Invitrogen中国测序通用引物序列
Invitrogen合成生物学服务产品手册说明书
Invitrogen 合成生物学服务产品手册•高品质引物和探针合成生物学服务合成生物学是什么？合成生物学是分子生物学与系统生物学的组合，使用工程学的原则来设计生物系统和生物工厂，其目的是创造出改进的生物功能以应对当前与未来的挑战。
我们相信合成生物学将会改变我们获取能源、生产食物以及优化工业过程的方式，并能检测、预防与治愈疾病。
我们致力于为科研人员提供卓越的技术和解决方案。
通过科学与工程，这一独特的领域能让科研人员研究、修改、创造和再创造高度复杂的生化途径、DNA 序列、基因以及自然生物系统，以便能够理解并解答一些关于生命最有挑战性的问题。
其中Pleasanton, California 工厂拥有：• ISO 9001认证• ISO 13485认证• GMP 认证我们在全球有9个生产基地：• Pleasanton, California • Regensburg, Germany • Aukland, New Zealand • Haneda, Japan • Inchinnan, UK • San Paulo, Brazil • Suzhou, China • Beijing, China • Guangzhou, China立足中国在中国，我们有苏州、北京、广州三地工厂进行合成生物学服务，服务内容包括引物合成和探针合成。
苏州、北京和广州工厂均获得ISO 9001认证，其中苏州工厂另有ISO 14000认证。
我们有多样化的仪器：• 25+台Jurassics 合成仪• 3台Applied Biosystems 3900合成仪• 3台Mermade12高通量合成仪• 1台AKTA 大规格合成仪• 5台LCMS 质检仪器• 1台 Agilent 96CE PRO II • 15+台 HPLC 纯化仪满足不同类型的应用需求：• PCR • qPCR • STR • SSR • NGSInvitrogen 引物合成服务已经超过了20年，我们在20余年的专业DNA 合成中积累了丰富的经验和良好的业内声誉。
CRISPR-Cas9体系实验流程(2)
CRISPR-Cas9体系实验流程(2)二代测序RRBS一、材料试剂准备1）质粒：pSpCa9(BB)(AddgeneplamidID:42230)，若实验用gRNA为PCR扩增纯化产物，则需要该质粒做为U6的模版。
pUC19(Invitrogen,cat.no.15364-011)可用于构建gRNA，若用PCR 产物进行转染，则需要该质粒来进行共转染，做为DNAcarrier。
上述三种质粒，根据实验选择gRNA的表达方式（PCR产物/单载体系统/双载体系统）来确定具体使用哪种。
2）超纯水，DNae/RNae-free(LifeTechnologie,cat.no.10977-023) 3）高保真聚合酶，KapaHiFi(KapaBioytem),PfuUltra(Agilen)，HerculaeIIfuionpolymerae均可，只需保真效果好，扩增过程不产生突变。
4）TaqDNApolymeraewithtandardTaqbuffer(NEB,cat.no.M0273S)用于一般检测。
5）QIAquickgele某tractionkit(Qiagen,cat.no.28704)6）QIApreppinminiprepkit(Qiagen,cat.no.27106)7）FatDigetBbI(BpiI)(Fermenta/ThermoScientific,cat.no.FD1014)，如需要将gRNA构建到pSpCa9(BB)-2A-GFP质粒上，则需要该酶。
8）T7DNAligaewith2某rapidligationbuffer(Enzymatic,cat.no.L602L).或者T4DNAligae，二者无区别。
10）dNTPolutionmi某,25mMeach(Enzymatic,cat.no.N205L)11）MgCl2,25mM(ThermoScientific,cat.no.R0971)12）T4polynucleotidekinae(NewEnglandBioLab,cat.no.M0201S)13）PlamidSafeATP-dependentDNae(Epicentre,cat.no.E3101K)14）Adenoine5′-triphophate,10mM(NewEnglandBioLab,cat.no.P0756S)15）SOCmedium(NewEnglandBioLab,cat.no.B9020S)二、实验流程或者人工手动选择，在目的区域5′-NGG（即PAM）上游20bp片段均可做为targetite，一般targetite可选在正义链或者反义链，二者均可。
pcdna3
pcdna3.4载体说明书
产品货号：HG-VPI0001
载体名称：pcDNA3、1(+)、pcDNA3、1+、pcDNA3、1
出品公司：Invitrogen
载体⽤途：哺乳动物表达载体
载体⽤⽤：5428bp
原核抗性：Ampicillin（氨苄青霉素）
真核筛选标记：Neomycin / G418
启动⽤：CMV promter
终⽤⽤：BGH poly(A) ignal
荧光标记：⽤
表达⽤式：组成型表达，⽤需诱导
表达⽤平：⽤
复制⽤：pUC ori
克隆菌株：DH5a、TOP10、L1-Blue等均可
载体拷贝数：⽤
5'测序引物：CMV-f（5’-CGCAAATGGGCGGTAGGCGTG-3’，测序公司免费提供）
3'测序引物：BGH-r（5’-TAGAAGGCACAGTCGAGG-3’，测序公司免费提供）
价格：询价
载体描述：
pcDNA3、1(+)是⽤前最常⽤的哺乳动物表达载体之⽤，载体使⽤CMV 强启动⽤调控外源基因的表达。
载体拷贝数很⽤，表达量也很⽤。
Amp+原核筛选抗性，Neo+真核筛选抗性，可以利⽤G418筛选稳定细胞株。
质粒图谱：。
上海实验室：上海市徐汇区银都路218号 聚科生物
北京实验室：北京亦庄经济技术开发区荣昌东街7号隆盛工业园203邮编：100088 电话：800-820-8982-1-1 Email：seqbj@
广州实验室：广州市海珠区新港东路2429号海珠科技大楼 213室邮编：510320 电话：800-820-8982-1-1 Email：seqgz@
常用载体与引物查询表
北京实验室：北京亦庄经济技术开发区荣昌东街7号隆盛工业园203邮编：100088 电话：800-820-8982-1-1 Email：seqbj@
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常用引物序列
常用引物序列引言引物序列是指在分子生物学实验中用来特异性引导DNA或RNA复制和扩增的短链核酸序列。
常用的引物序列在科研和实验室工作中起着重要作用。
本文将介绍几种常用引物序列及其在实验中的应用。
1. 通用引物序列通用引物序列是指适用于多种物种的引物序列。
常见的通用引物序列包括16S rRNA引物序列用于细菌和古细菌的分析，18S rRNA引物序列用于真核生物的分析，以及ITS引物序列用于真菌的分析。
这些通用引物序列具有高度保守性，可以用于不同物种的物种鉴定和进化分析。
2. 物种特异引物序列物种特异引物序列是指只在特定物种中存在的引物序列。
这些引物序列通常用于物种鉴定和种群遗传分析。
例如，人类特异引物序列可以用于人类DNA的特异扩增，从而进行人类个体的鉴定。
物种特异引物序列的选择和设计需要根据目标物种的基因组序列进行。
3. 定量引物序列定量引物序列是指用于定量PCR实验的引物序列。
这些引物序列通常与目标基因的外显子区域相结合，可以通过PCR扩增目标基因的特定片段，并通过实时荧光定量PCR技术进行定量分析。
定量引物序列的设计需要考虑引物的特异性和扩增效率，以确保准确的定量结果。
4. 荧光标记引物序列荧光标记引物序列是指在引物序列上加入荧光标记分子，用于检测和定量特定基因的表达水平。
常用的荧光标记引物序列包括荧光探针和荧光引物。
荧光标记引物序列可以通过荧光定量PCR或原位杂交等技术进行检测。
5. 反向引物序列反向引物序列是指用于反转录PCR实验的引物序列。
反转录PCR是一种将RNA转录成cDNA的技术，常用于研究基因的表达调控和mRNA的定量分析。
反向引物序列通常与反向转录酶结合，将RNA逆转录成cDNA，并通过PCR扩增特定基因的cDNA片段。
6. 基因特异引物序列基因特异引物序列是指用于特定基因扩增的引物序列。
这些引物序列通常与目标基因的外显子区域相结合，可以选择性地扩增目标基因，从而进行基因型鉴定和基因表达分析。
Invitrogen中国测序通用引物序列
ATT AAC CCT CAC TAA AGG GA
pGEX-4T-5'
GGG CTG GCA AGC CAC GTT TGG TG
pGEX-4T-3'
CCG GGA GCT GCA TGT GTC AGA GG
GLp1
TGT ATC TTA TGG TAC TGT AAC TG
GLp2
CTT TAT GTT TTT GGC GTC TTC CA
PBV220R:
CTG CGT TCT GAT TTA ATC TG
U6
ATG GAC TAT CAT ATG CTT ACC GTA
2.0rev primer:
AGG CGA TTA AGT TGG GTA
3.0rev:
GAG TTA GCT CAC TCA TTA GGC
S.tag
GAA CGC CAG CAC ATG GAC
pIRES2-EGFP.P5’:
GTA GGC GTG TAC GGT GGG AG
pIRES2-EGFP.P3’:
AAC GCA CAC CGG CCT TAT TC
3'AD:
AGA TGG TGC ACG ATG CAC AG
CMV -F
CGC AAA TGG GCG GTA GGC GTG
S1
pCMV-R
TCCAAACTCATCAATGTATC
pTRC99C-F:
TTG CGC CGA CAT CAT AAC
pTRC99C-R:
CTGCGTTCTGATTTAATCTG
pCEP-F:
AGA GCT CGT TTA GTG AAC CG
EBV-R :
通用型基因打靶载体的构建及其功能鉴定_陈兴启
生物工程学报C hin J Biotech2008, October 25; 24(10): 1818-1823 Chinese Journal of Biotechnology ISSN 1000-3061cjb@© 2008 Institute of Microbiology, CAS & CSM, All rights reserved通用型基因打靶载体的构建及其功能鉴定陈兴启*, 孙达权*, 刘凤军, 贾淑玲, 张涌西北农林科技大学动物医学院生物工程研究所, 杨凌 712100摘要:为了构建适合大多数基因座位点打靶的通用型基因打靶载体及打靶成功后去除正选择标记基因, 以克隆载体pGEM-3Z为骨架, 插入了一个正选择标记基因新霉素磷酸转移酶基因(neo)、两个相同的负选择标记基因单纯疱疹病毒胸苷激酶基因HSV-tk1和HSV-tk2, 并在neo的两侧各添加了一个方向相同的LoxP(locus of crossing-over (x) in P1)序列及两个不同的多克隆位点序列, 从而构建了载体pA2T。
插入的两个不同的多克隆位点序列中, neo和HSV-tk1之间的多克隆位点序列有8个稀少的酶切位点、neo和HSV-tk2之间的多克隆位点序列有5个稀少的酶切位点, neo、HSV-tk1和HSV-tk2有各自独立的转录单元。
脂质体法转染山羊成纤维细胞, 用遗传霉素(G418)和丙氧鸟苷(GAC)进行正负筛选, 验证了正负选择标记基因的生物活性, 证明通用型基因打靶载体pA2T构建成功。
载体pA2T转化组成性表达Cre重组酶(Cyclization recombination protein)的大肠杆菌BM25.8, 检测到LoxP序列的生物活性, 结果表明pA2T中的正选基因可以被Cre重组酶去除。
因此, 本研究所构建的通用型基因打靶载体pA2T, 根据不同的基因座设计同源臂后, 插入到MCS中可直接用于不同基因座位点的打靶, 并能够在打靶成功后用Cre重组酶去除基因组中插入的neo基因, 为用基因打靶的方法制作转基因动物提供了便利。
测序通用引物序列
测序通用引物序列常见载体的测序引物：Primer of Vector:Vector：Primer(F)；Primer(R)pACT T7 T3pACT2 GAL4 AD pACT2-RpAS2-1 GAL4 BD pAS2-1.RpB42AD pB42ADF pB42ADRpBACPAK8 BAC1 BAC2pBK-CMV T7 T3PBS(SK/KS)/M13- M13F/T7 T3/M13RpBV220 PBV220F PBV220RpCAMBIA 1301(1300) P1 P2pCAMBIA 2300 M13R(-48) M13F(-47)PCANTB5E S1/M13R S6pCAT3-enhancer RVP3 此载体无反向引物pcDNA3.0 CMV-F/T7 SP6/BGHpcDNA3.1 T7 BGHpcDNA4 T7/CMV-F BGHpcDNA6 T7/CMV-F(J21025在T7前面）BGHpcDNAII T7 SP6pCE2.1 M13F M13RpCEP4 pCEP-F EBV-RpCF-T M13F M13RpCI T7（17Base）此载体无反向引物pCI-neo T7（17Base）T3pCMS-EGFP T7 T3pCMV-3Tag-4A T3 /PFLAG-CMV-F T7pCMV5 pCMV5F pCMV5RpCMV5-Flag pCMV5F pCMV5RpCMV-MYC/HA pCMV-F pCMV-RpCMV-Sport M13F/T7 SP6/M13RpCMV-Tag(KAN+) T3 T7pCR2.1-TOPO M13F/T7 M13RpCR3.1 T7 BGHpCS2 SP6 T7pDonar M13F M13RpDONR221 M13F M13RpDrive T7 SP6pDRIveR(KAN+) T7 SP6pDsRED1-C1 pDsRED-ex-C1-F pEGFP-N-3’(距离很近,一般不用) pDsRED2-C1(KAN+) pDsRED-ex-C1-F pEGFP-N-3’pDSRED-N1(KAN+) pEGFP-N-5’ PDSRED-N-RpECFP-C pEGFP-C-5’ pECFP-C-3′pECFP-N1 pEGFP-N-5’ pEGFP-N-3’pEF/myc/ER pEF-F pCDNA3.1RpEGFP-C(KAN+) pEGFP-C-5’ pEGFP-C-3′pEGFP-N(KAN+) pEGFP-N-5’ pEGFP-N-3’pENTR/D-TOPO(KAN+) M13F M13RpET-*(His)(KAN+) T7 T7 TerpET22(a,b,c)(AMP+) T7 T7 TerpET28,30,24,49(KAN+) T7 T7 TerpET32(a,b,c)(AMP+) T7/S.tag T7 TerpET50(amp+) T7/s.tag T7TERpET44(AMP+) T7/s.tag T7 TerpEYFP-N1 pEGFP-N-5’ pEGFP-N-3’pEYFP-C1 pEGFP-C-5’ pEGFP-C-3′pFLAG-CMV pFLAG-CMV -F pFLAG-CMV -R pGAD424 GAL4 AD 3′ADpGADGH GAL4 AD 3′ADpGADT7-Rec GAL4 AD/T7 3′ADpGAPZa-A a-FACTOR 3′AOXpGBKT7(Kana+) T7 3′BDpGEM-T(-Easy) M13F/T7 SP6/M13RpGEX-(*)T pGEX-4T-5’ pGEX-4T-3’pGL2 GLP1 GLP2pGL3 RVP3 GLP2(RVP4)(没有特别说明用GLP2) PinpointTM Vector Pinpoint Primer SP6pIRES PIRES-F/T7 T3/PIRES-R (J40720)pIRES2-EGFP pIRES2-EGFP.P5’ pIRES2-EGFP.P3’pLXSN pLXSN-F pLXSN-RpMAL-c2E MalE primer M13F(-47)pMAL-C2x P5’ P3’pMAL-p2X MalE primer M13F(-47)PMD18-T M13R(-48) M13F(-47)PMD19-T M13F(-47) M13R(-48)pPIC9K(AMP+、ZEO+）5’AOX/a-factor 3’AOX pPICZa 5′AOX/PPICZa-F 3′AOXpPROEXHTA M13R(-48) 无反向引物pQE30or40 pQE30-F pQE-R:pRSET T7 T7TERpSilencer3.1-H1 hygro M13F(-47) 3.0REV pSILENCEV2.0-U6 T7 2.0REVpSK01-T M13F M13RpSK-CMV(KAN+) T7 T3pSP72 T7 SP6pSport1 SP6/M13F(-47) T7/M13RpSUPER T7 T3pTA2 M13F/T7(优先使用M13F）T3/M13RpT-Adv M13F /T7 M13RpTARGET TM pTarget.F(在T7前面）/T7 pTarget.R pTO-T7 T7 T7TERpTRC99a-c pTRC99C-F pTRC99C-RpTriPLEx2 5′pTriPLEx2 T7pTWIN-1 T7 T7TER(客户确认再用）pUC18(19)/118(119) M13F(-47) M13R(-48)pUCm-T M13F/T7 M13RpVAX1 T7 BGHpWSK29 T7/M13F/M13F(-47) T3/M13R/M13R(-48)pXT7 T7 SP6pYES2 T7 pYes2.RpLEXA pLEXA-F pLEXA-RpLNCX pLNCX-F pLNCX-RpRECEIVER CMV-F 此载体无反向引物pSHUTTLE-CMV PSHUTTLE-CMV-F PSHUTTLE-CMV-R pSP64/65 SP6 此载体无反向引物pSTBlue-1 T7 SP6pT7Blue(R) T7 M13F(-47)引物名称序列(5′-3′)：M13R：CAG GAA ACA GCT ATG ACCM13F：TGT AAA ACG ACG GCC AGTM13F(-47)：CGC CAG GGT TTT CCC AGT CAC GACM13R(-48)：AGC GGA TAA CAA TTT CAC ACA GGAM13(-96)：CCC TCA TAG TTA GCG TAA CGSP6：ATT TAG GTG ACA CTA TAGT7：TAA TAC GAC TCA CTA TAG GGT7 terminator：TGC TAG TTA TTG CTC AGC GGT3：ATT AAC CCT CAC TAA AGG GApGEX-4T-5′：GGG CTG GCA AGC CAC GTT TGG TG pGEX-4T-3′：CCG GGA GCT GCA TGT GTC AGA GG GLp1：TGT ATC TTA TGG TAC TGT AAC TGGLp2：CTT TAT GTT TTT GGC GTC TTC CARVp3：CTA GCA AAA TAG GCT GTC CCRVp4：GAC GAT AGT CAT GCC CCG CGpcDNA3.1R：TAG AAG GCA CAG TCG AGGPinPoint primer：CGT GAC GCG GTG CAG GGC G pCMV-F：TCT AAA AGC TGC GGA ATT GTpCMV-R：TCCAAACTCATCAATGTATCpTRC99C-F: TTG CGC CGA CAT CAT AACpTRC99C-R: CTGCGTTCTGATTTAATCTGpCEP-F: AGA GCT CGT TTA GTG AAC CGEBV-R : GTG GTT TGT CCA AAC TCA TCpIRES2-EGFP.P5’: GTA GGC GTG TAC GGT GGG AG pIRES2-EGFP.P3’: AAC GCA CAC CGG CCT TAT TC3′AD: AGA TGG TGC ACG ATG CAC AGCMV -F：CGC AAA TGG GCG GTA GGC GTGS1：CAA CGT GAA AAA ATT ATT ATT CGCS6：GTA AAT GAA TTT TCT GTA GTA GG5`AOX1：GAC TGG TTC CAA TTG ACA AGC3`AOX1：GCA AAT GGC ATT CTG ACA TCCα-Factor：TAC TAT TGC CAG CAT TGC TGCGAL4 AD：TAC CAC TAC AAT GGA TGpACT2-R：GTGCACGATGCACAGTTGAApB42ADF：CCA GCC TCT TGC TGA GTG GAG ATGpB42ADR：AAG CCG ACA ACC TTG ATT GGA GpEGFP-N-5’：TGG GAG GTC TAT ATA AGC AGA G pEGFP-N-3’：CGT CGC CGT CCA GCT CGA CCA G pEGFP-C-5’：CAT GGT CCT GCT GGA GTT CGT G pEGFP-C-3′ ：TAT GGC TGA TTA TGA TCA GTPBV220F：AAG AAG GGC AGC ATT CAA AGPBV220R：CTG CGT TCT GAT TTA ATC TGU6：ATG GAC TAT CAT ATG CTT ACC GTA2.0rev primer：AGG CGA TTA AGT TGG GTA3.0rev：GAG TTA GCT CAC TCA TTA GGCS.tag：GAA CGC CAG CAC ATG GAC5′TriplEx2：CTC CGA GAT CTG GAC GAG CRVP4：GAC GAT AGT CAT GCC CCG CGRVP3：CTA GCA AAA TAG GCT GTC CCpQE30-R：GTT CTG AGG TCA TTA CTG GpQE30-F：TGA GCG GAT AAC AAT TTC ACpEF-F：TCA AGC CTC AGA CAG TGG TTCpDSRED-N1-R：TGA AGC GCA TGA ACT CCT TG pDsRED-express-C1-F：TCC CAC AAC GAG GAC TAC AC pCMV5R：ATT ATA GAG GAC ACC TAG TCpCMV5F：TTC CAA AAT GTC GTA ATA ACP5′：TGC GTA CTG CGG TGA TCA ACP3′：CTG CAA GGC GAT TAA GTT GGBAC2：ACG CAC AGA ATC TAG CGC TTBAC1：AAC CAT CTC GCA AAT AAA TA3′BD：TAA GAG TCA CTT TAA AAT TTG TAT AC pTarget.F：CCA GGA TTT TCC CAG TCA CpTarget.R：GGC TTT ACA CTT TAT GCT TCT7(17base)：ACA TCC ACT TTG CCT TTC TCpYes2.R：TCG GTT AGA GCG GAT GTGGAL4 BD：TCA TCG GAA GAG AGT AGpAS2-1.R：AAG AGT TAC TCA AGA ACA AGA ApFlag-CMV-F: GGT AGG CGT GTA CGG TGGpFlag-CMV-R: GCA CTG GAG TGG CAA CTTpIRES-F: CTT ACT GAC ATC CAC TTT GCpIRES.R: CAC TGC ATT CTA GTT GTG GTP1：CCA GGC TTT ACA CTT TAT GCP2：GCG ATT AAG TTG GGT AAC GCpLEXA-F：CGT CAG CAG AGC TTC ACC ATpLEXA-R：TAA AAC CTA AGA GTC ACT TTpLNCX-F：AGC TCG TTT AGT GAA CCG TCA GAT CG pLNCX-R：ACC TAC AGG TGG GGT CTT TCA TTC CC pLXSN-F：CTT GAA CCT CCT CGT TCG ACpLXSN-R：GTT GCT GAC TAA TTG AGA TGpSHUTTLE-CMV-F：GGT CTA TAT AAG CAG AGG TG pSHUTTLE-CMV-R：GTG GTA TGG CTG ATT ATG ATC AG MalE Primer：GGT CGT CAG ACT GTC GAT GAA GCC。
表4 主要使用的引物及序列
表4 主要使用的引物及序列序列技术在现代生物学研究中发挥着越来越重要的作用。
在进行序列分析之前，需要先选择合适的引物，以确保检测到所需的目标序列，并避免检测到不必要的杂交或引物间的相互杂交。
本文将介绍主要使用的引物及其序列。
1. 基因测序引物基因测序引物是用于测序DNA或RNA的引物。
这些引物通常包括一个DNA或RNA序列和一个与之匹配的引物序列。
常用的基因测序引物包括以下几种：- M13引物M13引物是一种通用的测序引物，用于测序单链DNA。
其序列为：5'-GTAAAACGACGGCCAGT-3'。
- T7和SP6引物T7和SP6引物用于测序DNA文库中的克隆DNA。
其中T7引物的序列为：5'-TAATACGACTCACTATAGGG-3'，SP6引物的序列为：5'-ATTTAGGTGACACTATAG-3'。
- M13F和M13R引物M13F和M13R引物也用于测序单链DNA。
M13F引物的序列为：5'-GTAAAACGACGGCCAGT-3'，M13R引物的序列为：5'-CAGGAAACAGCTATGAC-3'。
- T3和T7引物T3和T7引物与RNA兼容，并用于测序RNA和RNA-DNA杂交分子。
T3引物的序列为：5'-AATTAACCCTCACTAAAGGGA-3'，T7引物的序列为：5'-TAATACGACTCACTATAG-3'。
2. PCR引物PCR引物是用于荧光定量PCR、数字PCR、标准PCR等技术的引物。
以下是几种常用的PCR引物：- GAPDH引物GAPDH引物用于检测人体组织中的GAPDH基因表达水平。
其序列为：5'-GAAGGTGAAGGTCGGAGT-3'（前引物）、5'-GAAGATGGTGATGGGATTTC-3'（后引物）。
pYD1酵母表达载体
pYD1编号 载体名称北京华越洋生物VECT2890 pYD1载体基本信息出品公司: Invitrogen载体名称: pYD1质粒类型: 酵母表达展示系统载体高拷贝/低拷贝: 高拷贝启动子: CMV克隆方法: 多克隆位点，限制性内切酶载体大小: 5009bp5' 测序引物及序列: pYD1-‐F: A GTAACGTTTGTCAGTAATTGC 3' 测序引物及序列: pYD1-‐R: G TCGATTTTGTTACATCTACAC 载体标签: C-‐His载体抗性: 氨苄筛选标记: TRP1备注: 配套酿酒酵母菌株是EBY100.产品目录号: V835-‐01稳定性: 稳表达组成型: 组成型病毒/非病毒: 非病毒载体质粒图谱和多克隆位点信息其他酵母表达载体：p416GFD pPIC9p53blue pPIC9K pACT2-AD pPIC9k-His pAD-GAL4-2.1 pPICZA pADH2 pPICZB pAUR123 pPICZC pBridge pPICZαA pCL1 pPICZαB pDEST32 pPICZαC pDisplay pPICZαD pDR195 pPICZαFC pESC-His pPICZαGB pESC-Leu pPink-HC pESC-TRP pPink-LC pESC-URA pPinkα-HC pFA6a-FGP(S65T)-kanMX6 pRS316 pFLD pRS403 pFLD/CAT pRS405 pFLDαpRS406 pGADT7-T pRS414 pGAG424 pRS415 pGAPZA pRS416 pGAPZB pRS41H pGAPZαB pRS426 pGAPZαC pRS426gal pGBKT7 pSEP1 pGBKT7-53 pSEP2 pGBKT7-Lam pSEP3pHIC-PI pSospHIL-D2 pSos-MAFB pHIL-S1 pUG66pHis2 pYC2/CT pHisSi-1 pYC2/NTA pMETA pYC2/NTB pMETB pYCP211 pMETC pYEPlac112 pMETαA pYEPlac195 pMETαB pYES2 pMETαC pYES2-EGFP pMyr pYES2-kan pPIC3.5 pYES2-NTA pPIC3.5K pYES2-NTB pPIC6B pYES2-NTCpPIC6C pYES3/CT pPIC6αA pYES6/CT pPIC6αB pYES-DEST52 pPIC6αC pYIP211 pYX212 pYIP5 SUMOprotease pYRP7Ycp22lac-EGFP Ycplac33。
诺赛基因通用引物序列
GCTCCTCAGTGGATGTTGCC CGCAATCACAGGTTTACACC ACGTGCTACTTCCATTTGTC GTAAATTTCTGGCAAGGTAGAC TATAACGCGTTTGGAATCACT GGAGAAATTAACTATGAGAGG GTTCTGAGGTCATTACTGG ATTAGGACAAGGCTGGTGGG GAAATTTGTGATGCTATTGC ACAGCTCCTGGGCAACGTGC AGGCGATTAAGTTGGGTA ATCTGTATCAGGCTGAAAATC TTAAAGAGGTATATATTAATGTATCG CAG CCT GAA GTG AAA GAA CAG CCT GAA GTG AAA GAA TTTGCAGCTACCACATT GTTCACGGTGCCCTCC gAgCggATAACAATTTCACACAgg CTAGCAAAATAGGCTGTCCC GACGATAGTCATGCCCCGCG GCAGTTCCCTACTCTCGC CATCAGAGATTTTGAGACAC ATTTAGGTGACACTATAG CAGGCTTTACACTTTATGCTTC GAACGCCAGCACATGGAC GGAGGCTTTTTTGGAGGC AAATAAAGCAATAGCATCAC GAAATTTGTGATGCTATTGC AATTAACCCTCACTAAAGGG TAATACGACTCACTATAGG AAGGCTAGAGTACTTAATACGA TAATACGACTCACTATAGGg GCTAGTTATTGCTCAGCG AATTAATCATCCGGCTCG TCCTTCCGTGTTTCAGTTAGC TCCACGCTGTTTTGACCTCC
TGTCCTACTCAGGAGAGCGTTCAC GCCCTTCTTAATGTTTTTG GCATGGCCTTTGCAGGG
中国大鲵促甲状腺激素受体的克隆及序列分析
中国大鲵促甲状腺激素受体的克隆及序列分析王勤;何青;袁月华;徐海龙;李成磊【摘要】本实验以大鲵脑组织为材料,通过RT-PCR和RACE方法成功获得了中国大鲵Andrias davidianus促甲状腺激素受体(TSHR)cDNA全长序列.该序列编码585个氨基酸,具有典型的G蛋白偶联受体家族的特点,有4个N-糖基化位点,7个跨膜α螺旋.同源分析显示,大鲵TSHR与热带爪蟾、变色龙、人的TSHR同源性分别为70％、70％和67％.同时大鲵与其它脊椎动物TSHR在结构上存在一些差异,如缺乏前导序列、胞外部分序列缩短、没有富含亮氨酸的重复单位(LRRs)等,大鲵TSHR结构上的这些差异是否与其不同的生理功能相关有待进一步研究.利用邻接法对部分脊椎动物TSHR氨基酸序列构建分子系统树,结果显示有尾目大鲵为两栖动物中较早分化的一支,表明其进化地位较原始.RT-PCR组织分布分析发现,TSHR 基因在大鲵的甲状腺外组织也有表达,其中性腺组织表达量最高,这可能暗示TSHR 与大鲵的生殖调节有关.【期刊名称】《四川动物》【年(卷),期】2013(032)003【总页数】6页(P348-353)【关键词】中国大鲵;克隆;甲状腺激素受体;组织分布【作者】王勤;何青;袁月华;徐海龙;李成磊【作者单位】四川农业大学生命科学学院,四川雅安625014;四川农业大学生命科学学院,四川雅安625014;四川农业大学生命科学学院,四川雅安625014;四川农业大学生命科学学院,四川雅安625014;四川农业大学生命科学学院,四川雅安625014【正文语种】中文【中图分类】Q959.5;Q785;S917促甲状腺激素(thyrotropin)又称甲状腺刺激激素(thyroid-stimulating hormone，TSH)，是腺垂体分泌的促进甲状腺的生长和功能发挥的糖蛋白激素，它可以通过与其受体(thyroid-stimulating hormone receptor，TSHR)的特异性结合来调节甲状腺细胞的成长、增殖和分化，还可以调节脊椎动物的生长发育和新陈代谢。
测序通用引物名称及序列表
测序通⽤引物名称及序列表测序通⽤引物名称及序列列表载体名称上游引物（5'primer）下游引物（3'primer）P3*FLAG-CMV CMV-30(825-854)CMV-24(1129-1152) pAc5.1/V5-His(_A,_B,_C)pAc5-5BGH rev pAcG2T pGEX-5not availablepACT T7EEV T3/EBVrevpACT2GAL4ADfor pGAL4-ADrvpACT2p17110p12584 pACYC184(BamHI-site)PBRforBam PBRrevBampACYCDuet-1(MCSI)ACYCDuetUP1Primer DuetDOWN1 pACYCDuet-1(MCSII)DuetUp2T7-Terminator pAdEasy-1not available not availablepAdTrack-CMV not available not available pAS2-1GAL4Bdfor/P24990pGAL4-BDrv/P31430pB42AD pB42ADF PB42ADRpBABE pBMN_5'pBacPAK8BAC1BAC2pBAD pBAD-F pBAD-R pBAD/HisABC pBAD-5'pBBR1MCS T3/M13rev T7/M13forpBD-GAL4pBD-GAL4-F PBD-GAL4-RpBI12135S NOSpBIND GAL4-Bdfor T3,EBVrevpBK-CMV M13F/T7M13R/T3 pBluescriptIIKS(+/-)T3/M13rev T7/M13for（优先⽤M13F）pBluescriptIISK(+/-)T3/M13rev T7/M13forpBluescriptKS(+/-)T3/M13rev T7/M13forpBluescriptSK(+/-)T3/M13rev T7/M13forpBR322(BamHI-site)PBRforBam PBRrevBampBR322(EcoRI/HindIII-sites)pBRforEco pBRrevHind pBR325(BamHI-site)PBRforBam PBRrevBampBR329(BamHI-site)PBRforBam PBRrevBampBridge(MCSI)GAL4-Bdfor3'BDpBridge(MCSII)not available not available pBS-T II T3/M13rev T7/M13forpBS（AMP）T7T3 pBSR T3T7ter pBudCE4.1(MCSI)CMV-Profor,T7c-mycrev,EBVrevpBudCE4.1(MCSII)EF-1αFwd BGHpBudCE4.1/lacZ/CAT CMV-Profor,T7c-mycrev,EBVrev pBV220pBV220F PBV220RpCAL-c T7/Tac-Profor T7-TerminatorpCAL-n T7/Tac-Profor T7-Terminator pCAMBIA1301(1300)pCAMBIA1301-5'(ECORI)/M13R pCAMBIA1301-3'(HindIII) pCAMBIA1304pCAMBIA1301-5'(ECORI)pCAMBIA1301-3'(HindIII) pCAMBIA2300M13R(-48)M13F(-47)/M13F(-49) pCANTB5E S1S6pCAT3-enhancer RVP3此载体⽆反向引物pCDFDuet-1(MCSI)ACYCDuetUP1Primer DuetDOWN1pCDFDuet-1(MCSII)DuetUP2T7TER pcDNA1.1CMV-Profor,T7pCDM8-3pcDNA2.1M13for/T7M13rev/Tac-ProforpcDNA3T7/CMV-Profor BGH rev/SP6 pcDNA3.1(+/-)pcDNA3.1F/T7/CMV-Profor BGH revpcDNA3.1/His(_A,_B,_C)T7/CMV-Profor BGH rev pcDNA3.1/myc-His(_A,_B,_C)T7/CMV-Profor BGH rev/c-mycrev pcDNA3.1/V5-His(_A,_B,_C)T7/CMV-Profor BGH rev/V5rev pcDNA3.1/Hygro(+,-)T7/CMV-Profor BGH rev/V5revpcDNA3.1/Zeo(+.-)T7BGHrevpcDNA3.3TOPOTA CMV-Profor TKPAreverse pcDNA4/HisMax(_A,_B,_C)Xpressfor BGH revpcDNA4/HisMax-TOPO Xpressfor BGH rev pcDNA4/HisMax-TOPO/lacZ Xpressfor BGH rev pcDNA4/myc-His(_A,_B,_C)T7,CMV-Profor BGH rev,c-mycrev pcDNA4/TO TREfor/CMV-Profor BGH rev pcDNA4/V5-His(_A,_B,_C)CMV-Profor,T7BGH rev,V5rev pcDNA4-TET/ON/AMP+CMV-ProforpcDNA5/FRT T7/CMV-Profor BGH rev pcDNA6/myc-His(_A,_B,_C)CMV-Profor,T7BGH rev,c-mycrev pcDNA6/V5-His(_A,_B,_C)CMV-Profor,T7BGH rev,V5rev pCEP4pCEP-F/CMV-Profor EBVrevpCI T7（17BASE）EBVrevpCI-neo T7（17BASE）EBVrev,T3pCMS-EGFP T7T3pCMS-EGFP T7EBVrev,T3pCMV-3Tag-4A T3/PFLAG-CMV-F T7 pCMV5pCMV5F PCMV5RpCMV6CMV-Profor pCMV6-3、HGHrevpCMV6-XL4CMV-Profor/T7pCMV6-3、HGHrevpCMV-HA PCMV-F,CMV-Profor,TREfor PCMV-R，EBVrev pCMV-MYC(AMP+)PCMV-F PCMV-R,EBVrevpCMVmyc/nuc CMV-Profor BGH rev,c-mycrev pcmv-scriptEXVector T3T7 pCMV-Sport6T7/M13for SP6/M13rev pCOLADuet-1(MCSI)ACYCDuetUP1Primer DuetDOWN1pCOLADuet-1(MCSII)DuetUP2T7TER pCR2.1T7,M13for M13rev pCR2.1-TOPO M13for,T7M13rev pCR3.1T7BGH rev pCR3.1-Uni T7BGH revpCR4T3/M13rev T7/M13forpCR4-Blunt T3/M13rev T7/M13forpCR4-TOPO M13rev,T3M13for,T7pCR-Blunt M13rev T7,M13forpCR-BluntII M13rev/SP6T7/M13for pCR-BluntII-TOPO M13rev/SP6M13for/T7 pCRII M13rev/SP6T7/M13for pCRII-TOPOM13rev/SP6M13for/T7pCR-ScriptSK(+)T7/M13for T3/M13revpCR-XL-TOPO M13rev T7,M13forpCS2+(MCSI)SP6EBVrev,T7?pCS2+(MCSII)T3pSG5-3pDB_GAL4cam T7PpDB_leu PDBLeu-5PDBLeu-3pDEST22DEST22F DEST22RpDEST15pGEX-5T7-TerminatorpDEST20pGEX-5pFastBac-3pDEST26TREfor/CMV-Profor T7/M13forpDisplay T7/CMV-Profor c-mycrev pDNR-LIB(MCS_A)M13for,T7pSG5-3,M13R pDonar M13F M13RpDONR201PDONR-F PDONR-RpDONR207PDONR-F PDONR-RpDONR223M13F M13RpDrive T7/M13rev SP6/M13for pDsRED1-C1(DsRed1-N-f)DsRed1-C-rpDsRed1-N1CMV-Profor RFP-Nrev,CMV-R?pDsRed2-N1(DsRed1-N-f)DsRed1-C-rpDsRed2-C1(DsRed1-N-f)DsRed1-C-r pDsRED2-C1(KAN+)pDsRED-ex-C1-F pEGFP-N-3’pDsRed-Express dsRed1_N_primer/CMV-F dsRed1_C_primer/CMV-R pDSRED-monomer-N1(KAN+)dsRed1_N_primer pDSRED-N1(KAN+)pEGFP-N-5’pDSRED-N-RpEASY-Blunt M13F T7/M13RpEASY-BluntSimple M13F T7/M13R（距离插⼊位点合适，优先安排）pEASY-T1Simple M13F M13R（距离插⼊位点合适，优先安排）pEASY-T1M13F/T7M13RpEASY-T3M13F/T7M13R/SP6pECFP-N(C)PECFP-N-5.PECFP-N-3,pEF/myc/cyto/ER/mito/nuc pEF-5Pcdna3.1R/BGH rev pEF1(4,6/myc-His)T7/pEF-5Pcdna3.1R/BGH rev pEF1(4,6/V5-His)T7/pEF-5Pcdna3.1R/BGH rev pEF1(4;6/His_A;_B;_C)T7/Xpressfor Pcdna3.1R/BGH rev pEF5/FRT/V5-D(-TOPO)T7/pEF-5Pcdna3.1R/BGH rev pEGFP M13rev EGFP-NrevpEGFP-1not available EGFP-Nrev/PEGFP-N-3' pEGFP-C PEGFP-C-5′PEGFP-C-3′pEGFP-C1EGFP-Cfor SV40-pArevpEGFP-C2EGFP-Cfor SV40-pArevpEGFP-C3EGFP-Cfor SV40-pArevpEGFP-F EGFP-Cfor SV40-pArevpEGFP-N PEGFP-N-5′PEGFP-N-3′pEGFP-N1CMV-Profor EGFP-NrevpEGFP-N2CMV-Profor EGFP-NrevpEGFP-N3CMV-Profor EGFP-NrevpENTR M13F M13R pET-11(-a,-b,-c,-d)T7T7-TerminatorpET-12(-a,-b,-c)T7T7-Terminator pET-14b T7T7-TerminatorpET-15b T7T7-TerminatorpET-16b T7T7-TerminatorpET-17b T7T7-TerminatorpET-17xb T7T7-TerminatorpET-19b T7T7-TerminatorpET-20b(+)T7T7-Terminator pET-21(-a,-b,-c,-d)(+)T7T7-Terminator pET-22b(+)T7T7-Terminator pET-23(-a,-b,-c,-d)(+)T7T7-Terminator pET-24(-a,-b,-c,-d)(+)T7T7-Terminator pET-25b(+)T7T7-TerminatorpET-26b(+)T7T7-TerminatorpET-27b(+)T7T7-TerminatorpET-28a(-b,-c)(+)T7T7-TerminatorpET-29a(-b,-c)(+)S.tag/T7T7-TerminatorpET-3(-a,-b,-c,-d)T7T7-Terminator pET-30_Ek/LIC T7T7-Terminator pET-30_Xa/LIC T7T7-Terminator pET-30a(-b,-c) (+)S.tag/T7T7-Terminator pET-31b(+)not available T7-Terminator pET-32_Ek/LIC TRXfor T7-Terminator pET-32_XA/LIC TRXfor T7-Terminator pET-32a(-b,-c)(+)S.tag/TRXfor T7-Terminator pET-33b(+)T7T7-Terminator pET-34b(+)S.tag T7-Terminator pET-35b(+)S.tag T7-Terminator pET-36b(+)S.tag T7-Terminator pET-37b(+)S.tag T7-Terminator pET-38b(+)not available T7-Terminator pET-39b(+)S.tag T7-Terminator pET-40b(+)S.tag T7-Terminator pET-41_Ek/LIC GST-Cfor T7-Terminator pET-41a(-b,-c)(+)S.tag/pGEX-5T7-Terminator pET-42a(-b,-c)(+)S.tag/pGEX-5T7-Terminator pET-43.1a(-b,-c) (+)S.tag coliDOWN pET-43.1a_EK/LIC S.tag not available pET-44a(-b,-c)(+)S.tag T7-Terminator pET-44a_EK/LIC S.tag not available pET-45b(+)T7T7-Terminator pET-46_Ek/LIC T7T7-Terminator pET-5(-a,-b,-c)T7T7-Terminator pET-52b(+)T7T7-TerminatorpET-7T7T7-Terminator pET-9(-a,-b,-c,-d)T7T7-Terminator pETcoco-1T7T7-Terminator pETDuet-1(MCSI)pETUP1DuetDOWN1 pETDuet-1(MCSII)DuetUp2T7-Terminator pET-T4T7T7-Terminator pEYFP-C1pEGFP-C-5’pEGFP-C-3' pEYFP-N1pEGFP-N-5’,CMV-Profor pEGFP-N-3’pFLAG-ATS N26for pTrcHis-rv；C24rev pFLAG-CTCN26for pTrcHis-rv；C24rev pFLAG1N26for pTrcHis-rv；C24rev pFLAG-CMV(-2)CMV-30；CMV-Profor CMV-24 pFLAG-CMV1CMV-30CMV-24pGAD424GAL4_ADfor3'ADpGADGH GAL4_ADfor3'ADpGADT7T7/GAL4_ADfor3'AD pGADT7-Rec T7/GAL4_ADfor3'AD pGADT-T T73,BD pGAD10GAL4_ADfor3'AD pGAPZa-A a-FACTOR3'AOX pGBKT7T73,BDpGBT9MATCHMAKER5'DNA-BD/GAL4BD MATCHMAKER3'DNA-BDpGEM-1T7SP6pGEM-3T7SP6 pGEM-3Zf(+)(-)SP6/M13rev T7/M13for pGEM-4T7SP6pGEM-4Z T7/M13for SP6/M13rev pGEM-5Zf(+)(-)SP6/M13rev T7/M13for pGEM-7Zf(+)(-)SP6/M13rev T7/M13for pGEM-9Zf(+)(-)T7/M13for SP6/M13rev pGEM-T T7/M13for SP6/M13rev pGEM-T_Easy T7/M13for SP6/M13rev pGene/V5-His_A(_B,_C)pGENE-5BGH rev,V5rev pGEX-2T pGEX-5pGEX-3pGEX-2TK pGEX-5pGEX-3pGEX-3X pGEX-5pGEX-3 pGEX-4T-1(-2,-3)pGEX-5pGEX-3 pGEX-5X-1(-2,-3)pGEX-5pGEX-3 pGEX-6P-1(-2,-3)pGEX-5pGEX-3 pGL2GLP1GLP2pGL3RVP3GLP2(RVP4)(没有特别说明⽤GLP2)pGL3-Basic(MCSI)RVP3(PGL3+)?GLP2(PGL3-)? pGL3-Basic(MCSII)RVP4,PLXSN-3'?pGL4pGlow(-TOPO)T7pGlow-3 pGM-T T7SP6pGWC SP6T7pHook-2T7/CMV-Profor not available pIND/V5-His_A(_B,_C)not available BGH rev,V5rev PinpointTMVector PinpointPrimer SP6pIRES(MCSI)T7pIRES-3pIRES(MCSII)not available T3,EBVrevpIRES2-EGFP CMV-Profor,pIRES2-EGFP.P5’IRESrev,pIRES2-EGFP.P3’pIRES-hrGFP-2a CMV-Profor,T3pIRES-hrGFP-3 pIRESneo2T7/CMV-Profor pIRES-3pIVEX(all)T7/pBRrevBam T7-TerminatorpLEXA pLEXA-F pLEXA-RpLNCX pLNCX-F pLNCX-RpLNCX2CMV-Profor pRevTRE-3 pLVTHM（H1启动⼦下游）H1primer SP6 pLXSN pLXSN-F pLXSN-RpMALc MalE primer M13F(-47)pMAL-c2E MalE primer M13F(-47)pMAL-C2x Pmal-c2x-F(P5’)Pmal-C2X-R(P3’)pMALd MalE primer M13F(-47)pMALe MalE primer M13F(-47)pMAL-P4X MalE primer M13F(-47)pMAL-p2X MalE primer M13F(-47)pMET A/B/C AUG1F AUG1RpMD18-T M13R(-48)ECORI M13F(-47)(HINDⅢ)pMD19-T M13F47M13R48pMD20-T M13F47M13R48pMOSBlue T7/M13rev M13forpMSCV-puro pLXSNfw pMSCVrev pMT/V5-His_A(_B,_C)Mtfor BGH rev,V5rev pNTAP T3T7pCTAP pCTAP5'primer T7pOTB7M13rev/T7M13for/SP6 pOptiVEC-TOPO TA CMV-F/CMV-Profor EMCVIRES reverse pPC86PPC86-F PPC86-R pPC97PBD-GAL4-F PBD-GAL4-RpPIC3.5K5'AOX3'AOXpPic9k(A+,Z+)5’AOX(Ppic9k-f)/a-factor3’AOX(Ppic9k-R) pPICZa5'AOX/PPICZa-F3'AOX pPROEXHTA M13R(-48)⽆反向引物pProEX-HTa(b,c)M13R48/Tac-Profor pBADrv/pTrcHis-3 pPD129.36M13F20/M13F pQE30or40or60(AMP+)PQE30-F PQE-30R pRC/CMV2/CAT CMV/T7pRECEIVER CMV-F此载体⽆反向引物pRECEIVER-M03pRECEIVER-M03F pRECEIVER-M03R pREP4pREP4forward primer EBV reverse primerpRK5SP6pSG5-3pRSET T7/Xpressfor T7ter pRSFDuet-1(MCSI)DuetUP1DuetDOWN1 pRSFDuet-1(MCSII)DuetUP2T7TERpSecTac2T7/CMV-Profor BGH rev/c-mycrevpSG5pSG5-5,/T7PSG5-R(SV40)pSHlox1T7SP6 pSHUTTLE-CMV PSHUTTLE-CMV-F PSHUTTLE-CMV-R pSI T7EBVrev pSilencer1.0-U6T7T3 pSilencer2.0-U6T7M13for pSilencer2.1-U6neo T7M13for pSilencer3.1-H1hygro M13F(-47) 3.0REV pSilencer4_1-CMVneo pSilener4.1-5'CMV-Profor pSILENCEV2.0-U6T7 2.0REV pSIneo T7EBVrev,T3Psit T7T7TpSK01-T M13F M13RpSK-CMV(KAN+)T7T3 pSOS Psos5'Psos3'pSP64SP6M13revpSP64/65SP6此载体⽆反向引物pSP65SP6M13revpSP70SP6T7pSP71SP6T7pSP72SP6T7pSP73SP6T7pSport1SP6/M13F(-47)T7/M13RpSPORT1SP6/M13for T7/M13revpSPT18SP6T7pSTBlue T7/M13rev SP6/M13for pSUPER.Basic T7/M13F M13RpSUPER T7T3pSURE-T M13F M13R pSURE-Tsimple M13F-47M13R-48pSuperCos pBRforEco T7pT3T7M13rev/T3M13for/T7pT7-7T7not availablepT7Blue?T7M13F(-47)pT7T3_18U M13rev/T7M13for/T3 pT7T3D-PAC M13rev/T7M13for/T3 pTA2M13F/T7(优先使⽤M13F）T3/M13RpT-Adv M13rev T7,M13forpTAg T7/M13rev M13for pTARGETTM pTarget.F(在T7前⾯）/T7pTarget.RpTG19-T M13F(-47)M13R(-48) pTARGETTM T7/M13F PTARGET-SEQ pThioHisA,B,andC Trx Forward Trx Reverse/M13for pTO-T7T7T7TERpTRC99A PTRC99A-F pTrcHis-rvpTrc99a-c PTRC99C-F PTRC99C-RpTRC99a-c PTRC99C-F PTRC99C-RpTrcHisB PTrcHisA-F/Xpressfor PTrcHisA-RpTrcHisA PTrcHisA-F PTrcHisA-RpT-REX-DEST30TREfor T7 pTriEx1T7/TriExup TriExdownpTriEx1.1T7/TriExup TriExdown pTriEx1.1_Hygro T7/TriExup not available pTriEx1.1_Neo T7/TriExup IRESrevpTriplEX1TriplEx-LD-5T7,TriplEx-LD-3pTriplEX2TriplEx-LD-5；pTR5‘T7,TriplEx-LD-3pTWIN-1T7T7TERpTXB1T7MxeInteinrevpTXB2T7MxeInteinrevpTXB3T7MxeInteinrevpTYB1T7InteinrevpTYB2T7InteinrevpTYB3T7InteinrevpTYB4T7InteinrevpTZ_18U T7/M13rev M13forpUB6/V5-His UB-F BGH rev,V5rev pUC13M13rev/M13rev(-48)M13for/M13for(-49)pUC18M13rev/M13rev(-48)M13for/M13for(-49) pUC18(19)/118(119)M13F(-47)M13R(-48)/PUC19(HINDⅢ)pUC19M13rev/M13rev(-48)M13for/M13for(-49)pUC57M13rev/M13rev(-48)M13for/M13for(-49)pUC8M13rev/M13rev(-48)M13for/M13for(-49)pUC9M13rev/M13rev(-48)M13for/M13for(-49)pUM-T M13F(-20)M13R(-20) pUCm-T(AMP+)M13F/T7M13RpUNI/V5-His not available BGH rev,V5revpVAX1T7T7/CMV-Profor PCDNA3.1R/BGHR pVP22/mycHis VP22-Cfor BGH rev,c-mycrev pVP22/mycHis2T7/CMV-Profor VP22-Nrev pWE15pBRrevHind T7pYES2T7pYes2.RpYES-DEST52T7/GAL1-Profor V5rev/CYC1-Terminator pYEX_4T_1Clontech pYEX_4T-3pYEX_4T_2pGEX-5pYEX_4T-4pYEX_4T_3pGEX-5pYEX_4T-4pYEX_4T_4pGEX-5pYEX_4T-4 pZeoSV2+/hu-Tyr T7not available pZERO-1M13rev/SP6T7/M13forpZERO-2M13rev/SP6M13for/T7pZome-1-C Zome-F Zome-RpZome-1-N Zome-F Zome-R YCp50(BamHI-site)PBRforBam PBRrevBam YEp13(BamHI-site)PBRforBam PBRrevBam YEp24(BamHI-site)PBRforBam PBRrevBam YIp5(BamHI-site)PBRforBam PBRrevBam RNAi-ReadypSIREN-RetroQ-U6Zs Green U6菌PCDB T7BGH 天为时代TA载体T7T3 m13（+）T7？T3？pMSCV-neo pMSCV-5'pMSCV-3'引物名称序列(5'-3')M13R CAG GAA ACA GCT ATG ACCM13F TGT AAA ACG ACG GCC AGTM13F(-47)CGC CAG GGT TTT CCC AGT CAC GAC M13R(-48)AGC GGA TAA CAA TTT CAC ACA GGA M13(-96)CCC TCA TAG TTA GCG TAA CGSP6ATT TAG GTG ACA CTA TAGT7TAA TAC GAC TCA CTA TAG GGT7terminator TGC TAG TTA TTG CTC AGC GGT3ATT AAC CCT CAC TAA AGG GA pGEX-4T-5'GGG CTG GCA AGC CAC GTT TGG TG pGEX-4T-3'CCG GGA GCT GCA TGT GTC AGA GG GLp1TGT ATC TTA TGG TAC TGT AAC TG GLp2CTT TAT GTT TTT GGC GTC TTC CARVp3CTA GCA AAA TAG GCT GTC CCRVp4GAC GAT AGT CAT GCC CCG CG pcDNA3.1R TAG AAG GCA CAG TCG AGG PinPoint primer CGT GAC GCG GTG CAG GGC G pCMV-F TCT AAA AGC TGC GGA ATT GT pCMV-R TCCAAACTCATCAATGTATCpTRC99C-F:TTG CGC CGA CAT CAT AACpTRC99C-R:CTGCGTTCTGATTTAATCTGpCEP-F:AGA GCT CGT TTA GTG AAC CGEBV-R:GTG GTT TGT CCA AAC TCA TC pIRES2-EGFP.P5’:GTA GGC GTG TAC GGT GGG AG pIRES2-EGFP.P3’:AAC GCA CAC CGG CCT TAT TC3'AD:AGA TGG TGC ACG ATG CAC AG CMV-F CGC AAA TGG GCG GTA GGC GTGS1CAA CGT GAA AAA ATT ATT ATT CGC S6GTA AAT GAA TTT TCT GTA GTA GG 5`AOX1GAC TGG TTC CAA TTG ACA AGC3`AOX1GCA AAT GGC ATT CTG ACA TCCα-Factor TAC TAT TGC CAG CAT TGC TGC GAL4AD TAC CAC TAC AAT GGA TGpACT2-R GTGCACGATGCACAGTTGAApB42ADF:CCA GCC TCT TGC TGA GTG GAG ATG pB42ADR:AAG CCG ACA ACC TTG ATT GGA G。
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Invitrogen中国测序通用引物序列引物名称序列(5'-3')M13R CAG GAA ACA GCT A TG ACCM13F TGT AAA ACG ACG GCC AGTM13F(-47) CGC CAG GGT TTT CCC AGT CAC GAC M13R(-48) AGC GGA TAA CAA TTT CAC ACA GGA M13(-96) CCC TCA TAG TTA GCG TAA CGSP6 A TT TAG GTG ACA CTA TAGT7 TAA TAC GAC TCA CTA TAG GGT7 terminator TGC TAG TTA TTG CTC AGC GGT3 A TT AAC CCT CAC TAA AGG GA pGEX-4T-5' GGG CTG GCA AGC CAC GTT TGG TG pGEX-4T-3' CCG GGA GCT GCA TGT GTC AGA GG GLp1 TGT A TC TTA TGG TAC TGT AAC TG GLp2 CTT TA T GTT TTT GGC GTC TTC CA RVp3 CTA GCA AAA TAG GCT GTC CCRVp4 GAC GA T AGT CA T GCC CCG CG pcDNA3.1R TAG AAG GCA CAG TCG AGG PinPoint primer CGT GAC GCG GTG CAG GGC G pCMV-F TCT AAA AGC TGC GGA A TT GT pCMV-R TCCAAACTCA TCAA TGTA TCpTRC99C-F: TTG CGC CGA CA T CA T AACpTRC99C-R: CTGCGTTCTGA TTTAA TCTGpCEP-F: AGA GCT CGT TTA GTG AAC CGEBV-R : GTG GTT TGT CCA AAC TCA TC pIRES2-EGFP.P5’:GTA GGC GTG TAC GGT GGG AG pIRES2-EGFP.P3’: AAC GCA CAC CGG CCT TA T TC3'AD: AGA TGG TGC ACG A TG CAC AGCMV -F CGC AAA TGG GCG GTA GGC GTGS1 CAA CGT GAA AAA A TT A TT A TT CGC S6 GTA AA T GAA TTT TCT GTA GTA GG5`AOX1 GAC TGG TTC CAA TTG ACA AGC3`AOX1 GCA AA T GGC A TT CTG ACA TCCα-Factor TAC TA T TGC CAG CA T TGC TGCGAL4 AD TAC CAC TAC AA T GGA TGpACT2-R GTGCACGA TGCACAGTTGAApB42ADF: CCA GCC TCT TGC TGA GTG GAG A TGpB42ADR: AAG CCG ACA ACC TTG A TT GGA G pEGFP-N-5’: TGG GAG GTC TA T A TA AGC AGA G pEGFP-N-3’: CGT CGC CGT CCA GCT CGA CCA G pEGFP-C-5’: CA T GGT CCT GCT GGA GTT CGT G pEGFP-C-3' : TA T GGC TGA TTA TGA TCA GTPBV220F: AAG AAG GGC AGC A TT CAA AGPBV220R: CTG CGT TCT GA T TTA A TC TGU6 A TG GAC TA T CA T A TG CTT ACC GTA2.0rev primer: AGG CGA TTA AGT TGG GTA3.0rev: GAG TTA GCT CAC TCA TTA GGCS.tag GAA CGC CAG CAC A TG GAC5'TriplEx2 CTC CGA GA T CTG GAC GAG CRVP4 GAC GA T AGT CA T GCC CCG CGRVP3 CTA GCA AAA TAG GCT GTC CCpQE30-R GTT CTG AGG TCA TTA CTG GpQE30-F TGA GCG GA T AAC AA T TTC ACpEF-F TCA AGC CTC AGA CAG TGG TTC pDSRED-N1-R TGA AGC GCA TGA ACT CCT TG pDsRED-express-C1-F TCC CAC AAC GAG GAC TAC ACpCMV5R A TT A TA GAG GAC ACC TAG TCpCMV5F TTC CAA AA T GTC GTA A TA ACP5' TGC GTA CTG CGG TGA TCA ACP3' CTG CAA GGC GA T TAA GTT GGBAC2 ACG CAC AGA A TC TAG CGC TTBAC1 AAC CA T CTC GCA AA T AAA TA3'BD: TAA GAG TCA CTT TAA AA T TTG TA T AC pTarget.F CCA GGA TTT TCC CAG TCA C pTarget.R GGC TTT ACA CTT TA T GCT TCT7(17base) ACA TCC ACT TTG CCT TTC TCpY es2.R TCG GTT AGA GCG GA T GTGGAL4 BD TCA TCG GAA GAG AGT AGpAS2-1.R AAG AGT TAC TCA AGA ACA AGA A pFlag-CMV-F: GGT AGG CGT GTA CGG TGGpFlag-CMV-R: GCA CTG GAG TGG CAA CTTpIRES-F: CTT ACT GAC A TC CAC TTT GC pIRES.R: CAC TGC A TT CTA GTT GTG GTP1 CCA GGC TTT ACA CTT TA T GCP2 GCG A TT AAG TTG GGT AAC GCpLEXA-F CGT CAG CAG AGC TTC ACC A TpLEXA-R TAA AAC CTA AGA GTC ACT TTpLNCX-F AGC TCG TTT AGT GAA CCG TCA GA T CG pLNCX-R ACC TAC AGG TGG GGT CTT TCA TTC CC pLXSN-F CTT GAA CCT CCT CGT TCG ACpLXSN-R GTT GCT GAC TAA TTG AGA TG pSHUTTLE-CMV-F GGT CTA TA T AAG CAG AGG TG pSHUTTLE-CMV-R GTG GTA TGG CTG A TT A TG A TC AG MalE Primer GGT CGT CAG ACT GTC GA T GAA GCC Invitrogen中国使用的测序载体和引物Primer of V ectorV ector Primer(F) Primer(R) pACT T7 T3pACT2 GAL4 AD pACT2-RpAS2-1 GAL4 BD pAS2-1.RpB42AD pB42ADF pB42ADRpBACPAK8 BAC1 BAC2pBK-CMV T7 T3PBS(SK/KS)/M13- M13F/T7 T3/M13RpBV220 PBV220F PBV220RpCAMBIA 1301(1300) P1 P2pCAMBIA 2300 M13R(-48) M13F(-47)PCANTB5E S1/M13R S6pCA T3-enhancer RVP3 此载体无反向引物pcDNA3.0 CMV-F/T7 SP6/BGHpcDNA3.1 T7 BGHpcDNA4 T7/CMV-F BGHpcDNA6 T7/CMV-F(J21025在T7前面）BGHpcDNAII T7 SP6pCE2.1 M13F M13RpCEP4 pCEP-F EBV-RpCF-T M13F M13RpCI T7（17Base）此载体无反向引物pCI-neo T7（17Base）T3pCMS-EGFP T7 T3pCMV-3Tag-4A T3 /PFLAG-CMV-F T7pCMV5 pCMV5F pCMV5RpCMV5-Flag pCMV5F pCMV5RpCMV-MYC/HA pCMV-F pCMV-RpCMV-Sport M13F/T7 SP6/M13R pCMV-Tag(KAN+) T3 T7pCR2.1-TOPO M13F/T7 M13R pCR3.1 T7 BGH pCS2 SP6 T7 pDonar M13F M13R pDONR221 M13F M13R pDrive T7 SP6 pDRIveR(KAN+) T7 SP6pDsRED1-C1 pDsRED-ex-C1-F pEGFP-N-3’(距离很近,一般不用)pDsRED2-C1(KAN+) pDsRED-ex-C1-F pEGFP-N-3’pDSRED-N1(KAN+) pEGFP-N-5’PDSRED-N-R pECFP-C pEGFP-C-5’pECFP-C-3' pECFP-N1 pEGFP-N-5’pEGFP-N-3’pEF/myc/ER pEF-F pCDNA3.1R pEGFP-C(KAN+) pEGFP-C-5’pEGFP-C-3' pEGFP-N(KAN+) pEGFP-N-5’pEGFP-N-3’pENTR/D-TOPO(KAN+) M13F M13RpET-*(His)(KAN+) T7 T7 TerpET22(a,b,c)(AMP+) T7 T7 TerpET28,30,24,49(KAN+) T7 T7 TerpET32(a,b,c)(AMP+) T7/S.tag T7 TerpET50(amp+) T7/s.tag T7TERpET44(AMP+) T7/s.tag T7 TerpEYFP-N1 pEGFP-N-5’pEGFP-N-3’pEYFP-C1 pEGFP-C-5’pEGFP-C-3' pFLAG-CMV pFLAG-CMV -F pFLAG-CMV -R pGAD424 GAL4 AD 3'AD pGADGH GAL4 AD 3'ADpGADT7-Rec GAL4 AD/T7 3'ADpGAPZa-A a-FACTOR 3'AOXpGBKT7(Kana+) T7 3'BDpGEM-T(-Easy) M13F/T7 SP6/M13R pGEX-(*)T pGEX-4T-5’pGEX-4T-3’pGL2 GLP1 GLP2pGL3 RVP3 GLP2(RVP4)(没有特别说明用GLP2)PinpointTM V ector Pinpoint Primer SP6pIRES PIRES-F/T7 T3/PIRES-R (J40720) pIRES2-EGFP pIRES2-EGFP.P5’pIRES2-EGFP.P3’pLXSN pLXSN-F pLXSN-RpMAL-c2E MalE primer M13F(-47)pMAL-C2x P5’P3’pMAL-p2X MalE primer M13F(-47)PMD18-T M13R(-48) M13F(-47)PMD19-T M13F(-47) M13R(-48)pPIC9K(AMP+、ZEO+）5’AOX/a-factor 3’AOXpPICZa 5'AOX/PPICZa-F 3'AOX pPROEXHTA M13R(-48) 无反向引物pQE30or40 pQE30-F pQE-R:pRSET T7 T7TERpSilencer3.1-H1 hygro M13F(-47) 3.0REVpSILENCEV2.0-U6 T7 2.0REVpSK01-T M13F M13RpSK-CMV(KAN+) T7 T3pSP72 T7 SP6pSport1 SP6/M13F(-47) T7/M13RpSUPER T7 T3pTA2 M13F/T7(优先使用M13F）T3/M13RpT-Adv M13F /T7 M13RpTARGET TM pTarget.F(在T7前面）/T7 pTarget.RpTO-T7 T7 T7TERpTRC99a-c pTRC99C-F pTRC99C-R pTriPLEx2 5'pTriPLEx2 T7pTWIN-1 T7 T7TER(客户确认再用）pUC18(19)/118(119) M13F(-47) M13R(-48)pUCm-T M13F/T7 M13RpV AX1 T7 BGHpWSK29 T7/M13F/M13F(-47) T3/M13R/M13R(-48) pXT7 T7 SP6pYES2 T7 pY es2.RpLEXA pLEXA-F pLEXA-RpLNCX pLNCX-F pLNCX-R pRECEIVER CMV-F 此载体无反向引物pSHUTTLE-CMV PSHUTTLE-CMV-F PSHUTTLE-CMV-R pSP64/65 SP6 此载体无反向引物pSTBlue-1 T7 SP6pT7Blue(R) T7 M13F(-47)。