连续流动(硫氰酸钾)法测定总植物碱的含量

连续流动（硫氰酸钾）法测定总植物碱的含量

1 范围

本标准规定了烟草及烟草制品中总植物碱（以烟碱计）的连续流动硫氰酸钾测定方法。

本标准适用于烟草及烟草制品中总植物碱（以烟碱计）的测定。

本方法测定烟草及烟草制品中总植物碱（以烟碱计）的检出限为0.045%，定量限为0.160%。

2 规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件，凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法

YC/T 31 烟草及烟草制品试样的制备和水分测定烘箱法

3 原理

用水萃取烟草样品，萃取液中的总植物碱（以烟碱计）与对氨基苯磺酸和氯化氰反应，氯化氰由硫氰酸钾和二氯异氰尿酸钠在线反应产生。反应产物用比色计在460nm测定。

注：用5％乙酸溶液作为萃取液亦可得到相同的结果。

4 试剂与材料

除特别要求以外，均应使用分析纯试剂，水应符合GB/T 6682中一级水的规定。

4.1 磷酸氢二钠(Na2HPO4·12H2O)，纯度>99.0％。

4.2 柠檬酸[COH(COOH)(CH2COOH)2·H2O]，纯度>99.0％。

4.3 对氨基苯磺酸(NH2C6H4SO3H)，纯度>99.8％。

4.4 硫氰酸钾(KSCN)，纯度>98.5％。

4.5 二氯异氰尿酸钠(C3Cl2N3 NaO3)，纯度>9

5.0％。

4.6 硫酸亚铁（FeSO4·7H2O），纯度>99.0％。

4.7 碳酸钠（Na2CO3），纯度>99.8％。

4.8 烟碱，纯度>98.0％。

4.9 Brij 35 溶液（聚乙氧基月桂醚）

将250g Brij 35 加入到1L水中，加热搅拌直至溶解。

4.10 缓冲溶液A

称取65.5 g磷酸氢二钠(4.1)、10.4 g柠檬酸(4.2)至烧杯中，用水溶解，然后转入1000 mL容量瓶中，用水定容至刻度，加入1 mL Brij 35溶液（4.9），混匀。使用前用定性滤纸过滤。

4.11 缓冲溶液B

称取222 g磷酸氢二钠(4.1)、8.4 g柠檬酸(4.2)、7.0 g对氨基苯磺酸(4.3) 至烧杯中，用水溶解，然后转入1000mL容量瓶中，加用水定容至刻度，加入1 mL Brij 35溶液（4.9），混匀。使用前用定性滤纸过滤。

4.12 硫氰酸钾溶液

称取2.88 g硫氰酸钾(4.4) 至烧杯中，用水溶解，然后转入250 mL容量瓶中，用水定容至刻度。

4.13 二氯异氰尿酸钠溶液

称取2.20 g二氯异氰尿酸钠(4.5) 至烧杯中，用水溶解，然后转入250 mL容量瓶中，用水定容至刻度。该溶液应现配现用。

4.14 解毒溶液A

称取1 g柠檬酸（4.2）、10 g硫酸亚铁（4.6）至烧杯中，用水溶解，然后转入1000 mL容量瓶中，用水定容至刻度。

4.15 解毒溶液B

称取10 g碳酸钠（4.7）至烧杯中，用水溶解，然后转入1000 mL容量瓶中，用水定容至刻度。

4.16 烟碱标准溶液

4.16.1 标准储备液

称取适量烟碱（4.8）于250 mL容量瓶中，精确至0.0001g，用水溶解，定容至刻度。此溶液烟碱含量应在1.6 mg/mL左右。该标准储备液在0℃~4℃冰箱中保存，有效期为一个月。

4.16.2系列标准工作溶液

由标准储备液（4.16.1）制备至少5个系列标准工作溶液，其浓度范围应覆盖预计检测到的样品含量。该工作溶液在0℃~4℃冰箱中保存，有效期为2周。

5 仪器

5.1 具塞三角瓶，50 mL。

5.2定量加液器或移液管。

5.3 快速定性滤纸。

5.4 分析天平，感量0.0001g。

5.5振荡器。

5.6 连续流动分析仪，由下述各部分组成：

——取样器；

——比例泵；

——螺旋管；

——透析槽；

——比色计，配460 nm滤光片；

——数据处理装置。

6 分析步骤

6.1 试样制备

按YC/T 31制备试样，并测定其水分含量。

6.2 样品处理

称取0.25 g试样于50 mL具塞三角瓶中（5.1），精确至0.0001g，加入25 mL水，盖上塞子，在振荡器（5.5）上振荡（转速>150 rpm）萃取30 min。用快速定性滤纸（5.3）过滤萃取液，弃去前几毫升（2~3mL）滤液，收集后续滤液作分析之用。

6.3 仪器分析

上机运行系列标准工作溶液（4.16.2）和滤液（6.2），分析流程图参见附录A。如样品浓度超出

标准工作溶液的浓度范围，则应稀释后再测定。 7 结果的计算与表述

7.1 总植物碱（以烟碱计）含量的计算

a 表示以干基试样计的总植物碱（以烟碱计）的含量，数值以％表示，由式（1）计算：

式中：

c ——萃取液总植物碱的仪器观测值，单位为毫克每毫升（mg/mL ）； v ——萃取液的体积，单位为毫升（mL ）； m ——试样的质量，单位为克（g ）； w ——试样水分的质量分数。 7.2 结果的表述

以两次平行测定结果的平均值作为测定结果，结果精确至0.01％。两次平行测定结果绝对值之差不应大于0.05％。 8

精密度和回收率

本方法的精密度结果见表1和加标回收率结果见表2。

表1本方法的精密度（n ＝6）

表2 方法的低，中，高加标回收率（n ＝3）

(1)

100

1000

)w 1(m v

c a ××-××=