基因组特征评估
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RAD-seq评估相对杂合度
RAD-tag数统计
SNP检测、统计
相对杂合度分析基因组Survey分析基因组大小评估杂合度评估重复比例评估
GC分布评估SSR检测
初步组装
DNA样品总量: ≥3 μg/个体(RAD-seq) ≥10 μg(Survey)
样品要求文库类型测序策略与深度分析内容项目周期
基因组DNA
40天HiSeq PE125/PE1501X(RAD-seq); 50X(Survey)
RAD文库或小片段文库技术参数
基因组特征评估包括两个产品:
RAD-seq评估相对杂合度:RAD-seq是指利用限制性内切酶对基因组进行酶切,结合一定大小的插入片段文库,对其进行高通量测序;对于无参考基因组的物种,通过构建RAD文库,进行低深度测序,可以用来评估基因组的相对杂合度,为后续基因组项目挑选合适的材料。
基因组Survey分析:对于没有基因组参考序列的物种,在正式启动基因组项目之前,基于小片段文库的低深度测序数据,通过K-mer分析,可以有效地评估基因组大小、GC含量、杂合度高低以及重复序列含量等信息,是全面了解某一物种基因组特征的有效方法,为后续全基因组de novo测序及组装策略的制定
提供依据;此外,通过基因组Survey分析也可对基因组进行初步组装。RAD-seq评估和基因组Survey分析的不同之处在于:RAD-seq仅用于评估相对杂合度,主要用于筛选多个样品中杂合度相对较低的样品进行分析;而基因组Survey分析则可对基因组特征进行全面评估,并对后续组装提供依据。