普通电泳分三种: 水平电泳 垂直电泳 转移电泳
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• 整个电泳过程完全浸在缓冲液中完成的称 为湿转电泳
湿转电泳槽图片
半干转电泳
• 将混杂的蛋白质经聚丙烯酰胺凝胶电泳分 离后,转移至固相膜上,再用标记的抗体 或二抗与之反应,以显示膜上特定的蛋白 条带。
• 膜和滤纸均为浸湿而非整个电泳过程完全 浸在缓冲液中完成的称为半干转电泳
半干转电泳槽图片
1.安全盖 2.带有弹簧锁的负电 极装置 3.滤纸 4.凝胶 5.膜 6.滤纸 7.带弹簧的正电极平 台固定于 4 个固定栓 上 8.电缆 9.底座
有分子筛效应。它有两种形式:非变性聚 丙烯酰胺凝胶及SDS-聚丙烯酰胺凝胶(SDSPAGE);非变性聚丙烯酰胺凝胶,在电泳 的过程中,蛋白质能够保持完整状态,并 依据蛋白质的分子量大小、蛋白质的形状 及其所附带的电荷量而逐渐呈梯度分开。
垂直电泳槽图片
湿转电泳
• 将混杂的蛋白质经聚丙烯酰胺凝胶电泳分 离后,转移至固相膜上,再用标记的抗体 或二抗与之反应,以显示膜上特定的蛋白 条带。
普通电泳的原理
• 生物大分子(如蛋白质,核酸,多糖等) 大多都有阳离子和阴离子基团,称为两性离 子。常以颗粒分散在溶液中,它们的静电 荷取决于介质的H+浓度或与其他大分子的 相互作用。
• 在电场中,带电颗粒向阴极或阳极迁移,迁 移的方向取决于它们带电的符号,这种迁移 现象即所谓电泳。
• 电泳的样品支持物,生物实验大多为凝胶。
普通电泳仪大体分三种 基础电泳仪 高电流电泳仪 高电压电泳仪
基础电泳仪
• 参数:一般电压为几百伏特,电流为几百 毫安。
• 应用:主要用于水平电泳、垂直电泳、百度文库 转电泳
高电流电泳仪
• 参数:一般电压为几百伏特,电流为几千 毫安。
• 应用:主要应用于水平电泳、垂直电泳、 湿转电泳、半干转电泳
高电压电泳仪
普通电泳设备组成
电泳仪 + 电泳槽
普通电泳槽分三种: 水平电泳 垂直电泳
转移电泳
水平电泳
• 用琼脂糖凝胶作支持物的电泳法。借助琼 脂糖凝胶的分子筛作用,核酸片段因其分 子量或分子形状不同,电泳移动速度有差 异而分离。
• 是基因操作中常用的重要方法。
水平电泳槽图片
垂直电泳
• 作用:用于分离蛋白质和寡糖核苷酸。 • 作用原理 聚丙烯酰胺凝胶为网状结构,具
• 参数:一般电压为几千伏特,电流为几百 毫安。
• 应用:主要应用于等电聚焦电泳、DNA测序 电泳等。
THANKS!!! 具体操作及注意事项请见下一个PPT
湿转电泳槽图片
半干转电泳
• 将混杂的蛋白质经聚丙烯酰胺凝胶电泳分 离后,转移至固相膜上,再用标记的抗体 或二抗与之反应,以显示膜上特定的蛋白 条带。
• 膜和滤纸均为浸湿而非整个电泳过程完全 浸在缓冲液中完成的称为半干转电泳
半干转电泳槽图片
1.安全盖 2.带有弹簧锁的负电 极装置 3.滤纸 4.凝胶 5.膜 6.滤纸 7.带弹簧的正电极平 台固定于 4 个固定栓 上 8.电缆 9.底座
有分子筛效应。它有两种形式:非变性聚 丙烯酰胺凝胶及SDS-聚丙烯酰胺凝胶(SDSPAGE);非变性聚丙烯酰胺凝胶,在电泳 的过程中,蛋白质能够保持完整状态,并 依据蛋白质的分子量大小、蛋白质的形状 及其所附带的电荷量而逐渐呈梯度分开。
垂直电泳槽图片
湿转电泳
• 将混杂的蛋白质经聚丙烯酰胺凝胶电泳分 离后,转移至固相膜上,再用标记的抗体 或二抗与之反应,以显示膜上特定的蛋白 条带。
普通电泳的原理
• 生物大分子(如蛋白质,核酸,多糖等) 大多都有阳离子和阴离子基团,称为两性离 子。常以颗粒分散在溶液中,它们的静电 荷取决于介质的H+浓度或与其他大分子的 相互作用。
• 在电场中,带电颗粒向阴极或阳极迁移,迁 移的方向取决于它们带电的符号,这种迁移 现象即所谓电泳。
• 电泳的样品支持物,生物实验大多为凝胶。
普通电泳仪大体分三种 基础电泳仪 高电流电泳仪 高电压电泳仪
基础电泳仪
• 参数:一般电压为几百伏特,电流为几百 毫安。
• 应用:主要用于水平电泳、垂直电泳、百度文库 转电泳
高电流电泳仪
• 参数:一般电压为几百伏特,电流为几千 毫安。
• 应用:主要应用于水平电泳、垂直电泳、 湿转电泳、半干转电泳
高电压电泳仪
普通电泳设备组成
电泳仪 + 电泳槽
普通电泳槽分三种: 水平电泳 垂直电泳
转移电泳
水平电泳
• 用琼脂糖凝胶作支持物的电泳法。借助琼 脂糖凝胶的分子筛作用,核酸片段因其分 子量或分子形状不同,电泳移动速度有差 异而分离。
• 是基因操作中常用的重要方法。
水平电泳槽图片
垂直电泳
• 作用:用于分离蛋白质和寡糖核苷酸。 • 作用原理 聚丙烯酰胺凝胶为网状结构,具
• 参数:一般电压为几千伏特,电流为几百 毫安。
• 应用:主要应用于等电聚焦电泳、DNA测序 电泳等。
THANKS!!! 具体操作及注意事项请见下一个PPT