振动切片的免疫反应
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振动切片的免疫反应
（以下免疫反应在摇床上轻轻摇动） 免疫荧光标记：
培养板中浸于PBS中的切片
↓
振动切片封闭液(PNBS) 室温封闭2hr
↓
一抗（稀释过）4︒C 2days
↓
PBS 室温1hr ⨯ 5
↓
二抗-荧光集团（稀释过）4︒C 过夜
↓
PBS 室温1hr ⨯ 5
↓
贴于载玻片上
↓
荧光封固剂封片
碱性磷酸酶（AP）:
培养板中浸于PBS中的切片
↓
振动切片封闭液(PNBS) 室温封闭2hr
↓
一抗（稀释过）4︒C 2 days
↓
PBS 室温1hr ⨯ 5
二抗-AP（稀释过）4︒C 过夜
↓
PBS 室温1hr ⨯ 5
↓
显色: AP-CDS 10-30min
↓
NBT4.5μl/ml、BCIP3.5μl/ml in AP-CDS 室温或37︒C 5-30min
↓
TE 室温10min
↓
贴于载玻片上
↓
梯度乙醇脱水
↓
二甲苯透明
↓
中性树胶封片
辣根过氧化物酶（HRP）:
培养板中浸于PBS中的切片
↓
3%H2O2.10% MeOH in PBS RT 3min
↓
振动切片封闭液(PNBS) 室温封闭2hr
↓
一抗（稀释过）4︒C 2 days
↓
PBS 室温1hr ⨯ 5
二抗-HRP（稀释过）4︒C 过夜
↓
PBS 室温1hr ⨯ 5
↓
显色: HRP-CDS室温20-30min
↓
贴于载玻片上
↓
梯度乙醇脱水
↓
二甲苯透明
↓
中性树胶封片