第七章 免疫电泳技术 一、选择题

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2.火箭免疫电泳技术是单向免疫扩散与电泳相结合的一项技术,其原理是含于琼脂凝胶中 的抗体不发生移动,样品孔中的抗原泳向阳极,在抗原抗体比例恰当处发生结合沉淀。随着 泳动抗原含量的逐渐减少,抗原泳动的基底区越来越窄,抗原抗体分子复合物形成的沉淀线 逐渐变窄,形成峰状的沉淀区,状似火箭。抗体浓度保持不变,峰的高度与抗原量呈正相关。
三、名词解释 1.免疫电泳技术是琼脂内电泳与免疫扩散相结合的一种常用的免Βιβλιοθήκη Baidu学实验方法。
四、简答题 1.对流免疫电泳实质上是定向加速度的免疫双扩散技术,其基本原理是:在琼脂板上打两 排孔,左侧各孔加入待测抗原,右侧孔内放入相应抗体,抗原在阴极侧,抗体在阳极侧。通 电后,带负电荷的抗原泳向阳极抗体侧,而抗体藉电渗作用流向阴极抗原侧,在两者之间或 抗体的另一侧(抗原过量时)形成沉淀线。
D.免疫固定电泳 E.免疫印迹技术 1.单向免疫扩散与电泳相结合的技术 2.双向免疫扩散与电泳相结合的技术 3.区带电泳与免疫沉淀反应相结合的技术 4.区带电泳与免疫双扩散相结合的技术
二、填空题 1.免疫电泳技术是( )和( )相结合的一种免疫化学分析技术。 2.免疫电泳主要应用于( )和( ) 等方面。 3.蛋白质在电场中的泳动方向与其 pI 和缓冲液的 pH 有关,在 pH8.4 以上的缓冲液中,大 部分蛋白质将向( )泳动。 4.火箭免疫电泳中,若保持抗体浓度不变,则待测抗原的量与( )呈正相关。
3.免疫电泳为区带电泳与免疫双扩散的结合的一种免疫化学分析技术,其原理是先利用区 带电泳技术将不同电荷和分子量的蛋白抗原在琼脂内分离开,然后与电泳方向平行在两侧开 槽,加入抗血清。置室温或 37℃使两者扩散,各区带蛋白在相应位置与抗体反应形成弧形 沉淀线。
4.免疫固定电泳原理是血清蛋白质在琼脂糖凝胶介质上经电泳分离后,将抗血清直接加于 已分离的蛋白质泳道上,或将浸有抗血清的滤纸贴于其上,抗原与对应抗体直接发生沉淀反 应,形成的复合物嵌于固相支持物中。将未结合的游离抗原或抗体洗去,经染色后出现被结 合固定的某种蛋白。
三、名词解释 1.免疫电泳技术
四、简答题 1. 简述对流免疫电泳的基本原理。 2. 简述火箭免疫电泳的基本原理。 3. 简述免疫电泳技术的基本原理。 4. 简述免疫固定电泳的基本原理。
五、论述题 1.常用的免疫电泳技术有哪些?进行血清中 M 蛋白的鉴定与分型应选择哪种技术较合适,并 简述其具体操作步骤。
D. pg/ml E. 只能定性,不能定量 8. 火箭免疫电泳的特点是: A.抗原、抗体复合物形成状如火箭的沉淀峰 B.电泳时间大大缩短 C.灵敏度有极大的提高 D.电流逐渐减小 E.电流方向有规律地改变 9.火箭免疫电泳中,抗原、抗体的泳动方向是: A.琼脂凝胶中的抗体不移动,样品孔抗原向阴极泳动 B.琼脂凝胶中的抗体不移动,样品孔抗原向阳极泳动 C.琼脂凝胶中的抗原不移动,样品孔抗原向阴极泳动 D.琼脂凝胶中的抗原不移动,样品孔抗原向阳极泳动 E.抗原、抗体均向正极泳动 10.火箭免疫电泳中,待测抗原的量与下列哪项呈正相关? A.沉淀峰宽度 B.沉淀峰面积 C.沉淀峰高度 D.沉淀峰高度的对数 E.沉淀峰高度的平方 11.火箭免疫电泳时,沉淀峰顶部呈不清晰的云雾状提示: A.抗原不纯 B.抗体不纯 C.抗原过量 D.电流过大 E.电泳未达终点 12.免疫电泳适宜于: A.蛋白质定量 B.蛋白质分子量分析 C.蛋白质纯化 D.蛋白组分分析 E.蛋白质浓度测定 (二)、A1 型题(否定题) 1.相对其它免疫电泳,下列哪项不是免疫固定电泳的优势? A.分辨力强 B.敏感性高 C.操作需时短 D.能准确定量 E.结果易于分析 (三)、B1 型题(配伍题) 问题 1~4 A.免疫电泳 B.对流免疫电泳 C.火箭免疫电泳
第七章 免疫电泳技术 一、选择题 (一)、A1 型题(标准题) 1. 免疫电泳中电流的作用是: A.改变抗原抗体的运行方向 B.抑制抗原、抗体的扩散 C.加速抗原、抗体的扩散并规定其运行方向 D.使沉淀弧更明显 E.使沉淀弧位置离待测孔更远些,以便观察 2. 电渗是指: A.电场中抗原相对于抗体的移动 B.电场中缓冲液离子对固体的相对移动 C.电场中抗原对固体的相对移动 D.电场中抗体对固体的相对移动 E.电场中液体对固体的相对移动 3. 免疫电泳时,常用的琼脂糖凝胶载体的浓度是: A.0.5% B.0.5%-0.8% C. 0.8%-1.0% D. 1.5% E. 2.0% 4. 对流免疫电泳的原理是: A.双向免疫扩散与电泳相结合的定向加速的免疫扩散技术 B.单向免疫扩散与电泳相结合的定向加速的免疫扩散技术 C.单向免疫扩散与两相反方向的规律改变的电流相结合的免疫扩散技术 D.双向免疫扩散与两相反方向的规律改变的电流相结合的免疫扩散技术 E.抗原、抗体反应与电泳相结合的定向加速的免疫扩散技术的统称 5. 对流免疫电泳中,若待测抗原在阳极侧孔,已知抗体在阴极侧孔,抗原、抗体泳动方向 分别是: A.抗原向阳极侧泳动,抗体向阴极侧泳动 B.抗原向阴极侧泳动,抗体向阳极侧泳动 C.抗原、抗体均向阳极侧泳动 D.抗原、抗体均向阴极侧泳动 E.抗原向阴极侧泳动,抗体一部分向阴极侧泳动,一部分向阳极侧泳动 6. 对流免疫电泳中,泳向阴极侧的 Ig 是: A. IgG1,IgG2 B. IgG3,IgG4 C. IgG1,IgG3 D. IgG1,IgG4 E. IgG2,IgG4 7. 对流免疫电泳可测出的蛋白质抗原的浓度可达: A. mg/ml B. μg/ml C. ng/ml
标准答案 一、选择题 (一)、A1 型题(标准题) 1.C 2.E 3.C 4.B 5.E 6.A 7.B 8.A 9.B 10.C 11.E 12.D (二)A1 型题(否定题) 1.D (三)、B1 型题(配伍题) 1.C 2.B 3.D 4.A 二、填空题 1.琼脂内电泳 免疫扩散 2.纯化抗原和抗体成分的分析 正常和异常免疫球蛋白的识别与鉴定 3.正极 4.沉淀峰的高度
五、论述题 1. 常用的免疫电泳有技术对流免疫电泳,火箭免疫电泳,免疫电泳,免疫固定电泳技术。 血清中 M 蛋白的鉴定与分型可选用免疫固定电泳技术,方法如下:先将患者血清或血浆在醋 纤膜上或琼脂上作区带电泳(一般作 6 条标本),达到预定时间后取下,参考泳道加蛋白质 固定剂,用于区带对照,余 5 条泳道上分别加入抗 IgG、抗 IgA、抗 IgM、抗κ轻链和抗λ 轻链的抗血清,作用 30min 后洗去游离蛋白质,抗原抗体复合物则被保留,染色后蛋白质电 泳参考泳道和抗原抗体沉淀区带被氨基黑着色,根据电泳移动距离分离出单克隆组分及加入 的抗血清组分即可对各类免疫球蛋白及其轻链进行分型。
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