实验四薄层色谱

原理
薄层色谱常用的有吸附色谱和分配 色谱。薄层色谱常用做柱色谱的先导。
原理
薄层色谱是在洗涤干净的玻板上均匀 的涂一层吸附剂或支持剂，待干燥、活 化后将样品溶化，用管口平整的毛细管 滴加于薄层板1cm处的起点线上，晾干 或吹干后，置薄层板于盛有展开剂的展 开缸内，浸入深度为0.5cm。
原理
待展开剂的前沿一端1cm附近处， 将色谱板取出，干燥，记录原点至主 斑点中心及展开剂前沿的距离，计算 此移值Rf： Rf＝溶质的最高浓度中心至原点中心 的距离/溶剂前沿至原点中心的距离
3 因溶液太稀或样点太小，可重复点样，但应 在前次点样的溶剂挥发后，方可重点，以防 样点被溶解掉，样点过大，造成拖尾，扩散 等现象，影响分离效果。
1.具体操作方法
（3）展开：
展开剂—正庚烷27mL，乙酸乙酯3mL 。将展 开剂倒入层析缸， 然后将点样好的薄层板小心的放 到层析缸中，点样的一端朝下，浸入展开剂中约0.5 cm。一般情况，先在薄层板另一端1cm处划一条直 线，展开剂达到此线时，立即取出。如未划线，观 察展开剂前沿上升到一定高度时取出，并尽快在展 开剂前沿划出标记。 （注意：如不注意，展开剂挥 发后，就无法确定展开剂上升的高度。）将薄层板 晾干。观察混合试样斑点出现的位置及与其相应样 品斑点是否相符。
实验四：薄层色谱
本次实验需要干燥的仪器有： 层析缸一个； 20cm×5cm左右的玻璃板二个。
薄层色谱是分离、纯化和 鉴定有机化合物的方法之一。
一、目的和要求
• 了解薄层色谱的原理和方法 • 初步掌握薄层板的制板，点样，展开
等操作
二、实验原理
利用混合物各组分在某一物质 中Biblioteka Baidu吸附或溶解性能（分配）的不 同；或其亲和性的差异，使混合物 的溶液流经该种物质进行反复的吸 附，或分配作用，从而使各组份分 离。
1.具体操作方法
（1）薄层板的制备： 取两块20cm×5cm左右的玻璃板，
洗净，晾干或烘干。
在80mL烧杯中，放入约1.5g硅胶G，加入 4mL羧甲基纤维素钠溶液，调成糊状，（其稀 稠为在震动下可流动）倒在玻璃板上。用食指 和拇指拿住玻璃板，前后，左右振摇，摆动， 使流动的糊状物均匀的铺在玻片上将已涂好的 硅胶G薄层板在室温下，水平放置半小时后移 入烘箱，慢慢升温至110℃，恒温半小时。
Rf 值＝ 展开剂前沿至原点中心距离
四、数据处理
⑴ 以做成功的那块薄层板计算 Rf 值。
⑵ 计算苏丹红，偶氮苯的Rf值。
五、实验延伸
1. 该实验也可用于柱色谱中分离 和提纯有机化合物。
2.有关操作也可参考兰州大学和 复旦大学化学系有机化学教研 室编的《有机化学实验》一书。
六、思考题
1.如何利用Rf值来鉴定化合物？ 2.展开剂的高度超过点样线，
原理
薄层吸附色谱和柱吸附色谱一样，化合物 的吸附能力与它们的极性成正比。具有较大 极性的化合物吸附较强，因而Rf 值较小。
薄层板的活性与含水量有关。其活性随含 水量的增加而下降。
凡溶剂的极性越大，则对一化合物洗脱力 也越大，也就是说Rf 值也越大。
三、操作步骤
准备用物 玻璃板，硅胶G，蒸馏水， 80mL烧杯，样品，层析缸，毛细管
注意事项：制成的板需厚薄均匀，无气泡。 室
温放置必须使板干透，否则会出现断裂现象
1.具体操作方法
（2）点样： 样品为苏丹红，偶氮苯及两者混
合样。每块板各点三个样品，两块板 相同。
注意事项：
1 在薄层板一端约1cm处轻轻画一直线，取管 口平整的毛细管，于画线处轻轻点样（毛细 管刚接触薄板即可）。
2 样点间距1cm—1.5cm，斑点直径一般不超过 2mm。
原理
流动的混合物溶液称为流动相；固定的物 质称为固定相（可以是固体或液体）。薄层 色谱兼备了柱色谱和纸色谱的优点。一方面 适用于小量样品（几到几十微克，甚至0.01 微克）的分离；另一方面在制薄层板时把吸 附层加厚，将样品点成一条线，则可分离多 达500mg的分离。因此又可用来精制样品。 此法特别适用于挥发性较小或在较高温度易 发生变化而不能用气相色谱分析的物质。
注意事项：
1 展开剂高度不超过1cm，如展开剂高度超 过点样线，则测样点将被溶解掉。
2 薄层色谱的展开，须在密闭容器中进行， 为使展开剂的蒸汽，在缸内迅速达到平衡， 在缸内壁放置一高5cm，环绕周长约4/5的 滤纸，或放置两张11cm滤纸，下面浸入 展开剂中。
1.具体操作方法
（4）比移值：
溶质的最高浓度中心至原点中心距离
对薄层色谱有什么影响？