丹酚酸的提取工艺
高纯度丹酚酸B的制备工艺研究
酚 液 "’#$%!混匀且快速加入 )’#$%浓硫酸!在沸水浴中放置 ")
称 取 -份 等 量 丹 参 切 片!按 照 (’"方 法 提 取!提 取 液 离 心 减
$+,!采用流水冷却后于 -.#,$ 处比色法测定吸光度&以吸光值 压 浓缩!定容&分别加到装有上述 -种不同树脂的层析柱上!先用
为 纵 坐 标!葡 萄 糖 浓 度 为 横 坐 标!得 葡 萄 糖 的 线 性 回 归 方 程/01 水 洗 去 上 样 液 中 未 吸 附 成 分!再 用 乙 醇 洗 脱!收 集 各 自 乙 醇 洗 脱
(’=’"中所述方法测定各样品液总糖含量&结果见表 "&
样品液 提取原液
上样液
表 " 纯化过程中总糖含量的变化
>>>>
总糖量
样品液
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洗脱液
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!"#"! 标 准 曲 线 的 绘 制 准 确 吸 取 上 述 葡 萄 糖 贮 备 液 #’"! 吸 附 为 被 吸 附 的 丹 酚 酸 <的 质 量!通 过 比 较 各 树 脂 对 丹 酚 酸 <
#’()!#’)!#’*)!"’#$%!分 别 置 于 "#$%具 塞 比 色 管 中!加 入 苯 的吸附及解吸情况!选择最佳树脂&
丹参中主要成分的提取分离标准工艺简述
丹参最重要具有旳成分为脂溶性旳二萜类成分和水溶性酚酸类成分,因此在设计丹参提取分离时,重要考虑旳是这两类物质旳提取过程。
其中脂溶性成分以丹参酮ⅡA为重要有效成分,其含量也相对较高;而水溶性成分以丹参素、丹参酚酸类、原儿茶醛为重要成分,原儿茶醛虽为活性成分,但其在丹参中含量很低。
且水溶性成分对于热旳敏感性强,脂溶性成分有升华性,在长时间热解决过程中容易成分损失。
1、提取已知丹参中成分热不稳定,采用梯度渗漉法对脂溶性成分和水溶性成分进行提取。
先以95%乙醇对丹参药材进行浸泡溶胀一段时间后,再用95%乙醇进行渗漉,采用正交法选用合适旳渗漉速率,注意低温操作。
滤去渗漉液A(重要为提取丹参酮等脂溶性成分),再用8倍量水对药渣进行渗漉,滤去渗漉液B,提取水溶性成分。
两份渗漉液均需要采用减压浓缩旳方式进行合适浓缩,温度不适宜过高,时间也不适宜过长。
2、分离对渗漉液A可以采用水沉法进行精制。
由于丹参酮ⅡA等二萜醌类成分具有共轭体系,刷型作用力强,也可以选用合适旳大孔树脂吸附进行分离,再使用95%旳乙醇进行解吸附。
对渗漉液B可以采用醇沉法,查资料可以加醇使药液含醇量达50%,能减少成分旳损失,起到最佳旳分离效果。
此外,由于水溶性酚酸成分中,丹酚酸具多种酚羟基、且分子量较大,可以采用大孔吸附树脂和聚酰胺树脂吸附旳措施进行分离;而丹参素与原儿茶醛分子量不不小于丹酚酸类成分,分子间作用力相对于丹酚酸类较小,因此与水旳亲和力更大,更适合于阴离子互换树脂进行分离。
若要对丹酚酸类成分过大孔树脂进行分离,可采用先用水洗脱,再用醇洗脱旳方式进行分离纯化。
3、超临界流体萃取法超临界流体萃取法是现行以便、有效提取丹参中有效成分旳措施,同样在条件旳选择上需要控制温度、压力、时间等因素,此外可以加入合适旳夹带剂来提高提取效率。
如脂溶性成分可以加入高浓度旳乙醇来增长脂溶性成分旳溶解性,而水溶性成分也可以选用合适旳夹带剂,有文献提出可以选用10%醇和非离子表面活性如吐温旳混合体系溶液进行提取。
丹参总酚酸类成分的提取纯化工艺和质量研究_张秋燕
水平 1 2 3
表 1 丹参水溶性成份提取工艺影响因素水平考察
A 溶剂种类
B 溶剂用量/倍
C 提取时间/h
纯水
6
1
0.1 mol·L-1 盐酸
8
1.5
0.05 mol·L-1 盐酸
10
2
D 提取次数/次 1 2 3
No. 1 2 3 4 5 6 7 8 9 均值 1 均值 2 均值 3 极差
所用溶剂 1 1 1 2 2 2 3 3 3
362.105 168.659 254.221 193.446
表 2 丹参水溶性成分提取工艺结果直观分析
溶剂用量
提取时间
1
1
2
2
3
3
1
2
2
3
3
1
1
3
2
1
3
2
211.039
228.120
293.112
322.579
280.8349
提取次数 1 2 3 3 1 2 2 3 1
8
F 临界值 4.460 4.460 4.460 4.460
至 300 mL 超 声 ,配 成 水 溶 液 。
选 择 处 理 好 的 大 孔 吸 附 树脂 4 000
3 000 A
B
HPD100,HPD450, HPD600 , 3 500
2 500
HPD700,HP70,HP2MGL,SP700, SP825,X -5,S -8,D4020,H103, AB -8 适 量 , 用 纯 水 冲 洗 并 抽
关键词:丹酚酸 柱色谱 高效液相色谱 指纹图谱 doi: 10.11842/wst.2013.02.029 中图分类号:R284 文献标识码:A
大孔树脂吸附分离丹参提取液中丹酚酸B的工艺研究
精确 量 取 等 量 上 述 8种 湿 树 脂 , 别 加 入 分
5 mI浓 度 为 1 6 9 丹 酸 / 取 室 温 下 静 置 0 . 2 mg 酚 B mI提 取 液 中丹酚 酸 B的工 艺研 究
一眦一一 一一
∞ 即 媲 料∞导加 ∞甾仰 嘿∞臻 0 掣盘∞ ∞索 g 罚
1 4 5. 0
1 .2 8 5
下既 能实 现较高 的工作 效 率 , 又保 证 了树 脂 对 丹 酚 酸 B的高 效 吸附 。
1O O
干膏率一E M1 ( 一M。/ 料 )M原 ]
3 结 果 与讨 论
3 1 树 脂 的吸 附容量 .
表 1 8 树 脂 的 吸 附容 量 种
树脂 型号 饱 和吸附量 mg 酚 / 馒树 丹 醴BmI 脂
4, h 再用蒸馏 水洗 至 中性 , 备用 。
212 树脂 的选择 ..
测波长为 26 m, 8n 理论板数按丹酚酸 B 峰计算应
不 低 于 2 0 。称 取丹 参 酚 酸 B . mg 加 7 甲醇 00 56 , 5
溶 解定容 至 1 mL 0 。
分别 精 密 量 取 适 量 刚 配 好 的 对 照 品 , 释 成 稀
0 2 mg mI, . 1 / 0 1 mg mI, . 7 / . 8 / 0 2 mg mI . 4 / 0 0 mg ,
选 用 了 D 0 、HP 4 O 11 D 5 、HP 6 0 YWD0 、 D0、 7
L 0 , WD 6 X 5 DI0共 8种树脂 进行试 验 。 D6 5 Y 0 、 一、 6
在一定 p 值 下 , 参 提 取 液 (.2 mg 酚 B H 丹 16 9 丹 酸 /
mL  ̄ ) m e 以一 定 的 流速 通 过 树脂 柱 , 测定 流 出 液 中 组分 的含量 。
大孔树脂吸附分离丹参提取液中丹酚酸B的工艺研究
丹参提取丹酚酸 B 的提取物中杂质含量过高 ,可导致丹
酚 酸 B 性 质 不 稳 定 ,文 章 采 用. 孔 树 脂 对 丹 参 提 取 液 进 行 纯 大 化 , 以提 高 丹酚 酸 B 的 纯度 。
3 结 果 与 讨 论
31 树脂 的 吸附 容量 .
表 1 8种 树脂 的 吸 附 容 量
s t f co y ai a t r . s
Ke w o d : a i a va i i rh z e; s la o i c dB ; l c o o o sa s r t n r s y r s r d x s l iem l o r ia t a v n b ca i na r p r u d o p i e i o n
Su t dy on Abs r i n a pa a i n o h a r po o a r po o sn f r o pto nd Se r to ft e M c o u usM c o r usRe i o
Sava b ca i f o Ra xSa v a i i r h z l no i cd B r m di l i eM l O r iae t .
Ta 1 Co ar o t st tcfa on ea s r t n e f tof8 r s n b l o mp e t he a i v d opi fec e i
.
— — — — — — — — — — — — — — — — —
1 实 验 仪 器 和 材 料
高效液相色谱议( 日本 岛 津 ,S MA U,带 光 电 二级 管 HI DZ 阵 列检 测 器 ) 参 ( 自某 丹 参 种 植 基 地 ) 丹 购 ;丹 酚 酸 B 标准 品( 上 海 融 禾 医 药 科 技 有 限 发 展 公 司 , 1 / , 批 准 文 号 0 mg 瓶
一种简便的丹参丹酚酸提取工艺
一种简便的丹参丹酚酸提取工艺水塔()老醋生物科学车建途小珺于雷丕馥中才摘要:丹参中药材取自唇形科植物丹参的根,在中医临床上,丹参主要用来治疗冠心病、脑血栓、肝炎及肝硬化等。
该药长期的临床应用背景及在治疗疾病方面的明显效果,引起了国外学者对其水溶性酚类化合物的重视。
丹酚酸B是丹参水溶性成分中最主要的活性物质,其含量较高,占丹参药材的2%-8% 。
丹酚酸B的活性很强,对脂质过氧化引起的细胞膜损伤有明显的保护作用,还具有抗血小板聚集并对血栓形成的作用。
因此,丹酚酸B的提取技术的研究受到了医药界的关注。
本实验简化了丹参中丹酚酸B的提取方法,以简单低成本的提取方法得到丹酚酸B纯度较高的干粉。
实验原料和仪器1. 主要原料:丹参饮片。
本次实验使用的丹参为:中江丹参(药材批发市场)岭野生丹参(网上药店)2. 其它材料或试剂:去离子水,乙醇,10%盐酸,乙酸乙酯3. 实验仪器:电炉,水浴锅,冷凝管,真空泵,低温高速离心机,旋转蒸发仪,冷冻干燥器,以及烧杯等常用玻璃仪器。
基本提取工艺流程图提取工艺具体操作步骤1. 取丹参饮片,加10-12倍量的30%-40%的乙醇溶液,浸泡1-2小时,煮沸回流提取1.5-2小时,过滤,滤渣加8-10倍量的相同浓度乙醇溶液,煮沸回流提取1.5-2小时,过滤,将两次提取液合并。
2. 将上述提取液55℃以下浓缩至1-1.5倍量,用10%的盐酸酸化至pH为2.5-3,抽滤或离心去掉悬浮颗粒不溶物。
3. 滤液用乙酸乙酯萃取三次,分离出有机溶剂层,50℃以下减压浓缩回收乙酸乙酯。
4. 将浓缩后的浸膏(干粉)溶于1.5倍量去离子水中,继续浓缩至干,重复两次,即可去除产品中残留乙酸乙酯。
浓缩液取出经真空冷冻干燥,既得丹酚酸总提物。
提取物质量控制指标提取物功效成分检测方法HPLC法测定丹酚酸A、丹酚酸B、迷迭香酸、丹参素钠1.色谱条件色谱柱:Agilent Zorbax C18;流动相:甲醇-乙腈-甲酸-水(30:10:1:59);流速:1.0ml/mL;检测波长:286nm;进样量:20μL2.对照品溶液制备精密称取丹酚酸B对照品,用水溶解,并稀释成浓度为0.20mg/mL的溶液,作为对照品溶液。
丹参总酚酸提取工艺的优化
团独家 拥有 自主 知识产 权 的主导 品种 之一 ,具有 活 血 化瘀 、通脉 舒 络功能 ,用 于瘀 血 闭阻所致 的胸 痹 及 中风 、冠 心 病 、心 绞 痛 ,心 肌 梗 死 等 症 。2 0 05 年 获 得 国 家 发 明 专 利 ( 利 号 Z D 1 3 1. ) 专 I2 532 1 。 20 0 6年 人选 “ 三 届 百 姓 放 心药 品 ” 十 大 中药 注 第
度 ,摇 匀 。在 5 0 n 处 ,测 定 吸 光 度 。 以丹 酚 酸 0 m B计 ,按 线性 回归 方程计 算 。
收 稿 日期 :2 o — 1一 2 O9 O 6
作者简介 :王小平 ( 96一) 17 ,女 ,陕西宝鸡人 ,主管 中药师 ,讲师 ,博士 ,从事 中草药化学成分分析及新药研究 。
入 液相 色谱仪 ,记 录峰 面积 。
2 4 总 酚 酸 的 含 量 测 定 .
流 动相所 用 甲醇 为色谱 醇 ,其他 试剂 如 :乙醇 等 均为 分 析纯 ;丹 参 来 自山 东 丹参 G P基 地 ;丹 A 酚酸 B ( 1 5 2— 0 8 7 由 中国药 品生物 制 品检 116 2 00 ) 定 所提 供 。
3 2Leabharlann 第 2期 王小平 ,等 :丹参 总酚酸提取工艺 的优 化
O
2 5 正 交试验 结果分析 .
表 方 差 分 析 表 5 嘟
2 2 2 2
2 5 1 丹酚酸 B正交试验结果分析 ( . . 见表 2及表 3 )
表 2 正 交试 验 结 果
詈 詈
由实验 结果 表 4及方 差分 析结 果表 5可 知 ,最 佳水 平 为 A B c咖 因 素 的 由 主 到 次顺 序依 次 为 ,各 c,B,A,其 中提取 时 间 、提 取次 数对 提 取结 果有 显著 影 响 ,溶 媒用 量无 显 著影 响 。故最终 的提取工 艺为 A。 。 即 6倍 量 2 % 乙醇 ,提 取 3次 ,每次 BC 0
微波辅助提取丹参中丹酚酸B
M i r wa e a ss e x r c i n o a v a lc a i co v . s it d e t a to f s l i no i c d B
f o a va m i i rhia b n r m s li l o r z u ge t
HAN We ,S i—a i UN Jn ln,L U Z i i g I h— n p
Vo _ 0 No 2 l3 .
Ma .2 8 r 00
微 波 辅助 提 取 丹 参 中丹 酚酸 B
韩 伟 , 金 兰 , 志平 孙 刘
( 华东理 工大 学 中药现代 化工 程 中心 , 海 2 0 3 ) 上 027
摘 要 :以丹参 中水溶性 成分 丹酚酸 B的收率为指标 , 采用微 波提 取 的方法 , 考察 浸泡 时间、 剂种类及 浓度 、 溶 提
va mi irhz u ge Th fe t f p r e tg e ta to f s li n lc a i i l o r ia b n . t e e c s O e c na e xr cin o a va oi cd B, s c s l a h n i u h a e c i g tme,s le t ov n t p sa d c n e ta in,MAE i y e n o c n r to tme,l ui/s l ai i d oi r to,p o ou i n a d e ta to tg s q d H fs l to n x r cin sa e ,we e d s u s d.Th r ic s e e
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第3 0卷 第 2期 20 0 8年 3月
南 京 工 业 大 学 学 报 (自 然 科 学 版 ) J U N LO A JN N V R IY O E H O O Y ( aua Si c dtn O R A FN N I G U I E ST FT C N L G N trl c neE io ) e i
丹酚酸的提取工艺
丹酚酸的提取工艺
丹酚酸的提取工艺包括以下步骤:
1. 原料准备:使用含有丹酚酸的植物材料,如紫花苜蓿、白蜡树、白色卡耐、金钱草、草莓等。
2. 溶剂提取:将植物材料加入溶剂中(如乙醇、丙酮等),在适当温度下进行热提取或酸碱提取,可以得到含有丹酚酸的溶液。
3. 过滤、浓缩:用滤纸过滤掉杂质,然后将提取液浓缩,除去溶剂,得到粗丹酚酸。
4. 结晶:将粗丹酚酸加入适量水中溶解,然后通过降温或者添加酸碱物质,使其结晶沉淀,再经过过滤、洗涤等步骤,得到纯的丹酚酸产物。
5. 干燥:将丹酚酸经过分离、洗涤等步骤后,进行干燥,将其水分蒸发掉,得到干燥的丹酚酸。
丹参中丹酚酸B的提取分离及分析方法研究进展
量 。结 果 表 明 , 工 艺 较 原 工 艺 丹 参 素 提 高 了 新
2 . % , 酚酸 提高 了 1 . % 。 31 总 97
2 超 声波提取 法 .
统 的提 取方 法是 水 提醇 沉 , 也 是 目前 制 备 丹参 注射 这
收 期: 0- - 稿日 6 5 1 0 03
[ ol c neadTcnl yMo e i t no rdtn l hns dc ea t i dc ] 4 W r Si c n ehoo  ̄ dr z i Tai a ie Mein n Ma r Mei d e g n ao f o i C e i d ea a 9
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关键词 : 丹参 丹酚 酸 B 提 取 纯化 分析 方 法
丹参 中药 材 取 自唇 形 科 植 物 丹 参 ( av lo- S la miir i t
B n e 的 根 , 中 医 临床 上 , 参 主要 用 来 治 疗 ug ) 在 丹 冠 心病 、 脑血 栓 、 肝炎及 肝 硬化 等 。该药 长期 的临 床应 用 背景 及在 治疗 疾病 方 面 的明 显效 果 , 引起 了 国 内外
甲醇 ,0 甲醇 ,0 % 甲醇 及 水 各 3 mL冰 浴 超 声 处 7% 10 0 理, 计算 丹 酚酸 B 的提 取 量 。 结果 表 明 , 参 生 药 中 丹
丹 酚酸 B的提取 以 7 % 甲醇 为溶剂 提 取率 最 高 ; 次 0 其
为 7 % 乙 醇 , 提 取 率 为 7 % 甲醇 的 9 . % 。 但 这 0 其 0 88 几 种 提取溶 剂差 异并 不 特 别 显 著 , 的 提取 率 相 对 较 水 低 , 7 % 甲醇 的 9 .6 。 由于水作 溶剂 成本 较低 , 为 0 50 % 又不 会造 成环境 污染 , 以他们 认 为 丹 酚 酸 B直接 用 所
滇丹参中丹酚酸B提取及纯化工艺研究
滇丹参中丹酚酸B提取及纯化工艺研究发表时间:2018-01-18T14:57:39.917Z 来源:《健康世界》2017年24期作者:周玉会[导读] 在提取与纯化滇丹参中的丹酚酸B成分的时候,可以应用絮凝澄清的提取方法来制作水提液。
哈药集团三精制药 150000摘要:目的:通过提取工艺研究实验,对滇丹参中丹酚酸B的提取与纯化方法进行研究,选出最合适的工艺方法。
方法:本次工艺提取与纯化情况研究选用的工艺指标主要是滇丹参之中的丹酚酸B的基本含量,通过正交试验的方法将滇丹参药材中的可提取的丹酚酸B进行提取,并进一步纯化。
结果:完成提取工艺研究试验后,确定最为合适的提取条件如下:在8倍水量的条件之下,煎煮2次,每次持续一个小时,精选絮凝沉降剂,ZTC1+1是最佳选择,药液的基本浓度需要被控制在1g/5mL,絮凝剂的使用量要控制在A:B=2:4,搅拌速度需要达到每分钟100r,在这种条件下,获取的丹酚酸B成分的含量是最高的。
结论:在提取与纯化滇丹参中的丹酚酸B成分的时候,可以应用絮凝澄清的提取方法来制作水提液,这种方法需要使用的提纯液用量相对比较节省,不会造成污染。
关键词:滇丹参;丹酚酸B;提取;纯化;工艺研究滇丹参是一种中药,主要是云南鼠尾草这种植物的根,在我国的贵州、四川以及云南等地生长,作为重要具有多种药效,不仅仅可以对红肿部位进行消肿与解毒,同时还可以达到止血以及祛瘀的效果,一些中医也会应用这种药材来使患者安神养心。
基于这种药材的这几种功效,中医经常会将其应用于对几种妇科疾病进行治疗,包括月经不调、经闭以及异常痛经的问题,对于健忘失眠以及关节痛等其他种类的疾病也有相对比较好的治疗效果。
医疗人员还会对其具有的抗凝血功能进行应用,使患者的冠脉流量增加。
而丹酚酸B是滇丹参的重要成分之一,其具有的丹酚酸B不仅有含量高的优势,同时还具有极强的活性,可以起到抗氧化的应用效果,还能对自由基进行清除。
但是提纯这种丹酚酸B的时候,常常会出现,纯度不够、污染提纯环境等问题。
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丹酚酸的提取工艺
摘要:在丹参的这味中药中丹酚酸是主要的作用成分,它在抵抗动脉粥样硬化
以及心肌细胞的保护等等一系列的人体疾病中具有很大的药用价值。
中药丹参中
水溶性的物质提取的标准是以原儿茶醛或丹参素为主,不足的是这两种物质的含
量在药材中含量较少的含量,但在丹酚酸中的主要作用物质则是丹酚酸 B。
根据
丹酚酸 B的含量来讨论丹酚酸的提取工艺,以探讨最合适的工业化的方案。
关键词:丹酚酸:提取工艺;实验
一、仪器与试剂
1、仪器
此次实验中主要用到的实验仪器有电子分析天平、天平、电子天平、离心沉淀机、旋转
蒸发仪、柱温箱、实验型喷雾干燥机、泵、紫外检测器、高效液相色谱柱、超声波清洗器、pHS-25型 pH计。
2、药品与试剂
此次实验主要用到的药材是干燥的丹参药材系唇形科植物根和根茎,试剂主要是乙醇、
甲醇、乙腈、甲酸、D101 大孔吸附树脂、盐酸、FeCl3、丹酚酸 B对照品。
二、丹酚酸提取的工艺流程
1、设计合理的实验
采用均匀的选择实验因素的方法,首先我们要选择3个影响醇的提取的主要的因素:这
三个因素分别是乙醇的浓度(用A来表示)、提取醇是我们花费的时间(用B来表示)、提
取醇是温度的大小(用C来表示),这三个因素作为我们判断的一个原因,然后我们需要选
择9个不同的乙醇的浓度,还需要选择3个不同的提取花费的时间和提取时的温度也要选择
3个不同的温度、每个不同的因素,实验的时候要做3次接下来就是实验过程。
2、制备基础的实验溶液
首先我们需要取100g丹参药材加入圆底烧瓶中,圆底烧瓶我们需要3000ml的,接下来
下面的按表 1实验中的排好的顺序和不同的条件进行做实验,我们需要在一个保持不变温的
水浴锅中加热,就会混合均匀,就会有需要的东西从药材中蒸发出来,趁着刚加热后需要进
行抽干过滤这个操作,留下滤渣,然后我们需要把它再次放入圆底烧瓶,在加热,趁热的时
候把他抽干过滤,这就是我们进行的第2次从药材中提取乙醇,我们抽干过滤后,会有剩下
的一些溶液,需要把这两次剩下溶液倒在一块。
接下来就把混合后的溶液倒进旋转蒸发仪就
行再次处理,通过降低压力,使溶液更纯,把我们倒入的乙醇需要蒸发干净,接着就需要用
实验室配置好的质量分数是10%的盐酸溶液倒入到降低压力蒸发好的溶液调至酸性是溶液的pH=3,接下来用每分钟转2000圈的离心机,转5min,这样就可以把溶液离心,,想作为样
品溶液备用还需要一步抽干过滤,这一步使用的漏斗是布氏漏斗。
3、大孔吸附树脂分离和纯化
树脂的刚开始需要的处理操作D101 树脂首先需要用体积分数。
95%的乙醇泡上一天一夜,这样做的目的是把最上层漂浮的东西去掉,我们装入玻璃管的时候采用湿法装柱,把乙醇倒
入玻璃柱中,乙醇不断的往下流动这样就可以达到清洗的目的,在这个过程中还要不间断的
检查一下流出来的乙醇溶液,不断加入乙醇,乙醇液与水混合按照(1∶5)的比例不出现白
色浑浊的时候就可以了,还需要用水冲洗不断冲洗,直到没有什么味就可以啦。
4、丹参提取液分离纯化
需要把离心之后的样品溶液把它倒入D101大孔树脂(需要药材与树脂以1∶4的容量进
行倒入;通过时需要保持一定的流速,在2.0 ~ 3.0BV/h),之后倒入水进行对样品溶液的冲洗,目的是用它来除去溶在水中的杂质。
我们采用加入FeCl3检测的方法,可以判断用来洗
脱的液体中还有没有丹酚酸 B成分是否被洗脱干净,然后用溶液的6倍水来进行冲洗,继续
用溶液的7倍量体力分数为30%的乙醇进行洗涤脱色(保持通过时的流速为 0.5 ~ 1.0
BV/h)。
然后收集一些体积分数为 30%的洗脱下来的乙醇溶液,之后需要用旋转蒸发仪(在60℃时)降低压力进行浓缩,浓缩直到液体的相对于原来密度的1.15倍。
我们浓缩后的液体
还需要进行喷雾和干燥(保持仪器的进风温度为220 ℃,出风时的温度 80 ℃),最终得淡黄
色固体粉末就为产品。
然后把它放进干燥器内,留着备用。
5、丹酚酸B含量测定
制备供试品溶液用电子天平称取丹参提取出来的产品粉末 10mg,把它加入到100mL量瓶中,加入一定量的水溶解后,然后再定容,充分摇匀,把定容后的溶液通过0.45μm微孔的滤膜过滤,就可以得到供试品所用的溶液。
6、色谱的条件
色谱柱用C18(规格250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为甲醇 -水-乙腈 -甲酸(四者的体积比30∶59∶10∶1);流速为1mL· min-1;检测时的波长为286nm;加入的样品量10μL;柱子的温度35 ℃;
7、测定含量的方法
用移液管准确量10 μL供试品溶液,然后把他注入液相色谱仪中,按照“2.3.2”项下条件显示的进行操作,通过仪器测定丹酚酸 B吸收峰显示的峰的面积的积分值,就可以通过峰面积计算出丹酚酸B的含量。
我们将洗脱液放到于60 ℃的水浴,蒸发干乙醇和部分水,就会变成稠膏状的产品,把产品移至真空的干燥箱(调节温度和压力为60 ℃,0.09MPa)降低压力进行干燥,然后把它放到干燥器中停留0.5 h,主要是为了它再次变得潮湿,等到样品变成正常温度后,就可以就行准确的测量了。
三、实验的结果
显示了丹酚酸提取的工艺使用正交试验结果。
通过多次的计算和分析,最后求得回归方程Y=1961+2.0861X1+5.4653X2-0.0356X12-2.055X22+0.0186X1X3,R2=0.954 5,F=6.150 1,通过比较发现方程是明显表现了有效性,当乙醇的浓度为 45%,提取次数为2次时,每次进行 1 h 时,温度为 70 ℃是最好的工艺参数。
还需要进行验证一下我们得到的最佳的条件,这3 批样品丹酚酸 B含量为:70.23%、69.04%、69.69%。
四、分析与讨论
大部分文献记载采用水提醇沉法是提取丹参药材中水溶性成分丹酚酸B常用的方法。
本文就是采用通过乙醇浸透然后提取提的方法提取,因为用水提取时提取液中含有的糖类等水溶性杂质会导致液体变得黏稠,这也是使用乙醇提取的原因。
还有就是丹参提取的溶液不适合长时间在中高温浓缩。
丹酚酸B对热非常的不稳定,特别容易发生氧化水解,对受热温度和受热时间都特别敏感,通过试验结果可以看出,,我们通过降低工艺过程的温度和受热的时间,有对提取物中丹酚酸保存率有着大大的提高。
这就决定了丹酚酸提取适合采用减压浓缩和喷雾干燥等工艺来进行。
为了使部分杂质从浓缩液中析出,我们可以把浓缩液的PH值调节到3,并且酸性的体系对丹酚酸 B水溶液在受热条件下的稳定有这很大的好处;可以改变丹酚酸在溶液中的游离状态,这也是调节PH带来的另一个有利之处。
在酸性条件下,丹参酚酸的极性会降低,这就对大孔吸附树脂对丹酚酸的吸附起了很大的作用。
参考文献:
[1]周长新,罗厚蔚,丹羽正武.丹参水溶性化学成分的研究[ J] .中国药科大学学报,1999,30(6):411 -416.
[2]孙金兰,韩伟.丹参中丹酚酸 B的提取分离及分析方法研究进展[ J] .中医药现代化,2007,9(1):49 -53.
[3]富志军.浓缩、精制及干燥对复方丹参提取液中水溶性成分的影响[ J] .安徽中医学院学报,2003,22(2):52 -53.
[4]李宁,徐文进,高崇凯.HPLC测定丹酚酸渗透泵片丹酚酸 B的含量[ J] .广东药学院学报,2008,24(5):469-471.。