水质 细总大肠菌群原始记录

1. 目的

为确定本公司水质中菌落总数、大肠菌群测定使用方法，明确菌落总数、大肠菌群检测相关细则，指导人员正确作业，确保检测工作正常开展，根据《生活饮用水标准检验方法》GB5750.12-2006制订本方法作业指导书。

2. 适用范围

适用于水质中菌落总数、大肠菌群的测定。

3. 职责

检测人员严格按照本指导书要求开展检测工作。

4. 检测依据标准及检测方法

《生活饮用水卫生标准》GB 5749-2006

《生活饮用水标准检验方法》GB5750.12-2006

5. 标准值

表1 二次供水菌落总数、大肠菌群

6. 检验仪器及设备

高压蒸汽灭菌器、恒温培养箱、冰箱、显微镜、PH试纸。

7. 试剂和材料

营养琼脂培养基，三倍浓缩乳糖蛋白胨培养液，伊红美兰琼脂，革兰氏染色液。

8. 检测程序

8.1 菌落总数：取采集的样品1mL于灭菌平皿内，倾入已融化冷却至45℃的营养琼脂15mL，同时做一个平行样和一个空白对照平皿，并立即摇匀。冷却后，翻转平板，置于35℃～37℃恒温箱中，培养48h。计数每个平板上的菌落数。

8.2 大肠菌群：在5支装有10mL双料乳糖蛋白胨培养液的试管各加水样10mL；在5支装有10mL单料乳糖蛋白胨的试管各加水样1mL，在5支装有10mL单料乳糖蛋白胨的试管各加稀释后的水样（1:10）1mL。轻摇试管，是液体充分混匀，置35℃～37℃培养箱中24h。观察是否产酸产气，若有，需进一步做证实试验。

8.3 取一环阳性管中的溶液接种到伊红美兰琼脂平板上，置35℃～37℃培养箱中18h～24h，观察菌落形态，典型的大肠菌群菌落为黑紫色或红紫色，具有金属光泽。

8.4 挑取可疑大肠菌群菌落1或2个进行革兰氏染色，同时接种乳糖发酵管，于36℃±1℃培养箱中，培养24h。

8.5 凡乳糖发酵管最终产酸、产气，革兰氏染色为阴性的无芽孢杆菌，为大肠菌群阳性。记下证实试验的阳性管数，查总大肠菌群（MPN）检索表得出100mL水样中总大肠菌群的MPN值。

9. 计算

菌落总数计算见式（1）：

a=b×n (1)

式中：

a—表示菌落总数，cfu/mL

b—平均菌落数

n—表示稀释倍数

10. 表格样式

附录A 水质中菌落总数、大肠菌群检测原始记录样式

附录A：水质中菌落总数、大肠菌群检测原始记录样式

二次供水检测原始记录

受理编号：中坚（）检[20 ] 号

检测项目：细菌总数、大肠菌群检验日期：年月日依据：《生活饮用水标准检验方法》GB/T 5750.12-2006

一、实验条件：

1、实验室温度：℃；实验室湿度： %；

2、仪器设备：恒温培养箱(仪字第号 )；生物显微镜(仪字第号 )

3、培养基：厂家：批号：

厂家：批号：

厂家：批号：

二、结果：

1、细菌总数：

放置时间：取出时间：

检验者：复核者：

日期：年月日日期：年月日

2、总大肠菌群：

检验者：复核者：

日期：年月日日期：年月日