交叉配血试验标准化操作规程盐水法

合集下载

交叉配血步骤

交叉配血步骤

盐水介质配血法:
1、取洁净小试管两支,分别注明主侧、次侧。

2、主侧管分别加受血者血清2滴和供血者红细胞悬液1滴。

次侧管加供血者血清2滴和受血者红细胞悬液1滴。

混匀,3400转/min离心15秒。

轻轻摇动试管,观察结果。

凝聚胺配血法
1、取洁净小试管两支,分别注明主侧、次侧。

主侧管:病人血清2滴+献血者3%~5%红细胞悬液1滴
次侧管:病人3%~5%红细胞悬液1滴+献血者血清2滴
2、各加入LIM0.65ml,混匀后再加入Polybrene溶液2滴,并混合均匀,3400转/min离心15秒,弃上清,轻轻摇动试管观察是否凝集,如无凝集必须重做,最后加入Resuspending2滴,轻轻摇动试管混合并观察结果。

3、如果凝集散开,配血结果相合;如果凝集不散开,配血结果不相合。

交叉配血试验操作规程

交叉配血试验操作规程

交叉配血试验操作规程一、前期准备1.需准备的仪器和材料有:试剂盘、试剂套装、试管、离心机、试剂架、操作台、试剂粉末、负压孔盖垫、抗人免疫球蛋白(抗人IgG)、标注笔等。

2.确保实验室实验台面整洁干净,并消毒工作区。

3.检查试剂有效期,避免使用过期试剂。

4.根据需求确定所需血浆标本和酶抗全血标本。

二、实验步骤1.将所需血浆标本加入试管中,用离心机离心10分钟,以获得澄清的血浆。

2.将澄清的血浆转移到试剂盘中的相应位置,每个孔位加1mL。

3.将离心后的红细胞沉淀与抗人IgG直接接触15分钟,以充分吸附不特异抗体。

4.加入2mL盐水,搅拌均匀,离心5分钟,去除清液。

5.加入4mL盐水,振荡均匀,1分钟后离心5分钟,去除清液。

6.加入2mL盐水,振荡均匀,1分钟后离心5分钟,去除清液。

7.加入1mL试剂套装中所配的抗人IgG,共悬浮混合24次,再加入5mL盐水,振荡均匀。

8.加入2mL盐水,振荡均匀,1分钟后离心5分钟,去除清液。

9.加入2mL试剂套装中所配的抗人IgG,共悬浮混合24次,再加入5mL盐水,振荡均匀。

10.重复步骤9,使红细胞悬浮,在离心后去除清液。

三、结果判断1.观察试剂盘中悬浮混合的红细胞沉淀情况,判断是否存在凝集现象。

2.凝集现象表明供血者和受血者之间存在血型抗原-抗体反应。

四、安全注意事项1.实验操作过程中注意戴手套、口罩和护目镜,保证操作者和实验样品的安全。

2.在操作前检查仪器和试剂的完好性,并遵循试剂的保存和使用说明。

3.严禁口饮、抽烟和进食,确保操作环境清洁。

4.实验后及时清洗仪器和工作区域,妥善处理废弃物。

5.确保实验室通风良好,防止有害气体和防护物质的浓度超标。

6.在实验操作过程中,严格遵守相关的实验操作规程和实验室安全规定。

以上是交叉配血试验的操作规程,包括前期准备、实验步骤、结果判断和安全注意事项。

按照规程进行操作,可以确保实验结果的准确性和实验人员的安全。

交叉配血试验标准操作规程

交叉配血试验标准操作规程

交叉配血试验标准操作规程1目的检测供血者与受血者之间的输血相容性,包括主侧配血与次侧配血,确保输血安全。

2职责血库工作人员负责执行3适用范围适用于盐水介质法、手工凝聚胺法和手工微柱凝胶法交叉配血全过程。

4操作规程4.1原理4.1.1盐水介质法IgM类抗体可以在室温盐水介质中发生凝集反应,使用手工试管法可以判断供、受者间血液的相容性。

4.1.2凝聚胺法凝聚胺交叉配血试验就是利用多聚季胺盐类—凝聚胺携带很多正电荷,中和红细胞表面的负电荷,使红细胞之间距离减少,引起正常红细胞可逆性凝集。

无抗体致敏的红细胞被凝聚胺凝集,当加入中和液后,则凝集解散,而抗体致敏的红细胞被凝聚胺凝集,则不能解散,以此来判断供、受者间血液的相容性。

4.1.3手工微柱凝胶法微柱凝胶卡的微管中装填有葡聚糖凝胶颗粒和抗人球蛋白试剂,红细胞表面抗原与其对应的IgG抗体结合以后,在离心力的作用下不断向管底沉降,并与抗人球蛋白结合形成红细胞凝集,凝胶颗粒具有分子筛的作用,可以阻滞凝集的红细胞在离心力的作用下通过凝胶颗粒,使其悬浮在凝胶上端,未凝集的红细胞则可以通过凝胶颗粒到达微管底部。

4.2 试剂与器材4.2.1试剂凝聚胺配套试剂、生理盐水、微柱凝胶卡。

4.2.2 器材血清学离心机、卡式专用离心机、光学显微镜、塑料软试管、试管架、一次性塑料滴管、记号笔、玻片、移液器、一次性移液枪头。

4.3 标本要求4.3.1.患者样本 EDTA抗凝全血或血清,全血量3~5ml,在1760g条件下离心5分钟,离心后无溶血、无凝块、无明显乳糜。

4.3.2.供者标本枸橼酸盐抗凝全血,全血量3~5ml,在1760g条件下离心5分钟,离心后无溶血、无凝块、无明显乳糜。

4.4 操作步骤4.4.1盐水介质法4.4.1.1取两支试管,1支标明“主侧”;另一支标明“次侧”。

4.4.1.2按标记“主侧”管加受血者血浆1滴和供血者2%红细胞悬液1滴;“次侧”管加供血者血浆1滴和受血者2%红细胞悬液1滴。

交叉配血标准操作规程

交叉配血标准操作规程

(二)设备:戴安娜专用离心机(型号:DG SPIN)、戴安娜专用孵
育器(型号:DG THERM)、微量移液器(5-50ul)、普通离心机、玻
璃试管、生理盐水等
五、标本要求:
(一)抽取受血者抗凝(抗凝剂为EDTA.K2)静脉血2-3ml,

3000r/min条件下离心5分钟备用。
(二)标本保存:血液样本必须密封,2-8℃保存7天。
待用。 (五)交叉配血: 主侧:用定量加样器加入献血者1%的红细胞悬液50ul +患者血清或
血浆25uБайду номын сангаас ; 次侧:用定量加样器加入患者1%的红细胞悬液50ul + 献血者血浆
25ul。 (六)将卡放入DG THERM孵育箱15分钟,移出放入离心机9分钟,
取出观察结果。 七、结果观察: (一)主侧和次侧均不凝集,细胞沉于反应卡的底部,配血相合,可
(三)用于交叉配血必须是2-8℃保存3天以内的标本。
六、操作步骤:
(一)交叉配血前,先复检患者和献血者ABO和Rh血型。
(二)实验前将未开的抗人球蛋白检测卡放置于DG SPIN专用离心机
离心9分钟左右,取出待用。
(三)在抗人球蛋白检测卡上标明患者姓名或住院号、主侧和次侧,
撕掉配血卡上的封条。
(四)取试管两支,分别配制患者和献血者红细胞悬液(浓度为1%)
之内
2+
80%(大部分)的红血球沉在微管的上端2/3
之内
3+
80%(大部分)的红血球沉在微管的上端1/3
之内
4+ DP(双 群)
H(溶 血)
凝集的细胞处于微管的顶部 红血球同时位于微管上部和微管底部
微管中液体出现透明红色

交叉配血标准操作规程

交叉配血标准操作规程

交叉配血标准操作规程(抗人球蛋白法)一、目的:为规范交叉配血试验的技术操作,保证临床输血安全有效,特制定本规程。

二、适用范围适用于输血科进行交叉配血试验。

三、职责输血科技术人员负责交叉配血试验。

四、试剂及材料(一)试剂:抗人球蛋白检测卡(西班牙Diagnostic Grifols,S.A公司生产)(二)设备:戴安娜专用离心机(型号:DG SPIN)、戴安娜专用孵育器(型号:DG THERM)、微量移液器(5-50ul)、普通离心机、玻璃试管、生理盐水等五、标本要求:(一)抽取受血者抗凝(抗凝剂为EDTA.K2)静脉血2-3ml, 在3000r/min条件下离心5分钟备用。

(二)标本保存:血液样本必须密封,2-8℃保存7天。

(三)用于交叉配血必须是2-8℃保存3天以内的标本。

六、操作步骤:(一)交叉配血前,先复检患者和献血者ABO和Rh血型。

(二)实验前将未开的抗人球蛋白检测卡放置于DG SPIN专用离心机离心9分钟左右,取出待用。

(三)在抗人球蛋白检测卡上标明患者姓名或住院号、主侧和次侧,撕掉配血卡上的封条。

(四)取试管两支,分别配制患者和献血者红细胞悬液(浓度为1%)待用。

(五)交叉配血:主侧:用定量加样器加入献血者1%的红细胞悬液50ul +患者血清或血浆25ul ;次侧:用定量加样器加入患者1%的红细胞悬液50ul + 献血者血浆25ul。

(六)将卡放入DG THERM孵育箱15分钟,移出放入离心机9分钟,取出观察结果。

七、结果观察:(一)主侧和次侧均不凝集,细胞沉于反应卡的底部,配血相合,可以输血(二)主侧或次侧出现凝集,细胞悬挂于卡的中间或上部,配血不相合,不可以输血(三)若输注血液为红细胞,则只需主侧配血相合。

微柱卡式法凝集强度描述。

交叉配血试验标准化操作规程盐水法

交叉配血试验标准化操作规程盐水法

落石出交叉配血试验标准化操作规程盐水法一、目的为保证临床输血的相容性,确保临床输血安全,对全血、红细胞悬液、洗涤红细胞、浓缩红细胞、少白细胞红细胞、冰冻红细胞、机采浓缩白细胞悬液等血液成分进行交叉配血试验;二、方法采用盐水介质试管法;三、原理交叉配血试验也称配合性试验,只是检查不配合性,使受、供者血液间没有可测的不相配合的抗原、抗体成分;盐水介质交叉配血试验常称立即离心配血试验,将人红细胞血型抗原与相应的抗体发生的凝集反应在盐水介质中进行,只有在任何步骤中不产生溶液血或凝集时方可将供血者的血液或血液成分给受血者输注;试验通常包括:主侧交叉配血试验:受血者血清对供血者红细胞,是检测受血者血清中是否存在与供血者红细胞发生反应的抗体;次侧交叉配血试验:受血者红细胞对供血者血清,是检测供血者血清中是否存在与受血者红细胞发生反应的抗体;自身对照试验:受血者红细胞对受血者血清,是检测受血者血清中是否存在抗自身红细胞抗体、直接抗球蛋白试验阳性及红细胞缗钱状假阳性的存在;四、适用范围适用于输血前需进行交叉配血试验的血液及血液成分;五、仪器设备普通离心机;血型专用离心机;六、试剂1、试剂名称:%氯化钠注射液2、试剂生产厂家:湖南科伦制药有限公司;3、批准文号:国药准字H;4、包装规格:500ml/瓶;5、贮藏条件;18-25℃避光保存;6、有效期:自检定合格之日起二年;七、检测样本要求1、标本类型:静脉血EDTA抗凝剂:血液=1:10;2、标本采集:见输血科标本管理标准化操作规程;3、标本储存和运输:新鲜血2~8℃贮存时间不超过72小时;4、标本拒收状态:标识不准确、标本稀释、细菌污染,严重溶血等不能测定;八、操作步骤1、将受血者与献血者的红细胞血清分离;2、分别配制受血者与献血者红细胞配成2%盐水悬液;3、取洁净小试管10mmx60mm2支,1支标明主侧:受血者血清PS+供血者细胞DC;另1支标明次侧:供血者血清DS+受血者细胞PC;4、按标记主侧管加受血者血清1滴和供血者红细胞悬液1滴;次侧管加供血者血清1滴和受血者红细胞悬液1滴;混匀,以1000r/min离心1min,轻轻侧动试管,观察结果;冬季室温较低,应将试管保温,以防冷凝集素引起凝集反应影响结果判断;5、结果判断:ABO同型配血,主侧和次侧管均无溶血及凝集表示无输血禁忌,可以输血;反之不能;九、质量控制1、此检测项目应参加卫生部临床检验中心组织的室间质评,且成绩合格;2、每日做室内质量控制,且要求在控;3、严格执行查对制度,判断结果后应仔细核对、记录,必要时应镜下观察红细胞形态;4、交叉配血标本应在2~8℃保存留一周,以备复查;十、生物参考区间相合;不相合;十一、注意事项与干扰因素1、不能单独应用盐水介质交叉配血进行临床发血,必须结合其他介质方法交叉配血相合后方可发血;2、交叉配血标本必须正确有标识,其血液量、红细胞或血浆的质量符合实验要求和受血者当前的免疫学状态;3、交叉配血试验血样,要求是输血前3天内的血样预防受血者在输血前的3个月之内可能有妊娠或输血等免疫史而可能产生不规则抗体;4、标本血液离体后要求尽快送检,至检测完毕最长不能超过3d,每次检测后受血者和供血者的血标本应在2℃~8℃保存7天;5、试剂使用前应仔细检查试剂的贮存条件是否符合要求、是否变质失效;6、患者使用的药物影响的处理:如果使用右旋糖酐、PVP等治疗,应注意将红细胞洗涤;如果受者使用肝素治疗,则应用硫酸鱼精蛋白对抗,使样本凝结;7、交叉配血试验注意红细胞缗钱状的假阳性鉴别,应结合镜下观察或离心去上清液后重悬观察;8、抗体筛选试验阴性,而交叉配血结果阳性,提示有未检测明的同种抗体存在;9、交叉配血结果不相合提示有未查明的同种抗体存在;10、注意交叉配血试验过程中离心力、温度、红细胞浓度、抗原抗体的比例;11、血清或血浆中如含有溶血性抗体,则相应红细胞被溶解而不凝集,交叉配血结果阳性,如排除标本中补体干扰因素的影响,可来活后重新试验;12、注意在室温反应中或抗球蛋白试验中显示有自身抗体,应加做自身对照试验或直接抗人球蛋白试验加以鉴别;十二、参考文献1、胡丽华主编,临床输血检验,第1版;中国医药科技出版社,2004;2、叶应妩,等主编,全国临床检验操作规程,第3版;东南大学出版社,2006,11;。

交叉配血操作规程

交叉配血操作规程

交叉配血操作规程交叉配血是一种常用的动物繁殖方法,通过将两个不同的个体进行交叉配对,以获得具有理想遗传特征的后代。

下面是一份交叉配血操作规程,详细介绍了交叉配血的具体步骤和注意事项。

一、前期准备1.确定需要交叉配血的两个个体,分别为雄性和雌性个体。

2.对选定的个体进行健康检查和基因型鉴定,确保它们身体健康且没有携带任何遗传疾病或缺陷。

3.确定交叉配血的时间和地点,保持环境整洁,避免外部因素对实验造成干扰。

4.准备必要的实验器材和试剂,包括培养皿、显微镜、匀浆器、移液器、生理盐水等。

二、交叉配血操作步骤1.检查个体性别:使用显微镜或基因鉴定方法,确认选定个体的性别。

2.打开个体体腔:以手术刀或麻醉剂等方法,在个体体腔中打开一个小孔,以便于之后的操作。

3.收集个体血液:用匀浆器缓慢吸取个体血液,将其置于培养皿中。

4.检查血液凝固情况:观察个体血液是否凝固,若已凝固则将其舍弃,重新收集血液。

5.将雄性血液与雌性血液混合:将取自雄性个体的血液与取自雌性个体的血液混合,保持培养皿中的血液充分混合。

6.观察交配反应:观察混合后的血液是否发生凝集或聚集,若出现凝集或聚集现象,说明雄性与雌性个体之间存在交配反应。

7.鉴定交配结果:使用显微镜或试纸等方法,对交配结果进行鉴定和记录。

8.存储交配后的血液:若需要保存交配后的血液供后续研究使用,将其分装于合适的容器中,并存放于低温环境中。

9.清理实验现场:将使用过的器材和材料进行清理和消毒,保持实验现场整洁。

三、注意事项1.交叉配血操作需要在无菌环境下进行,以避免外部微生物对实验的污染。

2.个体血液的收集应该尽量避免暴露在空气中,以免造成血液的凝固或氧化。

3.操作过程中要注意个体的安全,减少对个体的伤害。

4.需要保持操作的准确性和规范性,避免实验中出现误差。

5.实验后要对结果进行及时记录和分析,以便下一步的研究。

6.学习和了解相关法规和伦理要求,确保在动物实验中符合相关规定。

交叉配血盐水介质法实验方法和步骤

交叉配血盐水介质法实验方法和步骤

交叉配血盐水介质法实验方法和步骤下载提示:该文档是本店铺精心编制而成的,希望大家下载后,能够帮助大家解决实际问题。

文档下载后可定制修改,请根据实际需要进行调整和使用,谢谢!本店铺为大家提供各种类型的实用资料,如教育随笔、日记赏析、句子摘抄、古诗大全、经典美文、话题作文、工作总结、词语解析、文案摘录、其他资料等等,想了解不同资料格式和写法,敬请关注!Download tips: This document is carefully compiled by this editor. I hope that after you download it, it can help you solve practical problems. The document can be customized and modified after downloading, please adjust and use it according to actual needs, thank you! In addition, this shop provides you with various types of practical materials, such as educational essays, diary appreciation, sentence excerpts, ancient poems, classic articles, topic composition, work summary, word parsing, copy excerpts, other materials and so on, want to know different data formats and writing methods, please pay attention!一、实验背景交叉配血盐水介质法是用来研究细菌耐受性和交叉耐药性的一种常用实验方法。

血型鉴定、交叉配血操作规程

血型鉴定、交叉配血操作规程

⾎型鉴定、交叉配⾎操作规程ABO、Rh-D⾎型鉴定操作规程1.⽬的:规范ABO、Rh-D检测的操作过程2. 标本采集:静脉采⾎2ml抗凝⾎,避免溶⾎试剂3. 试剂:长春博讯⽣物技术有限责任公司4.⽅法原理【原理】:标准⾎清中的完全抗体(lgM)抗A、抗B、和抗D能和红细胞表⾯相应的抗原在盐⽔介质中发⽣特异性的凝集反应。

根据红细胞凝聚类型可鉴别出A、B、O、AB四型和RHD阴性或阳性。

5. 操作:⼀、玻⽚法(⼀般只能做正定型)【正定型】:1、取⼀张玻⽚,⽤蜡笔或记号笔将其分为三等份,从左到右每⼀等份左上⾓标明A、B、D,2、对应加⼊抗A和抗B抗D标准⾎清⼀滴;3、分别加PC(患者10—15%红细胞悬液);4、⽤洁净⽵签将试剂和红细胞充分混匀,混合物约2cm2⼤⼩;5、轻轻地连续倾斜转动玻⽚2—5分钟,观察并记录; 【解释】:A端凝集为A型⾎;B端凝集为B型⾎;A、B 端均凝集则为AB型;A、B端均不凝集则为O型;D端凝集则为RH阳性者,⽆凝集则为RH阴性。

备注:玻⽚法可作为ABO⾎型初筛或复检;不适⽤于抗体鉴定和交叉配⾎;不适合检测ABO亚型。

⼆、试管法(盐⽔介质)【原理】:标准的A型和B型红细胞能和受检者⾎清(⾎浆)中相应的抗体发⽣特异性结合,形成⾁眼可见的凝集反应,从⽽可推断出受检者的⾎型。

【材料】:1、标准A型和B型红细胞悬液(浓度4%,商品有售,亦可⾃⾏新鲜配制);2、受试者⾎清或⾎清;3、洁净康⽒试管。

【正定型】:1、取⼆⽀洁净试管分别记上抗A和抗B;2、对应加⼊抗A和抗B⾎清1滴;3、分别加⼊病⼈红细胞悬液1滴(浓度为2%-5%);4、混匀,室温放置5分钟,1000rpm离⼼1分钟,取出观察结果【解释】:轻摇试管,检查是否凝集,抗A、抗B管均凝集,受试者为AB型⾎;抗A、抗B管均不凝集,则为O 型⾎;抗A管凝集则为A型⾎;抗B管凝集则为B型⾎。

【反定型】:1、取⼆⽀试管分别记上AC和BC;2、分别加⼊病⼈⾎清;3、对应加⼊A和B型试剂红细胞;4、混匀室温放置5分钟,1000rpm离⼼1分钟,取出观察结果;【解释】:⾸先检查上清液有⽆溶⾎,然后轻摇试管,检查是否凝集,A、B管均凝集受试者为O型⾎;A、B管均不凝集则为AB型⾎;A管凝集则为B型⾎;B管凝集则为A型⾎。

交叉配血试验标准化操作规程(盐水法)作业指导书

交叉配血试验标准化操作规程(盐水法)作业指导书

交叉配血试验标准化操作规程(盐水法)一、目的为保证临床输血的相容性,确保临床输血安全,对红细胞悬液、洗涤红细胞、浓缩红细胞、少白细胞红细胞等进行交叉配血试验。

二、方法采用盐水介质试管法;三、原理交叉配血试验也称配合性试验,只是检查不配合性,使受、供者血液间没有可测的不相配合的抗原、抗体成分。

盐水介质交叉配血试验常称立即离心配血试验,将人红细胞血型抗原与相应的抗体发生的凝集反应在盐水介质中进行,只有在任何步骤中不产生溶液血或凝集时方可将供血者的血液或血液成分给受血者输注。

试验通常包括:(一、)主侧交叉配血试验:受血者血清对供血者红细胞,是检测受血者血清中是否存在与供血者红细胞发生反应的抗体;(二、)次侧交叉配血试验:受血者红细胞对供血者血清,是检测供血者血清中是否存在与受血者红细胞发生反应的抗体;四、适用范围适用于输血前需进行交叉配血试验的血液及血液成分。

五、仪器设备普通离心机;血型专用离心机;六、0.9%氯化钠注射液(四川科伦药业股份有限公司)批准文号:国药准字H51021158;有效期:自生产日期之日起三年;七、检测样本要求1、标本类型:静脉血(EDTA-K2真空紫头采血管1支+ 普通红头真空采血管1支)。

2、标本储存和运输:新鲜血2~8℃贮存时间不超过72小时。

3、标本拒收状态:标识不准确、标本稀释、细菌污染,严重溶血等不能测定。

八、操作步骤1、将受血者与献血者的红细胞血清分离;2、分别配制受血者与献血者红细胞配成3 % RBC悬液3% RBC悬液配制:1滴压积RBC + 1.6 ml(40滴)生理盐水3、取一次性试管2支,1支标明主侧:受血者血清(PS)+供血者细胞(DC);另1支标明次侧:供血者血清(DS)+受血者细胞(PC)。

4、主侧管加受血者血清5滴和供血者红细胞悬液5滴。

次侧管加供血者血清5滴和受血者红细胞悬液5滴。

混匀,以1000r/min离心2min,轻轻侧动试管,观察结果。

冬季室温较低,应将试管保温,以防冷凝集素引起凝集反应影响结果判断。

盐水法配血操作规程

盐水法配血操作规程

盐水法配血操作规程盐水法配血是一种常用的配血方法,通过在供者血样与受者红细胞悬液中加入不同浓度的盐水溶液来观察凝集反应,判断供者与受者血型是否相容。

下面是盐水法配血的操作规程。

一、实验前准备1. 准备好所需试剂和仪器设备,如盐水溶液、试管、试管架、洗瓶、一次性手套、试管盒等。

2. 校对血型试剂,确保其有效期内,并按照说明书稀释好。

二、操作步骤1. 标记试管用玻璃笔或细标签标记试管,并分别写上供者和受者的信息。

2. 制备供者血样取一滴供者的血液于洗净的试管内,加入一滴净化水,用试管尾轻轻混匀。

3. 制备受者红细胞悬液取一滴受者的血液于洗净的试管内,加入适量的盐水溶液,用试管尾轻轻混匀。

4. 加盐水溶液以1:2、1:4、1:8的比例分别将0.9%的盐水溶液加入供者和受者的试管中,使总体积约为1ml。

轻轻摇动试管,使溶液充分混合。

5. 静置观察把试管放入试管架上,静置5分钟,观察凝集情况。

6. 结果判定观察供者与受者试管中是否出现凝集现象,根据凝集的程度判断血型的相容性。

- 无凝集:相容,可进行输血。

- 片状凝集:相容,可进行输血,但需留意可能存在特殊抗体。

- 线状凝集:不相容,不可进行输血。

7. 清理试管将用过的试管放入洗瓶中,用水冲洗干净,清理试管架。

8. 记录结果根据观察结果,将配血结果记录在相关数据表格中,包括供者和受者的血型信息、凝集情况以及对应的相容性。

三、注意事项1. 操作时要严格按照标准操作规程进行,避免操作失误。

2. 手套和试管架等工具要彻底清洁干净,确保实验的准确性和结果可靠性。

3. 配血试验要进行双重确认,避免操作失误和结果错误。

4. 注意个人防护,避免接触到供者的血液,以避免传染病的传播。

5. 根据实际需要,可进行不同浓度溶液的稀释和配制,以满足不同试验的要求。

通过盐水法配血操作规程,可以判断供者与受者的血型相容性,为临床输血提供可靠的依据,确保输血安全性和有效性。

交叉配血标准操作规程

交叉配血标准操作规程

交叉配血标准操作规程(抗人球蛋白法)一、目的:为规范交叉配血试验的技术操作,保证临床输血安全有效,特制定本规程。

二、适用范围适用于输血科进行交叉配血试验。

三、职责输血科技术人员负责交叉配血试验。

四、试剂及材料(一)试剂:抗人球蛋白检测卡(西班牙Diagnostic Grifols,S。

A公司生产)(二)设备:戴安娜专用离心机(型号:DG SPIN)、戴安娜专用孵育器(型号:DG THERM)、微量移液器(5—50ul)、普通离心机、玻璃试管、生理盐水等五、标本要求:(一)抽取受血者抗凝(抗凝剂为EDTA.K2)静脉血2-3ml, 在3000r/min条件下离心5分钟备用。

(二)标本保存:血液样本必须密封,2—8℃保存7天。

(三)用于交叉配血必须是2-8℃保存3天以内的标本。

六、操作步骤:(一)交叉配血前,先复检患者和献血者ABO和Rh血型.(二)实验前将未开的抗人球蛋白检测卡放置于DG SPIN专用离心机离心9分钟左右,取出待用。

(三)在抗人球蛋白检测卡上标明患者姓名或住院号、主侧和次侧,撕掉配血卡上的封条.(四)取试管两支,分别配制患者和献血者红细胞悬液(浓度为1%)待用。

)RN36837 8FE5 迥532903 8087 肇(五)交叉配血:主侧:用定量加样器加入献血者1%的红细胞悬液50ul +患者血清或血浆25ul ;次侧:用定量加样器加入患者1%的红细胞悬液50ul + 献血者血浆25ul。

(六)将卡放入DG THERM孵育箱15分钟,移出放入离心机9分钟,取出观察结果.七、结果观察:(一)主侧和次侧均不凝集,细胞沉于反应卡的底部,配血相合,可以输血(二)主侧或次侧出现凝集,细胞悬挂于卡的中间或上部,配血不相合,不可以输血(三)若输注血液为红细胞,则只需主侧配血相合。

微柱卡式法凝集强度描述。

交叉配血操作规程

交叉配血操作规程

交叉配血操作规程[原理]凝聚胺试验是利用低离子溶液促进红细胞抗原与血清(浆)中的抗体反应,再利用凝聚胺引起红细胞间非免疫性的凝集,让已有抗体(IgG)反应的红细胞间的距离缩短。

距离缩短后更能引起已反应的抗体和别的红细胞产生反应形成免疫性的凝集。

而由凝聚胺所引起的非免疫性红细胞凝集反应可被后来加入的复悬液所中和而散开,如有免疫反应,凝集就不会散开,为阳性反应。

如没有免疫反应,凝集就会散开,为阴性反应。

交叉配血试验是在盐水介质的基础上加入凝聚胺,检测供患之间是否相合,患者血清(浆)中是否含有具临床意义的红细胞异体抗体。

[试剂组成]1.洁净试管,离心机,显微镜。

2.0.85% 氯化钠溶液:准确称取氯化钠(AR)8.5 g,用蒸馏水溶解并定容至 1000 ml。

试剂启用后,有效期为:二周。

3.凝聚胺试剂①低离子介质溶液:含葡萄糖,乙二胺四醋酸-2 钠及稳定剂。

②凝聚胺溶液:含凝聚胺,氯化钠及稳定剂。

③复悬液:含柠檬酸钠,葡萄糖及稳定剂。

④阳性对照血清:含抗D 血清,氯化钠及稳定剂。

4.抗人IgG 血清。

[试剂保存和稳定性]1.凝聚胺试剂须保存在2-25℃。

2.有效期内可使用。

3.抗人IgG 血清低温冰箱保存。

复溶后放2—4℃冰箱保存。

[标本收集和准备]1.抽取受血者静脉血3-4ml(操作中小心防止红细胞破损),放入一已贴标签干燥洁净的试管中为血清管(也可用EDTA-K2 抗凝血液),并将注射器中余下的少量血液配成2%红细胞生理盐水悬液,放入另一已贴标签干燥洁净的试管中为红细胞悬液管。

以上标本有效期为三天;若受血者抽取标本后,输用过血液或血液制品,且输用时间超过12 小时的,必须重新采集标本。

2. 2% 红细胞悬液:用生理盐水洗涤红细胞3 次。

根据下表进行红细胞悬液的配制。

悬液浓度(%)压积红细胞(滴)盐水(滴)----------------------------------------------------------------2 1 2ml(40)5 1 0.8ml(16)----------------------------------------------------------------[操作步骤]1.取出3 支试管分别标记主,次及对照测试:主测管:加入病人血清(浆)2 滴,再加入供血者3-5%红细胞悬液1 滴,次测管:加入供血者血清(浆)2 滴,再加入病人3-5%红细胞悬液1 滴,对照管:加入2 滴*4 阳性对照血清,再加入供血者3-5%红细胞悬液1 滴。

S013交叉配血试验标准化操作规程(盐水法)

S013交叉配血试验标准化操作规程(盐水法)

S013交叉配血试验标准化操作规程(盐水法).docS013交叉配血试验标准化操作规程(盐水法)1. 引言本文档旨在提供交叉配血试验(盐水法)的标准化操作规程,确保试验的准确性和一致性,保障患者输血安全。

2. 目的规范交叉配血试验的操作方法。

确保试验结果的准确性和可靠性。

为临床输血提供科学依据。

3. 适用范围本规程适用于医疗机构中进行交叉配血试验的所有工作人员。

4. 术语和定义交叉配血试验:指在输血前,对献血者和受血者的血液进行相容性测试的过程。

盐水法:一种常用的交叉配血试验方法,通过盐水介质检测红细胞凝集反应。

5. 试验原理简述盐水法交叉配血试验的基本原理,包括红细胞凝集反应和抗体检测等。

6. 试验材料和设备6.1 试验材料新鲜抗凝血(EDTA或肝素)生理盐水标准血清学试剂6.2 试验设备离心机显微镜试管和试管架移液器和吸头7. 操作步骤7.1 样本准备收集献血者和受血者的血液样本。

离心分离血浆和红细胞。

7.2 盐水介质制备按照标准比例制备生理盐水介质。

7.3 主侧试验将受血者血清与献血者红细胞混合。

离心观察是否有凝集反应。

7.4 次侧试验将献血者血清与受血者红细胞混合。

离心观察是否有凝集反应。

7.5 结果判断根据凝集反应的有无和强度判断试验结果。

8. 结果记录和报告详细记录试验过程和结果。

按照规定格式编写试验报告。

9. 安全和质量控制9.1 安全措施遵守实验室安全规程。

采取必要的个人防护措施。

9.2 质量控制定期进行试验方法的验证和评估。

记录和分析试验误差。

10. 附录10.1 试验操作流程图提供交叉配血试验操作的流程图。

10.2 试验记录表格提供试验记录的示例表格。

10.3 试验报告模板提供试验报告的示例模板。

11. 结论本规程为交叉配血试验(盐水法)提供了一套标准化的操作流程,有助于提高试验的准确性和一致性,确保患者输血安全。

医院交叉配血试验标准操作规程

医院交叉配血试验标准操作规程

交叉配血试验标准操作规程1、目的为规范交叉配血试验的技术操作,保证临床输血安全有效,依据《输血实验室管理程序》4.1.7(2)条款的要求制定本规程。

2、适用范围适用于医疗机构输血科(血库)进行交叉配血试验。

3、职责医疗机构输血科(血库)技术人员负责交叉配血试验。

4、原理使受血者血清(血浆)和红细胞分别与献血者红细胞和血清(血浆)反应,采用盐水介质法、凝聚胺法、抗球蛋白法及微柱凝胶法等检测供、受者之间是否存在相应的红细胞血型抗原抗体反应,判定受血者与献血者血液之间红细胞血型免疫的相容性。

5、所需设备和试剂5.1设备普通离心机,血型血清学专用离心机,电热恒温水浴箱,普通显微镜。

5.2试剂凝聚胺试剂盒,抗球蛋白试剂。

6、检测环境条件6.1室温应控制在18~27℃,湿度应保持30%~70%。

7、步骤与方法7.1受血者、献血者血标本处理7.1.1将受血者血标本离心分离血清(血浆)及红细胞,取2支试管,分别标记受血者的唯一性标识,吸取离心后血标本血清(血浆)到一支已标识的试管内;吸取红细胞30μl 到另一支已标识的试管内,加生理盐水1ml稀释成3%的红细胞悬液。

7.1.2受血者ABO和RhD血型鉴定,执行《试管法鉴定ABO和RhD血型标准操作规程》。

7.1.3受血者红细胞不规则抗体筛选及鉴定,执行《红细胞不规则抗体筛选及鉴定标准操作规程>。

7.1.4根据受血者ABO和RhD血型鉴定结果选择ABO和RhD相容血液成分,剪取献血者血袋上一段留样管,取1支试管标记献血者唯一性标识,将剪下的血标本盛入标识的试管中,离心分离血清(血浆)及红细胞;另取2支试管分别标记献血者唯一性标识,吸取献血者血标本血清(血浆)到一支已标识的试管内;吸取献血者血标本红细胞3μl到另一支已标识的试管内,加生理盐水1ml稀释成3%的红细胞悬液。

7.1.5复检献血者ABO和RhD血型。

7.2盐水介质法交叉配血试验7.2.1取试管2支,分别标记为“主侧”、“次侧”,主侧加受血者血清(血浆)2滴、献血者3%红细胞悬液1滴,混匀;次侧加献血者血清(血浆)2。

盐水介质交叉配血SOP

盐水介质交叉配血SOP

杭州余杭邦尔医院检验科血库标准操作规程盐水介质配血法标准操作规程1(1)首先对患者血样充分离心后,吸出血清于另一试管中并标记。

(2)取试管12支,分别标记患者细胞、患者抗A、抗B、抗D、AC、BC、OC、主侧、次侧、献血者抗A、抗B、献血者细胞管。

对患者血样进行ABO血型(正反定性)和Rh血型检定,主侧管加受血者血清2滴,献血者2%~5%红细胞悬液1滴;次侧管加献血者血清2滴,受血者2%~5%红细胞悬液1滴,对献血者血辫进行ABO血型复查,以1000g离心15秒,观察结果2.结果判断ABO同型配血,主侧和次侧均无凝集及溶血现象。

为盐水介质配血结果阴性,可将原标本接着做聚凝胺法(具体方法见聚凝胺法)或抗人球蛋白法配血。

3.附注3.1冬季室温较低,应将试管保温以防止冷凝集引起的凝集反应。

3.2献血者血型因初复检已确定,可只做正定型,但务必要做。

3.3患者血清中纤维蛋白没完全析出时,要放置到37℃水浴箱中15分钟,然后再离心。

以防未完全析出的纤维蛋白影响判断结果。

3.4 交叉配血试验中发现不配合时,首先应考虑受血者和献血者的ABO定型是否错误,必要时进行抗体筛选,注意有无特异性同种抗体。

或者病人的血清在室温,37℃或抗人球蛋白血清中凝集所有的其它红细胞,造成交叉配血的困难,应进一步作有关试验进行鉴定。

3.5 在每次输血之后,受血者和献血者样本应在2℃~6℃保存10天。

如果病人在输血中发生不良反应或在输血后数天内发生迟发性溶血性反应时,保存的病人和献血员的血样就有可能要重新或追加试验,必要时从发生溶血性输血反应的病人重新采取血样与输血前病人血样同时检查以资比较。

7.6 各医院前来配血时,要有输血申请单方可配血。

4.相关文件《中国输血技术操作规程》编制人王渊审核人钟剑版本号第二版颁布日期2018年1月1日文件编号YHBE/SOP-XK-02 页码第 1 页。

交叉配血盐水法的步骤

交叉配血盐水法的步骤

交叉配血盐水法的步骤
嘿,咱今儿就来讲讲这交叉配血盐水法的步骤哈。

你说这交叉配血就好比是给血液找个最合适的“伙伴”,可不能马虎呢!
先呢,得准备好咱要用的东西,就像战士上战场得拿好武器一样。

然后呢,取两支干净的试管,一支标上主侧,一支标上次侧。

这可别标错了呀,不然不就乱套啦!
接下来,在主侧试管里加入受血者的血清和供血者的红细胞悬液,在次侧试管里加入供血者的血清和受血者的红细胞悬液。

这就像是给它们安排座位一样,得放对地方。

然后呀,轻轻混匀这些试管,让它们好好地融合一下。

就好像跳舞一样,得让大家都活动起来,才能知道配合得好不好嘛。

再之后呢,把这些试管放在室温下静置一段时间,这时候可别去打扰它们,让它们自己好好相处相处。

过了一会儿,就该观察结果啦。

要是没有凝集,那就太棒啦,说明这血液“伙伴”找得不错哟!但要是有凝集,那可就得小心啦,得好好再研究研究。

你想想啊,这血液要是没配好,那后果得多严重呀!就好比你穿错了鞋子,那走起来能舒服吗?能不别扭吗?所以说呀,这交叉配血盐水法的步骤每一步都得认真对待,不能有丝毫马虎。

咱平时做事不也得这样嘛,一步一个脚印,踏踏实实地来。

可不能马马虎虎,随随便便的。

这交叉配血盐水法虽然看起来不复杂,但每一个小细节都很关键呢!就像盖房子,一块砖没放好,可能整座房子都不牢固啦。

大家可都得记住这些步骤呀,这可是关乎生命的大事呢!咱可不能掉以轻心,得把好关,让每一次的交叉配血都能准确无误,让需要输血的人能得到最安全的保障。

这多重要呀,是不是?所以呀,可得认真学,认真做,别不当回事儿哟!。

医院交叉配血试验(凝聚胺法)标准操作程序

医院交叉配血试验(凝聚胺法)标准操作程序

交叉配血试验(凝聚胺法)标准操作程序【项目名称】交叉配血试验【实验用途】辅助用于交叉配血【实验原理】红细胞表面带有大量的负电荷,以避免其产生自发性聚集,当红细胞悬浮在电解质时,阳离子会被红细胞的负电荷所吸引。

此时红细胞则被扩散的双层离子云所围绕,而形成Zeta电位,Zeta电位决定红细胞之间的排斥作用。

凝聚胺技术首先利用低离子介质溶液,降低介质的离子强度,减少红细胞周围的阳离子云,以促进红细胞和血清(血浆)中的抗体结合。

其后,加入凝聚胺试剂,它是一种高价阳离子多聚物,是肝素中和剂,溶解后能产生很多正电荷,可以中和红细胞表面带有的负电荷,使红细胞Zeta电位降低,缩短红细胞之间的距离,使红细胞产生非特异性的聚集。

最后,加入重悬液,重悬液具有中和凝聚胺的作用,使正常的红细胞非特异性聚集散开,试验结果为阴性。

【标本种类】被检验者的血液,ABO正反血型Rh(D)血型抽3毫升不抗凝静脉血,交叉配血及不规则抗体抽5毫升不抗凝静脉全血。

血清标本:取静脉血沿管壁慢慢注入干燥试管内,待血液凝固后离心分离血清。

红细胞悬液的配制:用于一般实验,以血型鉴定,配血等的红细胞至少要用大量生理盐水洗一遍,通过洗涤可以去除红细胞表面的下述物质:1、少量血浆蛋白,如纤维蛋白原、抗球蛋白抗体,会干扰特异凝集和中和加入的抗体;2、已溶解红细胞的基质,有竞争抗体的作用;3、可容性的抑制物,如A、B、Chido、lewis等物质;4、抗凝剂,有抗非体作用,如第1次洗后有溶血现象,则要洗第2次,如第2次洗后上清液仍不完全清澈,这种红细胞不亦使用,应弃去。

红细胞悬液常用浓度有2%、5%和10%,配制时应将最后一次洗涤的红细胞水平离心机3000转/分离心,30分钟压积,在不除去上层盐水的情况下,吸取一定量的压积红细胞按体积百分比配成所需浓度的悬液。

实际工作中,可用一般洗涤压积的红细胞1滴加8滴生理盐水,配成的悬液约为10%,按此比例配成其他所需浓度的悬液2%的悬液一般用于滴定抗体效价,5%的悬液常用于血型鉴定或间接抗球蛋白试验,10%的悬液则用于测定抗体的亲合力。

  1. 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
  2. 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
  3. 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。

落石出
交叉配
血试验标准化
操作规程(盐
水法)
一、目

为保证临床输血的相容性,确保临床输血安全,对
全血、红细胞悬液、洗涤红细胞、浓缩红细胞、少白细胞红细胞、冰冻红细胞、机采浓缩白细胞悬液等血液成分进行交叉配血试验。

二、方法
采用盐水介质试管法; 三、原理
交叉配血试验也称配合性试验,只是检查不配合性,使受、供者血液间没有可测的不相配合的抗原、抗体成分。

盐水介质交叉配血试验常称立即离心配血试验,将人红细胞血型抗原与相应的抗体发生的凝集反应在盐水介质中进行,只有在任何步骤中不产生溶液血或凝集时方可将供血者的血液或血液成分给受血
者输注。

试验通常包括:
主侧交叉配血试验:受血者血清对供血者红细胞,是检测受血者血清中是否存在与供血者红细胞发生反应的抗体;
次侧交叉配血试验:受血者红细胞对供血者血清,是检测供血者血清中是否存在与受血者红细胞发生反应的抗体;
自身对照试验:受血者红细胞对受血者血清,是检测受血者血清中是否存在抗自身红细胞抗体、直接抗球蛋白试验阳性及红细胞缗钱状假阳性的存在。

四、适用范围
适用于输血前需进行交叉配血试验的血液及血液成分。

五、仪器设备
普通离心机;血型专用离心机;
六、试剂
1、试剂名称:0.9%氯化钠注射液
2、试剂生产厂家:湖南科伦制药有限公司;
3、批准文号:国药准字H20050061;
4、包装规格:500ml/瓶;
5、贮藏条件;18-25℃避光保存。

6、有效期:自检定合格之日起二年;
七、检测样本要求
1、标本类型:静脉血(EDTA抗凝剂:血液=1:10)。

2、标本采集:见输血科标本管理标准化操作规程。

3、标本储存和运输:新鲜血2~8℃贮存时间不超过72小时。

4、标本拒收状态:标识不准确、标本稀释、细菌污染,严重溶血等不能测定。

八、操作步骤
1、将受血者与献血者的红细胞血清分离;
2、分别配制受血者与献血者红细胞配成2%盐水悬液;
3、取洁净小试管(10mmx60mm)2支,1支标明主侧:受血者血清(PS)+供血者细胞(DC);另1支标明次侧:供血者血清(DS)+受血者细胞(PC)。

4、按标记主侧管加受血者血清1滴和供血者红细胞悬液1滴。

次侧管加供血者血清1滴和受血者红细胞悬液1滴。

混匀,以1000r/min离心1min,轻轻侧动试管,观察结果。

冬季室温较低,应将试管保温,以防冷凝集素引起凝集反应影响结果判断。

5、结果判断:
ABO同型配血,主侧和次侧管均无溶血及凝集表示无输血禁忌,可以输血。

反之不能。

九、质量控制
1、此检测项目应参加卫生部临床检验中心组织的室间质评,且成绩合格;
2、每日做室内质量控制,且要求在控。

3、严格执行查对制度,判断结果后应仔细核对、记录,必要时应镜下观察红细胞形态。

4、交叉配血标本应在2~8℃保存留一周,以备复查。

十、生物参考区间
相合;不相合。

十一、注意事项与干扰因素
1、不能单独应用盐水介质交叉配血进行临床发血,必须结合其他介质方法交叉配血相合后方可发血。

2、交叉配血标本必须正确有标识,其血液量、红细胞或血浆的质量符合实验要求和受血者当前的免疫学状态;
3、交叉配血试验血样,要求是输血前3天内的血样(预防受血者在输血前的3个月之内可能有妊娠或输血等免疫史而可能产生不规则抗体)。

4、标本血液离体后要求尽快送检,至检测完毕最长不能超过3d,每次检测后受血者和供血者的血标本应在2℃~8℃保存7天;
5、试剂使用前应仔细检查试剂的贮存条件是否符合要求、是否变质失效;
6、患者使用的药物影响的处理:如果使用右旋糖酐、PVP等治疗,应注意将红细胞洗涤;如果受者使用肝素治疗,则应用硫酸鱼精蛋白对抗,使样本凝结;
7、交叉配血试验注意红细胞缗钱状的假阳性鉴别,应结合镜下观察或离心去上清液后重悬观察。

8、抗体筛选试验阴性,而交叉配血结果阳性,提示有未检测明的同种抗体存在。

9、交叉配血结果不相合提示有未查明的同种抗体存在。

10、注意交叉配血试验过程中离心力、温度、红细胞浓度、抗原抗体的比例;
11、血清或血浆中如含有溶血性抗体,则相应红细胞被溶解而不凝集,交叉配血结果阳性,如排除标本中补体干扰因素的影响,可来活后重新试验。

12、注意在室温反应中或抗球蛋白试验中显示有自身抗体,应加做自身对照试验或直接抗人球蛋白试验加以鉴别。

十二、参考文献
1、胡丽华主编,临床输血检验,第1版。

中国医药科技出版社,2004;
2、叶应妩,等主编,全国临床检验操作规程,第3版。

东南大学出版社,2006,11;。

相关文档
最新文档