FDA_PI细胞活力的测定

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3.1.2.3细胞活力测定(FDA-PI双染色)

参照Dong等(2010) 的方法,水培试验镉处理第10d,取水稻幼苗根尖用去离子水冲洗3 次,利用二乙酰荧光素(Flurescein diacetate, FDA)- 碘化丙啶(Propidium iodide, PI )双染色剂(5mg FDA 溶解在l mL 丙酮中,避光贮藏在4℃的冰箱中,使用时取0.4 mL FDA 贮藏液加入到5mL 0.65mol/L 甘露醇中,按此比例获FDA染色溶液。将2mg PI溶解在5mL 0.65mol/L 甘露醇中,按此比例配成PI 染色溶液。将FDA 和PI 染液混匀) 在室温黑暗染色40min 。随后使用PBS缓冲液或蒸馏水洗涤3 次,每次5 min,去除多余的染料。利用激光共聚焦扫描显微镜(LSM 510;Zeiss,德国) 进行观察并拍照,激发光和检测光波长分别为485 nm和530 nm。

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