细菌鉴定流程

细菌鉴定流程：

取一环标本四区划线接种平板（如为粪便标本接种SS,MAC平板）

培养18-24小时后取一区菌落革兰染色，报告为革兰阳性球菌/革兰阴性球菌/革兰阳性杆菌/革兰阴性杆菌，注意区分细菌和真菌

一般情况下不会给你们做革兰阳性杆菌和革兰阴性球菌

革兰阳性球菌鉴定流程：

先做3%触酶试验：阳性的为葡萄球菌或微球菌，阴性为链球菌或肠球菌

葡萄球菌和微球菌的区别：葡萄糖OF试验，葡萄球菌为F型，微球菌为O型

所以如果做到一个触酶阳性的革兰阳性球菌都要做下葡萄糖OF试验，DNA酶试验，新生霉素试验，血浆凝固酶试验

链球菌和肠球菌的区别：链球菌高盐和胆汁七叶苷试剂均为阴性，而肠球菌都为阳性。

链球菌属内区别：本来可以通过溶血来区分一些的，但是由于实验室的平板αβ溶血比较难区分

所以如果做到一个触酶阴性的革兰阳性球菌都要做下高盐，胆汁七叶苷，杆菌肽，奥普托欣，CAMP

如果做到一个奥普托欣敏感的革兰阳性球菌再加做胆汁溶菌试验和菊糖试验（阳性为变红）可判定为肺炎链球菌

革兰阴性杆菌鉴定流程：

先做氧化酶试验：

氧化酶阴性的革兰阴性杆菌都要做下KIA，MIU，葡磷两支(做MR，VP)，苯丙，枸橼酸盐，硝还，蛋白胨水（做吲哚试验），赖氨酸，鸟氨酸，氨对

如果KIA结果为A/A或者K/A的应为肠杆菌科细菌，如上面向个反应还不能区分细菌到种根据教科书307页加做试验。

一般情况下只会给你们做大肠埃希菌，志贺菌属（四种），沙门菌属（甲副，乙副，伤寒），弗劳地枸橼酸杆菌，肺炎克雷伯，产酸克雷伯，产气肠杆菌，阴沟肠杆菌，普通变形杆菌，奇异变形杆菌，沙雷菌属，摩根菌属，普罗威登斯菌属。

如果KIA结果为K/K应怀疑为不动杆菌属或者嗜麦芽窄食单胞菌：这两个菌区分可通过麦芽糖和赖氨酸试验区分，

如为氧化酶阳性，要做葡萄糖的OF试验（用非发酵），硝还产气，精氨酸双水解酶，一般情况下只有两种菌给你们做一个是铜绿假单胞菌，一个是粪产碱杆菌，

真菌给你们做的一般情况只有白色念珠菌和新生隐球菌，通过墨汁负染，芽管试验，厚膜孢子来区分。

注意事项：

1.VP加了试剂后，放孵箱内4-6小时看结果

2.MR的结果较深点的红为阳性，淡红色为阴性，VP与MR结果要结合起来看

3.蛋白胨水的结果加了试剂后放置10-20分钟后看

4.枸橼酸试验如24小时不好看，可再培养24小时再看结果。

5.微量管不要拿错，比如葡萄糖OF管有多种，根据不同的细菌来选择不同的微量管

6.不要忘加石蜡。

最后结果报告形式：xx号标本检出xx菌

粪便标本一般只会给你们做沙门菌和志贺菌，到做血清凝集，也有可能没有致病菌，报“未检出肠道致病菌”。