Waters Troubleshooting 液相色谱系统故障解决
Waters液相层析问题排除-2
Position the Compression Pin in the Block
Reference Valve Manifold
Install thl
Assemble the Block and Fluidic Manifold
Align and Compress the Seal and Spacer Gasket
Replace Inlet/Outlet Check-Valve
Plunger Seal Replacement
Remove the Outlet Fitting
Detach the Head Mounting Bolts
Remove the Head
Head Support
Remove the Seal
OPEN
OPEN OPEN STREAM FILL SEAL EMPTY ON
CLOSED
CLOSED CLOSED VIAL HOME OFF
Valve 3 ?
Valve 4 ? Needle ?
Syringe ?
Wash Pump ?
To execute Normal State press ENTER Pressure 0 REBUILD VLVTEST PAGE PAGE
Injection valve阻塞 Purge 自动注射器或更换阀门零件 更换新的连接管或逆冲管子 清洗或更换新的filter
测试溶解度，将移动箱和样品放入 测试管子中观察之。若溶解度不佳 时可稀释样品或更换移动相溶剂
此问题一发生即可在注射时观察到 系统压力明显升高 1.将Restrictor loop 管子拆下， Restrictor loop阻塞 反接在Pump ，利用Pump将 Restrictor loop的阻塞物冲出来 2.若无法排除请更换新的 Restrictor loop
液相色谱系统常见故障排除技术
液相色谱系统常见故障排除技术当您排除液相色谱系统的故障时,下面的向导或许有用。
·查看改变流速或者改变溶剂组成的结果，然后一次只改变一个变量,观察结果．·不仅要为症状定义，还要提供数值的定量信息。
报告所有的参数设置。
·确定问题是不是可重复的.如果问题只是随机的,请记录：每次发生的时间和日期，以及发生问题的前因。
·排除化学以及操作因素。
检测和/或更换色谱柱.清洗色谱柱，稀释样品，并且检查流动相的纯度。
使溶剂通过工作波长范围在±５0nm的UV检测器，进行扫描.·检测泵的流速精确程度。
·注意色谱系统作出的改变（如新的溶剂、色谱柱或样品）。
如果问题是在改变之后发生的，请在问题出现之前恢复已存在的条件。
·检查系统进行最近一次周期性维护或者更换泵密封和过滤器的日期。
·保证溶剂已被脱气，并且在所有的溶剂线路中空气已被完全排出。
如果气泡仍然出现,请您检查入口过滤器的条件,并且调整配件的密封，注意不要过分紧固。
检测所有的液体线路是否泄漏。
·运行检测样品,大多数的色谱柱生产商会为您提供一个样品、一个色谱和一系列您可以使用的条件.将您的新色谱与生产商提供的色谱以及问题出现之前得到的色谱进行比较。
·换上带有节流阀的色谱柱（一种填充了玻璃珠的色谱柱）,可以在普通的分析流速下提供1000ｐsｉ(69baｒｓ)的压力降。
主要观察压力降并与以前获得的数值比较。
在恒流条件下观察压力的连续性。
下面列出了色谱系统可能发生的最常见的问题.同时，每种症状后面都为您提供了排除故障和预防的方法。
基线不正常的漂移和噪声第一步停止泵液，并且监视检测器基线。
如果１0分钟后噪声和漂移依然存在,那么问题很有可能出现在检测器上．请您参考检测器操作手册诊断检测器的问题.平衡－为整体系统实现全部平衡提供充足的时间.系统必须处于温度和流动相组成的平衡状态,来避免基线漂移.溶剂的紫外截止波长—检测器的波长与流动相的ＵV截止波长太接近了，引起了基线的超流速噪声以及移动。
液相色谱分析常见故障及解决方法 液相色谱维修保养
液相色谱分析常见故障及解决方法液相色谱维修保养液相色谱作为一种高精密仪器，如果在使用过程中不按照正确方式操作的话，就容易导致一些棘手的小问题。
其中常见的就是柱压问题、漂移问题、峰型异常问题。
液相色谱仪主要由贮液瓶、泵、进样器、柱子、柱温箱、检测器、数据处理系统组成。
对于整个系统而言，柱子、泵和检测器是核心部件同时也是易出问题的主要部位。
常见问题及解决方法一、柱压问题柱压问题是使用液相色谱过程中需要密切注意的地方，柱压的稳定与色谱图峰形的好坏、柱效、分离效果及保留时间等密切相关。
所谓柱压稳定并不是指压力值稳定于一个恒定值而是指压力波动范围在345kPa 以内或在50PSI之间(在使用梯度洗脱时，柱压平稳缓慢的变化是允许的)。
压力过高、过低都属于柱压问题。
1压力过高这是液相在使用中常见的问题，指的是压力突然升高，1、一般都是由于流路中有堵塞的原因。
此时，我们应该分段进行检查。
(1).首先断开真空泵的入口处，此时PEEK管里充满液体，使PEEK管低于溶剂瓶，看液体是否自由滴下，如果液体不滴或缓慢滴下，则是溶剂过滤头堵塞。
处理方法：用30%的硝酸浸泡半个小时，在用超纯水冲洗干净。
如果液体自由滴下，溶剂过滤头正常，在检查;(2).打开Purge阀，使流动相不经过柱子，如果压力没有明显下降，则是过滤白头堵塞。
处理方法：将过滤白头取出，用10%的异丙醇超声半个小时。
如果压力降至100PSI以下，过滤白头正常，在检查;(3).把色谱柱出口端取下，如果压力不下降，则是柱子堵塞。
处理方法：如果是缓冲盐堵塞，则用95%的水冲至压力正常。
如果是一些强保留的物质导致堵塞，则要用比现在流动相更强的流动相冲至压力正常。
假如按上面的方法长时间冲洗压力都不下降，则可考虑将柱子的进出口反过来接在仪器上，用流动相冲洗柱子。
这时，如果柱压仍不下降，只有换柱子入口筛板，但一旦操作不甚，很容易造成柱效下降，所以尽量少用。
问题无法解决可考虑更换色谱柱。
液相色谱仪常见故障分析及解决要点
液相色谱仪常见故障分析及解决要点液相色谱仪作为一种常用的分析仪器，经常会遇到一些故障。
以下是液相色谱仪常见故障的分析及解决要点：1.噪声增加：可能原因：进样器泄漏、柱床固定不良、柱床老化、流体系统不稳定等。
解决方法：检查进样器和柱床的连接，更换柱床，检查流体系统并重新校准。
2.峰形畸变：可能原因：柱床老化、进样器问题、流体系统堵塞等。
解决方法：更换柱床、清洗进样器、检查流体系统并进行维护。
3.基线漂移：可能原因：溶剂质量不纯、流体系统不稳定、进样器问题等。
解决方法：更换纯净溶剂、检查流体系统并重新校准、清洗进样器。
4.压力异常：可能原因：流体系统堵塞、泵的柱床老化、柱床压力限制等。
解决方法：清洗流体系统、更换柱床、检查柱床的压力限制。
5.进样器问题：可能原因：进样器泄漏、进样器柱床老化、进样器阀门不灵活等。
解决方法：检查进样器的连接，更换进样器柱床，润滑进样器阀门。
6.柱温控制问题：可能原因：柱温控制器故障、柱床老化、温度传感器问题等。
解决方法：更换柱温控制器、更换柱床、校准温度传感器。
7.柱床老化：可能原因：使用时间过长、样品残留、溶剂残留等。
解决方法：更换柱床、进行柱床维护、清洗柱床。
8.溶剂选择错误：可能原因：溶剂质量不纯、溶剂选择不适合分析物等。
解决方法：更换纯净溶剂、重新选择合适的溶剂。
9.柱床堵塞：可能原因：样品残留、溶剂残留、柱床老化等。
解决方法：清洗柱床、更换柱床、进行柱床维护。
10.柱床压力限制：可能原因：柱床老化、流量设置不合理等。
解决方法：更换柱床、重新设置流量。
在解决液相色谱仪常见故障时，需要注意以下要点：确定故障现象，并记录下来，有助于分析和解决问题。
了解仪器的正常工作原理，对比故障现象，定位故障的可能原因。
逐一排除故障可能原因，一步一步进行检查和测试，从最简单的可能原因开始排除。
如果无法解决故障，及时向仪器供应商或相关专家咨询，并提供详细的故障描述和测试结果。
定期进行仪器的维护和保养，包括清洗柱床、更换柱床、校准流量和温度等。
简介WatersUPLC故障排除
案例二：运行缓慢的故障排除
仪器响应缓慢，可能是硬件 问题、软件问题或样品问题 。
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2. 软件优化：升级软件至最 新版本，清理不必要的软件 插件。
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1. 硬件检查：检查液相色谱 仪的硬件连接是否正常，如 泵、检测器等。
案例三：数据丢失的故障排除
数据无法导出或丢失，可 能是存储设备问题、软件 问题或人为操作失误。
避免盲目操作
在故障排除过程中，避免盲目操作，以免造成二次损 坏。
寻求专业支持
对于无法解决的问题，及时寻求专业支持，避免自行 处理。
对未来Watersup LC故障排除的展望
技术进步
随着技术的不断进步，未来Watersup LC故障排除将更加智能化 和自动化，减少人工干预。
培训和教育
加强操作人员培训和教育，提高故障排除技能和意识。
定期维护保养
按照厂家建议进行定期维护保养，可 以减少仪器故障的发生。
总结Watersup LC故障排除的经验和教训
• 故障排除步骤：遵循故障排除步骤，从简单到复杂逐一排 查，避免遗漏。
总结Watersup LC故障排除的经验和教训
及时记录故障现象
在故障发生时，及时记录故障现象，有助于后续分析 。
通过定期维护和故障排查，延长设备使用寿命， 降低维修成本。
提高设备用户的专业技能和经验，促进跨部门和 跨领域的交流与合作。
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CATALOGUE
Watersup LC故障类型
硬件故障
泵压异常
当泵压过高或过低时，可能是泵密封圈磨损、泵 头内有异物或泵内部组件损坏。
检测器异常
检测器可能因为长时间未使用而出现基线漂移、 噪声增大等问题。
液相色谱系统常见故障与维护
液相色谱系统常见故障与维护沃特世科技（上海）有限公司常见分析型液相色谱系统溶剂管理器常见故障与维护样品管理器常见故障与维护检测器常见故障与维护仪器准备操作流程Seal wash—Needle wash—wet prime—purge工作环境:–如电源及地线,湿度,灰尘,环境温度等化学因素:–如溶剂质量,样品状况,色谱柱/保护柱状况等仪器状态:–泵,进样器,检测器,在线过滤器,管路连接质量等操作保养:–正确的操作程序,完善的日常及定期保养保障HPLC正常工作的几个要素HPLC实验的一般流程HPLC系统的启动–打开计算机，待Windows完成自检后,打开仪器电源和检测器，待设备通过自检后，启动色谱管理软件(例如:Empower 3)准备流动相–过滤,脱气仪器准备操作流程–Seal wash—Needle wash—wet prime—balance30min—purge inject—balance 30min准备样品–用流动相溶样或重组样品,过滤–制备空白样品编制仪器方法,开始实验Prime Seal washPrime Seal washWet prime湿灌注选择A 、B 、C 、D ，时间设定为4分钟，按start 按钮Wet prime 湿灌注故障提示与解决方法白色溶剂进管可以看到不断产生气泡如果滤头因为脏导致堵塞，进入系统的流动相中就会有气泡，该溶剂过滤头需要定期清洗，清洗步骤为：将溶剂过滤头从流动相溶剂管中拔下来，用色谱级异丙醇超声清洗10min，倒掉异丙醇后，用色谱级甲醇：超纯水=1:1超声清洗15min，最后将滤头装回即可.Dry prime Dry prime 干灌注操作Dry prime2695报错Lost prime ，开机设置流速，泵也运行，但压力为0，没有流速流出，Dry prime操作示意图故障提示与解决方法波动大,从1000到几百PSI变动e2690/5 故障提示与解决方法2695报错:Plunger homing over pressureACQUITY Arc QSM-R 正面压力传感器比例阀脱气机单向阀柱塞清洗排液阀主动泵蓄积泵Arc Multi Flow Path Technology™Flow Path 1 (1100µL) & 2 (700µL)过滤滤芯H-CLASS 溶剂管理Primary Head Accumulator Head Vent Valve100 µl MixerGradient Proportioning Valve PairsLow Pressure Mixing ManifoldDegasser ChambersSeal Wash Pump输液泵的准备灌注溶剂管理器–用于排除泵头及管路中的气泡–用于更换从储液瓶到泵头之间的溶剂在下列情况下需要Prime溶剂管理器–启用新的溶剂管理器或新的系统–停机4小时后再次开机–更换流动相使用输液泵的一般建议使用高质量的溶剂, 缓冲盐和添加剂有机溶剂质量是最稳定的使用超纯水缓冲液要过滤(0.2 m 滤膜),但不要使用尼龙材料的膜不要阻塞脱气机的排空管路(不要将其放到废液瓶中)使用完缓冲液后要用水将其从系统中冲洗干净(用10-20%有机溶剂的水溶液保存)使用输液泵的一般建议保持全部流路溶剂管路全都灌注过(未使用的管路用10-20%有机溶剂的水溶液灌注)保持柱塞清洗管路是灌注过的(90-95%水)启动仪器之前重新灌注溶剂管路如在低波长下用TFA/ACN 梯度最好用100 L或更大混合器Purge Injector 2695 Purge Injector冲洗进样器2695样品管理器流路图进样针FTN样品管理器的准备选择“Wash Solvent”，设定时间为15秒 选择“Purge Solvent”，设定5-7个循环单击OK. 当系统状态是“Idle(待机)” ,就表示灌注已经完成 提示: 每做一次灌注大约需要2－4分钟FTN 样品管理器的准备样品管理器FTN示意图-洗针Wash SolventPurge Solvent灌注进样器灌注洗针液和样品注射器的目的是：–准备样品管理器–冲洗里面的进样针–排除管路中的气泡提示:–确保用于灌注的溶剂有合适的组成，它应该是高纯的，并且几种溶剂是互溶的选择清洗进样针的溶剂 清洗溶液(Wash Solvent)的选择取决于样品和所使用的流动相，确保流动相和缓冲液是互溶的。
Waters液相色谱仪器压力不正常的解决方法
Waters液相色谱仪器压力不正常的解决方法用了Waters公司的液相色谱仪器已经6年了，就仪器维护上虽然说不上很精通，我想应该也不差。
仪器的维护、故障的解决对于一个色谱操作者来说是不可缺少的一项技能。
而问题只多，也不可能面面俱到，我就谈谈Waters公司液相色谱仪器压力不正常的几个解决方法，总结了几点，确实很有效，我想不管对于新手还是熟练工或是其他品牌的液相色谱仪，都是不错的方法。
1 泵压力上下波动的解决方法压力上下波动很大是液相色谱经常出现的问题，出现这个情况的原因通常都是泵里面存在气泡造成。
这个情况我相信所有常做液相色谱的人都知道该怎么解决这个问题。
就Waters公司液相色谱，机械泵一般先把泵阀旋转开，然后采用注射器吸抽泵里面的液体（如图1）。
如果还是不正常则把色谱柱及检测器甩开不接，把流速调到5.0mL/min冲洗，直到正常。
而Waters公司的2695型液相色谱是数码泵，更加智能化，只要进行湿灌泵直到泵压力正常即可。
图1 注射器吸抽泵操作示意图2 泵无压力2.1 泵无压力有液体流出出现泵无压力，但是管路又有液体流出，这个状况通常都是都是管路有漏液或是某处PEEK头连接造成。
如果是都正常，惟独压力显示为0或是很小时，就要考虑是不是压力传感器是否出了问题。
2.2 泵无压力无液体流出出现出现泵无压力，但是管路又无液体流出时，通常都是先考虑外在部件，先更换干净的流动相瓶中的金属过滤头（如图2，更换下来的可用6mol/L的硝酸超声清洗）。
如果更换后也不正常，就考虑泵的内在部件，通常都是因为气泡或是杂质进入了单向阀造成，这样我们就要拆开泵单向阀，把单向阀取出来（拆卸如图3、4、5），拆出来后把单向阀摇晃几下（能听见宝石的声音）或是超声再安装上去即可（注意方向）。
图2 金属过滤头【由于该附件或图片违规，已被版主删除】图3 单向阀泵头图4 单向阀外观图5 单向阀内部3 仪器系统压力偏高这个状况的出现不是一朝一夕的事，而是累积的杂质在系统里造成，通常都是因为在线保护柱（如图6）的滤芯时间长了堵塞。
waters液相色谱仪的维护与常见故障
4、色谱柱
1)塔板数下降 a. 样品处理不合适，选择适当的样 净化方法，选择合适流动相。 b. 柱头塌陷,考虑重新购买。
2)峰形变坏 a. 出现拖尾峰，分叉峰，非高斯峰。 b. 与塔板数下降有关，峰形坏保留时间不 变，可能是柱堵塞(不锈钢烧结片)，或 柱头有死体积（常见于使用Peek接头）。
©2007 Waters Corporation 44
3、进样系统
自动进样系统 d. 样品滞留：空白溶剂出色谱峰.
加倍清洗，或调整样品瓶顺序， （从低浓度开始，高浓度放后
面）或在样品瓶前放清洗液瓶.
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自动进样器（717/2690/2695）
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自动进样器（717/2690/2695）
溶剂过滤头
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1、流动相及溶剂瓶
溶剂瓶或流动相被污染
产生有规则的噪声； 基线上升，梯度洗脱出鬼峰； 原因: 溶剂质量差（含杂质多）； 配流动相的玻璃器皿不合格,微生物 影响； 配制流动相的操作不当（过滤、脱 气、搅拌).
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进样器
停机前一定冲洗干净进样 器内残留的样品或缓冲盐，防 止样品和无机盐沉积造成样品 交叉污染，硬件磨损或管路堵 塞。
注射器，样品瓶最好使用 仪器自配的，不要用其它仪器 的。
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柱—防止柱性能下降
1 溶剂的化学腐蚀性不能太强； 2 避免颗粒物在柱头沉降； 3 柱压不能太高，防止冲击太大； 4 流动相pH值小于7时，最好用大粒度同种填料的预
waters故障排除及解决方法
Wei HaoWaters China Limited.HPLC常见故障分析及排除方法确定故障现象用排除法寻找问题原因分析可能引起问题的因素用基准的方法验证系统从简单问题入手色谱故障排除步骤寻求帮助一次只变化一个因素，以使你能够确认所变因素与问题之间的关联。
养成良好的记录习惯。
将来利用记录可以帮助发现问题，强化预防保养工作。
尝试预测将来可能发生的问题。
利用成功的故障排除经验。
恢复原状。
如果使用更换组件的方法来查找问题之所在，完毕后应将原有完好组件安装回原处。
否则，换下来的组件将来很难再利用，造成浪费。
确认问题至少发生两次以上。
如果问题不重复出现，很难证实其确实存在。
色谱故障排除经验规则引起HPLC发生问题的潜在因素: HPLC 常见故障因素环境电源接地线温度湿度清洁程度化学品色谱柱保护柱溶剂样品仪器泵进样器检测器数据处理单元HPLC 常见故障因素（工作环境）工作环境的影响•电源容量、稳定性•地线系统统一电源,统一接地•湿度对光学部件的影响尤为严重•温度空调机的影响•清洁不要轻视灰尘的影响HPLC 常见故障因素（化学品）化学品的影响•已损坏的保护柱、色谱柱•所用溶剂、试剂的品质•化学品使用不当带来的影响•样品前处理方法不当带来的影响•实验前的准备和实验结束后的收尾工作515 5101515/15252690/2695 600正确使用您的色谱泵：•使用高品质的溶剂•溶剂过滤（注意滤膜的选择）•脱气溶剂•柱塞杆清洗•注意调节流量时的变化速度密封圈柱塞杆HPLC 常见故障因素（510泵头）出口单向阀泵头进口单向阀出口阀进口阀参比阀抽液阀右泵头左泵头压力传感器废液溶剂过滤头HPLC 常见故障因素（600泵头）密封圈柱塞杆HPLC 常见故障因素（泵515/1500单向阀）PerformancePLUS Check Valves•易于使用•提高效率•长寿命•溶剂赖受性更好•兼容600, 515, 501 泵进、处口阀•兼容510 、M6000A 泵进口阀PN：700000253Primary HeadAccum.Head PrimaryX -ducerSystemX -ducer Prime/V entValve In-Line F ilter T o Sam pleManagementSystemFromDegasserGPV •注意流动相组分的互溶性！•使用正确的Seal Wash 溶剂！注意箭头方向！HPLC 常见故障因素（2690在线过滤器）2690初始化错误：Plunger homing over pressure在线过滤器HPLC 常见故障因素（进样器）7725i7172690PN:201000119请使用型号正确并且完好的注射器进样！请正确安装手动进样器！√X X请选择正确的转子类型！详情请参考Rheodyne公司网站：www. 正确使用步骤：•选择适当的洗针溶剂（绿管溶剂）和Seal Wash溶剂•清洗进样针（Needle Wash）•清洗柱塞杆密封（Seal Wash）•平衡系统•Purge 进样器•实验操作•清洗系统•Purge 进样器•清洗进样针（Needle Wash）•清洗柱塞杆密封（Seal Wash）其它注意事项：•打开样品仓盖后，等待样品盘停止转动后再取出•关机前取出所有样品瓶，或将样品盘全部取出•注意保持样品仓内和样品盘清洁•请使用Waters 公司认可的样品瓶•使用微量进样瓶请设定正确的针尖高度值（Depth of Needle〕•进样瓶垫损环后，请勿使用其它替代品HPLC 常见故障因素（检测器）2487双波长紫外检测器996二极管阵列检测器474荧光检测器2410示差折光检测器Peak not found: 656 nm DeuteriumLamp lighting failure 氘灯启动失败解决：检查电源检查氘灯使用时间Peak not found: Erbium n nm 波长校验失败解决：清洗检测池错误信息Lamp data not foundSystem not calibrated.Method not found错误信息机内电池的位置原因：机内电池耗尽解决：更换机内电池(CR2032)重新校正仪器注意：关闭并断开电源防止静电损伤2487检测器更换氘灯注意：关闭并断开电源防止静电损伤正常状态：Lamp及Status灯长亮Lamp灯闪烁：检查电源检查氘灯使用时间Status灯闪烁：清洗检测池996 检测器更换氘灯注意：关闭并断开电源防止静电损伤HPLC 常见故障因素（检测器）检测器使用和维护的其它注意事项•不要挡住检测器散热风扇和通风孔•不要随意更改检测器进、出口管路•示差折光检测器使用前、后均应充分清洗参比池(Purge )•长时间停用检测器时，应在检测池中充满甲醇或乙腈，必要时密封检测器进、出口管路HPLC 常见故障因素（色谱柱连接）WatersOtherPEEK 接头PN: PSL 613315√X XWaters PM Kit 介绍Performance Maintenance Kit 性能维护套件515 泵PM Kit600 泵PM KitPerformance Maintenance Kit 性能维护套件717 自动进样器PM Kit2690 系统PM KitPerformance Maintenance Kit 性能维护套件486 UV-Vis检测器PM Kit996 二极管阵列检测器PM KitWaters Quality PartsWaters正品密封圈非Waters密封圈Impropermachiningof sample portProperlychamferedsampleportThird Party Needle Waters QualityInjector NeedleThird Party Needle Waters QualityInjector NeedleImproper surface finish, irregular needle point Properlymachinedpoint andsurfacefinishWATERS 仪器维修/维护合同(TAP)介绍Total Assurance Plan(TAP)内容:★共同制定仪器维修/维护计划，每年定期更换仪器易损部件.如各密封件,光源灯等;★除定期更换的部件外,其他部件若出现故障，包括价格高的部件,维修或更换无需再付费。
液相色谱仪5种常见故障及处理方法
液相色谱仪5种常见故障及处理方法液相色谱仪是一种常见的分析仪器，在实验室中广泛运用。
但在实验中容易出现各种故障，严重影响实验结果的稳定性和准确性。
本文将介绍液相色谱仪的常见故障及其相应的处理方法，帮助实验人员提高实验效率和结果准确性。
故障1：峰缺失在进行液相色谱分析时，有时会发现某些峰的积分值明显偏低，或者甚至完全缺失。
这可能是由于以下几个原因导致的：可能原因:•柱子老化：液相色谱柱子长时间使用后，固定相可能流失或减少，导致结果出现峰缺失现象。
•进样量过大：进样量过大会使筛选柱中固定相与溶剂质量比例失衡，固定相与溶剂的分配不均匀，导致出现峰缺失现象。
•混杂：在样品制备时，不同的物质可能相互混合，导致某些组分不能被分离出来。
•溶剂挥发：极性溶剂如甲醇、乙醇等挥发性高，可能存在液相进样器进入柱子后被挥发掉的情况，影响分离。
处理方法:•柱子检测和维护：长时间使用后，液相色谱柱子的使用寿命会有所下降，建议定期检测和维护柱子。
•调节进样量：对进样量大小进行合理的调整，保证样品与固定相之间的比例均匀。
•加强样品制备：对样品进行充分的制备和清洁，避免溶剂挥发和不同组分混杂而导致结果不准确。
故障2：峰畸变峰畸变是指在分离的过程中，某些峰出现形状异常的变化。
峰畸变可能由以下原因导致：可能原因:•溶剂流速过快：溶剂流速过快，使柱子温度在某些区域过高或过低，导致峰的畸变。
•浓度不均：样品中各种组分的浓度不同，会使分离出的峰形状偏移或发生变化。
•柱子填充不均：柱子填充不均匀，导致分离出的峰形状不正常。
•流量不均：液相色谱仪内流体发生过快或过慢，可能会导致峰的畸变。
处理方法:•调节流速：合理地调整溶剂流速，使柱子内的流体分布均匀，以避免在特定点出现温度异常。
•调整样品浓度：避免样品中某种组分过多或过少，导致分离出的峰的畸变。
•检查柱子的填充和维护：检查液相色谱柱子的填充情况和保养，确保柱子填充均匀、表面光滑，避免填充物团聚、不均匀等情况。
液相色谱仪常见故障的处理方法
液相色谱仪常见故障的处理方法液相色谱仪是一种常用的分析仪器，广泛应用于制药、化工、环境等领域。
然而，液相色谱仪在运行中难免会遇到故障，这些故障如果不及时处理，将会影响分析结果的准确性和可靠性。
下面就介绍一些液相色谱仪常见故障的处理方法。
一、泵系统故障1.1 压力稳定性差当液相色谱仪中的某一个压力降较大时，其稳定性会变差。
此时可以尝试根据实际情况适当调整流速或空气泡数量，并检查泵的活塞是否顺畅，是否需要更换。
1.2 漏气在进行某些特殊的分析时，需要使用无气泡溶剂，如果出现漏气，可能会使得分离柱床压缩，导致分离效应减弱。
此时需要及时检查泵的密封性，并根据实际情况更换密封圈或换泵头。
二、检测器故障2.1 检测器响应不稳定液相色谱仪的检测器响应不稳定可能会影响分析结果的准确性和可靠性。
一些常见的影响因素包括：灯丝寿命、流量计的稳定性、载气的纯度等。
针对这些因素，可以通过更换灯丝、清洁流量计和更换或加入更纯的载气来解决。
2.2 信号噪声过大如果检测器的信号噪声过大，可能会干扰峰的分析，导致分析结果不准确。
这时可以尝试调整检测器的增益、检测器和信号放大器的设置，或者更换检测器的灯丝和各种电子元器件。
三、自动取样器故障3.1 管道堵塞当自动取样器采样管道出现堵塞时，会使得样品无法正常进入分析系统，从而导致分析结果的不准确。
此时可以尝试使用针筒或吸头进行清洗，注意不要损坏管道，或者更换采样针头。
3.2 移液量不准确液相色谱仪的自动取样器需要能够准确地移液，否则可能会影响分析结果的可重复性。
一些常见的影响因素包括：采样针头的污染、吸头容量的错误等。
这时可以尝试更换采样针头，或者重新校正吸头容量。
四、其他故障4.1 通道阻塞当液相色谱仪中的通道出现阻塞时，会使得分离效应不理想，从而影响分析结果。
此时可以尝试使用清洗溶液进行清洗，或者更换分析柱。
4.2 控制系统故障液相色谱仪的控制系统故障可能会影响仪器的正常运行。
对于这种情况，可以尝试重启控制系统，检查控制系统的电源和通信线路。
岛津液相色谱仪常见故障及维修方法
近年来，岛津液相色谱仪在科学研究和工业生产中得到了广泛的应用。
然而，随着使用时间的增长，液相色谱仪也可能会出现一些常见故障，这些故障有些对实验结果产生了很大的影响。
深入了解液相色谱仪的常见故障及其维修方法对于科研工作者和技术人员来说是至关重要的。
**1. 压力不稳定问题**在使用岛津液相色谱仪时，有时可能会遇到压力不稳定的问题。
这可能会导致色谱柱的寿命缩短，影响分离效果。
该问题出现的主要原因可能有色谱柱堵塞、柱温控制不稳定、进样器堵塞等。
解决该问题的方法有清洗色谱柱、调节柱温、清洗进样器等。
**2. 噪声干扰问题**另外，噪声干扰也是岛津液相色谱仪常见的故障之一。
噪声干扰可能会导致谱图产生异常，严重影响实验结果。
出现噪声干扰的原因可能有进样器堵塞、溶剂气泡、泵的脉动等。
解决该问题的方法包括排除气泡、改善进样器的清洗方法、调节泵的流速等。
**3. 回路漏液问题**回路漏液也是岛津液相色谱仪常见的故障之一。
回路漏液会导致进样器稀释效果不佳，影响实验结果。
回路漏液的原因可能有连接处松动、密封圈老化等。
解决该问题的方法包括更换密封圈、重新调整连接处的紧固度等。
**4. 泵的压力不稳定问题**液相色谱仪泵的压力不稳定也是一个常见的故障。
泵的压力不稳定可能会导致进样量不准确，影响分析的准确性。
出现这一问题的原因可能有泵的柱塞磨损、密封圈老化等。
解决该问题的方法包括更换柱塞、更换密封圈等。
总结回顾，液相色谱仪在实验过程中可能会遇到各种故障，如压力不稳定、噪声干扰、回路漏液和泵的压力不稳定等。
解决这些故障需要技术人员有较强的实操能力和丰富的经验。
除了平时的维护保养，定期的维修和保养也是至关重要的。
只有不断改进维护的技术和方法，才能更好地保障液相色谱仪的正常运行。
个人观点及理解：对于液相色谱仪的维护保养我一直非常重视，我认为只有定期的检查和维护才能延长仪器的使用寿命，保证实验结果的准确性。
在解决液相色谱仪常见故障时，需要及时沟通和协作，找出问题的根源并采取有效措施加以解决，这样才能确保实验的顺利进行。
WATERSHPLC常见故障分析
WATERSHPLC常见故障分析WATERSHPLC（高效液相色谱）是一种常用的分析方法，用于分离和检测化合物。
然而，HPLC仪器在使用过程中一些常见故障可能会影响分析结果和实验的进行。
在以下的文章中，我们将探讨一些WATERSHPLC常见故障的分析和解决方法。
1.峰形不对称峰形不对称可能是由于流动相、柱等问题引起的。
首先，检查流动相是否正确配置，确保使用的溶剂无气泡和杂质。
其次，检查柱的状态，尽量避免在柱上运行样品时破坏柱的封底。
最后，还可以尝试调整梯度和流速等参数以改善峰对称性。
2.噪声干扰噪声干扰可能是由于仪器的光电检测器或环境因素引起的。
首先，检查光电检测器是否干净，清洁检测器表面以去除灰尘和杂质。
其次，尽量将仪器放置在安静的环境中，避免外部噪声的干扰。
最后，检查样品制备的过程，确保样品中没有杂质或颗粒。
3.漏液漏液可能是由于柱连接不紧密或密封圈老化引起的。
首先，检查柱连接是否紧固，确保连接件没有松动。
其次，检查密封圈的状态，及时更换老化的密封圈。
最后，还可以尝试调整流速和压力以减轻压力对密封的影响。
4.柱堵塞柱堵塞可能是由于样品中的杂质、柱背压增加或柱老化引起的。
首先，可以尝试使用过滤器或微孔过滤膜将样品预处理，去除样品中的颗粒和杂质。
其次，检查流动相的组分，避免出现析出物或结晶。
最后，定期检查柱背压，及时更换老化的柱。
5.柱效降低柱效降低可能是由于柱老化、样品残留或流动相组分改变引起的。
首先，定期检查柱的状态，及时更换老化的柱。
其次，对于含有高糖、脂肪或盐的样品，可以考虑进行前处理或柱后处理以减轻柱效降低的影响。
最后，检查流动相的组分，确保流动相没有杂质和过多的溶剂。
总结而言，WATERSHPLC常见故障的分析和解决方法需要综合考虑多个因素，包括流动相、柱、样品和仪器等。
通过仔细检查和调整这些因素，可以解决大多数故障，并确保HPLC仪器的正常运行和准确的分析结果。
如何正确解决液相色谱仪的故障问题
如何正确解决液相色谱仪的故障问题液相色谱仪是一种常用的分析仪器，用于化学品的分离和定量分析。
在使用过程中，可能会出现一些常见的故障。
那这些故障是怎么解决的呢？压力异常：检查流动相供应系统，确保供应容器中有足够的溶剂。
检查进样器、柱床和连接管路，确保没有堵塞或泄漏。
检查进样器和柱床连接处，确保紧固。
峰形不对称或扩展：检查进样器针头，确保针头干净且不损坏。
检查流动相，确保溶剂质量良好。
检查柱床和连接管路，确保没有泄漏或堵塞。
检查流速和梯度程序，调整为合适的条件。
噪音过大：检查流动相供应系统和泵，确保泵的压力稳定。
检查进样器和柱床连接处，确保紧固。
检查检测器和信号放大器，确保连接良好。
检测器信号不稳定：检查进样器和柱床连接处，确保紧固。
检查检测器和信号放大器，确保连接良好。
检查流动相供应系统，确保泵的压力稳定。
色谱峰丢失或峰形异常：检查进样器和柱床连接处，确保紧固。
检查柱床，如果柱床老化或损坏，及时更换。
检查进样器针头，确保针头干净且不损坏。
检查流动相供应系统，确保供应容器中有足够的溶剂。
柱温控制不稳定：检查柱温控制装置，确保温度传感器正常工作。
检查加热器和冷却器，确保工作正常。
检查环境温度，避免温度变化过大的环境。
进样量不准确：检查进样器针头，确保针头干净且不损坏。
检查进样器的进样量设定，根据需要进行调整。
检查进样器的进样方式，使用适当的进样方式。
进样器漏液：检查进样器密封件，确保没有损坏或松动。
检查进样器针头，确保针头干净且不损坏。
检查进样器的连接管路，确保紧固。
泵噪音过大：检查泵的连接管路，确保紧固。
检查泵的传动装置，确保工作正常。
检查泵的压力稳定器，确保调整正确。
检测器灵敏度下降：检查检测器灵敏度设定，根据需要进行调整。
检查检测器的灯丝或光源，确保工作正常。
检查检测器和信号放大器，确保连接良好。
岛津高效液相色谱仪常见故障
岛津高效液相色谱仪常见故障
岛津高效液相色谱仪常见故障如下：
1. 流动相内有气泡：
解决方法：检查流动相是否脱气，流动相抽滤时要用氮气或干燥的空气顶走滤膜上面的流动相，过滤后的流动相放置时间不要过长，最好现用现配。
2. 基线漂移：
解决方法：检查流动相是否纯净，溶剂过滤，必要时用有机溶剂如甲醇或乙腈精制，确认输液泵流速是否正常，色谱柱是否被污染。
如果被污染可用0.05mol/L 的氢氧化钠溶液进行冲洗。
3. 噪音：
解决方法：检查流动相流速是否正常，色谱柱是否被污染。
如果被污染可用0.05mol/L的氢氧化钠溶液进行冲洗。
4. 峰形不对称：
解决方法：检查样品是否与色谱柱兼容，流动相流速是否正常，流动相比例是否改变，样品是否超载，如果出现这些情况可以进行相应的处理。
1。
制备液相色谱故障排查及解决方案
制备液相色谱故障排查及解决方案液相色谱是现代化学分析中常用的一种分离和检测技术，它已广泛应用于医药、化工、环保、农业等领域。
然而，液相色谱设备在使用过程中，难免会出现一些故障，如何高效地排查和解决这些故障，提高设备的稳定性和可靠性，对于保障实验数据的准确性和可信度十分重要。
本文将从液相色谱设备常见故障出发，介绍液相色谱故障排查和解决方案。
液相色谱设备常见故障1.系统堵塞–堵塞柱头和柱端的可能原因：样品中含有颗粒物，或者样品溶液中的盐类、酸碱度或有机溶剂含量不合适。
–堵塞管径较小的零件的可能原因：管径较小的零件包括：进样器、针头和检测器中的光纤等。
这类故障可能是气泡、颗粒物、化学物质沉积、时间久了，或者泵缓冲液清洗不干净等原因造成的。
2.噪声干扰–检测器Baseline噪声的可能原因：电子噪声是最常见的噪声类型，多半是由于部件松动、机械强度不足、设备磨损或者温度变化导致Detector信号中某些内在值的抖动。
此类问题可以通过更好的隔离、抗振动装置、定期更替设备等方式来规避或解决。
3.色谱分离不良–固定相与手册不符或损坏的可能原因：固定相问题很多时候不符合使用说明或遇到特殊样品的时候被破坏。
如果固定相是污染或破坏了，色谱分离就会受到影响。
解决方案1.系统堵塞解决方案–加载前过滤样品–更换柱头或柱端–清洗柱头或柱端–在进样器中压入干净的纯水或缓冲液，换下柱头并紧固，并注射清洁的纯水或缓冲液，直至检测器所用的检测方法不再提示残留物。
–检查缓冲液的 pH 值是否合适，一般缓冲液的 pH 值在 3-10 之间，如果缓冲液的 pH 值偏于酸或碱，则容易造成系统堵塞。
2.噪声干扰解决方案–更换检测器或升级检测器–覆盖并密封色谱柱–清洗固定相材料、缓冲溶液、样品或移除异物–检查和确认在使用过程中是否有质谱仪产生的相互干扰，例如电子痕迹–检查环境温度变化，避免恒温装置的故障3.色谱分离不良解决方案–更换固定相柱–更改移动相流速–更改 pH 值–增加样品载体浓度结论液相色谱是一种精密的仪器设备，故障排查和解决方案需要经验和技能的支持。
液相色谱仪常见故障及解决方法 液相色谱解决方案
液相色谱仪常见故障及解决方法液相色谱解决方案1、气泡溢出流动相内有气泡，关闭泵，打开泄压阀，打开purg键，清洗脱气，气泡不断从过滤器冒出，进入液相色谱流动相，无论打开purge键几次，都无法清除不断产生的气泡。
原因过滤器长期沉浸于乙酸铵等缓冲液内，过滤器内部由于霉菌的生长繁殖，形成菌团，堵塞了过滤器，缓冲液难以流畅地通过过滤器，空气在泵的压力作用下经过滤器进入流动相。
处理过滤器浸泡于5%硝酸溶液中，超声清洗几分钟即可；亦可将过滤器浸泡于5%硝酸溶液中12～36小时，轻轻震荡几次，再将过滤器用纯水清洗几次，打开泄压阀，打开purge键清洗脱气，如仍有气泡不断从过滤器冒出，连续将过滤器浸泡于5%硝酸溶液中，如没有气泡不断从过滤器中冒出，说明过滤器内部的霉菌菌团已被硝酸破坏，流动相可以流畅地通过过滤器。
打开泄压阀，打开泵，流速调至 1.0～3.0ml/min，纯水冲洗过滤器1小时左右。
即可将过滤器清洗干净。
关闭泄压阀，纯甲醇冲洗半小时即可。
液相色谱仪2、峰面积重复性不佳（1）进样阀漏液。
（2）加样针不到位。
（3）液量不足。
处理对于*种情况更换进样阀垫圈；对于第二种情况保证加样针插到底，注射样品溶液后须快速、平稳地从LOAD 状态转换到INJECT状态，以保证进样量的精准。
日常工作中，液相色谱仪的保养特别紧要，如要注意不要让空气进入输液系统和高压泵中，储液器内的溶液如长时间未用应清洗储液器并更换溶液，每次用完色谱仪后缓冲液要用纯水冲洗干净，防止无机盐析出或沉积；样品的前处理也很紧要，任何样品都要尽可能地去除杂质，完全溶解，尽量削减对色谱柱的污染，以延长色谱柱的使用寿命，同时避开注射过浓的样品溶液，以免残留液在进样阀内析出固体引起堵塞；色谱柱作好标记，用于不同分析目的的色谱柱不要混用等。
3、柱压高原因（1）缓冲液盐分如（乙酸铵等）沉积于柱内。
（2）样品污染沉积。
处理对于*种情况先用40～50℃的纯水，低速正向冲洗柱子，待柱压渐渐下降后，相应提高流速冲洗，柱压大幅度下降后，用常温纯水冲洗，之后用纯甲醇冲洗柱子30分钟；对于第二种情况，由样品的沉积引起污染的C18柱，和纯水反向冲洗柱子，然后换成甲醇冲洗，接着用甲醇+异丙醇（4+6）冲洗柱子（冲洗时间的长短由样品污染的情况而定），再用换成甲醇冲洗，然后用纯水冲洗，zui后甲醇冲洗正向冲洗柱子30分钟以上。
液相色谱仪几种常见故障解决方案
液相色谱仪几种常见故障解决方案液相色谱仪是一种用于分离和分析混合物的仪器。
它主要由溶液供给系统、色谱柱系统、检测器、数据处理和控制系统组成。
液相色谱仪在实验室中得到广泛应用，但是在使用过程中也难免会出现一些故障。
本文将介绍液相色谱仪的几种常见故障及其解决方案。
色谱柱跑峰色谱柱跑峰是液相色谱仪中最常见的问题之一。
出现这种故障可能是因为色谱柱缺少填料、填料老化、填料堆积不均匀等原因引起的。
针对色谱柱跑峰的解决方案如下：1.更换填料：如果填料过老或者填料堆积不均匀，可以通过更换新的填料来解决这个问题。
2.调节流速：调节流速以达到更合适的分离效果。
3.检查前处理：在进行分离前，检查前处理的步骤是否严谨。
否则的话，可能会影响分离结果。
色谱柱背压过高色谱柱背压过高往往意味着某些问题需要解决，例如填料堵塞、流动阻力增大等等。
针对此故障，有以下解决方案：1.清洗色谱柱：定期清洗色谱柱以防止填料过于堵塞。
2.检查前处理步骤：与跑峰一样，良好的前处理也有助于防止后续某个阶段的系统堵塞。
3.调节流速：降低流速可以减轻柱的背压。
检测器信号异常如果检测器的信号异常，则可能是检测器本身的问题或者某些环境因素所致。
解决此故障的方案如下：1.清洗检测器：定期清洗检测器以确保它保持良好的工作状态。
2.更换检测器：如果清洗或者调节无法恢复检测器的信号，则可能需要更换检测器。
3.检查柱系统：异常信号也可能与色谱柱系统相关，检查柱并修复可能的问题。
4.调整移液管：检查移液管的状态，更换或调整它们以改善液相分析。
溶剂混合错误液相色谱仪是根据不同的化学性质来分离混合物，而这也意味着液相色谱仪需要运行具有不同性质的溶剂。
因此，溶剂混合错误可能对分析结果产生负面影响。
解决此故障的方案如下：1.检查溶剂混合比例：确保比例的准确性，这样可以获得更好的分离效果。
2.检查溶剂质量：再次检查您使用的溶剂质量以确保准确性。
3.检查柱温：高温或低温可能会影响柱内混合液相除密度以外的其他因素。
液相色谱仪的6个问题及解决方案上 液相色谱解决方案
液相色谱仪的6个问题及解决方案上液相色谱解决方案众所周知，定期对液相色谱仪进行保养与维修，不仅可使其长期保持在健康、可用、可靠的状态下，还可增长仪器的使用寿命，节约企业成本。
在此，我整理了有关液相色谱仪的6个常见问题及其解决方案。
一、压力异常压力，是液相色谱中为重要的指标，操作人员应记录仪器正常状态固定相条件下的压力值，并时时注意仪器压力的变化。
通常，压力不稳可引起保留时间的变化，而且不同流动相处于相同的流速与温度时，也会出现压力不同的情况。
压力异常主要分为压力高与压力波动两种情况。
为避免压力过高，操作人员可采用流动相过滤、样品过滤等方法，滤掉溶剂和样品中的微小颗粒与细菌，以避免色谱柱、流路的堵塞。
而压力波动，则是由宝石球沾在球座上、宝石球或球座受污染，所导致的密封差。
此时，操作人员可选择合适的器械，将连接入口的单向阀顶开并清洗。
二、漏液据了解，液相色谱仪的泵漏液，有柱塞密封垫磨损漏液与清洗垫磨损漏液两种情况，手动进样器的漏液多由转子密封垫磨损引起，检测器的漏液由流通池堵塞引起，而柱子接头处的漏液则由接头松动、磨损、不匹配等情况引起。
为预防解决这一类问题，仪器操作人员应每两年便更换仪器相应的部件。
三、基线噪音大引发基线噪音大的原因有四种：(1)使用了低纯度溶剂，或者流动相受污染；(2)检测器流通池、流动相内有气泡；(3)通过检测池的能量不足；(4)波长设定过短。
相应的，操作人员应当取用纯度更高的溶剂、检查样品池中的情况，一旦发现污染，还应及时清洗样品池。
如污染严重，操作人员可拆开样品池，将透镜放入异丙酮中进行超声清洗。
在这篇文章中，我先为大家整理了有关液相色谱仪的3个常见问题及解决方案。
在下篇文章里，我还会将有另外3个问题及解决方案罗列出来，敬请期待。
高效液相色谱使用常见问题1. 色谱柱中的流动相会排干吗？不少做色谱分离试验的人遇到过这样的情形：不慎未及时补充流动相，泵将溶剂瓶中的流动相吸干了，HPLC系统由此而停止工作了。
液相色谱的常见故障及解决方法及维护和修理保养
液相色谱的常见故障及解决方法及维护和修理保养导读：液相色谱仪是一种常用的专业检验检测仪器，在使用过程中难免会碰到一些故障，这需要相应的方法来解决。
液相色谱的常见故障及解决方法液相色谱仪的系统由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分构成。
储液器中的流动相被高压泵打入系统，样品溶液经进样器进入流动相，被流动相载入色谱柱（固定相）内，由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的调配系数，在两相中做相对运动时，经过反复多次的吸附—解吸的调配过程，各组分在移动速度上产生较大的差别，被分别成单个组分依次从柱内流出，通过检测器时，样品浓度被转换成电信号传送到记录仪，数据以图谱形式打印出来。
1、HPLC灵敏度不够的紧要原因及解决方法是什么？①样品量不足，解决方法为加添样品量②样品未从柱子中流出。
可依据样品的化学性质更改流动相或柱子③样品与检测器不匹配。
依据样品化学性质调整波长或改换检测器④检测器衰减太多。
调整衰减即可。
⑤检测器时间常数太大。
解决方法为降低时间参数⑥检测器池窗污染。
解决方法为清洗池窗。
⑦检测池中有气泡。
解决方法为排气。
⑧记录仪测压范围不当。
调整电压范围即可。
⑨流动相流量不合适。
调整流速即可。
⑩检测器与记录仪超出校正曲线。
解决方法为检查记录仪与检测器，重作校正曲线。
2、液相色谱中峰显现拖尾或显现双峰的原因是什么？①筛板堵塞或柱失效，解决方法是反向冲洗柱子，替换筛板或更换柱子。
②存在干扰峰，解决方法为使用较长的柱子，改换流动相或更换选择性好的柱子③可能柱超载，削减进样量。
3、为何显现峰展宽？①样品体积过大用流动相配样,总的样品体积小于*峰的15%②在进样阀中造成峰扩展进样前后排出气泡以降低扩散③数据系统采样速率太慢设定速率应是每峰大于10点④检测器时间常数过大设定时间常数为感喜好*峰半宽的10%⑤流动相粘度过高加添柱温,接受低粘度流动相⑥检测池体积过大用小体积池,卸下热交换器⑦保留时间过长等度洗脱时加添强溶剂含量,也可用梯度洗脱⑧柱外体积过大将连接管径和连接管长度降至zui小⑨样品过载进小浓度小体积样品4、如何简单判定比例阀是否内漏？设定泵使用一个单独通路（A），打开Purge阀，流速5mL/min，提起其他溶剂瓶内的溶剂过滤头直至离开液面，察看这些通路（B、C、D）内的溶剂是否随着流动，正常时均不应流动。
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展宽是以下两种因素的综合结果：
— 仪器/系统影响 — 色谱柱的影响
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塔板数：柱效测定结果
塔板数是反映色谱柱及仪器性能状态的关键参数
相同色谱柱
A 12,000 仪器A： 谱带展宽较小（70µL） 测出的塔板数较高（12,000）
Si－O
Base Base
-
拖尾且 在HPLC中 保留过长
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上述实验使用了两个相同的普通C8色谱柱
碱性物质拖尾的解决方案
色谱柱或填料的品牌/流动相的pH值
中性物质 碱性物质
普通 C18
中性物质
碱性物质
现代 C18 （高纯硅胶）
0.04 AU
5
10
15 Min.
样品溶于80%甲醇 及2%甲酸中
0.02 AU
2 溶剂强度强于流动相 1
3
15
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溶解样品的溶剂不当
色谱图中某些色谱峰变形
为什么得到一个或一些变形的色谱峰?
— 主要的影响因素是化学问题 — 某一个样品组分与颗粒表面发生阳离子交换 o 色谱柱的本身性质或化合物的本身性质所引起的化学问题 — 样品在色谱柱上过载 － 样品引起的化学问题 o 浓度过载 o 体积过载
第二部分
— 保留时间重现性 o 温度 o 有机相比例 o pH o 离子对 — 疏水塌陷 — 方法开发建议 — 额外的色谱峰（鬼峰）
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色谱问题的可能根源
流动相 进样器 在线过滤器 色谱柱 检测器 样品 泵 保护柱 连接管线及接头 积分仪/记录仪/软件
— 微柱系统之展宽应小于20µL
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窄柱应用的柱外谱带展宽要求
传统4.6mm和3.9mm内径色谱柱
— 整个系统： ~ 100 µl
较小内径（3mm内经）色谱柱
— 整个系统： < 100 µl（最好小于50µl）
窄柱（2mm内经）色谱柱
— 整个系统： < 25 µl
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系统优化
系统的优化：
— 检测池设计/降低池体积 — 降低进样器样品定量环体积 — 使用0.009”（窄柱及微柱：0.005”）内径管线 — 缩短管线长度，完美的（预先切割好）连接 — 检测器时间常数<0.2
填料塌陷
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色谱柱塌陷的影响及原因
造成的影响：双峰及前沿峰
— 特点是：所有色谱峰皆受影响
原因之一；化学伤害造成色谱柱自身毁坏
— pH >8 硅胶基质被溶解，引起塌陷 — pH <2 官能团被洗脱掉，但是一般情况下只会引起色谱峰前移，而没有 塌陷
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某些色谱峰变坏：化学问题
一些色谱峰峰形很好，但某一个或几个色谱峰峰形差 — 化学问题（非机械问 题）
— 由于第二种相互作用的发生使碱性物质峰形拖尾，因而导致：积分误差、分离度降 低、灵敏度降低
这些色谱峰峰形良好
系统性能的考察：测谱带展宽
将色谱柱从系统上卸下来，连接换上零死体积“两通”
— 流速：1mL/min. 用单波长紫外检测器测定 — 进样2到5µL样品，使检测器产生0.5-1.0AUFS的响应 — 测量峰高4.4%处的峰宽： o 谱带展宽（µL）= 1000×峰宽（PW，seconds）/60
典型的LC系统谱带展宽体积应为100µL左右
H3C
OH
O Si O O
C Si C CH3
C C
C C
C CH3
+
HO
注：有时此现象被称为色谱柱流失（“Column Bleed”），当配体水解 不断进行时，色谱峰的保留会降低，碱性物质的色谱峰形可能会变差 。
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对性能的影响（相同色谱柱）
— 如果在一个谱带展宽为130µL的系统中，一根柱效在大约在7,000左右的 色谱柱，那么谱带展宽降低到70µL时柱效会大于 >12,000
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色谱柱本身的问题：柱塌陷
柱头形成死体积 - Channeling
色谱图中所有色谱峰变形
为什么色谱图中的所有色谱峰都变形？
— 机械问题 o 进样器 o 色谱柱有死体积 o 连接有问题 — 化学问题 o 溶解样品的溶剂太强 — 其他的综合因素 o 色谱柱头的污染、部分堵塞
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低pH下键合相的水解
O Si O O OH
H 3C Si Cl CH3 C C C C C C C CH3
+
H 3C
C Si C CH3
C C
C C
C CH3
O Si O O
O
+ HCl
低pH (配体的水解)
样品名： 1. EDDP 2. Diphenhydramine (IS) 3. Methadone 色谱柱： SymmetryShield RP18 3.5µm，3.9×150mm 保护柱： Sentry Guard Column SymmetryShield RP18 5μm 柱温度： 30ºC 流动相： 0.1% TFA:Methanol （60:40） 检测器： UV at 210nm 流速： 1 ml/min 进样体积：30µl
泵 进样器 检测器 数据采集
谱带展宽 连接管路 色谱柱 样品瓶
化学问题
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机械问题
良好的色谱结果
填装良好的色谱柱在系统、连接状况皆良好的 状况下，色谱峰形很好
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色谱柱安装及连接的机械因素
连接管线的内经对系统谱带展宽的影响 — Waters公司提供三种内经的不锈钢管线 注：过长的管线亦会造成较大的谱带展宽
0.009" 0.040" 0.020"
样品谱带在管线内发生了扩散
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疏水相互作用及 与带电位点的离子交换作用 with Charged Sites
O-Si O-Si 阳离子交换 OO-Si O-Si + O- (CH ) HN 32 O-Si OO-Si O-Si O-Si O流动相的pH6~8 O--Si O-Si
流动相的pH < 3
+ HN(CH3 )
2
Si－OH
接头及筛板 检测器的检测池体积 色谱柱本身
— 色谱柱内的死体积 — 筛板阻塞
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色谱柱安装及连接的机械因素 连接适当
连接不妥，造成漏液
连接不妥
谱带展宽 由于色谱柱连接不当引起的谱带展宽，机械问题
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流动相pH和色谱柱寿命
pH 2 - 8 240- 硅胶基质： 220- 聚合物基质： pH 2 -12 200180- pH > 8 时硅胶溶解 1601401201008060402001 2 3 4 5 6
硅胶在水中的溶解（ppm）78源自910pH
硅胶溶解曲线，pH > 8 导致传统硅胶键合 相颗粒溶解，形成死体积
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色谱峰形欠佳的其它原因
色谱峰形问题：展宽且拖尾的色谱峰
— 色谱柱进口过滤器（筛板）部分阻塞 o 卸下接头，清洗或更换筛板 — 在线过滤器污染 o 更换筛板 — 保护柱污染 o 更换保护柱或柱芯
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液相色谱系统故障排除
Oct 2010
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常见HPLC问题的故障排除
第一部分
— 故障排除策略综述 — 机械及化学因素对性能的影响 — 仪器谱带展宽 o 系统检测及优化 — 色谱柱的性能 o 塔板数，死体积 — 色谱峰形问题
所有色谱峰都变坏的机械问题
相似的变化
色谱柱内空隙 － 高反压，扭曲的或双峰
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所有色谱峰都变坏的机械问题
谱带展宽（Band Spreading）:
— 被测样品谱带变形/加宽 — 严重者出现双峰 — 特点：所有的色谱峰的表现形状相似