《环境微生物学》实验二 放线菌和真菌形态的观察

1.毛霉属
2．根霉属（假根处分枝）
3．镰刀霉属
• 镰刀—孢子囊形状呈镰刀
形、长柱形、球形，有多 细胞与单细胞之分。
新 月 藻
4．木霉属（又称绿霉菌）
• 木—分解纤维素和
木质素的能力较强
• 分生孢子梗对生的或互 生的分支，还可二级或 三级分支。
提问：用途？
发酵产纤维素酶
Leabharlann Baidu
霉腐、致癌、过敏性鼻炎
实验二
结
束
多细胞核
分生孢子“种籽” 孢子丝 “花” 固体基质
“枝” 气生菌丝
“根” 基内菌丝
实验程序Ⅳ（观察酵母菌的形态）
• 观察酵母菌形态和无性繁殖：
用高倍镜观察啤酒酵母的形态和出芽繁殖。
• 酵母肝糖染色法：
在洁净的载玻片上滴一小滴路哥氏碘液（Lugol），取一环 酵母菌液与碘液混匀，盖上盖玻片，镜检，菌体呈淡黄色， 肝糖粒呈红褐色。在高倍镜下观察菌体形态、出芽、芽簇、 肝糖粒，并绘图。
• 酵母脂肪粒染色法：
在洁净的载玻片上加一滴，取一环啤酒酵母与福尔马林混匀， 静止5min，加1滴美兰染色液，10min后再加一滴苏丹Ⅲ染色 液，盖上盖玻片，镜检。原生质呈兰色，脂肪粒呈粉红色， 而液泡无色。（示范片）
实验程序Ⅴ（观察霉菌的形态）
• 观察黄曲霉菌丝分隔情况和分生孢子着生情况（着重辨认分 生孢子梗、顶囊、小梗和分生孢子）：在洁净载玻片中央加 一滴酒精，用接剖针挑取黄曲霉培养物少许放入其中，再加 入酒精和蒸馏水各一滴（重复一次），使分生孢子分散，便 于观察。倾去酒精和蒸馏水，加一滴乳酚油（防止细胞变形 和气泡产生，又可防止干燥以保持较长时间），盖上盖玻片， 镜检、观察、绘图。 • 用同样方法制取青霉（Penicillium sp.）封片，示范片，观察 菌丝有无分隔和分生孢子梗、小梗、及分生孢子排列方式， 并绘图。 • 用同样方法制取镰刀霉（Fusarium sp.）封片，示范片，观 察孢子丝和着生部位的构造，并绘图。
实
验
二
放线菌和真菌形态的 观察
放线菌和真菌形态的观察
• • • • 目的要求 实验材料 实验程序 思考题
目的要求
• 学习观察放线菌和真菌形态的基本方法 • 加深理解放线菌和真菌的形态特征
实验材料
• 放线菌和真菌培养物
1. 放线菌培养物：青色链霉菌（Streptomyces glaucus）或 “5406”产生菌（St. microflacus）四天培养物。 2. 啤酒酵母（Saccharomyces cervisiae）24至28h液体培养 物或斜面培养物。 3. 黄曲霉（Aspergillus flavus）4d平面培养物。 4. 各种真菌示范片。
实验程序Ⅲ（观察放线菌链霉菌的形态）
• 插片染色法：
280C插片培养4—6d，轻轻 取出盖玻片，进行固定、 染色、水洗、晾干、镜检。 观察方法同“直接观察 法”，观察基内菌丝、气 生菌丝及孢子丝的卷曲状 况，及分生孢子的形状， 绘图加以说明（本实验采 用青色链霉菌接种后观 察）。
放线菌的形态
• 特征：丝状分枝、 多核、 单细胞（细胞核之间没有分隔）
• 显微镜、载玻片、接种环、解剖针、解剖刀、酒 精灯、镊子等。 • 乳酚油、碘液、酒精、蒸馏水等。
实验程序Ⅰ
• • • • 观察放线菌链霉菌的形态 观察酵母菌的形态 观察霉菌的形态 看录象
实验程序Ⅱ（观察放线菌链霉菌的形态）
• 个体形态直接观察法： 观察菌丝和孢子丝自然生长的性状，其中包括气生 菌丝（较粗），基内菌丝（较细）和孢子丝的形状， 如分枝状况及孢子丝的卷曲等，并绘图说明。 • 印片染色法： 印片 微热固定 石炭酸复红染色1min 水洗 晾干 镜检。（示范片）
实验程序Ⅵ（观察霉菌的形态）
• 取黑曲霉（Rhizopus niger）5d平板培养物，用其皿盖， 在低倍镜下观察菌丝体形态（假根、匍匐菌丝、孢囊 梗及孢囊等）并绘图。 更好的是采用载片培养法，可制成永久的封片，更便 于保存。 • 做蘑菇切片。观察担子菌担子着生情况及其孢子的形 态等，示范片，并绘图。 • 观察梨头霉（Absidia sp.）或根霉的接合孢子，示范 片，并绘图。
5．交链孢霉属 • 交链—孢子囊链式
相连
• 单个孢子呈纺锤形，有 横和竖的隔膜将孢子分 隔呈砖壁状。
6．地霉
• ——节孢子， 单个或连接成 链
• 应用：白地霉饲料 • 菌体蛋白营养价值高，可食用或 作饲料； • 处理酒糟废水
思考题
• 在用放线菌菌苔直接观察气生菌丝和孢子丝的 形态时，要注意些什么？ • 在制取酵母菌的水浸片时，要注意哪些要点？ • 制取酵母水浸片时为什么不用水，而用乳酚油？