药物分析复习总结教学提纲

药物分析复习总结

第二章药品质量控制与药物分析方法验证

1.SOP（标准操作规程）

2.QC（质量控制）

3.GLP（药物非临床研究质量管理规范）（Laboratory）

4.GCP（药物临床试验质量管理规范）（Clinical）

5.GMP（药物生产质量管理规范）（Manufacture）

6.系统误差（具有固定的正或负偏差）(方法误差；试剂误差；仪器误差；操作误差)

偶然误差（不可定误差）

7.RSD即变异系数（相对标准偏差）

8.容量分析相对误差（RE）通常在0.2%以下；仪器分析法RE通常为2%~5%

9.称量的误差应小于1%

10.药典中API未规定含量百分数上限时，即不超过101.0%

11.消除系统误差方法：回收试验、校准仪器、对照实验、空白试验（回收试验：考察分

析方法能够对样品中被测物给予全量相应的能力验+证试验

12.95%的置信区间用1.96σ值进行计算

13.方法学验证参数：专属性；准确度（回收率）；精密度（RSD）；定量限；检测限；

定量限；线性与范围

14.称量时要多称一位，比如要称2.0g，则应称取1.95g~2.05g，而不是1.5g~2.5g

15.精密称量指称取重量应准确至所取质量的千分之一

16.热水指70~80度的水

17.不管鉴别、杂质测定（定量、限度）、含量测定，都需要进行的方法学验证为“专属

性”和“耐用性”

18.常用化学试剂质量等级：化学纯、分析纯、试剂纯、优质纯

19.分析方法验证的主要效能指标：准确度；精密度（重复性，中间精密度，重现性）；

专属性；耐用性；线性和范围；检测限和定量限；

20.测量不确定度的含义：是表征合理地赋予被测量值的分散性，与测量结果相联系的参

数。

21.药典附录包括“制剂通则”“通用检测方法”“指导原则”

22.杂志检查一般为限度检查

第三章样品的前处理和药物提取技术一、生物样品的采集（血浆、血清、全血；尿液；组织样品）

血浆：加抗凝剂后，2500~3000r/min离心5~10分钟

血清：静止凝固后，2500~3000r/min离心5~10分钟

二、生物样品的预处理（目的；影响因素；有机破坏，除蛋白质，结合物的水解，化学衍生化，游离药物分析的样品前处理方法）

目的：使药物从结合物中释放；防止杂质干扰；满足专属性；防止仪器污染影响因素：药物理化性质；浓度范围；测定目的；生物样品类型；预处理和分析技术

预处理技术：

1.有机破坏

①.湿法破坏：硝酸-高氯酸（对含氮杂环药物的破坏不够完全）

②.干法破坏：马福炉灰化法；低温等离子灰化法；氧瓶燃烧法（常用于卤素）

2.除蛋白质

①.加入与水相混溶的有机溶剂脱水

②.加入中性盐盐析

③.加入强酸生成不溶性盐

④.加入重金属盐类沉淀剂

⑤.加热

3.结合物水解：水解法；酶解法；溶剂解法

4.化学衍生化

5.游离药物分析的样品前处理方法（常用于血液处理中）

①.平衡透析法；

②.超滤法

还有超离心法和凝胶过滤法等

三、提取分离及相关技术（液-液提取法；离子对提取法；固相萃取法；固相微萃取技术，微透析，柱切换）

液-液提取法：水相的pH很重要，决定药物的存在状态；碱性药物最佳pH要高于pKa值1 ~2个单位；而酸性则要低于pKa值1~2个单位

离子对：提取离子性药物的方法；添加呈相反电荷的反离子物质

固相萃取法：即色谱；吸附分配离子交换；柱活化（反相柱需数毫升甲醇打破表面疏水层），加样，柱清洗，柱干燥，样品洗脱，SPE自动化（色谱联用）

固相微萃取技术：样品量小，适于分析挥发性与非挥发性物质

微透析：插入体内，不破坏生物体内环境

柱切换：六通阀。。

四、化学衍生化（目的；光谱分析法，色谱分析法）

目的：易于分离；提高灵敏度；增强稳定性；提高对光学异构体分离能力

光谱：紫外衍生；荧光衍生

色谱：分子中含有活泼氢者都可被化学衍生化（硅烷化，酰化，烷基化）（增大非极性）

第四章药物鉴别试验

一、物理常数测定法

1.相对密度（与水的密度之比）

2.熔点

3.比旋度=旋光度/(厚度*浓度)

4.吸收系数（E1%1cm：1%溶液液层厚度为1cm的吸光度值）

其它还有黏度、馏程、折光率、解离常数等

二、化学鉴别法（颜色变化；沉淀生成；气体生成；荧光反应；制备衍生物熔点鉴别法）

1.芳香第一胺反应（重氮化-耦合反应）：加稀HCl溶解，滴加少量NaNO2，再加b-

萘酚，生成橙黄色到猩红色沉淀

2.有机氟化物：氧瓶燃烧法有机破坏成无机氟化物，与茜素氟蓝、硝酸亚铈在pH=4.3

的弱酸下生成蓝紫色配位化合物

3.水杨酸盐：加FeCl3，显紫色；加稀盐酸，生成水杨酸沉淀（加乙酸铵成盐再次溶

解）

4.苯甲酸盐：加FeCl3，显赭色沉淀，加稀盐酸，变白色沉淀

5.钠盐：焦锑酸钾反应，钠离子与焦锑酸钾作用生成难溶的沉淀（法二：焰色反应）

6.钾盐：四苯硼钠反应，钠离子与四苯硼钠溶液反应生成白色沉淀（法二：焰色反

应）

7.铵盐：加过量NaOH加热，遇用水湿润的石蕊试纸，变蓝色（法二：气体使亚硝酸

汞试液湿润的滤纸显黑色。法三：溶液加入碱性碘化汞钾产生红棕色沉淀）

8.铁盐（亚铁）：滕氏蓝反应：滴加铁氰化钾，深蓝色沉淀，且沉淀在稀盐酸中不

溶，在NaOH中变成红棕色氢氧化铁沉淀（法二：与邻二氮菲反应呈红棕色）

9.铁盐（三价铁）：普鲁士蓝反应：滴加亚铁氰化钾，深蓝色沉淀，且沉淀在稀盐酸

中不溶，在NaOH中变成红棕色氢氧化铁沉淀（法二：与硫氰酸铵反应呈血红色）