2016CLSI更新解读
2016版ISO换版介绍
ISO9001-2015版改版介绍---CONTENTS目录一、换版介绍二、概念性变化三、新旧差异讲解四、条款解读五、提问换版介绍ISO9001系列族标准是由ISO/TC176/SC2（国际标准化组织质量管理和质量保证技术委员会质量体系分技术委员会）负责制定和修订；根据ISO（国际标准组织）导则，所有ISO国际标准都应每5-8年进行评审，评审其适用性和适宜性，ISO9000族标准已进行了多次修订。
1947ISO 国际标准化组织瑞士日内瓦成立197519791986ISO9000系列质量标准发展历程1975 年英国标准协会（BSI ）公布BS5750英国国家标准ISO 组织1979年成立了质量管理和质量保证技术协会（ISO/TC176）1986年ISO 组织发布了第一个ISO9000系列标准TC176于1986年6月15日正式发布第一标准是ISO8402：1986，名为《品质-术语》19871987年3月ISO 又正式发布了5个国际标准ISO9000:1987、ISO9001:1987、ISO9002:1987、ISO9003:1987、ISO9004:1987，与ISO8402:1986一起统称为”ISO9000系列标准”.1990TC176又于1990年发布了一个标准19941991年发布了三个标准，1992年发布了一个标准，1993年发布了五个标准；1994年没有另外发布标准，但是对上述“ISO9000系列标准”统一作了修改,分别改为:ISO8402:1994、ISO9000-1:1994、ISO9001:1994、ISO9002:1994、ISO9003:1994、ISO9004-1:1994，并把TC176制定的标准定义为“ISO9000族”。
TC176又发布了一个编号是ISO10013：1995标准199520002000年12月TC176针对ISO9001:1994更新形成ISO9001:2000版20082008年10月1日TC176正式发布ISO9001:2008版，2010年10月1日废止ISO9001:2000版。
2016年CLSI-M100S主要更新内容解读
2016年CLSI M100S（第26版）主要更新内容解读张雅薇? ? 王辉（通讯作者）北京大学人民医院检验科此文发表在《中华检验医学杂志》2016年3月第39卷第3期，165-169建立和完善病原菌鉴定和体外药敏试验的标准化操作规程，是加强微生物室能力建设的基本要求之一。
其对优化临床药物选择、减缓耐药菌的产生具有重要意义。
CLSI 制定的药敏试验标准是我国实验室遵循的指导性文件。
作为CLSI批准的药敏试验标准（包括M02-A12、M07-A10和M11-A8）的补充文件，2016年M100-S26正式更名为M100S（第26版）。
本文将重点解读CLSI M100S（第26版）文件[1]中的主要更新内容，以供临床实验室参考。
一、常规试验及报告药物的更新CLSI M100S（第26版）文件新增了多种目前新上市的新药如ceftolozane-他唑巴坦、奥利万星、泰地唑胺和特拉万星作为临床选择性报告的药物，并修订了几种抗菌药物的临床药敏报告组别，见表1。
注：a A组：常规测试并报告的药物。
b B组：常规测试，但选择性报告的药物。
c C组：补充性抗菌药物，选择性地报告。
d U组：仅用于泌尿道感染的抗菌药物。
e O组：其他药物，是指对微生物有作用，但在美国不常规要求测试的药物。
f其他非肠杆菌科：包括假单胞菌属和其他非苛养、非发酵糖革兰阴性杆菌（除外铜绿假单胞菌、不动杆菌属、洋葱伯克霍尔德菌和嗜麦芽窄食单胞菌）。
二、药敏折点的相关更新2016年CLSI M100S（第26版）文件修订了头孢唑林对肠杆菌科的纸片法和MIC折点，并建议将头孢唑林药敏结果用于预测口服头孢菌素的药敏。
当头孢唑林用于治疗由大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和奇异变形杆菌引起的非复杂性尿路感染时，建议使用新修订的折点，见表2，折点建立基于的给药方案为1g每12h；除非复杂性尿路感染外，当患者为其他感染时，仍沿用M100-S25中头孢唑林对肠杆菌科的折点。
粪肠球菌和屎肠球菌的临床分布及耐药性比较
医学基础与药学研究·94·粪肠球菌和屎肠球菌的临床分布及耐药性比较程 娟 刘 周 姚 杰 陈礼文 周 强 管世鹤【中图分类号】 R446.5 【文献标识码】 Ａ 【文章编号】 1671-8054（2019）01-0094-03【摘 要】 目的：探讨粪肠球菌和屎肠球菌的临床分布及其耐药特点。
方法：回顾性分析某医院临床分离的351例粪肠球菌和294例屎肠球菌的临床分布及其耐药率。
结果：粪肠球菌和屎肠球菌均主要来源于尿液。
粪肠球菌和屎肠球菌临床多分布于泌尿外科、ICU、肾内科。
粪肠球菌和屎肠球菌对青霉素、氨苄西林、克林霉素、环丙沙星、左氧氟沙星、呋喃妥因、莫西沙星、红霉素、高浓度庆大霉素、高浓度链霉素耐药率差异有统计学意义（P＜0.05）。
结论：粪肠球菌和屎肠球菌的多重耐药情况严重，两者耐药率存在显著差异，尤其屎肠球菌耐药情况严重，临床应根据细菌种类和药敏结果选择抗菌药物。
万古霉素、替考拉宁以及利奈唑胺在临床治疗多重耐药屎肠球菌仍是首选药物。
【关键词】 屎肠球菌 粪肠球菌 耐药性 药物敏感性试验肠球菌是一种寄居在人和动物肠道内、女性生殖道的革兰阳性球菌，目前已成为导致医院获得性感染的最主要条件致病菌之一。
其可引起泌尿道感染、伤口感染、腹膜炎、心内膜炎等多脏器感染，病死率极高。
特别是近年来耐万古霉素肠球菌（VRE）以及耐利奈唑胺菌株等多重耐药菌株的出现加重了临床抗感染治疗的难度，使得肠球菌的耐药性及耐药基因受到广泛关注[1]。
因此了解肠球菌的耐药现状对指导临床合理用药有重要意义。
由于肠球菌的分离率以屎肠球菌和粪肠球菌为主,为此现就我院2015年6月-2017年12月所分离的屎肠球菌和粪肠球菌的分布特点和耐药性进行比较，报道如下：1 材料与方法1.1 菌株来源 收集本院2015年6月-2017年12月分离鉴定的粪肠球菌351株和屎肠球菌294株（剔除同一患者相同部位菌株）。
其中中段尿培养细菌数≥105 CFU/mL的肠球菌作为尿路感染的病原菌进行分离鉴定。
CLSI临床质谱新标准解读
CLSI 临床质谱标准C62-A新内容解读CLSI 临床质谱标准C62-A主题内容架构由基础内容部分包括（1）范围、（2）标准预防措施、（3）术语、（4）仪器；方法内容包括（5）预考察事项、（6）方法建立、（7）方法验证；质控内容包括（8）液质检验方法的质量保证与质量控制、（9）后续监督构成。
其中方法和质控内容是与应用过程直接相关的。
下面进行具体介绍。
5．预考察事项（preexamination considerations）5.1目标分析物内容包括5.1.1 外源性物质、5.1.2内源性物质、5.1.3 外源性和内源性物质的相关因素、5.1.4 样本采集。
要充分了解目标分析物的性质，包含（1）目标分析物的临床意义如生理意义、临床价值、常用检测方法等；（2）理化性质如结构式、分子量、沸点、极性大小、酸碱性等；（3）存在形式如游离型、结合型；（4）干扰因素如类似物、同分异构体、其他代谢产物等；（5）预期浓度如常量级、微量级、参考区间浓度、切点浓度、病理浓度等；（6）样本类型如血清、血浆、全血、尿样、唾液、胆汁、组织等；（7）采集和处理方式如静脉血、足底血、指尖血、离心处理或静置、何种采血管等；（8）储存和运输方式如避光、冷藏、冷冻等。
5.2 内标内标可以校正基质效应或者样本萃取、色谱分离、离子化过程中产生的偏差，有利于提高定量分析的准确性和精密度及方法稳定性。
5.3 试剂和耗材的质量5.3.1 试剂盒耗材的质量：由于MS灵敏度高，因此试剂和耗材要求也高。
在使用前应对试剂、耗材进行验证，避免其中杂质对MS的影响。
使用过程中应按照SOP进行保存、操作，避免污染。
按照ISO 17025:2017进行批间次管控。
5.3.2 实验室设备：配置校准品和内标时，实验室应使用A级的容量瓶和移液器。
6．方法建立（assay development）6.1离子转变（ion transition）在建立和优化质谱采集参数的过程中，要先配制标准物质溶液直接导入质谱检测器进行质谱扫描，获取目标化合物的相关信息。
【指南与规范】2016年CLSI M100S(第26版)主要更新内容解读
一、常规试验及报告药物的更新CLSI M100S（第26版）文件新增了多种目前新上市的新药如ceftolozane-他唑巴坦、奥利万星、泰地唑胺和特拉万星作为临床选择性报告的药物，并修订了几种抗菌药物的临床药敏报告组别，见表1。
注：a A组：常规测试并报告的药物。
b B组：常规测试，但选择性报告的药物。
c C组：补充性抗菌药物，选择性地报告。
d U组：仅用于泌尿道感染的抗菌药物。
e O组：其他药物，是指对微生物有作用，但在美国不常规要求测试的药物。
f其他非肠杆菌科：包括假单胞菌属和其他非苛养、非发酵糖革兰阴性杆菌（除外铜绿假单胞菌、不动杆菌属、洋葱伯克霍尔德菌和嗜麦芽窄食单胞菌）。
二、药敏折点的相关更新2016年CLSI M100S（第26版）文件修订了头孢唑林对肠杆菌科的纸片法和MIC折点，并建议将头孢唑林药敏结果用于预测口服头孢菌素的药敏。
当头孢唑林用于治疗由大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和奇异变形杆菌引起的非复杂性尿路感染时，建议使用新修订的折点，见表2，折点建立基于的给药方案为1g每12h；除非复杂性尿路感染外，当患者为其他感染时，仍沿用M100-S25中头孢唑林对肠杆菌科的折点。
新版标准删除了下列药物对各菌种的折点：替卡西林和头孢噻吩对肠杆菌科的折点；替卡西林对铜绿假单胞菌；替卡西林和美洛西林对不动杆菌属；美洛西林、替卡西林和氨苄西林对其他非肠杆菌科（包括假单胞菌属和其他非苛养、非发酵糖革兰阴性杆菌，除外铜绿假单胞菌、不动杆菌属、洋葱伯克霍尔德菌和嗜麦芽窄食单胞菌）的折点。
同时也删除了美洛西林和替卡西林对厌氧菌的折点。
三、常规药敏试验、补充药敏试验、初筛试验、替代药物检测法和等效药物检测法鉴定抗菌药物的敏感和耐药M100S（第26版）增加了常规药敏试验、补充药敏试验、初筛试验、替代药物检测法和等效药物检测法的说明，见表3～7。
1.常规药敏试验：用于临床常规检测的纸片扩散法、肉汤或琼脂稀释法。
美国感染病学会2016年更新版念珠菌病处理临床实践指南解读
美国感染病学会2016年更新版念珠菌病处理临床实践指南解读袁莉莉;李光辉【期刊名称】《中国感染与化疗杂志》【年(卷),期】2016(016)004【总页数】8页(P521-528)【关键词】念珠菌病;美国感染病学会;指南;更新【作者】袁莉莉;李光辉【作者单位】复旦大学附属华山医院医院感染管理科,上海200040;复旦大学附属华山医院医院抗生素研究所,上海200040【正文语种】中文【中图分类】R518.7编者按：为了帮助临床医师在治疗念珠菌病时正确选用抗真菌药，制定合理的给药方案，美国感染病学会（IDSA）组织相关学科的专家对2009年版念珠菌病处理临床实践指南进行了更新。
该指南发表在Clinical Infectious Disease，2016，62（4）：e1-e50。
尽管该指南的更新乃是基于大量新的循证医学证据，对念珠菌病处理进行了更为详尽的介绍，对指导临床正确合理诊断处理念珠菌病具有重要参考价值，但由于国情的差异，在临床应用中应该结合本国实际情况加以运用。
念珠菌属引起的侵袭性感染很大程度上与医疗相关操作有关，是医院感染的主要病原真菌之一，病死率高。
至少有15种念珠菌能引起人类疾病，但超过90 %侵袭性感染通常由5种常见的病原真菌所致，分别为白念珠菌、光滑念珠菌、热带念珠菌、近平滑念珠菌和克柔念珠菌。
2004年1月美国感染病学会（IDSA）发布侵袭性念珠菌病和黏膜念珠菌病的诊疗指南，2009年在2004年版的基础上予以修订，2016年IDSA发布新的念珠菌临床实践指南，内容包括念珠菌血症、重症监护病房（ICU）念珠菌病、新生儿念珠菌病、中枢神经系统感染以及黏膜感染等，推荐意见共140条。
指南中涉及的儿科相关内容均得到美国儿科学会（APP）和儿科感染病学会（PID）的审阅和认可，同时指南也得到美国真菌病研究组（MSG）的支持。
指南的循证证据分级依据的是2008年IDSA采用的GRADE方法，GRADE方法将证据质量分为四级：高、中、低和极低，将推荐等级分为强或弱。
clsi-m100-s20_2010抗菌药物敏感性试验解释标准(中文)
内部交流资料
Vol . 30 No .1 M1 0 0 - S 20
抗微生物药物敏感性试验的执行标准； 第二十版信息增刊 Performance Standards for Antimicrobial Susceptibility Testing; Twentieth Informational Supplement
抗微生物药物敏感性试验执行标准； 第二十版信息增刊
Volume 30 Number 1
Franklin R. Cockerill, III, MD Karen Bush, PhD Michael N. Dudley, PharmD,FIDSA George M. Eliopoulos, MD Dwight J. Hardy, PhD David W. Hecht, MD Janet F. Hindler, MCLS, MT(ASCP) Janet A. Hindler. MCLS, MT(ASCP) Jean B. Patel, PhD, D(ABMM) Mair Powell, MD, FRCP, FRCPath, MHRA Richard B. Thomson, Jr., PhD John D. Turnidge, MD Melvin P. Weinstein, MD Barbara L. Zimmer, PhD Mary Jane Ferraro, PhD, MPH Jana M. Swenson, MMSc
美国感染性疾病学会念珠菌病处置的临床实践指南解读(最全版)
美国感染性疾病学会念珠菌病处置的临床实践指南解读（最全版）美国感染性疾病学会(Infectious Diseases Society of America, IDSA)一直致力于感染性疾病领域的指南撰写、推广。
今年IDSA对念珠菌病处置的临床实践指南(以下简称"新指南")、曲霉菌病指南、医院获得性肺炎指南同时进行了更新。
念珠菌病是临床常见感染。
IDSA在2000年制定了第1版念珠菌病指南[1]、2004年制定了第2版[2]、2009年制定了第3版[3]、2016年制定出第4版。
新指南2015年12月中旬发布，2016年1月中旬正式刊出，有正式印刷版本[4]和全文电子版本[5]，在IDSA官网均可获得()。
该指南题目是Clinical practice guideline for the management of Candidiasis: 2016 update by the Infectious Diseases Society of America，即《念珠菌病处置的临床实践指南：IDSA 2016升级版》。
值得注意的是新指南中的念珠菌病，指深部念珠菌病，比如菌血症或侵袭性感染，不包括浅部皮肤软组织感染。
Management不翻译为"管理"，在医学领域里翻译为"处置"更为贴切准确。
新指南正文50页，引文560条。
从17个角度，给出推荐共计140条，是公认的大型指南。
与第3版15个角度、72条推荐相比，两版之间的变化体现出人类对念珠菌病的认识在逐渐深化。
新指南的发布，除包括IDSA撰写与批准Standards and Practice Guidelines Committee (SPGC)的内容外，还有其他一些机构的参与和批准。
首先是美国儿科感染性疾病两大学会——美国儿科学会(AmericanAcademy of Pediatrics，AAP，该机构的红皮书非常有名，是儿科感染性疾病领域排名第一的临床手册)、美国儿科感染性疾病学会(Pediatric Infectious Diseases Society，PIDS)的参与，这说明新指南适用于儿科。
新指南CLSIEP9–A3在方法学比对及偏移评估中的应用(最全版)
新指南CLSIEP9–A3在方法学比对及偏移评估中的应用(最全版)新指南CLSI EP9–A3在方法学比对及偏移评估中的应用（最全版）XXX(CLSI)一直致力于制定系列评价临床检验方法的文件，其在制定相关标准和指南时采用特有的协商一致过程，包括方案的建立、认可和公开，对有关文件进行广泛、细致、全面的评论，根据使用者的意见进行文件修订，以保证其适应性等[1]。
CLSI在1986年1月首先推出EP9–P(proposed guideline)版本，1993年4月推出EP9–T(tentative guideline)版本，再经过修订，1995年12月推出批准指南EP9–A(approved guideline)版本[2]。
随后，又经过3次修订，即2002年9月的EP9–A2[3]、2010年7月的EP9–A2–IR(n)和2013年8月的最新版本EP9–A3文件[4]，即《用患者样本进行方法比对及偏移评估：批准指南––第三版》，EP9–A3为生产厂家和临床实验室提供了最新的方法学比对和偏移评估指南。
笔者将简要介绍其基本结构、主要用途、比对要求、实验方案、统计方法等内容，供同行参考。
一、EP9–A3概述EP9–A3主要有3个方面用途：(1)临床实验室新引进测量方法与参比方法比对；(2)厂家新建立的测量方法与参比方法相关性研究；(3)厂家对新建立的测量方法比对声明标准确认；3种用途的具体要求见表1.EP9–A3也可进行方法内比对，对于已建立或确认的方法，厂家或实验室可利用40个系列浓度标本对该方法不同条件进行比对分析，如同一方法不同样本类型、不同批号试剂等。
表1EP9–A3对厂家和实验室比对研究具体要求三、比对要求1．标本要求：比对时应使用未经过处理的患者标本，分析物浓度应尽可能在测量范围内均匀分布，各标本基本信息如临床诊断或状态(是否溶血、黄疸、脂血、浑浊)均应记录。
如需使用处理过的标本(如添加纯的高浓度物质)，应<比对标本总数的20%。
CLSI国家临床实验室标准委员会标准2010年最新标准目录(含中文翻译)
NCCLS国家临床实验室标准委员会标准2010年最新标准目录NCCLS C3-A4 2006.06.16 Preparation and Testing of Reagent Water in the Clinical Laboratory; Approved Guideline - Fourth Edition制备和检测试剂在临床实验室；批准指南-第四版NCCLS C5-P2 1987.01.01 Methodological Principles for Selected Analyses: Enzymes; Proposed Guideline方法论原则，选择分析：酶；建议指南NCCLS C12-T2 1991.01.01 Definitions of Quantities and Conventions Related to Blood pH and Gas Analysis-Second Edition Standard定义的量和公约有关的血液PH值和气体analysis-second版标准NCCLS C21-A 1992.01.01 Performance Characteristics for Devices Measuring PO2 and PCO2 in Blood Samples性能特点的设备测量氧及二氧化碳分压的血液样本NCCLS C24-A 1991.01.01 Internal Quality Control Testing: Principles and Definitions, Approved Guideline内部质量控制测试：原理和定义，批准指南NCCLS C25-T 1992.01.01 Fractional Oxyhemoglobin, Oxygen Content and Saturation, and Related Quantities in Blood: Terminology, Measurement and Reporting; Tentative Guideline分数血氧饱和度，氧含量，和相关的数量在血液：术语，测量和报告的暂定准则NCCLS C27-A 1993.01.01 Blood Gas Pre-Analytical Considerations: Specimen Collection, Calibration, and Controls, Approved Guideline血液气体分析前考虑：标本采集，校准，并控制，批准指南NCCLS C28-P 1992.01.01 How to Define, Determine, and Utilize Reference Intervals in the Clinical Laboratory; Proposed Guideline如何定义，确定，并利用参考间隔在临床实验室提出的指导方针NCCLS C29-T 1992.01.01 Standardization of Sodium and Potassium Ion Selective Electrode Systems to the Flame Photometric Reference Method; Tentative Standard标准化的钠和钾离子选择性电极系统的火焰光度参照法；试验标准NCCLS C30-T 1991.01.01 Ancillary (Bedside) Blood Glucose Testing in Acute and Chronic Care Facilities; Tentative Guideline辅助（床边）测试血糖在急性和慢性保健设施；暂定准则NCCLS C34-P 1993.01.01 Determination of Chloride and Sodium Concentrations in Sweat: Sample Collection and Quantitative Analysis; Proposed Guideline测定在汗水中氯和钠的浓度：样品采集和定量分析；提出的指导方针NCCLS DI1-A2 1992.01.01 Glossary and Guidelines for Immunodiagnostic Procedures, Reagents, and Reference Materials, Approved Guideline词汇和准则免疫诊断程序，试剂，和参考材料，批准指南NCCLS DI2-A 1986.01.01 Immunoprecipitin Assays: Procedures for Evaluating the Performance of Materials; Approved Guideline验证试验：评价程序的材料性能；批准指南NCCLS DI3-T 1986.01.01 Agglutination Analyses: Characteristics of Antibody, Methodology, Limitations, and Clinical Validation, Tentative Guideline凝集抗体分析：特点，方法，限制，和临床验证，初步的指南NCCLS DI4-T 1986.01.01 Enzyme and Fluorescence Immunoassays, Tentative Guideline酶和荧光免疫测定，初步的指南NCCLS EP 5 2004.01.01 Evaluation Precision Performance of Quantitative Measurement Methods; Approved Guideline评价精度性能的定量测量方法；批准指南NCCLS EP 7 2002.01.01 Interference Testing in Clinical Chemistry, Approved Guideline临床化学干扰试验，批准指南NCCLS EP6-P 1986.01.01 Evaluation of the Linearity of Quantitative Analytical Methods, Proposed评价定量分析方法的线性，提出NCCLS EP9-T 1993.01.01 Method Comparison and Biasa Estimation Using Patient Samples; Tentative Guideline方法比较不错的估计使用病人样本；暂定准则NCCLS EP10-T 1989.01.01 Preliminary Evaluation of Clinical Chemistry Methods; Tentative Guideline初步评价临床化学方法；初步的指南NCCLS GP2-A 2002.01.01 Clinical Laboratory Technical Procedure Manuals - Fourth Edition临床实验室技术程序手册-第四版NCCLS GP5-A 2002.01.01 Clinical Laboratory Waste Management临床实验室废弃物管理NCCLS GP6-A 1994.01.01 Inventory Control Systems for Laboratory Supplies - First Edition实验室用品库存控制系统-第一版NCCLS GP9-A 1998.01.01 Selecting and Evaluating a Referral Laboratory - First Edition选择和评价参考实验室-第一版NCCLS GP10-A 1995.01.01 Assessment of the Clinical Accuracy of Laboratory Tests Using Receiver Operating Characteristic (ROC) Plots - First Edition临床评估的准确性化验使用接收机操作特性（02）图-第一版NCCLS GP11-A 1998.01.01 Basic Cost Accounting for Clinical Services - First Edition成本会计的基本临床服务-第一版NCCLS GP14-A 1996.01.01 Labeling of Home-Use In Vitro Testing Products - First Edition家用体外测试产品的标签——第一版NCCLS GP15-A 2001.01.01 Papanicolaou Technique - Second Edition NCCLS GP15-T 1991.01.01 Papanicolaou Technique; Tentative Guideline NCCLS GP16-A 2001.01.01 Routine Urinalysis and Collection, Transportation, and Preservation of Urine Specimens - Second Edition 尿常规和收集，运输，和保存的尿液标本-第二版NCCLS GP17-A 2004.01.01 Clinical Laboratory Safety; Approved Guideline临床实验室安全；批准指南NCCLS GP18-A 1998.01.01 Laboratory Design - First EditionNCCLS GP20-A 2003.01.01 Fine-Needle Aspiration Biopsy (FNAB) Techniques - Second Edition细针穿刺活检（细针穿刺细胞学检查）技术-第二版NCCLS GP21-A 2004.01.01 Training and Competence Assessment培训和能力评价NCCLS GP22-A 1999.01.01 Continuous Quality Improvement: Essential Management Approaches - First Edition持续质量改进：管理的基本方法-第一版NCCLS GP23-A 1999.01.01 Nongynecologic Cytologic Specimens: Collection and Cytopreparatory Techniques - First EditionNCCLS GP26-A 2003.01.01 Application of a Quality System Model for Laboratory Services - Second Edition实验室服务的高质量的应用系统模型-第二版NCCLS GP27-A 1999.01.01 Using Proficiency Testing (PT) to Improve the Clinical Laboratory - First Edition使用水平测试（铂）改善临床实验室-第一版NCCLS GP28-P 2004.01.01 Microwave Device Use in the Clinical Laboratory; Proposed Guideline - First Edition微波器件在临床实验室的使用；建议指南-第一版NCCLS GP29-A 2002.01.01 Assessment of Laboratory Tests When Proficiency Testing is Not Available - First Edition评估实验室测试时，测试不可用-第一版NCCLS H1-A3 1991.01.01 Evacuated Tubes for Blood Specimen Collection, Approved Standard; Third Edition真空管采血，经批准的标准；第三版NCCLS H2-A2 2001.01.01 Refernece and Selected Procedure for the Erythrocyte Sedimentation Rate (ESR) Test参考和选择程序的红细胞沉降率（血沉）试验NCCLS H3-A3 1991.01.01 Procedures for the Collection of Diagnostic Blood Specimens by Venipuncture - Third Edition; Approved Standard静脉穿刺收集诊断血液标本的程序-第三版；批准标准NCCLS H4-A3 1991.01.01 Procedures for the Collection of Diagnostic Blood Specimens by Skin Puncture - Third Edition; Approved Standard皮肤穿刺收集诊断血液标本的程序-第三版；批准标准NCCLS H5-A2 1985.01.01 Procedures for the Handling and Transport of Domestic Diagnostic Specimens and Etiological Agents, Approved Standard; Second Edition处理和运输国内诊断标本和病因剂的程序，经批准的标准；第二版NCCLS H7-A 1985.01.01 Procedure for Determining Packed Cell Volume by the Microhematocrit Method; Approved Standard血球容量计法确定便携细胞体积的程序；批准标准NCCLS H8-A 1986.01.01 Detection of Abnormal Hemoglobin Using Cellulose Acetate Electrophoresis; Approved Standard用乙酸纤维素电泳检测异常血红蛋白；批准标准NCCLS H9-A 1989.01.01 Chromatographic (Microcolumn) Determination of Hemoglobin A2; Approved Standard色谱（微）测定血红蛋白；批准标准NCCLS H10-A 1986.01.01 Solubility Test for Confirming the Presence of Sickling Hemoglobins, Approved Standard确认镰状血红蛋白存在的溶解度试验，批准的标准NCCLS H11-A2 1992.01.01 Percutaneous Collection of Arterial Blood for Laboratory Analysis, Approved Standard Second Edition实验室认可的经皮动脉收集血液，第二版NCCLS H13-A 1989.01.01 Quantitative Measurement of Fetal Hemoglobin by the Alkali Denaturation Method, Approved Guideline定量测量胎儿血红蛋白的碱变性方法，批准指南NCCLS H14-A2 1990.01.01 Devices for Collection of Skin Puncture Blood Specimens - Second Edition, Approved Guidelines皮肤穿刺收集血标本的设备-第二版，批准指南NCCLS H15-A 2001.01.01 Reference Procedure for the Quantitative Determination of Hemoglobin in Blood, Approved Standard定量测定血液中血红蛋白的参考程序，批准标准NCCLS H16-P 1985.01.01 Method for Reticulocyte Counting, Proposed Standard网织红细胞计数方法，提出的标准NCCLS H17-P 1990.01.01 The Determination of Serum Iron and Total Iron-Binding Capacity; Proposed Standard测定血清铁和总铁结合能力；提出的标准NCCLS H18-A3 2004.01.01 Procedures for the Handling and Processing of Blood Specimens; Approved Guidelines处理和加工的血液标本的程序；批准指南NCCLS H20-A 1992.01.01 Reference Leukocyte Differential Count (Proportional) and Evaluation of Instrumrntal Methods; Approved Standard 参考白细胞计数（比例）和设备评价方法；批准标准NCCLS H21-A2 1991.01.01 Collection, Transport, and Processing of Blood Specimens for Coagulation Testing and Performance of Coagulation Assays, Approved Guideline Second Edition收集，运输，处理血液的凝血性能检测和凝血化验，批准指南第二版NCCLS H22-P 1984.01.01 Histochemical Method for Leukocyte Alkaline Phosphatase, Proposed Standard白细胞碱性磷酸酶组织的化学方法，提出的标准NCCLS H23-T 1988.01.01 Citrate Agar Electrophoresis for Confirming Identification of Variant Hemoglobins, Tentative Guideline柠檬酸琼脂电泳确认鉴定变异血红蛋白，暂定准则NCCLS H24-T 1988.01.01 Additives for Blood Collection Devices:Heparin, Tentative Standard血液采集装置的添加剂：肝素，试行标准NCCLS H26-P 1989.01.01 Performance Goals for the Internal Quality Control of Multichannel Hematology Analyzers; Proposed Standard血液分析仪内部质量控制的绩效目标，批准标准；NCCLS H28-T 1992.01.01 One-Stage Prothrombin Time Test (PT), Tentative Guideline一期凝血酶原时间测试（铂），暂定准则NCCLS H29-T 1992.01.01 Activated Partial Thromboplastin Time Test (APTT), Tentative Guideline活化部分凝血活酶时间（部分凝血活酶时间测试），暂定准则NCCLS H30-T 1991.01.01 Procedure for the Determination of Fibrinogen in Plasma; Tentative Guideline测定血浆中纤维蛋白原的程序，暂定准则；NCCLS H31-P 1986.01.01 Collection Containers for Specimens for Toxicological Analysis, Proposed Guideline收集容器的标本进行分析，提出的指导方针NCCLS H34-P 1986.01.01 Determination of Factor VIII Coagulant Activity (VIII:C), Proposed Guideline测定凝血因子Ⅷ活性（Ⅷ：丙），提议指南NCCLS H35-T 1992.01.01 Additives to Blood Collection Devices: EDTA, Tentative Standard血液采集装置的添加剂：ED TA，试行标准NCCLS H40-P 1986.01.01 Determination of Factor IX Coagulant Activity, Proposed Guideline凝血活性因子Ⅸ测定，提议指南NCCLS H42-T 1992.01.01 Clinical Applications of Flow Cytometry: Quality Assurance and Immunophenotyping of Peripheral Blood Lymphocytes; Tentative Guideline临床应用流式细胞术：质量保证和免疫外周血淋巴细胞；暂定准则NCCLS I/LA2-T 1993.01.01 Quality Assurance for the Indirect Immunofluorescence Test for Autoantibodies to Nuclear Antigen (IF-ANA) Tentative Guideline质量保证的间接免疫荧光试验自身核抗原（if-ana）暂定准则NCCLS I/LA6-T 1992.01.01 Evaluation and Performance Criteria for Multiple Component Test Products Intended for the Detection and Quantitation of Rubella Antibody, Tentative Guideline评价和业绩标准，多个组件测试产品的检测和定量检测风疹抗体，初步的指南NCCLS I/LA7-P 1984.01.01 Specimen Handling and Use of Rubella Serology Tests in the Clinical Laboratory, Proposed Guideline标本处理和使用风疹血清学试验在临床实验室，提议指南NCCLS I/LA9-P 1985.01.01 Reference Method for Digoxin by Radioimmunoassay; Proposed Standard放射免疫法测定地高辛用参考方法，批准标准；NCCLS I/LA13-A 1991.01.01 Human Immunodeficiency Virus Type 1, Reference Material Specifications; Approved Guideline人类免疫缺陷病毒1型，参考材料规范；批准指南NCCLS I/LA15-P 1991.01.01 Apolipoprotein Immunoassays: Development and Recommended Performance Characteristics; Proposed Guideline载脂蛋白免疫：发展和性能特点的指导方针提出建议；NCCLS I/LA18-P 1991.01.01 Specifications for Immunological Testing for Infectious Diseases; Proposed Guideline规格免疫学检测传染病提出的指导方针；NCCLS I2-A2 1992.01.01 Temperature Calibration of Water Baths, Instruments, and Temperature Sensors水浴温度的校准，温度传感器NCCLS I16-T 1987.01.01 Temperature Monitoring and Recording in Blood Banks; Tentative Guideline血库的温度监测记录；暂定准则NCCLS I17-P 1991.01.01 Protection of Laboratory Workers from Instrument Biohazards; Proposed Guideline对于实验室仪器生物危害对操作者的保护；提出的指导方针NCCLS LA1-A 1985.01.01 Assessing the Quality of Radioimmunoassay Systems, Approved Guideline，放射免疫分析系统质量评估，批准指南NCCLS LA4-A2 1992.01.01 Blood Collection on Filter Paper for Neonatal Screening Programs, Approved Standard Second Edition采血滤纸新生儿筛查项目，批准的标准第二版NCCLS LIS01-A 2003.04.20 STANDARD SPECIFICATION FOR LOW-LEVEL PROTOCOL TO TRANSFER MESSAGES BETWEEN CLINICAL LABORATORY INSTRUMENTS AND COMPUTER SYSTEMS - First Edition在临床实验室仪器与计算机系统间的信息传递的低层协议的规范-第一版NCCLS LIS03-A 2003.04.20 STANDARD GUIDE FOR SELECTION OF A CLINICAL LABORATORY INFORMATION MANAGEMENT SYSTEM - First Edition临床实验室信息管理系统选择的标准指南-第一版NCCLS LIS04-A 2003.04.20 STANDARD GUIDE FOR DOCUMENTATION OF CLINICAL LABORATORY COMPUTER SYSTEMS - First Edition临床实验室计算机系统文件的标准指南-第一版NCCLS LIS06-A 2003.04.20 STANDARD PRACTICE FOR REPORTING RELIABILITY OF CLINICAL LABORATORY INFORMATION SYSTEMS - First Edition临床实验室信息系统可靠性报告的标准规程-第一版NCCLS LIS08-A 2003.04.20 STANDARD GUIDE FOR FUNCTIONAL REQUIREMENTS OF CLINICAL LABORATORY INFORMATION SYSTEMS - First Edition临床实验室信息系统功能要求的标准指南-第一版NCCLS LIS09-A 2003.04.20 STANDARD GUIDE FOR COORDINATION OF CLINICAL LABORATORY INFORMATION SERVICES WITHIN THE ELECTRONIC HEALTH RECORD ENVIRONMENT AND NETWORKED ARCHITECTURES - First Edition协调标准指南临床实验室信息服务的电子健康记录环境和网络结构-第一版NCCLS M2 2009.01.01 Performance Standards for Antimicrobial Disk Susceptibility Tests - Tenth Edition抗菌盘易感性试验的性能标准-第十版; Includes NCCLS M100-S19; To Purchase Call 1-800-854-7179 USA/Canada or 303-397-7956 WorldwideNCCLS M6-P 1986.01.01 Evaluating Production Lots of Dehydrated Mueller-Hinton Agar, Proposed Standard评估生产大量脱水mueller-hinton 琼脂，提议标准NCCLS M7 2009.01.01 Methods for Dilution Antimicrobial Susceptibility Tests for Bacteria That Grow Aerobically - Eighth Edition 细菌需氧增长的稀释抗菌易感性试验方法-第八版; Includes NCCLS M100-S19; To Purchase Call 1-800-854-7179 USA/Canada or 303-397-7956 Worldwide NCCLS M11-A2 1990.01.01 Methods for Antimicrobial Susceptibility Testing of Anaerobic Bacteria厌氧菌的抗菌易感性的试验方法NCCLS M15-T 1992.01.01 Slide Preparation and Staining of Blood Films for the Laboratory Diagnosis of Parasitic Diseases; Tentative Guideline 制片和染色血片的寄生虫病实验室诊断；暂定准则NCCLS M20-CR 1985.01.01 Antifungal Susceptibility Testing, Committee Report药敏试验，委员会的报告NCCLS M21-T 1992.01.01 Methodology for the Serum Bactericidal Test; Tentative Guideline血清杀菌试验方法；暂定准则NCCLS M22-A 1990.01.01 Quality Assurance for Commercially Prepared Microbiological Culture Media, Approved Standard商业编写微生物媒体的质量保证，认可标准NCCLS M23-T2 1992.01.01 Development of In Vitro Susceptibility Testing Criteria and Quality Control Parameters; Tentative Guideline Second Edition体外药敏试验的标准和质量控制参数的发展；初步的指南第二版NCCLS M24-P 1990.01.01 Antimycobacterial Susceptibility Testing; Proposed Standard抗结核药敏试验；标准NCCLS M25-P 1990.01.01 Fetal Bovine (Calf) Serum胎牛血清（牛）NCCLS M26-T 1992.01.01 Methods for Determining Bactericidal Activity of Antimicrobial Agents; Tentative Guideline方法确定杀菌活性抗菌剂；初步的指南NCCLS M27-P 1992.01.01 Reference Method for Broth Dilution Antifungal Susceptability Testing of Yeast; Proposed Standard抗真菌药敏检测酵母菌肉汤稀释法的参考方法；标准NCCLS M29-T2 1991.01.01 Protection of Laboratory Workers From Infectious Disease Transmitted by Blood, Body Fluids, and Tissue; Tentative Guideline; Second Edition血液、体液、组织对传染病传播方面实验室工作人员的保护；暂定准则；第二版NCCLS M29-T2-SR N/A M29-T2, Summary of Recommendation摘要，推荐NCCLS M100-S4 1992.01.01 Performance Standard for Antimicrobial Susceptability Testing; Fourth Informational Supplement药敏试验的性能标准；第四信息的补充NCCLS NRSCL1-A 1991.01.01 Development of Definitive Methods for the National Reference System for the Clinical Laboratory临床实验室国家参考系统定义方法的开发NCCLS NRSCL2-A 1991.01.01 Development of Reference Methods to the National Reference System for the Clinical Laboratory临床实验室国家参考系统参考方法的开发NCCLS NRSCL3-A 1991.01.01 Development of Certified Reference Materials for the National Reference System for the Clinical Laboratory 临床实验室国家参考系统的认证参考材料的开发NCCLS NRSCL6-T 1989.01.01 Development of Methodological Principles Documents for Analytes in the Clinical Laboratory; Tentative Guideline 临床实验室分析物方法学文件中的开发；暂定准则NCCLS NRSCL8-P 1985.01.01 Nomenclature and Definitions for Use in the National Reference System for the Clinical Laboratory, Proposed Guideline 临床试验室参考系统用术语和定义NCCLS POL 1/2-T2 1992.01.01 Physician's Office Laboratory Guidelines Procedure Manual, and CLIA/NCCLS POL Index- Second Edition; Tentative Guideline医生办公室实验室程序手册和技术指南，第二版/实验室波尔指数；暂定准则NCCLS RS1-A 1988.01.01 Glucose; Approved Summary of Methods and Materials Credentialed by the NRSCL Council葡萄糖；提出简要的方法和材料证书NCCLS RS2-A 1988.01.01 Aspartate Aminotransferase (AST); Approved Summary of Methods and Materials Credentialed by the NRSCL Council谷草转氨酶；提出简要的方法和材料证书NCCLS RS3-A 1988.01.01 Cholesterol; Approved Summary of Methods and Materials Credentialed by the NRSCL Council胆固醇；提出简要的方法和材料证书NCCLS RS4-A 1988.01.01 Alanine Aminotransferase (ALT); Approved Summary of Methods and Materials Credentialed by the NRSCL Council丙氨酸氨基转移酶（谷丙）；提出简要的方法和材料证书NCCLS RS5-A 1988.01.01 Total Protein; Approved Summary of Methods and Materials Credentialed by the NRSCL Council总蛋白；提出简要的方法和材料证书NCCLS RS6-A 1988.01.01 Bilirubin; Approved Summary of Methods and Materials Credentialed by the NRSCL Council胆红素；批准总结方法和材料NCCLS RS7-P 1988.01.01 Sodium; Proposed Summary of Methods and Materials Credentialed by the NRSCL Council钠；提出简要的方法和材料证书NCCLS RS8-P 1988.01.01 Potassium; Proposed Summary of Methods and Materials Credentialed by the NRSCL Council钾；提出简要的方法和材料证书NCCLS RS9-P 1989.01.01 Calcium; Proposed Summary of Methods and Materials Credentialed by the NRSCL Council钙；提出简要的方法和材料证书NCCLS RS10-P 1988.01.01 Chloride; Proposed Summary of Methods and Materials Credentialed by the NRSCL Council氯化物；提出简要的方法和材料证书NCCLS RS11-P 1988.01.01 Urea Nitrogen; Proposed Summary of Methods and Materials Credentialed by the NRSCL Council尿素氮；提出简要的方法和材料的信NCCLS RS13-P 1989.01.01 Rubella Antibody; Proposed Summary of Methods and Materials Credentialed by the NRSCL Council风疹抗体；提出简要的方法和材料的威望NCCLS SC1 N/A Evaluation ProtocolsNCCLS SC1-L 1996.01.01 Evaluation Protocols评价协议: Speciality Collections专业收藏 Includes EP5, EP6, EP7, EP9, Ep10, GP10NCCLS SC2 N/A Specimen Collection标本收集NCCLS SC3 N/A Antimicrobial Susceptibility抗菌敏感性NCCLS SC4 N/A General Laboratory Practices and SafetyNCCLS SC5 N/A pH and Blood GasNCCLS SC6 N/A Immunoassay免疫测定NCCLS SC7 N/A General Hematology血液学NCCLS SC8 N/A General ChemistryNCCLS SC9 N/A General Laboratory PracticesNCCLS SC10 N/A Laboratory SafetyNCCLS SC11 CLIA N/A SC11 CLIA CollectionNCCLS SC12 N/A Coagulation CollectionNCCLS SC14-L N/A A COLLECTION OF FORMER ASTM STANDARDS RELATING TO CLINICAL LABORATORY COMPUTER SYSTEMS. (THE COLLECTION INCLUDES LIS1-A, LIS2-A, LIS3-A, LIS4-A, LIS5-A, LIS6-A, LIS8-A, AND LIS9-A)NCCLS T/DM1-A 1991.01.01 Development of Requisition Forms for Therapeutic Drug Monitoring and/or Overdose Toxicology: Approved Guideline开发征用形式的治疗药物监测和/或过量毒理学：批准指南NCCLS T/DM6-P 1988.01.01 Blood Alcohol Testing in the Clinical Laboratory; Proposed Guideline血液酒精测试在临床实验室提出的指导；。
CLSI发布标准介绍
附件：《体外诊断试剂分析性能评估系列指导原则（征求意见稿）》目录1.体外诊断试剂分析性能评估指导原则――编制说明2.体外诊断试剂分析性能评估指导原则——检测限3.体外诊断试剂分析性能评估指导原则——线性范围4.体外诊断试剂分析性能评估指导原则——可报告范围5.体外诊断试剂分析性能评估指导原则——准确度（回收实验）6.体外诊断试剂分析性能评估指导原则——准确度（方法学比对）7.体外诊断试剂分析性能评估指导原则——精密度8.体外诊断试剂分析性能评估指导原则——干扰实验9.体外诊断试剂分析性能评估指导原则——稳定性10.体外诊断试剂分析性能评估指导原则——参考值（参考区间）附件1：体外诊断试剂分析性能评估指导原则编制说明《体外诊断试剂注册管理办法（试行）》颁布后，体外诊断试剂产品的注册过程中要求提供申报产品的分析性能评估资料，产品性能评估是产品研发、制定产品标准等过程的重要技术支持研究过程，并可能对产品的质量造成一定的影响。
目前国际上对体外诊断试剂的性能评估通常是以美国临床实验室标准化组织（Clinical and Laboratory Standards Institude以下称为CLSI）的相关标准为依据，也是美国FDA推荐采用的评价标准，但我国还没有相关的标准及指导原则的要求。
为进一步明确体外诊断试剂分析性能评估的技术要求，我中心组织有关专家起草产品分析性能评估指导原则，以明确体外诊断试剂产品性能评估的技术要求。
体外诊断试剂产品性能评估包括检测限、线性范围、可报告范围、准确度（回收实验）、准确度（方法学比较）、精密度、干扰实验、稳定性、参考区间共九个项目。
起草的主要依据CLSI发布的以下标准:1. C28-A2: How to define and determine reference intervals in the clinical laboratory; ApprovedGuideline-Second Edition.2. EP5-A: Evaluation of precision performance of clinical chemistry devices; Approved Guideline.3. EP6-A: Evaluation of the linearity of quantitative measurement procedures; A Statistical Approach; Approved Guideline.4. EP7-A: Interference testing in clinical chemistry; Approved Guideline.5. EP9-A2: Method comparison and bias estimation using patient samples; Approved Guideline-Second Edition.每项性能的主要研究方法均采用以上标准和国内实际采用的评价方法相结合的方法。
clsi血培养推荐指南教学课件ppt
06
clsi血培养的临床应用
1
临床应用概述
2
3
CLSI血培养临床应用旨在提供准确、快速、有效的检测方法，以帮助医生早期诊断和治疗血流感染（BSI）。
BSI是一种严重的感染性疾病，具有较高的死亡率和并发症发生率，而血培养是诊断BSI的金标准。
CLSI血培养临床应用在提高检测准确性和缩短检测时间方面具有重要优势，有利于医生及时做出诊断和制定治疗方案。
一名患者因持续发热和白细胞计数升高入院，医生采集血液样本进行CLSI血培养检测。检测结果显示，患者感染了革兰氏阴性杆菌，医生根据检测结果制定了相应的治疗方案，患者的病情得到了有效控制。
案例一
CLSI血培养推荐指南旨在为实验室提供有关血培养检测的标准化和优化方法，提高检测质量和患者诊治水平。
指南涵盖了血培养采样、实验室检测、结果解读和报告等方面的推荐意见。
指南概览
1
指南细节
2
3
针对不同年龄段、病情的疑似感染患者，建议最佳的采样时机和采血量。
采样指征
详细规定了样品处理、增菌培养、自动化检测和手工操作等步骤的标准化操作流程。
clsi血培养常见问题及解决方案
血培养操作不规范
采样方法不当，培养基选择不当
血培养采样不当
采样前未充分准备，采样量不足或过多
血培养结果不准确
培养基污染，培养过程中出现假阳性或假阴性
常见问题分析
充分准备，适量采样，注意采样方法和时间
血培养采样改进
血培养操作优化
血培养结果验证
选择合适的培养基和采样方法，规范操作流程
02
与传统血培养方法相比，CLSI血培养的临床应用可提高检出率、减少假阳性率、缩短检测时间，并降低漏检率。
eucast和clsi 更新
2. 诺氟沙星的药敏结果可以推导喹诺酮类药物的药敏结果，敏感可以推导分离株对环丙沙星，左氧氟沙星，莫西沙
星和氧氟沙星敏感。但是耐药不行，需要单独进行测试才能确认药敏结果
3. 克林霉素诱导耐药实验：将克林霉素和红霉素纸片间隔≤12mm；孵育6-8小时后确认是否存在“D”状抑菌圈。
对于此试验，阳性结果可靠，但是阴性结果并不能排除不存在诱导耐药情况。此外当测试克林霉素药敏试验时，
3. 克林霉素诱导耐药实验：将克林霉素和红霉素纸片间隔≤12mm；孵育6-8小时后确认是否存在“D”状抑菌圈。
16
对于此试验，阳性结果可靠，但是阴性结果并不能排除不存在诱导耐药情况。此外当测试克林霉素药敏试验时，
建议QC 方法和流程
质控菌株： • 大肠ATCC 25922，金葡ATCC 29213和肺炎
15
Clindamycin
2
Trimethoprim-sulfamethoxazole
1.25-23.75
4 hours
Range Target
8-12
10
12-17
14-15
16-22
耐药
此外存在以个技术不确定区域ATU（Area of Technical Uncertainty ），因为孵育时间较短， 当抑菌圈在此区域内时无法确认其分类结果是属于敏感或耐药。其分类结果可疑。
8
如何处理和报告ATU结果
ATU区域代表了药敏分类结果（S，I，R）之间分离差的区域。 S，I，R结果解释误差在此区 域中极具增加，因此不建议对位于此区域的药敏结果进行解释。通常情况下孵育时间越短，出 现ATU结果的可能性就越高。
Target
17-18 20 18 21 25 17 17 17
最新CLSI折点更新主题讲座课件
分子检测
肠杆菌科
肠杆菌科 铜绿假单胞菌 不动杆菌属
肠杆菌科 铜绿假单胞菌 不动杆菌属
简单
快速
可检测碳青霉烯 酶的类型
•假阳性： ESBL/Ampc+膜孔 蛋白缺失的菌株 •假阴性：产NDM 菌株（偶尔出现） •仅用于肠杆菌科 细菌
•需要特殊试剂 •某些菌株检测结 果无效
•假阴性：产OXA （质粒介导，
Table1A-1C抗菌药物的分组 Table2A-2J 纸片法及MIC法的解释标准 Table3A-3I筛选实验及确证实验的解释 Table4A-5G质量控制 Table6A-8B制备方案 AppendixA-Glossary3补充说明及术语表
变化的概要
M100-S25 第 13-15页.
重大的变化2015（1）
—— P123
所需的试剂及材料
•临床试验室试剂级纯水 •亚胺培南粉末 •细菌蛋白提取液（pH 7.4 ） •ZnSO4.7H2O •酚红粉末 •1N NaOH 溶液 •10% HCl 溶液 •1.5 mL微量离心管 •1 μL 接种环 •储存装置
—— P120
所需的试剂及材料
•临床试验室试剂级纯水 •亚胺培南粉末 •细菌蛋白提取液（pH 7.4 ） •ZnSO4.7H2O •酚红粉末 •1N NaOH 溶液 •10% HCl 溶液 •1.5 mL微量离心管 •1 μL 接种环 •储存装置
—— P120
所需的试剂及材料
1. 10mMZnSO4.7H2O 2. 0.5% 酚红试剂 3. 0.1 N NaOH 溶液 4. Carba NP 试验A液 5. Carba NP 试验B液（A液+6ug/ml亚胺培南）
附录
Ø修改肺炎链球菌中头孢洛林药敏结果的建议 Ø增加了肠杆菌科中头孢吡肟折点变化，SDD的解释说明 Ø增加流行病学cutoff值
2016年CLSI-M100S(第26版)主要更新内容解读
2016年CLSI M100S（第26版）主要更新内容解读张雅薇王辉（通讯作者）北京大学人民医院检验科此文发表在《中华检验医学杂志》2016年3月第39卷第3期，165-169建立和完善病原菌鉴定和体外药敏试验的标准化操作规程，是加强微生物室能力建设的基本要求之一。
其对优化临床药物选择、减缓耐药菌的产生具有重要意义。
CLSI制定的药敏试验标准是我国实验室遵循的指导性文件。
作为CLSI批准的药敏试验标准（包括M02-A12、M07-A10和M11-A8）的补充文件，2016年M100-S26正式更名为M100S（第26版）。
本文将重点解读CLSI M100S（第26版）文件[1]中的主要更新内容，以供临床实验室参考。
一、常规试验及报告药物的更新CLSI M100S（第26版）文件新增了多种目前新上市的新药如ceftolozane-他唑巴坦、奥利万星、泰地唑胺和特拉万星作为临床选择性报告的药物，并修订了几种抗菌药物的临床药敏报告组别，见表1。
注：a A组：常规测试并报告的药物。
b B组：常规测试，但选择性报告的药物。
c C组：补充性抗菌药物，选择性地报告。
d U组：仅用于泌尿道感染的抗菌药物。
e O组：其他药物，是指对微生物有作用，但在美国不常规要求测试的药物。
f其他非肠杆菌科：包括假单胞菌属和其他非苛养、非发酵糖革兰阴性杆菌（除外铜绿假单胞菌、不动杆菌属、洋葱伯克霍尔德菌和嗜麦芽窄食单胞菌）。
二、药敏折点的相关更新2016年CLSI M100S（第26版）文件修订了头孢唑林对肠杆菌科的纸片法和MIC折点，并建议将头孢唑林药敏结果用于预测口服头孢菌素的药敏。
当头孢唑林用于治疗由大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和奇异变形杆菌引起的非复杂性尿路感染时，建议使用新修订的折点，见表2，折点建立基于的给药方案为1g每12h；除非复杂性尿路感染外，当患者为其他感染时，仍沿用M100-S25中头孢唑林对肠杆菌科的折点。
新版标准删除了下列药物对各菌种的折点：替卡西林和头孢噻吩对肠杆菌科的折点；替卡西林对铜绿假单胞菌；替卡西林和美洛西林对不动杆菌属；美洛西林、替卡西林和氨苄西林对其他非肠杆菌科（包括假单胞菌属和其他非苛养、非发酵糖革兰阴性杆菌，除外铜绿假单胞菌、不动杆菌属、洋葱伯克霍尔德菌和嗜麦芽窄食单胞菌）的折点。
中文版clsi更新PPT课件
ECVs和临床折点
临床折点建立根据： 抗菌药物的MIC分布 相关细菌 PK/PD 临床疗效
ECVs建立根据： and 仅仅是MIC的分布
临床微生物室如何使用ECVs
Ø万古霉素可用于治疗痤疮丙酸杆菌感染，但目前尚无临 床相关折点。
抗生素 万古霉素
痤疮丙酸杆菌
ECV（ug/ml）
野生型
非野生型
≤2
≥4
Table1A-1C抗菌药物的分组 Table2A-2J 纸片法及MIC法的解释标准 Table3A-3I筛选实验及确证实验的解释 Table4A-5G质量控制 Table6A-8B制备方案 AppendixA-Glossary3补充说明及术语表
变化的概要
M100-S25 第 13-15页.
重大的变化2015（1）
Ø环丙沙星体外虽然“S”，但临床疗效不是很好
Crump et al. 2008. Antimicrob Agents Chemother. 52:1278.
氟喹诺酮类非敏感——怎么办？
—— P49
沙门氏菌属ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ—氟喹诺酮类折点
抗生素
纸片 含量
环丙沙星 5ug
左氧氟沙星 -
氧氟沙星
-
培氟沙星 5ug
阳性菌株，不需要更改碳青霉烯类敏感性试验结果的解释。
目前不推荐作为临床常规使用。
—— P120
（使用M100-S20 (January 2010)）解释标准 在实验室实施修订的碳青霉烯类抗生素的MIC标准之前，如 果肠杆菌科亚胺培南，美罗培南的MIC值为2-4ug/ml或厄他 培南MIC值为2ug/ml，则可能产碳青霉烯酶，需做此试验。
最大变化
Ø引入 Carba NP试验 Ø引入流行病学cutoff值（ECVs）的概念
clsieucast和中国耐药判定标准概述
clsieucast和中国耐药判定标准概述CLSI（Clinical and Laboratory Standards Institute）是一个国际标准制定组织，主要致力于临床和实验室领域的标准制定。
CLSI针对不同微生物的耐药问题，制定了一系列标准以指导临床实验室进行药敏试验。
这些标准主要包括药物敏感性测定方法、药物敏感性解释标准、抗生素使用指南等。
CLSI的药敏试验标准提供了广泛的方法选择，包括盘扩散法、肉眼读片、MIC（最小抑菌浓度）测定等。
这些方法可以用于不同类型的细菌、真菌和病毒的抗生素敏感性测试。
此外，标准中还对药物敏感性结果的解释进行了规范，通过指定抗生素的最小抑菌浓度范围，确定对药物的敏感、耐药或中度敏感等级别。
EUCAST的标准与CLSI的标准有一些类似，但也存在差异。
例如，在一些情况下，EUCAST更详细地规定了不同细菌属和药物的敏感性解释标准。
此外，EUCAST还强调了在不同临床情境中选择合适的药物，并提供了相应的建议和指南。
中国目前使用的耐药判定标准主要是由中国卫生健康委员会（原国家卫生和计划生育委员会）发布的《微生物学临床诊断标准》。
该标准规定了临床实验室中药敏测试的相关要求，包括药敏试验方法、药物敏感性解释标准和结果报告等方面。
与CLSI和EUCAST的标准相比，中国的耐药判定标准在一些细节上可能会有所不同。
例如，对于一些药物的敏感性解释标准，中国标准可能会与国际标准有所差异。
此外，中国标准还会根据本土的流行病学数据和临床实践进行相应的调整。
总体而言，CLSI、EUCAST和中国耐药判定标准都是为了指导临床实验室进行有效的药敏测试和耐药判定。
标准的制定旨在提供可靠的结果，并帮助医生在选择合适的抗生素治疗方案时做出明智的决策。
同时，随着科学技术的不断发展和耐药问题的不断演变，这些标准也在不断更新和完善，以适应不断变化的临床需求。
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Doripenem
多立培南
广谱、对绝大多数β-内酰胺酶稳定的碳青霉烯类 商品名：Doribax 仅有静脉制剂 抗菌谱和抗菌活性
对肠杆菌科、铜绿假单胞菌、不动杆菌属等革兰阴性菌 MSSA、肺炎链球菌粪肠球菌等多数革兰阳性菌与亚胺培南相仿，优于美罗培南 MRSA、VRE 抗菌作用差 对艰难梭菌、厌氧革兰阳性球菌的抗菌活性与美罗培南相仿
替代试验：一种抗菌药对耐药性的检测较靶位药物的检测更具可靠、稳定！
等价试验—举例
等价试验：一类抗菌药对受试菌的作用机制、抗菌活性是相仿的，只 需测定其中一种抗菌药的敏感性，就可预测受试菌对其他该类抗生素 的敏感性。
主要更新内容
• 1.“test”含义 – supplemental, 补充试验 – screening, 筛选试验 – surrogate, 替换试验 – equivalent agents 等价试验 • 2.假中间葡萄球菌 • 3.福氏宋内痢疾志贺菌的ECV折点 • 4.关于碳青霉烯酶的检测 • 5.新增抗菌药物的介绍 • 6.肉汤稀释法药敏试验拖尾现象判断终点方法 • 7.天然耐药的增加和删除 • 8. 其他
Carba NP试验
Carba NP试验是一种肠杆菌科、铜绿假单胞菌和不动菌属细菌中碳青霉
烯酶的表型检测方法。该试验采用比色法，目前主要用于流行病学研究 或感染控制，尚不推荐作为临床常规使用。
研究表明，Carba NP试验在检测KPC、NDM、VIM、IMP、SPM和SME
型碳青霉烯酶方面具有较好的敏感性（>90%）和特异性（>90%）。但 检测OXA-48型碳青霉烯酶敏感性很低仅为11%，部分MIC较低的产酶株 可能不能被检出。
4.关于碳青霉烯酶检测的规定
• 耐碳青霉烯类药物的肠杆菌（CRE）的耐药机制是有碳青霉烯酶存在或其 它β-内酰胺酶联合膜孔蛋白的突变造成的。由于碳青霉烯酶容易通过质粒传 播，因此对碳青霉烯酶的检测在流行病学调查上具有重要意义。出于治疗
病人的目的，常规试验不用检测；但如果出于感染控制 的目的则应对碳青霉烯酶进行检测是有用的。在美国肺炎
1.Test 的含义
常规试验：纸片扩散法，肉汤或琼脂稀释法的常规临床测试。 补充试验：用来测定一种药物或一类药物的敏感性或耐药性试验，非 常规实验，也不需要用其他试验来确证。一些补充试验为鉴定一个特 殊的耐药机制，必需或选择性的报告临床。 筛选试验：提供推测性结果，需要进一步的附加试验来确证药物的敏 感及耐药性。 替代试验 一种抗菌药对耐药性的检测较靶位药物的检测更具可靠、 稳定！ 等价试验 一类抗菌药对受试菌的作用机制、抗菌活性是相仿的，只 需测定其中一种抗菌药的敏感性，就可预测受试菌对其他该类抗生素 的敏感性。
• ECV值不是临床折点 • 纸片扩散法和MIC结果不以“敏感、中介和耐药”报告 • 获得的数据仅作为建立适用于福氏志贺菌和宋氏志贺菌的 ECVs值 • 抑菌圈值仅对福氏志贺菌适用 • 阿奇霉素对宋氏志贺菌的抑菌圈和MIC非常模糊，判断困难
举例：
• • • • 标本 粪便 诊断 腹泻（男性 细菌 宋氏志贺菌 药敏报告
克雷伯菌以 KPC 为主，而在欧洲流行的基因型主要为 oxa-48-like ， NDM 。目 前没有一种表型试验方法（MHT，Carba NP或CIM）能有效地检测出所有种
类的碳青霉烯酶。 CLSI M100-S26中介绍Carba NP试验结果判断图片的更新。
MHT实验对于非克雷伯菌常产生假阳性结果。PCR方法只能检测已有的特异 性碳青霉烯酶基因。新一代测序技术是碳青霉烯酶检测发展的方向。
2.假中间葡萄球菌—苯唑西林
头孢西丁的K-B法和MIC 对检测假中间型葡萄球 菌的mecA基因介导的耐 药性是不可靠的
假中间葡萄球菌
主要更新内容
• 1.“test”含义 – supplemental, 补充试验 – screening, 筛选试验 – surrogate, 替换试验 – equivalent agents 等价试验 • 2.假中间葡萄球菌 • 3.沙门菌对喹诺酮的药敏规则，福氏宋内痢疾志贺菌的ECV折点 • 4.关于碳青霉烯酶的检测 • 5.新增抗菌药物的介绍 • 6.肉汤稀释法药敏试验拖尾现象判断终点方法 • 7.天然耐药的增加和删除 • 8. 其他
替代试验—举例
用头孢西丁检测mecA 基因 介导对苯唑西林的耐药性 用头孢唑林检测大肠埃希菌 等引起的非复杂性尿路感染 的药敏结果可以指导口服头 孢菌素类的敏感性 培氟沙星的药敏结果可以检 测沙门菌属细菌对氟喹诺酮 类敏感性的降低 萘啶酸的药敏结果可以检测 沙门菌属细菌对氟喹诺酮类 敏感性的降低
1μg/片苯唑西林的肺炎链球菌的药敏 结果可以指示肺炎链球菌对青霉素的 敏感
>=32 <=0.5 >=2
HIV 阳性）
氨苄西林 头孢曲松 环丙沙星
R S R
因XX医生需要报告阿奇霉素药敏试验结果。根据 阿奇霉素对宋氏志贺菌的MIC值可以考虑该菌没 有获得性或突变耐药性
复方磺胺 阿奇霉素
>=4/76 8
R 8
沙门氏菌属——氟喹诺酮类/喹诺酮
喹诺酮类对沙门菌的折点从肠 杆菌细菌中分离开
>=23 >==19 >=18 >=16
22-22 16-18 15-17
<=19 <=15 <=14
<=1 <=2 <=2 <=1 <=1 <=0.12 <=0.12
2 2 4 4
>=4 >=8 >=8
CLSI M100-S26
Ceftaroline 头孢洛林
广谱的、具有抗MRSA活性的头孢菌素 仅有静脉制剂 抗菌谱和抗菌活性
3.Epidemiological Cutoff Values (ECVs)
• • • • ECVs 是一个流行病学的折点 一个可以将细菌分成具有或不具有获得性或突变性耐药机制的MIC值 其建立基于体外药敏试验数据 有助于发现非野生型菌株的出现
野生型 无耐药机制
非野生型 有耐药机制
ECVs：福氏志贺菌和宋氏志贺菌
假中间葡萄球菌
• 假中间葡萄球菌属于中间葡萄球菌组（Staphylococcus intermedius Group，SIG），该组还包括中间葡萄球菌、 Staphylococcus delphini等。假中间葡萄球菌多定植于健康猫和狗 的鼻孔及肛门粘膜上，常引起的犬脓皮病，有时会导致狗和猫 的尿路和关节感染。近年来，越来越多地从人体标本：伤口 （咬），鼻窦，和血液等中分离出来，它属于人兽共患病原体。 由于其菌落在血平板上有双溶血环，试管法凝固酶阳性，常误 鉴定为金黄色葡萄球菌。与金黄色葡萄球菌的主要鉴别实验： 该菌玻片凝固酶实验阴性，PYR(吡咯氨基肽酶) 阳性。用商业 化AST设备常鉴定为中间葡萄球菌，但用MALDI TOF（质谱仪） 鉴定通常是正确的。一些假中间葡萄球菌菌株的MecA基因为阳 性。用原有的头孢西丁的折点不能准确检测出带有MecA基因的 假中间葡萄球菌，需使用新的CLSI苯唑西林的MIC值和纸片法 折点
假阴性结果的原因：1、OXA-48-like，SME-1，GES-5等水解能力较弱
的酶；2、黏液型细菌菌落；3、分离培养基的影响
阳性结果出现时间各异，KPC酶较快，OXA酶最慢
质控菌株：肺炎克雷伯菌 ATCC
BAA-1705 （+） BAA-1706 （-）
ATCC
主要更新内容
• 1.“test”含义 – supplemental, 补充试验 – screening, 筛选试验 – surrogate, 替换试验 – equivalent agents 等价试验 • 2.假中间葡萄球菌 • 3.福氏宋内痢疾志贺菌的ECV折点 • 4.关于碳青霉烯酶的检测 • 5.新增抗菌药物的介绍 • 6.肉汤稀释法药敏试验拖尾现象判断终点方法 • 7.天然耐药的增加和删除 • 8. 其他
由于其对MRSA的PBP2以及对PNSP的PBP2x具有亲和性。故对其有杀菌作用 对葡萄球菌、肺炎链球菌、β溶血链球菌、以及肠杆菌科细菌、嗜血杆菌属、卡他莫 拉菌均有良好抗菌作用 对产ESBLs,AmpC (C 组) 及碳青霉烯酶(如KPC酶)的肠杆菌科细菌没有抗菌活性 对铜绿假单胞菌、不动杆菌属细菌等抗菌作用差 对厌氧菌有部分抗菌活性(但对脆弱拟杆菌没有抗菌活性)
•细菌
对碳青霉烯类不敏感 的肠杆菌科细菌 :
优势:易于操作；无 需特殊的试剂或培养 基
快速
局限性:假阳性：膜 需要特殊试剂； 需要特殊试剂和仪 孔蛋白缺失ESBL或高 对某些菌检测无 器；仅对靶基因有 产AmpC；假阴性： 效；对染色体介 特异性； 导的OXA酶无法 对特殊的碳青霉烯 NDM;仅用于肠杆菌 检测 基因可能出现假阴 用于流行病学研究和院感控制 M100性 S25P112 3B 3C表
M100-S26 P58
主要更新内容
• 1.“test”含义 – supplemental, 补充试验 – screening, 筛选试验 – surrogate, 替换试验 – equivalent agents 等价试验 • 2.假中间葡萄球菌 • 3.福氏宋内痢疾志贺菌的ECV折点 • 4.关于碳青霉烯酶的检测 • 5.新增抗菌药物的介绍 • 6.肉汤稀释法药敏试验拖尾现象判断终点方法 • 7.天然耐药的增加和删除 • 8. 其他Fra bibliotek补充试验
要求做：
红霉素诱导克林霉素耐药试验 葡萄球菌属β内酰胺酶 实验
选择做：
ESBL MHT
Carba NP
MRSA Agar
筛选试验
万古霉素平板筛查:如果筛查阳性，需测万古霉素的MIC值。 高水平氨基糖苷类耐药筛选试验：如果纸片扩散法筛选实验不 确定（ 7-9 mm ），则需要做琼脂稀释法或微量肉汤稀释法试 验来确认。