--薄层色谱基础知识及斑点异常[原创]

持
哉
曼
蹿
捌
呕
书
赵
耶
斑点异常与克服
景
豺
汞
润
点样环境
伍
扼
❖洁净 、干
算
燥
弛
为
煌
胚
类
作
薄层色谱的点样
羊
宫
❖ 点样的形状
吭
用
1、圆点
炒
2、条带
铅
状
举
细
公
锣
扦
薄层色谱的点样
号
寨
❖ 点样的距离
东
自制板
高效板 该 炒
津
孵
直径不大于 4mm
宽度5－10mm
>8mm
10
直 径 8不－
宽度 >4－ 58m
席 屉 梧
蛊
薄层色谱的点样
白
干
❖ 点样的注意 点
喷雾法或浸渍法以适宜的显色剂 朽
显色，或加热显色，在日光下检 早
视。2.有荧光的物质或遇某些试剂 种
可激发荧光的物质可在356nm紫 第
外光灯下观察荧光色谱。3.对于可 闺
脾
薄层色谱中斑点的异常
畜
砚
异Leabharlann Baidu现象
滴
1、拖尾
冻
4、32、念、现效S珠边斑形象应状缘点及斑波点形 5、斑点与对照品
逞 材 柿
6、其对不上
导
任何粘合剂
觅
稍
倦
朵
娠
棉
拐
薄层板的制备
糟
掩
❖ 硅胶H和硅胶G的应用
漾
1物质是有色的，在日光看
韧
2物质没有颜色但可以利用
件
显色剂显色
惦
3.可以荧光显色
嘲
娘
写
毕
决
薄层板的制备
蛇
邓
❖ 硅胶HF254和硅胶GF254
凹
1.是指添加了荧光剂，如硫
梢
2.应用范化围镉：等物。质有荧光，在 254波长紫外下看其荧光；物 质没荧光，在254波长紫外下
，点样容易过载；涂层厚，显 岗
色不那么明显
抨
3.室温下在水平位置放置，待 梯
薄层发白近干
村
障
薄层板的制备
醛
仓
注意点
亮
5.研磨时间
汁
6.铺板用的匀浆不宜过稠或过稀 寞
：过稠，板容易出现拖动或停 桥
顿造成的层纹；过稀，水蒸发 化
后，板表面较粗糙。匀浆配比 湿
一般是硅胶G:水=1：2～3，硅 铆
胶G:羧甲基纤维素钠水溶液 僵
看暗斑（荧光淬灭）
谗 偶 舀 讥
蔗
蝉
斤
薄层板的制备
幽
埔
自制板
焕
腿
淖
无黏合 剂
含黏
季
合剂
徘
苏
馏
态
育
薄层板的制备
咖
❖黏合剂 cmc-na溶液的配
已 格
制
福
先将称好的CMC-Na加
碧
入所需水量的8/10,让其
休
充分溶涨后,再加热煮沸,
慰
然后将剩余水慢慢加入.
搐
这样在煮沸过程中不易
摇
形成颗粒,煮沸时间短.
诲
它
敛
摧
公
斑点异常
即
拖尾原因
豹
绳
1.点样量
坎
2.点过样载圆点未
独
3.展重开合
苞
4.薄剂层析 5.其他
矮 啪
洒
雁
畔
斑点异常与克服
白
处
❖拖
尾
1.点样量过载
维
钦
任何吸附剂，它们的负载化 锣
合物的能力是有一定限度的 妖
，因此点样过量而超载后， 疼
克过服剩方的法化：合A物.点被样抛时在可后以面点， 靡
形成成条拖带尾状现象
乍
黄，而且可能有霉菌出
铲
现，最好不要使用。
纵
搬
短
斟
薄层板的制备
翼
脓
制板
闽
操作：除另有规定
蜀
外，是指将1份固
旋
定相和3份水溶液
缄
，研磨混合，置玻
御
璃板上使涂布均匀
韩
，平台上于室温下
惶
晾干，活化后，置
誉
址
薄层板的制备
侈
粤
注意点
瞅
1.沿同一方向研磨混合，避免 邦
产生气泡
插
2.厚度为0.2－0.3mm，涂层薄 溯
轻
1.不要弄破薄层板
釉
2.点样量大时，少量多次
好
，
侮
3.点好样的薄层板用电吹
椭
风吹干或放入干燥器里晾
新
干
租
盅
都
薄层色谱的展开
悬
❖ 展开
畅 可
将点好样品的薄层板放入展 开缸的展开剂中，浸入展开 剂的深度为距原点5mm为宜
，密封
庆 形 悬 匝 腮
堤
哮
戚
薄层色谱的展开
阁
膊
❖ 展开剂配制
犹
1.把各组成溶剂移入分液漏斗， 难
茅
萨
薄层板的制备
蔚
❖黏合剂 cmc-na溶液的浓
烛 牵
度
楞
溶液的浓度0.3-0.7%比
灵
较合适，实际操作中0.4
蝇
％～0.5％最为实用，浓
廖
度高了将来显色时如果
刑
有加热过程稍不小心板
睦
子容易发黑，浓度低了
型
泉
薄层板的制备
嘴
❖黏合剂 cmc-na溶液的存
毗 齿
放
脉
注意放置时间太长的
睫
CMC-Na溶液可能会发
薄层板的制备
茂
汲
3、实验室硅胶有哪些型号
聂
硅胶S
蜗
硅胶G
仰
硅胶
硅胶H/硅胶N 硅胶GF245
脱 筑
硅胶HF254
臆
锻
屉
昂
薄层板的制备
锦
诡
❖ 硅胶G和硅胶S
幼
1.硅胶G是指硅胶粉+15%
峰
煅石膏。
信
2.硅胶S是指硅胶粉
逆
+15%淀粉。
鹃
嘉
荣
趟
六
薄层板的制备
矩
亡
❖ 硅胶H或硅胶N
欣
是指纯硅胶粉，没有添加
=1:2。匀浆的稀稠除影响板的
耘
薄层板的制备
切
怠
活化
游
合
1.薄层板为何要进行
躬
2.在“10活5－化1”10？度活化30分钟。 呵
3.一般检识水溶性成分或一些极 釉
性大的成分时，所用薄层板只 锑
在空气中自然干燥，不经活化 镰
即可贮存备用
凝
耻
薄层色谱的点样
戎
慌
❖ 点样器
酥
赔
七
罢
鸿
嫌
掠
低
紊
薄层色谱的点样
展开缸如需预先用展开 剂预平衡，可在缸中加 入适量的展开剂，密闭 ，一般保持15－30分钟
神 连 趟 娠 蔫
笔
海
讹
薄层色谱的展开
柯
❖ 展开距离
按 匡
富
展开至规定距离（一般为
堑
8～15cm）
呀
炔
饿
稀
嘲
虑
薄层色谱的显色
忱
殷
❖ 显色与检视
阵
1.供试品含有可见光下有颜色的成 弧
分可直接在日光下检视，也可用 姬
强烈振摇使混合液充分混匀，放 恤
置，如果分层，取用体积大的一 蹭
层2.作混为合展展开开剂剂。要最求好新不鲜要配把制各，组 蝶 成不溶要液多倒次入反展复开使缸用，,如振需摇分展层开，缸 产 则按要求来放配置制分展层开后剂取。需要的 肄
一相（上层或下层），备用
玫
释
薄层色谱的展开
释
❖ 预饱和、预平衡
莆 摹
凹
及
薄层色谱基础知识
痘
镶
辕
及斑点异常的原因和克
中
服
亢
其
Zhuhaikangabc 喜 伞
别
薄层色谱
操作的流程
薄层 板
点样
展开
显色
牢
潮
黍
结果 判定
锭 敲 贯
锦
菊
戒
害
导
郭
薄层板的制备
戴
菱
固定相
带
榨
❖ 什么是固定相？
肯
猎
柞
少
揩
落
末
薄层板的制备
伙
❖ 常用固定相
卓 绘
1、聚酰 2、硅胺 3、胶硅澡
玲 诵 国
4、氧土化
忙
5、纤铝维素6、其他
束
料
治
肚
薄层板的制备
漠
❖ 聚酰胺
嫉 灶
己
1、什么是聚酰胺？
华
2、聚酰胺适合那些化合物的分离？ 摇
鹤
适用于多元酚类化合物分离，
西
如黄酮，醌类，酚酸，含羰基
偏
的化合物等
示
散
薄层板的制备
淖
❖ 硅胶
遥 雄
禁
1、什么是硅胶
狮
2、硅胶适合酸性和碱性等化
阔
合物的分离
究
箩
壬
拢
绰
罕
B.选用稍厚一点的板
趴
败
斑点异常与克服
睫
圈
❖拖
尾
2.点样圆心未重合
繁
琴
样点虽然在同一垂直线上但样 沼
点上下圆心没有重合，致使样 孺
克点服呈方近法椭：圆点形样，位也置是要形准成确拖，现 巳
预先设计象好的点原样因的之位一置，然后 妊
用铅笔作好标记，每次点样对 戈
准圆点
找
褐
斑点异常与克服
九
品
❖拖
尾
3.展开剂的配制