茶多酚的含量测定

茶多酚的含量测定
高锰酸钾直接滴定法
目的：掌握高锰酸钾直接滴定法测定茶叶中茶多酚含量的原理及操作
原理
茶叶中茶多酚易溶于热水，在用靛红作指示剂的状况下，样液中能被高锰酸钾氧化的物质基本上都属于茶多酚物质。

依据耗费1mLmL的高锰酸钾相当于茶多酚的换算系数，可计算茶多酚的含量。

仪器与试剂
仪器：剖析天平、电动磁力搅拌器、电热水浴锅、500mL 白瓷皿。

试剂：
1、%靛红溶液：称取靛红1g加入少许水搅匀后，再慢慢加入相对密度为的浓硫酸50mL，冷却后用蒸馏
水定容至1000mL ，假如靛红不纯，可下法磺化办理是：称取靛红1g，加浓硫酸50mL，在80℃烘箱或
水浴中加热磺化4~6h ，用蒸馏水定容至1000mL ，过滤后贮于棕色瓶中。

2、%草酸溶液：正确称取草酸，用蒸馏水溶解后定容至1000mL。

3、高锰酸钾标准溶液：称取AR的高锰酸钾，用蒸馏水溶解后定容至1000mL。

正确汲取%
草酸溶液10mL，放入250ml锥形瓶中（平行3份），加入蒸馏水50mL，再加入相对密度为的浓硫酸10mL，摇匀，在70~80℃水浴中保温5分钟，拿出后用高锰酸钾进行滴定。

开始
慢滴，待红色消逝后再滴第二滴，此后可渐渐加速，边滴边摇，待溶液出现淡红色保持 1 分钟不变即为终点。

计算高锰酸钾溶液的百分比浓度。

测定步骤
1、供测试液的准备：正确称取茶叶磨碎样品 1g，放在250mL锥形瓶中，加入沸蒸馏水
80mL，
在开水浴中浸提30分钟，而后抽滤、清洗，滤液倒入100mL容量瓶中，冷至室温，最后用
蒸馏水定容至100mL，摇匀。

2、测定：取200ml蒸馏水放入白瓷皿中，加入%靛红溶液5mL，
再加入供测试液5mL，开动磁力搅拌器，用已标定的高锰酸钾溶液边搅拌边滴定，滴定速度
以1滴/s为宜，靠近终点时应慢滴。

直到溶液由深蓝色转变成亮黄色为止，记下耗费的高锰
酸钾毫升数。

同时做空白测定。

五、结果计算
式中：X—茶多酚的含量，%，B—空白耗费的高锰酸钾毫升数，mLA—样品耗费的高锰酸钾毫升数，mLω--高锰酸钾的浓度，%，m—样品的质量g，V1—测定用供测试液的体积，mL，V2--供
测试液的体积，mL 酒石酸铁比色法
原理：
茶叶中多酚类物质占茶嫩梢干重的20％～35％，由约30种以上的酚类物质所构成，通称茶
多酚。

按其化学构造分为四类：（1）儿茶素类，属黄烷醇类；（2）黄酮及黄酮醇类；（3）花白素及花青素，即羟基-［4］-黄烷醇及其钾盐；（4）醋酸及缩酚酸类。

此中以黄烷醇类化
合物最重要（占多酚的80％左右）。

纯儿茶素一般为白色无定形粉末，在空气中极易氧化成棕色物，能溶于水、乙醇、甲醇、丙酮、乙酸乙酯等有机溶剂中。

茶多酚能溶于水、乙醇、
甲醇、丙酮、乙酸乙酯，微溶于油脂。

对热、酸较稳固，2%的溶液加热至120℃并保持30min，无显然变化。

在碱性条件下易氧化变质。

酒石酸铁能与茶多酚生成紫褐色络合物，络合物溶液颜色的深浅与茶多酚的含量成正比。

所以能够用比色方法测定。

该法可防止高锰酸钾滴定法所产生的人为视觉偏差。

茶多酚的测定方法有高锰酸钾直接滴定法和酒石酸铁比色法，因为高锰酸钾直接滴定法操作比较复杂，且靠肉眼察看颜色判断终点，假如样品溶液颜色较深时，可能影响测定结果。

本实验将应用酒石酸铁比色法测定茶多酚的含量。

仪器与试剂
仪器：分光光度计
试剂：（1）酒石酸铁溶液：称取FeSO4·7H2O，含4个结晶水的酒石酸钾钠，加蒸馏水溶
解后，用蒸馏水稀释至1000mL（2）的磷酸缓冲液：Na2HPO4·12H2O，·2H2O，加蒸馏水溶解后．用蒸馏水稀释至1000mL．
步骤
（l）样品溶液的制备方法：正确称取茶叶磨碎样品1g于200mL三角烧瓶中，加入开水80mL，在开水浴中浸提30min，而后过滤、清洗，滤液倒人100mL容量瓶中，冷至室温，最后用蒸馏水定容至刻度，摇匀，备用。

摇匀，再加入磷酸缓冲液稀释至刻度。

以蒸馏水取代样品溶液加入相同的试剂作空白。

选择540nm波长和1cm的比色杯测定吸光度。

计算
式中：ω—茶多酚的含量，%，A—样品溶液的吸光度值，T—样品溶液的整体积，mLV—测
定用样品溶液的量，mL，m—样质量量，g—用1cm比色杯，当吸光度为时，试液中茶多酚的浓度为mL
说明及注意事项
1、、磷酸盐缓冲液在常温下简单生长霉菌，放冰箱中保留或临用时现配。

2、样品溶液制备中的注意事项：
（1）较透明的样液，假如味茶饮料，将样液充足摇匀后，直接取样测定
（2）较污浊的样液，假如汁茶饮料、奶茶饮料等，称取充足混匀的样液
50mL容量
25mL于瓶中，加95%的乙醇15mL充足混匀，搁置15min，用水定容至刻度，
过滤。

（3）含有碳酸气的样液，如农民汽茶，量取充足混匀的样液 100mL于250mL的烧杯中，称
取其总量，于电炉上加热至沸，在微沸状态下加热10min，以将二氧化碳清除，放冷，用水
补足本来的质量，摇匀，备用。

测定
正确汲取试液1ml，注人25mL的容量瓶中，加水4ml和酒石酸亚铁溶液5ml，充足混淆，
再加pH7.5磷酸盐缓冲液至刻度，用10mm比色杯，在波长
540nm处，以试剂空白溶液作参比，测定吸光度(A)
高效液相色谱
采纳高效液相色谱法测定绿茶中茶多酚的含量。

在色谱柱为KromasilC18、流动相为乙酸：
甲醇：N,N-二甲基甲酰胺：水=1：1：40：58（V/V）、色谱柱温30℃、进样量10μL、检测
器为紫外检测器、检测波长的色谱条件下对绿茶中茶多酚含量进行测定。