植物的克隆PPT教学课件
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• 切取小组织块（消毒的根茎叶芽） • 接种，获得愈伤组织（创伤组织） • 诱导愈伤组织，再生出新植株
二、植物的组织培养
切取
接种
愈伤组织的形成
• 愈伤组织：在人 工培养基上由外 植体长出来的一 团无序生长的薄 壁细胞（细胞排 列疏松、无规 则）。
植物组织培养（试管苗的形成）
培养室
试管苗大规模培养
（1）除去硝基苯中的残酸 （2）除去溴苯中的溴
（3）除去乙酸乙酯中的乙酸 （4）除去溴乙烷中的乙醇 （5）除去苯中的苯酚 （6）除去苯中的甲苯
3、洗气
用液体反应物除去气体中的杂质的方法称为洗气
适用范围
（1）除去甲烷中的乙烯、乙炔气体
（2）除去乙烯中的二氧化碳、二氧化硫气体
（3）除去乙炔中的硫化氢、磷化氢气体
植物克隆的成功需做到： • 深入探讨特定植物细胞全能性的表达条件； • 尽量选择优良、细胞全能性表达充分的基因
型
四、植物克隆的成就
• 细胞培养源自文库器官培养 意义：
受精过程和胚胎发育过程的研究 遗传工程的操作 培育植物新品种 原生质体培养与植物细胞工程 多途径上的植物克隆实践
➢植物组织培养的应用：
• 悬浮细胞培养：愈伤组织在摇床上分散成单 个细胞，再发育成胚状体，形成植株
• 原生质体培养：纤维素酶和果胶酶脱壁，获 得原生质体。转基因受体、细胞融合、利用 全能性诱导为完整植株
• 单倍体培养：花药离体培养
三、植物细胞全能性的体现
• 植物细胞的全能性比动物更容易体现 • 各种植物细胞全能性的表达程度大不相同
在生物体内为什么细胞没有表现出全能性,而是 分化为不同的组织或器官呢?
基因在特定的时间和空间 条件下选择性表达的结果.
一、植物细胞的全能性
4、植物细胞全能性表达的条件 • 离体状态 • 有一定的营养物质、激素、和其他外
界条件。
二、植物的组织培养
1、植物组织培养程序
• 配制培养基（含营养物质和植物生长调 节剂的含0.7~1%琼脂，灭菌凝固）
E、蔗糖的水解（热水浴） F、纤维素的水解（15min，热水浴）
四、有机物的分离、提纯与检验
1、蒸馏
分离相溶的沸点不同的液体混合物可用蒸馏的方法
适用范围
（1）提纯硝基苯 （2）制无水乙醇 （3） 从乙酸和乙醇的 混合物中分离乙醇 （4）石油的分馏
2、分液
分离两种互不相溶的液体，可用分离的方法
适用范围
经过炼 苗的小 苗，可 以和一 般植物 一样进 行大规 模栽培
移栽
离体的植物器官、组织或细胞 （高度分化）
脱分化
无定形状态
愈伤组织（未分化）
薄壁细胞 高度液泡化
再分化
排列疏松、无规则
根、芽 （再分化）
植物体
二、植物的组织培养
2、植物细胞培养的4种技术
• 组织培养：脱分化成愈伤组织（簿壁细胞）， 再分化为植株
几种重要有机物的检验
有机物质 甲苯 卤代烃 乙醇 苯酚
使用试剂 酸性高锰酸钾溶液 NaOH,AgNO3,HNO3
铜丝 1.浓溴水；2.氯化铁溶液
乙醛 乙酸 乙酸乙酯
葡萄糖 蛋白质
淀粉
银氨溶液或新制 Cu(OH)2 纯碱
水；酚酞和氢氧化钠
新制Cu(OH)2
(1)石油分镏；
(2)制乙酸乙酯； (3)制硝基苯；
(2)石油产品的催化裂化；
(3)煤的干镏；
(4)制酚醛树脂；
返回
返回
返回
石油分馏
石油分馏产品的催化裂化
煤的干馏
三、需要水浴加热的实验
A、制备硝基苯，需要温度计 B、制备酚醛树脂
C、银镜反应（热水浴） D、乙酸乙酯的水解（700C－800C）
(与实验室制氧气,氨气的装置相同) 由于甲烷不溶于水,可用排水法收集.
3、碱石灰的作用。
乙烯的实验室制法：
1、发生装置及收集方法:
（1）选用“液+液 气”的物质制备装 置.(与实验室制氯气,氯化氢的装置相同)
（2）用排水法收集.
2、实验注意事项:
（1）V(乙醇)/V(浓硫酸)=1:3; （2）烧瓶中加入啐瓷片防止爆沸;
（1）试管苗的快速繁殖 （2）无病毒植物的培育 （3）生产药物 （4）人工种子 （5）转基因植物的培育
现在已有胡萝卜、芹菜、柑橘、咖啡、棉花、 玉米、水稻、橡胶等几十种植物的人工种子试种 成功，但由于成本较高，中国尚未应用于生产。
➢植物体细胞杂交
⑴定义： 用两个来自不同植物的体细胞融合成
一个杂种细胞，且把杂种细胞培育成 新的植物体的方法。
去壁方法：
原生质体 融合方法：
酶解法（纤维素酶、果胶酶等） 物理法：离心、振动、电刺激等 化学法：聚乙二醇（PEG）
一、几种有机气体的制备
(1) 甲烷的制备; (2) 乙烯的制备; (3)乙炔的制备;
甲烷的实验室制法：
1、药品:无水醋酸钠(CH3COONa)和碱石灰； 2、发生和收集装置:
使用“固+”型固的物气质制备发生装置.
4、过滤
要分离不溶与可溶的固体，可先将混合物溶于水再过滤
适用范围
除去肥皂中甘油和过量碱 先加食盐盐析，若肥皂凝为 粒状，则过滤，可滤去甘油、
碱的食盐溶液。
（过滤的方法在无机实验中应用较多）
四、有机物的检验
1.溴水
常
2.酸性高锰酸钾溶液
用
3.银氨溶液
试
剂
4.新制的Cu(OH)2碱性悬浊液
5.FeCl3溶液
第二节 植物的克隆
一、植物细胞的全能性
1、定义：植物体的每个生活细胞都具有发育为
完整植株的潜能。
2、原理：生物体的每一个细胞都包含有该物种
所特有的全套遗传物质，都有发育成 为完整个体所必需的全部基因。
3、差异：⑴受精卵的全能性最高
⑵受精卵>卵细胞或花药>干细胞>体细胞 体细胞中植物细胞>动物细胞
一、植物细胞的全能性
⑵优势： 打破了不同种生物间的生殖隔离限制。
即克服远缘杂交不亲和障碍！大大扩 展了可用于杂交的亲本组合范围
植物体细胞杂交 过程示意图
(1)
(2)
(3)
(1)
(4)
(5)
植物体细胞杂交 过程示意图
植物A细胞
原生质体A
去壁
原生质体融合
植物B细胞
原生质体B
杂种植株
细胞分裂 愈伤组织
融合体 再生壁
杂种细胞
（3）迅速升温至170 0c。
乙炔的实验室制法:
1.发生装置:“固+液 气”的制取装置;
2.收集方法:排水法; 3.注意事项:
(1)可用饱和食盐水代替水,以得到平稳气流. (2)不能使用启普发生器,
(3)产物气体中因含有AsH3,PH3而有特殊气味.
二、有冷凝装置的实验
制备实验 性质实验
(1)制溴苯；
二、植物的组织培养
切取
接种
愈伤组织的形成
• 愈伤组织：在人 工培养基上由外 植体长出来的一 团无序生长的薄 壁细胞（细胞排 列疏松、无规 则）。
植物组织培养（试管苗的形成）
培养室
试管苗大规模培养
（1）除去硝基苯中的残酸 （2）除去溴苯中的溴
（3）除去乙酸乙酯中的乙酸 （4）除去溴乙烷中的乙醇 （5）除去苯中的苯酚 （6）除去苯中的甲苯
3、洗气
用液体反应物除去气体中的杂质的方法称为洗气
适用范围
（1）除去甲烷中的乙烯、乙炔气体
（2）除去乙烯中的二氧化碳、二氧化硫气体
（3）除去乙炔中的硫化氢、磷化氢气体
植物克隆的成功需做到： • 深入探讨特定植物细胞全能性的表达条件； • 尽量选择优良、细胞全能性表达充分的基因
型
四、植物克隆的成就
• 细胞培养源自文库器官培养 意义：
受精过程和胚胎发育过程的研究 遗传工程的操作 培育植物新品种 原生质体培养与植物细胞工程 多途径上的植物克隆实践
➢植物组织培养的应用：
• 悬浮细胞培养：愈伤组织在摇床上分散成单 个细胞，再发育成胚状体，形成植株
• 原生质体培养：纤维素酶和果胶酶脱壁，获 得原生质体。转基因受体、细胞融合、利用 全能性诱导为完整植株
• 单倍体培养：花药离体培养
三、植物细胞全能性的体现
• 植物细胞的全能性比动物更容易体现 • 各种植物细胞全能性的表达程度大不相同
在生物体内为什么细胞没有表现出全能性,而是 分化为不同的组织或器官呢?
基因在特定的时间和空间 条件下选择性表达的结果.
一、植物细胞的全能性
4、植物细胞全能性表达的条件 • 离体状态 • 有一定的营养物质、激素、和其他外
界条件。
二、植物的组织培养
1、植物组织培养程序
• 配制培养基（含营养物质和植物生长调 节剂的含0.7~1%琼脂，灭菌凝固）
E、蔗糖的水解（热水浴） F、纤维素的水解（15min，热水浴）
四、有机物的分离、提纯与检验
1、蒸馏
分离相溶的沸点不同的液体混合物可用蒸馏的方法
适用范围
（1）提纯硝基苯 （2）制无水乙醇 （3） 从乙酸和乙醇的 混合物中分离乙醇 （4）石油的分馏
2、分液
分离两种互不相溶的液体，可用分离的方法
适用范围
经过炼 苗的小 苗，可 以和一 般植物 一样进 行大规 模栽培
移栽
离体的植物器官、组织或细胞 （高度分化）
脱分化
无定形状态
愈伤组织（未分化）
薄壁细胞 高度液泡化
再分化
排列疏松、无规则
根、芽 （再分化）
植物体
二、植物的组织培养
2、植物细胞培养的4种技术
• 组织培养：脱分化成愈伤组织（簿壁细胞）， 再分化为植株
几种重要有机物的检验
有机物质 甲苯 卤代烃 乙醇 苯酚
使用试剂 酸性高锰酸钾溶液 NaOH,AgNO3,HNO3
铜丝 1.浓溴水；2.氯化铁溶液
乙醛 乙酸 乙酸乙酯
葡萄糖 蛋白质
淀粉
银氨溶液或新制 Cu(OH)2 纯碱
水；酚酞和氢氧化钠
新制Cu(OH)2
(1)石油分镏；
(2)制乙酸乙酯； (3)制硝基苯；
(2)石油产品的催化裂化；
(3)煤的干镏；
(4)制酚醛树脂；
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石油分馏
石油分馏产品的催化裂化
煤的干馏
三、需要水浴加热的实验
A、制备硝基苯，需要温度计 B、制备酚醛树脂
C、银镜反应（热水浴） D、乙酸乙酯的水解（700C－800C）
(与实验室制氧气,氨气的装置相同) 由于甲烷不溶于水,可用排水法收集.
3、碱石灰的作用。
乙烯的实验室制法：
1、发生装置及收集方法:
（1）选用“液+液 气”的物质制备装 置.(与实验室制氯气,氯化氢的装置相同)
（2）用排水法收集.
2、实验注意事项:
（1）V(乙醇)/V(浓硫酸)=1:3; （2）烧瓶中加入啐瓷片防止爆沸;
（1）试管苗的快速繁殖 （2）无病毒植物的培育 （3）生产药物 （4）人工种子 （5）转基因植物的培育
现在已有胡萝卜、芹菜、柑橘、咖啡、棉花、 玉米、水稻、橡胶等几十种植物的人工种子试种 成功，但由于成本较高，中国尚未应用于生产。
➢植物体细胞杂交
⑴定义： 用两个来自不同植物的体细胞融合成
一个杂种细胞，且把杂种细胞培育成 新的植物体的方法。
去壁方法：
原生质体 融合方法：
酶解法（纤维素酶、果胶酶等） 物理法：离心、振动、电刺激等 化学法：聚乙二醇（PEG）
一、几种有机气体的制备
(1) 甲烷的制备; (2) 乙烯的制备; (3)乙炔的制备;
甲烷的实验室制法：
1、药品:无水醋酸钠(CH3COONa)和碱石灰； 2、发生和收集装置:
使用“固+”型固的物气质制备发生装置.
4、过滤
要分离不溶与可溶的固体，可先将混合物溶于水再过滤
适用范围
除去肥皂中甘油和过量碱 先加食盐盐析，若肥皂凝为 粒状，则过滤，可滤去甘油、
碱的食盐溶液。
（过滤的方法在无机实验中应用较多）
四、有机物的检验
1.溴水
常
2.酸性高锰酸钾溶液
用
3.银氨溶液
试
剂
4.新制的Cu(OH)2碱性悬浊液
5.FeCl3溶液
第二节 植物的克隆
一、植物细胞的全能性
1、定义：植物体的每个生活细胞都具有发育为
完整植株的潜能。
2、原理：生物体的每一个细胞都包含有该物种
所特有的全套遗传物质，都有发育成 为完整个体所必需的全部基因。
3、差异：⑴受精卵的全能性最高
⑵受精卵>卵细胞或花药>干细胞>体细胞 体细胞中植物细胞>动物细胞
一、植物细胞的全能性
⑵优势： 打破了不同种生物间的生殖隔离限制。
即克服远缘杂交不亲和障碍！大大扩 展了可用于杂交的亲本组合范围
植物体细胞杂交 过程示意图
(1)
(2)
(3)
(1)
(4)
(5)
植物体细胞杂交 过程示意图
植物A细胞
原生质体A
去壁
原生质体融合
植物B细胞
原生质体B
杂种植株
细胞分裂 愈伤组织
融合体 再生壁
杂种细胞
（3）迅速升温至170 0c。
乙炔的实验室制法:
1.发生装置:“固+液 气”的制取装置;
2.收集方法:排水法; 3.注意事项:
(1)可用饱和食盐水代替水,以得到平稳气流. (2)不能使用启普发生器,
(3)产物气体中因含有AsH3,PH3而有特殊气味.
二、有冷凝装置的实验
制备实验 性质实验
(1)制溴苯；