压片法实验报告

题目：压片法实验报告

目的：掌握压片法的基本技术，以葱为例观察植物有丝分裂的各个时期,并对葱的染色体计数。

材料：葱根尖。

方法与操作步骤

一、取材：上午8:30取洁净的葱根尖，取尖端2-3cm长于称量瓶中。

二、前处理：为了得到更多中期分裂项的细胞，同时使染色体缩短和良好分散，

可对根尖进行预处理。处理方法为：浓度为0.002M的8-羟基喹啉前处理3小时

三、固定：卡诺氏（无水乙醇：冰醋酸=3:1）固定液（用量应在材料大小的20

倍以上）固定9个小时。

四、解离

1、用蒸馏水冲洗材料后，用50%乙醇处理30分钟。

2、1mol／L盐酸解离37分钟。

3、软化45%冰醋酸处理30min。

五、染色：改良苯酚品红染色10-18个小时。

六、制片

1、取一个根尖放于一张洁净的载玻片的中间。

2、切取根尖端的3-4mm。

3、在材料上滴一滴蒸馏水，盖上盖玻片。

4、用食指和中指固定住盖玻片，然后用笔平整的一端撞击盖玻片，用吸水纸吸

取多余水分。

七、镜检

1、镜检时先用10*10倍需找比较适合观察的各分裂相细胞。

2、然后在换10*40倍进一步观察所选细胞的染色体分散效果如何，是否在一个近似的平面上。选取染色体分散比较好，且近似在一个平面上的中期分裂相的细胞做染色体计数；选取典型的各分裂时期观察有丝分裂的前期、中期、后期和末期。

3、将10*40倍下选好的细胞换到油镜（10*100）倍观察，在100倍物镜下观察需要滴香柏油在盖玻片上。

结果与分析

一、结果分析

1、染色体计数的观察如下列图片所示

2n=16

2n=16

2n=16 通过以上的观察数出葱染色体条数为2n=16。

1、根尖的选取时间应该在植物细胞分裂最旺盛的时刻，具体时间可以参考前人的研究，如果没有经验可以借鉴则要不同时间段多次取材以作比较。本实验是根据前人的经验在上午8:30取材。

2、最好在根尖3-5cm长时取材。

3、前处理的时间及8-羟基喹啉的浓度要依材料染色体的大小而定。如果是大染色体则需要处理时间长，小染色体需要处理的时间短。

4、固定液的体积一定要大于材料体积的20倍以经快杀死细胞使细胞结构尽可能接近生活状态。

5、染色时间可以自己掌握，可以视材料而定。本实验从染色10小时到18小时都有取材观察，效果擦别不是太大。实验过程中失误的是染色后没有用冰醋酸分色就进行了镜检，使得镜检时看到的染色体染色过重，影响了观察效果。

6、制片是敲片是关键步骤，一定要用一只手的食指和中指将载玻片固定然后再用笔撞击载玻片，根尖分生组织都分散开后再镜检。