobile phase of 50% acetonitrile - 0. 05 mol/L sodium acetate buffer(35 :65) ,at the detection wavelength of 360 run. Results The calibration curve of glicine was linear in the concentration range of 0. 025 ~ 0. 20 g/L. The average recovery was 99.58% ,with RSD of 1. 18%. Conclusion The method was simple and sensitive, and the determination result was accurate and reliable, indicating that the method was suitable for determination of glicine in human Rabies Immunoglobulin.%目的建立测定狂犬病人免疫球蛋白制品中甘氨酸含量的高效液相色谱法.方法采用Shim-Pack CLC-ODS色谱柱(150mm×6.0mm,5μm),以50％乙腈溶液-0.05mol/L醋酸钠缓冲液(35∶65)为流动相,检测波长为360 nm.结果甘氨酸质量浓度在0.025～0.20g/L范围内与峰面积呈良好线性关系(r=0.9999),平均回收率为99.58％,RSD为1.18％(n=6).结论所用方法简便灵敏,结果准确可靠,可用于狂犬病人免疫球蛋白制品中甘氨酸含量的测定.【总页数】2页(P22-23)【作者】高莉萍;盛凤仙;浦奕奕【作者单位】上海新兴医药股份有限公司,上海200135;上海新兴医药股份有限公司,上海200135;上海新兴医药股份有限公司,上海200135【正文语种】中文【中图分类】R927.2;R977.6【相关文献】1.柱前衍生高效液相色谱法测定乳制品中甘氨酸的含量 [J], 赵志红;张逢秋;朱慧;施文蓉2.高效液相色谱法测定人凝血因子Ⅷ制品中甘氨酸的含量 [J], 高莉萍;李萍;姚佳佳3.高效液相色谱法测定人纤维蛋白原中甘氨酸、盐酸精氨酸含量 [J], 陈通威;高红琴;崔素梅;张惠兰;王宗刚4.柱前衍生反相高效液相色谱法测定北虫草发酵液中甘氨酸含量 [J], 房天琪;邱芳萍;王长周;季晓枫5.柱前衍生反相高效液相色谱法测定冻干人纤维蛋白原制品中盐酸精氨酸和甘氨酸的含量 [J], 尉小平;冉铁成;王坚;赵家宏因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
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人血免疫球蛋白中甘氨酸含量测定法（新增）
本法系依据过量的6-氨基喹啉基-N-羟基琥珀酰亚氨基氨基甲酸酯（AQC）在一定条件下和氨基酸形成稳定的衍生产物（柱前衍生），用高效液相色谱法测定衍生产物，根据衍生产物的含量计算甘氨酸含量。
照高效液相色谱法（附录III B）测定
色谱条件和系统适应性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为基质的C18反相色谱柱，颗粒度4μm，内径3.9mm,柱长150mm；柱温为37℃;以140mmol/L乙酸钠、17mmol/L 三乙胺pH 5.65、1μg/mlEDTA二钠盐为流动相A液，以100%乙腈为流动相B液，以纯水为流动相C液,流速为每分钟1.0ml，梯度洗脱32分钟（见梯度表），检测波长为248nm。
甘氨酸与相邻色谱峰之间分离度应≥1.5；拖尾因子（T）为0.95～1.40之间(甘氨酸和α-氨基丁酸峰)。
重复性RSD≤2.0%（甘氨酸对照品峰面积测量值）。
内标溶液的制备精密称取α-氨基丁酸对照品4.0g, 加超纯水至100ml定容。
对照品溶液的制备(1)精密称取甘氨酸标准2.5g加超纯水至100ml定容。
(2)精密量取(1)项氨基酸标准溶液1.0ml，加9.0ml 1.5%磺基水扬酸，混匀静置2小时以上3000rpm离心10分钟，留取上清备用。
①分别精密量取上清液50μl、100μl、125μl、150μl、200μl，置10ml容量瓶中，用纯水定容。
②分别精密量取①项中各甘氨酸标准溶液0.1 ml，加0.4ml纯水，加内标0.02ml混匀备用。
精密量取(2)②项甘氨酸标准溶液10μl放入衍生管中加70μl硼酸缓冲液(pH8～10)涡旋混和并加入20μl AQC衍生剂涡旋混和15秒，备用。
供试品溶液的制备精密量取供试品溶液1.0ml，加9.0ml 1.5%磺基水扬酸，混匀静置2小时以上3000rpm离心10分钟，留取上清备用。
（1）精密量取离心上清液1.0ml，置10ml容量瓶中，用纯水定容。
（2）精密量取（1）项中供试品溶液0.1 ml，加0.4ml纯水，加内标0.02ml混匀备用。
精密量取(2)项供试品溶液10μl放入衍生管中加70μl硼酸缓冲液涡旋混和并加入20μl AQC衍生剂涡旋混和15秒, 备用。
测定法精密量对照品溶液与供试品溶液,分别注入液相色谱仪，记录色谱图32分钟。
进样量为10μl。
按内标法计算。
梯度表
附注：(1)甘氨酸含量测定应采用柱前衍生及内标法,除本法要求外衍生剂也可选用异硫氰酸苯酯（PITC）, 邻苯二甲醛(OPA);内标物也可选用正缬氨酸; C18反相色
谱柱的颗粒度也可选用5μm或亚二微米。
根据液相色谱系统、C18反相色谱
柱规格、衍生剂及内标物的不同可以调整相应的色谱条件。
(2)直线回归相关系数应不低于0.999。
(3)系统适应性中重复性可用其它适宜方法。
（4）本法也适用于血液制品中组氨酸和精氨酸测定，仅对照品改为相应的组氨酸或精氨酸。