氟喹诺酮类药物在牛奶中残留研究
高效液相色谱同时测定牛奶中4种氟喹诺酮类药物残留
Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｆｏｕｒ ｆｌｕｏｒｏｑｕｉｎｏｌｏｎｅｓ ｉｎ ｍｉｌｋ ｂｙ ｌｉｑｕｉｄ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ［ｊ］．ＡＯＡＣ Ｉｎｔ．１９９７．９０ｆ５）：９８２—９８７． ［３３ Ｄｒａｋｏｐｏｕｌｏｓ Ａ Ｉ，ｌｏａｎｎｏｕ Ｐ Ｃ．ｓｐｅｃｔｒｏｆｌｕｏｒｉｍｅｔｒｉｃ ｓｔｕｄｙ ｏｆ ｔｈｅ ａｃｉｄ—ｂａｓｅ ｅｑｕｉｌｉｂｒｉａ ａｎｄ ｃｏｍｐｌｅｘａｔｉｏｎ ｂｅｈａｖｉｏｒ ｏｆ ｔｈｅ ｆｌｕｏｒｏｑｕｉｎｏｌｏｎｅ ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ ｏｆｌｏｘａｅｉｎ，ｎｏｒｆｌｏｘａｅｉｎ．ｅｉｐｒｏｆｌｏｘａｅｉｎ ａｎｄ ｐｅｆｌｏｘａｃｉｎ ｉｎ ａｑｕｅｏｕｓ ｓｏｌｕｔｉｏｎ［Ｊ］Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ａｎａｌｙｔｉｃａ Ｃｈｉｍｉｃａ Ａｅｔａ，１９９７，３５４（１－３）：１９７—２０４． ［４］Ｗａｌｉｌｙ Ａ ＦＭ，Ｂｅｌａｌ ＳＦ．ＢａｋｒｙＲ Ｓ．ｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｒｉｃ ａｎｄ ｓｐｅｅｔｒｏｆｌｕｏｒｉｍｅｔｒｉｃ ｅｓｔｉｍａｔｉｏｎ ｏｆ ｃｉｐｒｏｆｔｏｘａｅｉｎ ａｎｄ ｎｏｒｆｌｏｘａｃｉｎ ｂｙ ｔｅｒｎａｒｙ ｃｏｍｐｌｅｘ ｆｏｒｍａｔｉｏｎ ｗｉｔｈ ｅｏｓｉｎ ａｎｄ ｐａｌｌａｄｉｕｍ［Ｊ］．Ｊ Ｐｈａｒｍ．Ｂｉｏｍｅｄ．Ａｎｆｌｌ．１９９６．１４（５）：５６ｆ一５６９． Ｉｓ］Ａｒｇｅｋｅｒ Ａ Ｐ，Ｋａｐａｄｉａ Ｓ Ｕ．Ｒａｉ ｓ Ｖ．Ｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｎｏｒｆｌｏｘａｃｉｎ ａｎｄ ｔｉｎｉｄａｚｏｌｅ ｉｎ ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ
氟喹诺酮类药物在牛奶中残留研究
环丙沙星ciprofloxacin
恩诺沙星enrofloxacin*
沙拉沙星sarafloxacin*
二氟沙星difloxacin*
萘啶酸nalidixic acid
氟甲喹flumequine*
氧氟沙星ofloxacin
培氟沙星pefloxacin
达氟沙星danofloxacin*
恶喹酸oxolinic acid*
LC-MS/MS方法研究
仪器 高速分散器：IKA T18；氮气浓缩仪：Zymak TurboVap(r) LV；全 自动固相萃取仪：Gilson ASPEC XL4;Agilent 1100 高效液相色谱 仪；API 2000四极杆串联质谱仪。
标准品 盐酸环丙沙星、甲磺酸培氟沙星、恩诺沙星、沙拉沙星、甲磺酸 达氟沙星和盐酸洛美沙星，为化学对照品，含量大于99.0%，均 由中国兽医药品监查所提供；氧氟沙星、诺氟沙星标准品，购于 Sigma；盐酸二氟沙星对照品，广州惠华动物保健品有限公司提 供；麻保沙星对照品，广东燕塘动物药业有限公司提供。
样品加标回收率
标样2ppb LC-MS/MS MRM谱图
空白牛奶LC-MS/MS MRM谱图
加标 2ppb LC-MS/MS MRM谱图
检测限和定量限
本方法对13种FQs药物的检测限（LOD）和定 量限（LOQ）分别为（ppb）：
麻保沙星0.5(2)；诺氟沙星0.5(2)；氧氟沙星 0.5(2)；培氟沙星0.5(2)；环丙沙星0.5(2)；洛 美沙星0.1(0.5)；达氟沙星0.2(1)；恩诺沙星 0.2(1)；沙拉沙星0.5(2)；二氟沙星0.5(2)；氟 甲喹0.5（2）；恶喹酸0.5(2)；萘啶酸0.1(0.4) 。
洛美沙星lomefloxacin
210978233_基于磺酸基共价有机框架快速测定牛奶中氟喹诺酮类抗生素残留
张璐，姜伟. 基于磺酸基共价有机框架快速测定牛奶中氟喹诺酮类抗生素残留[J]. 食品工业科技，2023，44（7）：269−277. doi:10.13386/j.issn1002-0306.2022050089ZHANG Lu, JIANG Wei. Sulfonic Acid-based Covalent Organic Framework for the Rapid Determination Towards Fluoroquinolone Antibiotic Residues in Milk[J]. Science and Technology of Food Industry, 2023, 44(7): 269−277. (in Chinese with English abstract).doi: 10.13386/j.issn1002-0306.2022050089· 分析检测 ·基于磺酸基共价有机框架快速测定牛奶中氟喹诺酮类抗生素残留张 璐，姜 伟*（南昌市检验检测中心，江西南昌 330000）摘 要：为了拓展基于新型纳米材料的固相萃取技术在复杂食品基质中的应用，本文制备了磺酸基共价有机框架材料（TpPa-SO 3H ），将其作为固相萃取吸附剂，结合高效液相色谱（high performance liquid chromatography ，HPLC ）用于牛奶中3种氟喹诺酮类（fluoroquinolones ，FQs ）抗生素的快速分析。
通过机械研磨法快速制备磺酸基共价有机框架TpPa-SO 3H ，探究其作为新型高效固相萃取吸附剂在FQs 抗生素检测方面的优势。
通过系统研究吸附剂用量、样品溶液pH 、吸附时间和解吸条件等因素，探究材料结构性能对固相萃取效率的影响以及方法重现性和定量分析能力。
结果表明：TpPa-SO 3H 具有超大的比表面积和丰富的磺酸基功能位点，能够与FQs 抗生素实现高效且选择性结合，通过优化，吸附时间为4.0 min 时，萃取回收率为94.23%~98.68%，结果显著优于国家标准方法。
牛奶中抗生素残留的测定方法比较
FOOD INDUSTRY ·125周萌 北京市海淀区疾病预防控制中心牛奶中抗生素残留的测定方法比较进入到机体内部。
在机体新陈代谢时有些药物会产生不良影响，有些药物则没有。
当动物在进行治疗时药物就会在机体内被代谢，在代谢过程中会向不同组织扩散。
因此，抗生素在奶牛体内一般会被代谢出去，但是某些“长期效应”抗生素却很难排出，这就可能会导致牛奶中抗生素残留。
哺乳期乳房处理及残留物的持续。
牛奶中抗生素残留的另外一个原因是奶牛哺乳期乳房处理不当。
奶牛哺乳期很容易发生乳房炎，对于该疾病的处理方法主要有两种，一是进行物理治疗，二是生物治疗。
物理治疗就是每次对奶牛进行挤奶工作以奶液的形式排出，从而降低牛奶中抗生素。
生物治疗就是利用抗生素的高扩散性，使得抗生素能够快速穿过细胞壁进入到血液循环，再通过代谢方式排出。
图1为常见抗生素的副作用及我国允许的最高残留限量。
生素是为了治疗奶牛的疾病而在养殖业中广泛应用，使用过量的抗生素会导致牛奶中抗生素超标。
牛奶中的抗生素残留不仅会导致牛奶的质量下降，而且还会危害食用者的生命健康。
新鲜牛奶中抗生素超标会引发很多问题，因此要提高牛奶中抗生素残留的检测方法。
牛奶中抗生素残留的原因分析目前越来越多的奶牛养殖业使用抗生素治疗奶牛的疾病，但是使用过多的抗生素会导致奶牛的耐药性增强，降低鲜奶的品质。
因此为了保证消费者的健康，就要分析牛奶中抗生素残留的原因。
其主要原因是新陈代谢和药物代谢动力学、哺乳期乳房处理及残留物的持续、干乳期乳房处理。
以下是具体分析：新陈代谢和药物代谢动力学。
牛奶中抗生素超标的原因之一是由于抗生素在机体的新陈代谢。
一般来说，药物都可以通过运输途径抗干乳期乳房处理。
牛奶中抗生素残留的原因还有奶牛干乳期乳房处理不当。
在干乳期要采取特殊的方式处理奶牛的乳房，因为这一时期奶牛停止产奶。
在奶牛的哺乳期过程中其自身的特点和抗生素的形式都会影响奶牛干乳期的乳房处理。
常用检测方法比较为了降低牛奶中抗生素，为了提高牛奶的质量，就要提高牛奶中抗生素残留的检测手段。
原奶中药物多残留现场快速检测技术的研究
Ｃｏ ｒ ｒ ｅ ｓ ｐ ｏ ｎ ｄ ｉ ｎ ｇ ａ ｕ ｔ ｈ ｏ ｒ ：ＨＥ Ｙ ａ ｎ — ｌ ｉ ｎ ｇ
氨基糖苷类抗生素和氟喹诺酮类抗菌药都属于 广谱抗菌药物 ， 由于其疗效好 、 抗菌范围广， 在畜牧 业养殖 中具有不可替代的作用。但这类抗菌药的过 度使用会 引起食 品中残留超量 ， 经人体食用后就会 产生 一 系列 不 良反 应 ， 如 肾毒 性 、 耳 毒性 、 干扰 繁殖 系统 、 影响光敏感性 等， 其中有些是不可逆毒性 。 因此 欧盟 、 美 国食 品与药 品管 理局 （ Ｆ Ｄ Ａ） 、 中国 以及 其他一些国家对这类药物在食品中的残留限量都有 严格的要求。这两类药物 目前最常用的检测方法有 薄层色谱法 １ 、 高效液相 色谱法（ Ｈ Ｐ Ｌ Ｃ ） 、 液相质谱 联用法 、 气相色谱法［ ６ １ 、 毛细管电泳法 、 酶联免疫吸 附分析法［ ８ １ 等。这些方法各具优势， 但都需配相应的
氟喹诺酮类药物残留限量及检测技术研究进展
氟喹诺酮类药物残留限量及检测技术研究进展张运尚，杜加茹，王伟东，樊剑鸣*（郑州大学公共卫生学院，河南郑州 450001）摘 要：氟喹诺酮类药物（FQS）是第3代喹诺酮类抗生素，具有良好的生物利用度和耐受性，不仅对革兰氏阳性菌和阴性菌有杀菌作用，还具有抗真菌和抗病毒活性，因此被广泛应用于治疗畜牧动物养殖过程中的细菌性感染。
但当人类过多食用含有FQS残留的食品后，将会损害身体多个系统并引起细菌耐药性，因此建立灵敏度高、简便的检测方法十分必要。
本文综述了FQS残留的检测标准和常用的检测方法及优缺点，酶联免疫分析法（ELISA）具有灵敏度高、操作简便等优势，预测ELISA法在今后FQS残留检测中发挥重要作用。
关键词：氟喹诺酮类药物；药物残留限量；残留检测技术；酶联免疫分析法中图分类号：S816.7 文献标识码：A DOI编号：10.19556/j.0258-7033.20200516-05氟喹诺酮类药物（Fluoroquinolones，FQS）是第3代喹诺酮药物，其化学结构是在喹啉环的6位上加入了氟原子，7位上连有哌嗪基的一类衍生物，此特点使得原本亲脂性的吡酮类药物增加了适度的亲水性，同时降低了蛋白结合率，提高生物利用度[1-2]。
该类药物通过抑制细菌的DNA和RNA合成从而达到抑菌作用[3]。
相比第1代及第2代喹诺酮药物，FQS的抗菌活性明显增加，抗菌谱显著扩大，对革兰氏阳性菌（金葡球菌、链球菌、肺炎球菌）和革兰氏阴性菌（肠杆菌科、流感杆菌和奈瑟菌属）[4]以及一些衣原体、支原体和螺旋体均有抗菌作用[5]，因此被广泛应用在临床上治疗细菌感染性疾病。
FQS代表药物主要包括恩诺沙星（Enrofloxacin，ENR）、环丙沙星（Ciprofloxacin，CIP）、诺氟沙星（Norfloxacin，NOR）、达氟沙星（Danofloxacin，DAN）、氟罗沙星（Flero xacin，FLE）、沙拉沙星（Saraflaxacin，SFX）、依诺沙星（Enoxacin，EX）等。
液相色谱串联质谱快速测定牛奶中氟甲喹残留量
液相色谱串联质谱快速测定牛奶中氟 甲喹残留量
黄 卫红 孙 棣 ｆ 贵州省产 品质量监督检验院 贵州 贵阳 ５ ５ ０ ０ ０ ３ ）
【 摘 要】 建立快速简便 的牛奶 中氟甲喹的测定方法； 以乙腈为提取剂 ， 正己烷 除脂后 Ｌ Ｃ — ＭＳ ／ ＭＳ 测定 ； 氟甲喹线性范围为 ０ ． ２ ～ ５ ０ ｎ ｇ ／ ｍ Ｌ ， 检 出限为 ０ ． ２ ｇ ／ ｋ ｇ ， 加标平均回收率为 ８ ４ ． ３ ～ １ ０ １ ． ０ ％， Ｒ Ｓ Ｄ 小于 １ ０ ％。该方法定量准确可 靠， 可用于牛奶中氟甲喹的测定。
１ ． 实验 部分
１ ． １ 仪器设备 ６ ２ ． ０ ／ ２ ０ ２ ． ０ Ｙ ＝ ６ ２ ５ ７ ６ ． ４ ＋ ２ ４ １ ９ ４ ６ ｘ Ｒ ＝ ０ ． ９ ９ ９ ７ ０ ． ２ Ｔ Ｓ Ｑ Ｑ ｕ ａ ｎ ｔ ｕ ｉ ｎ Ｕ ｈ ｒ ａ 三重 四级杆质谱 联用仪 ． Ｔ ｈ ｅ ｒ ｌ ｎ ｏ Ｆ ｉ ｓ ｈ ｅ ｒ 公司： 氟 甲喹 ２ 氮气发生器 ． Ｐ Ｅ Ａ Ｋ公 司； Ｍ ｎ ｌ ｔ ｉ ｒ ｅ ａ ｘ 振荡混 匀器 ， Ｈ ｅ ｉ ｅ ｌ ｏ ｌ ｐ ｈ 公司； ｍ ｉ ｌ ｌ ｉ — ２ ． ２ 加标 回收率和精密度 Ｑ Ａ ｃ ａ ｄ ｅ ｍ ｉ ｃ 超纯水系统 ， 密理博 中国有 限公司 ； Ｔ ｕ ｆ ｂ ｏ Ｖ ａ ｐ自动氮吹仪 ， 以三组 阴性 样 品为测试样 品 ， 氟 甲喹 ， 高、 中、 低分别 为 ０ ． ５ 、 ２ ． ０ 、 Ｂ Ｉ Ｏ Ｔ Ａ Ｇ Ｅ公 司 。 １ ０ ． ０ ｎ ｇ ． 每一水平在 相同实验条 件下 做 ６ 个平行 样 ， 计算 回收率及 相 １ ． ２标准品及试 剂 对标准偏差 ， 结果见表 ４ 。 氟 甲喹购 自于 Ｄ ｒ ． Ｅ ｈ ｒ ｅ ｎ ｓ ｆ ｏ ｒ ｆ ｅ ｒ Ｇ ｍ ｂ Ｈ Ｇ ｅ ｒ ｍ ａ ｎ ｙ 。甲酸 、 乙酸 、 乙腈 、 表 ４ 加标 回收率及精密度 （ ｎ ＝ ６） 正 己烷 ： 色谱纯 ． Ｍ ｅ ｒ ｃ ｋ 公司； 超纯水 。 分析物 本底率， ０ ｚ ｇ ／ ｋ ｇ １ 加标量／ （ ｇ ／ ｋ ｓ ） 平均 回收率／ ％ Ｒ Ｓ Ｄ ， ％ １ ． ３ 标准溶液的配制 ０ ． ５ ９ ８ ． ７ ５ ． ３ 储备溶液（ １ ｍ ｇ ／ ｍ Ｌ ） 准确称取 １ ０ ａ ｒ ｇ 氟 甲喹标准 品， 分别用 乙腈定 氟甲喹 Ｏ ． Ｏ ２ ． ０ ９ １ ． ０ ４ ６ 容至 １ ０ ｍ Ｌ ． 配制成 ｌ ｍ ｇ ／ ｍ Ｌ的标准储备液一 ２ ０ ％冰箱保存 ：中间溶液 １ ０ ． Ｏ ８ ９ ． ６ ６ ． １ （ １ Ｏ Ｉ ｘ ｇ ／ ｍ Ｌ ）分别准确量取标准储备液 １ ． Ｏ Ｏ ｍ Ｌ置于 ｌ Ｏ Ｏ ｍ Ｌ 容量瓶 中 ， ２ － ３ Ｌ Ｃ — ＭＳ ／ ＭＳ分 析 用乙腈定容后一 ２ Ｏ ℃冰箱保存 ： 标 准工作 使用液配制 将中间溶液用初 通过对流动相梯度洗脱和离子源参数的优化 ． 使氟甲喹在色谱柱 始 流动 相逐 级 稀 释配 制成 氟 甲喹 分别 为 Ｏ ． ２ ｎ ｇ ／ ｍ Ｌ 、 ０ ． ５ ｎ ｇ ／ ｍ Ｌ 、 １ ． ０ ｎ ｓ ／ 上有合适 的保留并获得 较好 的检测灵敏度 ， 通过对准分子离子二级质 ｍ Ｌ 、 ２ ． ０ ｎ ｇ ／ ｍ Ｌ 、 ５ ． Ｏ ｎ ｇ ／ ｍ Ｌ 、 １ ０ ． Ｏ ｎ ｇ ／ ｍ Ｌ 、 ２ ０ ． ０ ｎ ｇ ／ ｍ Ｌ 、 ５ ０ ． ０ ｎ ｇ ／ ｍ Ｌ ， 一 ２ ０ ℃冰箱保 谱 扫描 ． 发现 主要 碎片离 子为 ２ ６ ２ ． ０ ／ ２ ４ ４ ． ０ 、 ２ ６ ２ ． ０ ／ ２ ０ ２ ～ ０ 三组子 离子 存。 中２ ６ ２ ． ０ ／ ２ ４ ４ ． ０的丰度最强 ． 但其信 噪比却最低 ． 可能 是因为该子离子 １ ． ４样品处理 的产生是 由于母离子脱水形 成 ． 基线噪音 比较高 ， 故最终确定定量离 取样 品 ２ ｇ ， 加入 １ ％乙酸乙腈 ６ ｍ Ｌ振荡提取后 ４ ０ ０ ０ 转离 心 ． 取上 子为 ２ ６ ２ ． ０ ／ ２ ０ ２ ． ０ 、 定性离子 为 ２ ６ ２ ． ０ ／ １ ２ ６ ． ０ ． 三个离子对 的相对丰度 图 清液于离心管 中 ， 重复提取一 次 ， 合并上 清液 ， 加入 ６ ｍ Ｌ正 已烷 涡旋 和色谱图见图 １ 提取后离 心取下 层于离心管中 ４ ５ ℃下氮气 流吹干 ． ２ ｍ Ｌ初始流动相 复溶后加 入 ２ ｍＬ正 己烷涡旋离心后取下层过膜进样 。 ・ １ ． ５ 液相色谱及质谱条件 液 相 色谱 条件 ：色 谱 柱 为 Ｔ ｈ ｅ ｒ ｒ ｎ ０ 一 Ｈ ｙ ｐ ｅ ｒ ｓ ｉ ｌ Ｇ Ｏ Ｌ Ｄ柱 （ ３ ｍｘ ２ ． １ ｍ ｍｘ ｌ ０ Ｏ ｍ ｍ ） ： 柱温 ４ Ｏ ℃： 流速 ０ ． ５ ｍ Ｌ ／ ｍ ｉ ｎ ； 进样 量 １ ０ １ ｘ Ｌ ； 梯度 条件 见表 １ 表 １ 流动相梯度程序 洗脱条件
鲜乳中抗生素残留检验
鲜乳中抗生素残留检验鲜乳中抗生素残留检验张志诚 060409123（常熟理工学院，苏州常熟，215500）摘要：利用TTC快速检测法对牛奶中抗生素检测结果进行比较分析，根据检测结果认为样品牛奶中不含青霉素G类抗生素。
关键词：牛奶；抗生素残留；TTC；青霉素GAbstract：The TTC method is used to detect the antibiotic residue in milk.According to testresults,there’s no Penicillin-G class antibiotic residue.Key words：milk; antibiotic residue; TTC method; Penicillin-G class antibiotic 育，引言随着人们对食品安全问题的逐步关TTC不能还原，试验液为无色状态。
根据待注．长期饮用抗生素残留超标乳制品可能引测牛奶的着色情况判定是否有抗菌素存在。
起的菌群失调、产生耐药性。
该问题已引起该法简便、快速，无需特殊设备，2h～3 h消费者和乳品生产企业的高度重视。
虽然我可见报告。
检测各种抗生素所用的TTC法试国《生鲜牛乳收购标准》中并未对抗生素残验的灵敏度(最低检出量)分别为：青霉素留作出要求．。
但绝大部分乳品生产企业在 0．004U／mL，链霉素0．5 U／mL，庆大霉原料乳收购环节都已开展抗生素残留检测素0．4 U／mL，卡那霉素5 U／mL。
工作。
本文利用TTC法(嗜热链球菌抑制法)对牛奶中抗生素残留进行检测。
2.材料和方法1.原理TTC法，即氯化三苯基四氮唑法(tripheye tetrazolium chloride)，是目前我国食品卫生标准中规定的检查牛乳中抗生素残留的检测方法 (GB5409．85)。
样品经80℃杀菌后加入嗜热链球菌菌液。
培养一段时间后加入TTC( 2,3,5-氯化三苯四氮唑），若样品中不含抗菌素或其浓度低于检测限，试验菌繁殖，TTC被还原，试验溶液变成红色。
高效液相色谱法测定奶牛乳汁中恩诺沙星与环丙沙星残留量
２３ 标 准 曲线 与 线性 范 围的 测 定 ．
在 ８ 支微量离心管中各加 入 ０８ Ｌ空 白乳样 ， ．ｍ 除第一支 管外其余各管依 次加入 ８ Ｌ系列浓度 的恩诺沙星 、环丙沙 星混合标准液 （－ ０ ｇ Ｌ ， ２ ２０ ／ ）旋涡混匀 ， ｍ 使得各样品 中制得 的恩诺 沙星 和环丙沙星的浓度 都为 ００ ～ ｇ Ｌ， 一管不 ．２ ２ ／ 第 ｍ
电子分析 天平 ： Ｅ ６ Ａ １０型 ， 瑞士 Ｍｅｌ 公司 ； ｔｅ ｔｒ 台式高速 离心机 ：８ ４ Ｒ） ８ １Ｒ） ， ５ｏ （ ／ ０ （ 型 德国 Ｅ ｐ ｎ ｏ 公司 ； ５ ｐ ｅｄｒ ｆ 高效液相 色谱仪 ： ｔ ｓ６ ５和 Ｗａ ｒ２７ 荧光检测器 ，美 国 Ｗａ ｒ Ｗａ ｒ２９ ｅ ｔ ｓ４ ５ ｅ ｔｓ ｅ 公 司 ；色 谱柱 ： ｙ ｅ ｉ Ｄ ，．ｍ ５ ｒｍ， ｍ，批 号 ： Ｈ ｐ ｒｌ Ｓ４６ ｍ ｘ２０ ｓＢ ａ ５
３ 标 准 曲线 与 线性 范 围 ． ２
２１ 样 品预 处理 ．
从冰箱 中取 出乳 汁样品 ，自然解冻 ，摇 匀 ，准确吸取
０８ Ｌ乳汁于 ２ Ｌ塑料离心管 ， ． ｍ ｍ 沿管壁轻轻加入 ０ ｍ ． Ｌ乳 汁 ４ 提取液 ， 旋涡混匀 １ ｉ， ａ ｒｎ 直至无絮状 物质 出现 ，２ ０ ｒｍ离 １００ｐ 心 １ｍ ｎ后 ， ０ｉ 取上 清液于棕色进样瓶 中 ， 高效 液相色谱法 供
１ 材 料 与 仪 器
外标法 ， 分别将恩诺沙 星和环丙 沙星的色谱 面积（ 与相 应 Ａ） 药物浓度（ ） ｃ 作标准 曲线 ， 恩诺沙星和环 丙沙星 的标准曲线 、 回归方程和相关系数。
环境友好型方法快速检测牛奶中的六种喹诺酮残留
ｃ ｏ ｍ ｂ ｉ ｎ ｅ ｄ ｉｔ ｗ ｈ ｐ ｏｔ ｒ ｅ ｉ ｎ ｍｉ ｇ ｈ ｔ ｂ ｅ ｄ ｉ ｓ ｓ ｏ ｃ ｉ ａ ｔ ｅ ｄ ， ｗ ｈ ｉ ｃ ｈ ｗ ｏ ｕ ｌ ｄ ｒ ｅ ｓ ｕ ｌ ｔ ｉ ｎ ａ ｈ ｉ ｈ ｇ ｅ ｉｃ ｆ ｉ ｅ ｎ ｃ ｙ ｏ ｎ ｅ ｘ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ ｕｉ ｑ ｎ ｏ ｌ ｏ ｎ ｅ ｓ ｆ ｒ ｏ ｍ ｍｉ ｌ ｋ ｓ ａ ｍ —
Ａｂ ｓ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ ： Ａ ｋ ｉ ｎ ｄ ｏ ｆ ｅ ｎ ｖ ｉ ｒ ｏ ｎ ｍｅ ｎ ｔ ｆ ｒ ｉ ｅ ｎ ｄ ｌ ｙ ｍｅ ｔ ｈ ｏ ｄ ｆ ｏ ｒ ｓ ｉ ｍｕ ｌ ｔ ａ ｎ ｅ ｏ ｕ ｓ ｓ ｅ ｐ ｒａ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ａ ｎ ｄ ｄ ｅ ｔ ｅ ｒ ｍｉ ｎ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ ｓ ｉ ｘ ｑ ｕ ｉ ｎ ｏ ｌ ｏ ｎ ｅ ｓ ｉ ｎ ｍｉ ｌ ｋ ｂ ｙ ｈ ｉ ｇ ｈ ｐ ｅ ｒ ｆ ｏ ｒ ｍａ ｎ ｃ ｅ ｌ ｉ ｑ ｕ ｉ ｄ ｃ ｈ ｏ ｍａ ｒ ｔ ｏ ｇ ｒ ａ ｐ ｈ ｙ ｗ ａ ｓ ｅ ｓ ｔ ａ ｂ ｌ ｉ ｓ ｈ ｅ ｄ ｉ ｎ ｔ ｈ ｉ ｓ ｐ ａ ｐ ｅ ｒ ． Ｔｈ ｅ ｑ ｕ ｉ ｎ ｏ ｌ ｏ ｎ ｅ ｓ ｗｅ ｒ ｅ ｓ ｅ ｐ ｒａ ａ ｔ ｅ ｄ ｏ ｎ ａ ｒ ｅ ｖ ｅ ｒ ｓ ｅ ｄ － ｐ ｈ ａ ｓ ｅ Ｃ ｈ ｏ ｍａ ｒ ｔ ｏ ｒ ｅ ｘ Ｃ１ ｇ ｃ ｏ ｌ ｕ ｍｎ ａ ｎ ｄ ｄ ｅ ｔ ｅ ｃ ｔ ｅ ｄ ｂ ｙ ｄ ｉ ｏ ｄ ｅ ａ ｒ ｒ ａ ｙ ｄ ｅ ｔ ｃｔ ｅ ｏ ｒ ｗｉ ｔ ｈ ｈｅ ｔ ｗ ａ ｖ ｅ ｌ ｅ ｎ ｇ ｔ ｈ ｏ ｆ ２ ８ ０ ｎ ｎ １ ． Ｅ ｘ ｅｒ ｐ ｉ ｍｅ ｎ ｔ ｓ ｈ ｏ ｗ ｅ ｄ ｈａ ｔ ｔ ｐ ｏｔ ｒ ｅ ｉ ｎ ｄ ｅ ｎ ａ ｔ ｕ ｒ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｗａ ｓ ｓ ｌ ｏ ｗ ｂ ｕ ｔ ｆ ｕ ｌ ｌ ｉ ｎ ｔ ｈ ｅ ｍｉ ｘ ｔ ｕ ｒ ｅ ｓ ｏ ｌ ｕ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ ｃ ｉ ｔ ｒ ｉ ｃ ａ ｃ ｉ ｄ ｎｄ ａ ａ ｍｍｏ ｎ ｉ ｕ ｍ ｓ ｕ ｌ ｆ ａ ｔ ｅ ｗ ｉ ｔ ｈ ｓ ｕ ｉ ｔ ａ ｂ ｌ ｅ ｃ ｏ ｎ ｃ ｅ ｎ ｔ ｒ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｓ ． Ｍｅ ａ ｎ ｗｈ ｉ ｌ ｅ ｔ ｈ ｅ ｑ ｕ ｉ ｎ ｏ ｌ ｏ ｎ ｅ ｓ
胶体金免疫层析法快速检测牛奶中氟喹诺酮类药物残留
抗菌药 。该类药物对葡萄球菌 、 肺炎球菌 、 某些厌氧菌 、 支 原体等均有效 ， 特别是对绿脓杆菌效果好 ， 几乎适用于临 床常见 的各种细菌感染性疾病 口 一 。喹诺酮类药物 的作用 机制是抑制细菌的 Ｄ Ｎ Ａ 旋转酶 ， 从而影 响Ｄ Ｎ Ａ的正常形 态与功能 ， 阻碍 Ｄ Ｎ Ａ的正 常复制 、 转录 、 转运与重组 ， 从而 产生快速杀菌作用 。
清液 ， 沉淀用 复溶缓冲液洗涤两次， 用体积为初始胶体金 体积 １ ／ ２ ０ 的复 溶缓冲液将沉淀重悬 ， 得 到的Ｆ Ｑ ｓ 单克隆 抗体一 胶体金标记物溶液的浓度为 ５ ０￣ ｇ ／ ｍ ｌ 溶液 ， 置４ ℃
备用。
１ ． ４ 微孔 试 剂制 备
准确 、 费用低 的特 点 Ｉ Ｓ ｌ 。该研 究以兽医临床上应 用较 广 的Ｆ Ｑ ｓ 作为检测 的 目标 药物 ， 利用胶体金免疫层 析方法
中１ １ 种 氟喹 诺 酮类 药物 残 留 。
关键词 ： 氟喹诺酮类药物 ； 单克隆抗体 ； 试纸条 ； 胶体金
中图分 类号 ： ￥ ８ ５ ９ ． ８ ４ 文献 标识 码 ： Ｂ
文章 编 号 ： １ ０ ０ ４ — ５ ０ ９ ０ （ ２ ０ １ ３ ） ０ ２ — ０ ０ ０ ９ — ０ ４
２ ０ 世纪 ８ Ｏ 年代 发 展 起来 的一 项 新 技 术 ， 具有 简 便 、 快速 、
中加入上述 Ｆ Ｑ ｓ 单克隆抗体 ， 继续搅拌混匀 ３ ０ ａ ｒ ｉ ｎ ， 加入 １ ０ ％Ｂ Ｓ Ａ至 Ｂ Ｓ Ａ在胶体金溶液 中的终浓度为 ｌ ％（ 体积百
分含量 ） ， 静置 ３ ０ｍ ｉ ｎ 。１ ２ ０ ０ ０ ｒ ｐ ｍ、 ４ ℃离心 ３ ０ ｍ ｉ ｎ ， 弃上
基质固相分散-牛奶、蜂蜜中喹诺酮的多残留分析
２ Ｄｅ ａ ｔ ｎ ｆＣｈ ｍｉ ｔ ｙ ． ｐ ｒ ｍｅ ｔｏ ｅ ｓ ｒ ，Ｂａ ｄ ｎ ｉｅ ｓ ｔ ｏ ｉ ｇ Ｕｎ ｖ ｒ ｉ ｙ，Ｂａ ｄ ｎ ７ ０ ，Ｃｈ ｎ ） ｏ ｉ ｇ０ １ ５ １ ｉａ
ｄ ｖ ｌｐ ｄ ｂ ｓｎ ｔｉ ｏ ｉ— ｈ ｓ ｉｐ ｒ ｉｎ ｔ ｃ ｎ ｌ ｇ ｓ ｓ ｍｐ ｅ ｐ ｅ ｒａ ｍｅ ｔ ｆ ｌ ｗｅ ｙ ｌ ｕｄ ｅ ｅｏ ｅ ｙ ｕ ｉｇ ｍａ ｒｘ ｓ ｌ ｐ ａ ｅ ｄｓ ｅｓｏ ｅ ｈ ｏ ｏ ｙ ａ ａ ｌ ｒ ｔｅ ｔ ｎ ｏｌ ｄ ｏ ｄ ｂ ｉ ｉ ｑ
ＮＯ ２ ０ Ｖ． ０ ８
基 质 固相 分 散 一牛奶 、 蜂蜜 中喹诺 酮 的多残 留分 析
乔凤 霞 ，孙 汉文 ，刘广 宇 ，梁 淑 轩
（．河 北 大 学 化 学 与环 境 科 学 学 院 ， 北省 分析 科 学 技 术 重点 实验 室 ， 北 保 定 １ 河 河 ２． 定 学 院 化 学 系 ， 保 河北 保 定 ０ １５ ） ７ ０ １ ０１０ ； ７ ０ ２
ｃ ｏ ａｏ ａ ｈｒ ｍ ｔ ｇｒ ｐｈｙ ａ ｌ ｏ ｅ ｃ ｎｃ ｅ ｅ ｔｏ ｎｄ ｆｕ ｒ ｓ ｅ ｅ ｄ ｔ ｃ ｉｎ． Ｔｈｅ ｐａ ａ ｔ ｒ ｆｍ ａ ｒ ｘ ｓ ｌｄ ｐｈ ｓ ｉｐｅ ｓｏｎ ａ ｈ ｏｍａ ｒ ｍｅ ｅ ｓ ｏ ｔ ｉ ｏ ｉ — ａ ｅ ｄ ｓ ｒ ｉ ｎｄ ｃ ｒ —
Ａｂ ｔａ ｔ Ａ ｅ ｍｅ ｈｏ ｏｒｔ ｉ ｕ ｔ ｎ ｏ ｅ ｅ ｍ ｉ ｔｏ ｏ ｏｕ ｕｉ ｏｌ ｎ ｓ ｉ ｌ ｎｄ ｈｏ ｅ ｓ ｓｒ ｃ ： ｎ ｗ ｔ ｄ ｆ ｈｅ ｓｍ ｌａ ｅ ｕｓ ｄ ｔ ｒ ｎａ ｉｎ ｆｆ ｒ ｑ ｎ ｏ ｅ ｎ ｍｉｋ ａ ｎ ｙ ｗａ
牛奶中激素检测方法的研究进展
牛奶中激素检测方法的研究进展发布时间：2022-10-28T06:49:11.777Z 来源：《科技新时代》2022年12期作者：林红娜张伟健[导读] 三聚氰胺含氮量很高，达到６６％，因此被不法商贩非法添加到动物饲料和原料奶中，假冒增加蛋白质的含量林红娜张伟健烟台市华宇人力资源有限公司山东烟台264003烟台市标准计量检验检测中心山东烟台264003烟台市华宇人力资源有限公司山东烟台264003烟台市标准计量检验检测中心山东烟台264003摘要：三聚氰胺含氮量很高，达到６６％，因此被不法商贩非法添加到动物饲料和原料奶中，假冒增加蛋白质的含量。
三聚氰胺是环丙氨嗪的一种降解产物，高剂量的三聚氰胺可导致肾结石和肾衰竭。
环丙氨嗪（Ｃｙｒ）是一种三嗪类昆虫生长抑制剂，广泛应用于畜禽业中控制苍蝇和蛆。
环丙氨嗪的过度使用会导致动物源食品污染，产生一系列潜在的环境问题，并且通过食物链的富集作用危害人类健康。
已有研究证实它能引起小鼠乳腺肿瘤。
因为，动物源食品在进入市场前必须按照国家标准对环丙氨嗪和三聚氰胺的残留进行检测，所以如何现场检测环丙氨嗪和三聚氰胺的残留已成为动物源性食品和原料奶生产的热点问题。
美国ＦＤＡ将在动物源食品中环丙氨嗪的最大残留限量（ＭＲＬｓ）设定为０．０５～０．５μｇ·ｋｇ－１；中国规定原料奶中三聚氰胺的安全限量为２．５ｍｇ·Ｌ－１。
关键词：牛奶;激素;免疫分析法引言牛奶具有高蛋白质和高脂肪含量，是日常生活中必不可少的营养品之一。
自“三聚氰胺奶粉”“老酸奶工业明胶”“塑化剂超标”等事件发生后，奶粉及牛奶等奶制品的质量安全问题越来越受到公众的质疑与关注，上述事件多属于奶制品加工过程中添加违禁物以提高其“质量”。
除此之外，奶制品的生产源头面临更严峻的考验和挑战，即原料奶的质量安全问题，主要表现为牛奶中激素残留，来源于养殖过程中用于预防和治疗动物疾病，或是在饲料添加剂中的激素超剂量滥用和不合理配比使用等，导致药物在奶牛体内的正常代谢受到严重影响，使得原料奶中形成了对人体有害的残留物质。
恩诺沙星及其代谢产物在奶牛乳中的消除规律
Depletion of Enrofloxacin and Its Metabolite in the Milk of Lactating Cows
LIAO Jie-dan1,2, LI Shou-jun1, DING Huan-zhong1, LIU Wen-zi1, YU Jing-xian1, ZHANG Jia-hui1, LIU Ya-hong1
收稿日期：2008-01-16；接受日期：2008-12-08 基金项目：国家自然科学基金（30471308）；广州市科技计划项目（2005J1-C0111） 作者简介：廖洁丹（1979－），女，广东潮州人，硕士，研究方向为兽医药理学与毒理学。Tel：0757-85505213；E-mail：liaojiedan@。通信
(1College of Veterinary Medicine, South China Agricultural University, Guangzhou 510642; 2 College of Life Science, Foshan University, Foshan 528000, Guangdong)
在此工作条件下，恩诺沙星和环丙沙星的浓度在 0.01～0.80 µg·ml-1 范围内乳汁标准曲线线性关系良好 （r=0.9991～0.9999）；乳汁中的回 收率分别为 ： 91.88%～103.60%，93.15%～106.82%；样品测定的批 内变异系数小于 7.7%，批间变异系数小于 10%。在牛 奶中的检测限为 10 ng·ml-1。 1.6 数据处理
作者刘雅红（1966－），女，黑龙江泰来人，教授，博士，研究方向为兽医药理学与毒理学。Tel：020-85287189；E-mail：gale@
乳与乳制品中抗生素残留危害及治理对策
乳与乳制品中抗生素残留危害及治理对策摘要介绍了乳与乳制品中抗生素残留的危害，分析了其来源，并提出了治理对策，以期为乳制品安全工作提供参考。
关键词乳与乳制品；抗生素残留；危害；对策乳与乳制品已经成为食品行业中最大行业，我国整个乳制品市场将达到200亿美元的规模。
然而三聚氰胺、OMP等事件的发生对整个乳制品行业产生巨大的打击，消费者对于乳与乳制品等消费安全问题仍心有余悸，而国外乳品企业趁机抢占我国市场[1]。
虽然经过这2年的重新发展，国内乳制品企业正在迅速恢复，然而也应该吸取经验教训，重视乳品企业中另一潜在威胁因素——抗生素。
在乳制品行业中，由于抗生素残留，用于制作酸奶制品的原料大都采用国外进口奶粉，而且在前2年，一些企业推出“无抗奶”等产品，这一不科学、不符合实际的情况存在也是针对有些企业的乳制品中抗生素含量严重超标的现实提出的[2]。
因此，企业、国家相关部门应加大对乳与乳制品中抗生素残留的监管和相关政策的宣传。
1乳与乳制品中抗生素残留的危害1.1影响乳制品加工原料乳中抗生素残留物超标将严重干扰发酵乳制品的生产，还可严重影响干酪、黄油、发酵乳的起酵和后期风味的形成，从而对乳品企业造成巨大经济损失。
1.2引发人体超敏反应目前，在乳与乳制品中，主要的抗生素残留包括青霉素类、四环素类、氨基糖苷类、福诺酮类药物等。
经常食用低剂量青霉素、四环素及某些氨基苷类抗生素等残留的食品，能使易感的人群出现超敏反应。
严重者可引起休克，短时间内出现血压下降、皮疹、喉头水肿、呼吸困难等严重症状。
青霉素类是最容易引起超敏反应的一类抗生素；此外，四环素、链霉素等抗生素有时也能引起超敏反应。
青霉素具有半抗原特性，进入机体后，轻者表现为接触性皮炎和皮肤反应，严重者可表现为致死性过敏休克；四环素的变应原性反应比青霉素低，但四环素可引起过敏和荨麻疹。
1.3导致耐药性菌株的形成经常食用低剂量抗生素残留的食品可使细菌形成耐药性。
动物在经常反复摄入某一种抗生素后，体内将有一部分敏感菌株逐渐形成耐药菌株，这些耐药菌株可通过动物性食品进入人体。
胶体金免疫层析法快速检测牛奶中氟喹诺酮类药物残留
Ｍａ ｎａ ｇ ｅ ｍｅ ｎ ｔ Ｓ ｏ ｆ ｔ ｗａ ｒ ｅ ｏ ｎ Ｄａ ｉ ｒ ｙ Ｆａ ｒ ｍ
Ｘ Ｕ Ｓ ｈ ｕｏ ， Ｗ ＡＮ Ｇ Ｊ ｉ ａ ｎ — ｐｉ ｎ ｇ
牛奶中残留抗生素的快速检测方法研究
牛奶中残留抗生素的快速检测方法研究作者：刘雪莹来源：《中国新技术新产品》2013年第06期摘要：本文以新的方式将电化学生物传感器用于分析检测和鉴定牛奶中残留的抗菌药物。
这种测量以生成二氧化碳的速率为基础，其中二氧化碳生成的速率与微生物生长（大肠杆菌 ATCC 11303）的抑制有关。
在本试验研究中，考虑了喹诺酮和四环素类残留物。
例如，与传统的筛查法，细菌抑制法和免疫测定法相比，本文研发的实验与分析方法具有如下优势：（i）分析所费时间非常短（大约120分钟）；（ii）样本量较小（大约为0.5mL）；（iii）不需要处理样本；（iv）精确度高；以及（v）可能会连续地跟踪抑制过程。
此外，电化学生物传感器系统的灵敏度极高。
关键词：食品中残留的抗菌药物；喹诺酮；四环素；牛奶；筛查法；电化学传感器分析1概述抗菌药物被广泛应用于治疗养殖动物，有时也被作为生长促进剂使用[1]。
这些药物的大量利用必然导致食品中留有残留物。
抗菌药物残留物的存在引起了人们对消费者健康的关注。
主要考虑对象为：（i）对接触过的个体可能产生的过敏性敏化作用；（ii）抗菌药物残留物甚至在浓度低于最高残留限量时也有可能对人体肠道施加选择性压力；（iii）选择抗药性细菌的可能性。
根据高性能的非侵入性二氧化碳传感器的具体应用情况，人们研发了电化学传感器系统，以可靠、快速、低成本的研究微生物学过程。
在本研究中，作者将二氧化碳传感器用于检测和鉴定牛奶中残留的喹诺酮和四环素。
这种测量以生成二氧化碳的速率为基础，其中二氧化碳生成的速率与敏感菌生长的抑制有关。
本文针对喹诺酮和四环素开展了实验研究，因为人们认为应特别关注牲畜生产中最后使用的这些物质，而且这些物质能够治疗通过食物链把动物源性细菌传播至人体而导致的各种人体感染（包括胃肠道感染）。
对喹诺酮和四环素的耐药性会限制许多感染的药物选择。
此外，对这两种药物具有耐药性的生物体通常也会对其它类别的抗菌药物产生耐药性。
MALDI-TOF-MS技术筛选牛奶中氟喹诺酮类药物
MALDI-TOF-MS技术筛选牛奶中氟喹诺酮类药物张金玲;李凯;孙军;房灵军;赵晗;丁葵英;张启迪【期刊名称】《食品研究与开发》【年(卷),期】2013(000)023【摘要】前处理过程是整个食品安全检测过程中最耗时耗力，最繁琐，并且最影响检测结果的一环。
开发高效快速省时省力的前处理方法是未来的研究方向。
本文建立基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDI-TOF-MS）技术快速筛选牛奶中25中氟喹诺酮类药物残留的方法。
将样品和基质混合点于靶板之上，直接进入基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱进行测定，省去了繁琐的前处理过程。
当牛奶中氟喹诺酮类药物残留量超过0.05 mg/kg时，可以有效检测到25种氟喹诺酮类药物残留中的18种。
【总页数】5页(P52-55,56)【作者】张金玲;李凯;孙军;房灵军;赵晗;丁葵英;张启迪【作者单位】潍坊出入境检验检疫局，山东潍坊261041;潍坊出入境检验检疫局，山东潍坊261041;潍坊出入境检验检疫局，山东潍坊261041;滨州六和隆达农牧有限公司，山东滨州256600;潍坊出入境检验检疫局，山东潍坊261041;潍坊出入境检验检疫局，山东潍坊261041;青岛农业大学动物科技学院，山东青岛266109【正文语种】中文【相关文献】1.MALDI-TOF-MS成像技术及其在法医损伤标志物筛选中的应用 [J], 刘宁国;陈忆九2.基于2D-DIGE/MALDI-TOF-MS技术筛选奶牛低血钙症生物标志物 [J], 舒适;夏成;张洪友;许楚楚;李昌盛;肖鑫焕;王刚;白云龙3.高效液相色谱荧光检测法测定牛奶中4种氟喹诺酮类药物残留 [J], 廖洁丹;李智丽;张济培;陈建红;杨鸿4.牛奶中氟喹诺酮类药物残留同步快速检测的酶联免疫吸附法研究 [J], 李燕君; 谭梅; 岳秀英; 陆强; 吴晓岚; 吕晓华5.牛奶中氟喹诺酮类药物残留的HPLC检测方法研究 [J], 宫秀杰;萨仁高娃;阿力腾才斯克;史梅因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
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饶勇
raoyong23@
一、概述
氟喹诺酮类 (fluoroquinolones, FQs) 药物是第三代喹诺酮类(quinolones,
QNs)药物，其主要作用机制是抑制细菌的DNA螺旋酶，因其抗菌谱广、 抗菌力强、组织穿透力强、不良反应少而且价格较低而被广泛的应 用于人类及动物感染性疾病的预防和治疗。
肌肉、皮、肝、肾
300、400、1900、600
肌肉、脂肪、肝、肾、奶 100、100、300、200、100
肌肉、脂肪、肝、肾
100、100、200、300
肌肉、皮、肝、肾
100、100、200、300
肌肉、皮、肝、肾
100、100、200、300
肌肉、脂肪、肝、肾
100、100、300、200
肌肉、脂肪、肝、肾
19.22
0
1
2
3
4
5
6
7
8
9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20
Time, min
检测限和定量限
本方法对13种FQs药物的检测限（LOD）和定 量限（LOQ）分别为（ppb）：
麻保沙星0.5(2)；诺氟沙星0.5(2)；氧氟沙星 0.5(2)；培氟沙星0.5(2)；环丙沙星0.5(2)；洛 美沙星0.1(0.5)；达氟沙星0.2(1)；恩诺沙星 0.2(1)；沙拉沙星0.5(2)；二氟沙星0.5(2)；氟 甲喹0.5（2）；恶喹酸0.5(2)；萘啶酸0.1(0.4)。
LC-MS/MS条件
色谱条件
色谱柱：Nucleodur 100-3 c18
保护柱：zorbax xdb-c8 2.1×12.5mm
进样量：20μL。
流动相：0.1%甲酸（A）和0.1%甲酸乙睛（B）
梯度洗脱
Step
Total Time
Flow Rate A (%)
B (%)
(min)
(µl/min)
Difloxacin 牛
猪
鸡/火鸡
Enrofloxacin 牛
+
兔
Ciprofloxacin 猪
禽
羊
Flumequine 牛/羊/猪
/鸡
鲑鱼
Oxolinic acid 牛
猪/鸡
养殖鱼
Sarafloxacin 鸡
鲑鱼
肌肉、皮、肝、肾
400、100、140、0800
肌肉、皮、肝、肾
400、100、800、800
0
0.00
300
87.0
13.0
1
10.00
300
20.0
80.0
2
10.01
300
87.0
13.0
3
20.00
300
87.0
13.0
质谱条件
扫描方式：多级反应监测（MRM）；正离子；ESI源。
CUR： CAD： IS：
20.00 5.00 5500.00
GS2： GS1： TEM：
20.00 20.00 500.00
残留危害
过敏反应 肝毒性和肾毒性 软骨损伤 潜在的致癌性 破坏消化道微生物的群落结构 耐药性
鸡源大肠杆菌的对9种氟喹诺酮类药物的耐药率
喹诺酮类药物 Gatifloxacin
沙拉沙星 恩诺沙星 环丙沙星 二氟沙星 达氟沙星 左氟沙星 奥比沙星
萘啶酸
耐药率 11% 69% 69% 55% 76% 69% 13% 76% 99%
9.52
1
2
3
4
5
6
7
8
9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20
Time, min
加标 2ppb LC-MS/MS MRM谱图
In te n s ity , c p s
XIC of +MRM (26 pairs): 262.0/244.1 amu from Sample 10 (liver+2ppb) of Data0420.wiff
XIC of +MRM (26 pairs): 262.0/244.1 amu from Sample 7 (liver0ppb) of Data0420.wiff 5500
Max. 740.0 cps.
5000
4500
4000
3500
3000
2500
2000
1500
1000 500 0
9.25
2.59 2.10
标准品 盐酸环丙沙星、甲磺酸培氟沙星、恩诺沙星、沙拉沙星、甲磺酸 达氟沙星和盐酸洛美沙星，为化学对照品，含量大于99.0%，均 由中国兽医药品监查所提供；氧氟沙星、诺氟沙星标准品，购于 Sigma；盐酸二氟沙星对照品，广州惠华动物保健品有限公司提 供；麻保沙星对照品，广东燕塘动物药业有限公司提供。
样品前处理过程
Max. 1260.0 cps.
1960 1900
1800
1700
1600
1500
1400
1300 1200
10.95
1100
1000 900
9.49
800
700
600
500
400
300Biblioteka 2.489.28200 100 1.13
3.76
7.10 7.50 8.93
10.22 11.77
14.47 16.58 17.44
13种氟喹诺酮类药物MRM离子对、CE和CEP
测定物质 氟甲喹 恶喹酸 萘啶酸
诺氟沙星 麻保沙星 环丙沙星 恩诺沙星 沙拉沙星 二氟沙星 氧氟沙星 培氟沙星 洛美沙星 诺氟沙星
母离子 （m/z） 262.00
262.0 233.1 320.0 363.0 332.1 360.3 386.1 400.1 362.1 334.1 352.1 358.1
子离子（m/z）
244.10 201.90 216.0 244.1 215.1 187.1 276.0 302.0 262.0 320.0 288.0 245.0 245.1 316.0 342.0 299.0 356.0 299.0 261.0 318.0 233.0 290.0 265.0 308.0
提取 吸取牛奶1.0 mL于2.0 mL聚丙烯离心管中，加入30%乙腈三氯乙
酸0.5 mL，涡旋混匀15 sec，15 000 g离心6 min；下层残余物中 加入蒸馏水1.0 mL及30%乙腈三氯乙酸0.5 mL，涡旋，离心，重复 提取一次，合并上清液为SPE净化样液。 SPE净化（GILSON全自动固相萃取）
麻保沙星marbofloxacin* 环丙沙星ciprofloxacin 沙拉沙星sarafloxacin* 萘啶酸nalidixic acid 氧氟沙星ofloxacin 达氟沙星danofloxacin* 洛美沙星lomefloxacin
诺氟沙星norfloxacin 恩诺沙星enrofloxacin* 二氟沙星difloxacin* 氟甲喹flumequine* 培氟沙星pefloxacin 恶喹酸oxolinic acid* *表示畜禽专用
肌肉、脂肪、肝、肾
ADI：0-24
泌乳牛禁用
鸡
肌肉、皮、肝、肾
猪
肌肉、皮、肝、肾
MRL（ppb）
200、100、400、400
200、100、400、400 100、50、200、200
二氟沙星 Difloxacin ADI:0-10 恩诺沙星 Enrofloxacin ADI: 0-6.2
氟甲喹 Flumequine ADI: 0-8.25 恶喹酸 Oxolinic acid ADI：0-1.2 沙拉沙星 Sarafloxacin ADI:0-0.4
50、50、100、300
肉+皮
肌肉、脂肪、肝、肾 肌肉、皮、肝、肾
肌肉+皮
皮、肝
肉+皮
150
100、50、150、150 100、50、150、150
300
10、100
30
LC-MS/MS方法研究
仪器 高速分散器：IKA T18；氮气浓缩仪：Zymak TurboVap(r) LV；全 自动固相萃取仪：Gilson ASPEC XL4;Agilent 1100 高效液相色谱 仪；API 2000四极杆串联质谱仪。
25.0 25.0 25.0 25.0 20.0 20.0 22.0 22.0 28.0 28.0 24.0 24.0 25.0 25.0 25.0 25.0 24.0 35.0 27.0 27.0 22.0 22.0 23.0 26.0 28.0 30.0
样品加标回收率
标样 Mar nor cip dan enr sar dif oxo nal flu pef ofl lom
标样2ppb LC-MS/MS MRM谱图
In te n s ity , c p s
XIC of +MRM (26 pairs): 262.0/244.1 amu from Sample 1 (2ppb-st) of Data0420.wiff
Max. 1620.0 cps.
2300 2200
2000
我国动物性食品中氟喹诺酮的最高残留限 量（MRL，μg/kg）
美国：禁止该类药物用于食品动物 欧盟：计划到2006年全面禁止抗生素在食品动 物中的使用 中国：农牧发[1999]17号规定了最高残留限量
残留限量（农牧发[1999]17号）
药物
残留标示物 动物 组织
达氟沙星Danofloxacin Danofloxacin 牛