根系活力的测定[TTC法]优秀课件
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加入10mL容量瓶 Na2S2O4 酯定容
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四、实验步骤—测定根系活力
0.5g根尖样品 0.4%TTC和磷酸缓冲液的等量混合液10ml
根充分浸没于溶液中
与此同时 做一空白 实验,先
加硫酸,
37℃下暗保温1~3h
再加根样
品,其他
加入1mol/L硫酸2ml
操作同上
取出根吸 干水分
与3~4ml乙酸乙酯和少量 石英砂在研钵内磨碎
根系活力的测定[TTC法]
制作人:刘新 单 位:生命科学学院 植物生理学教研室
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一、实验目的 理解植物根系活wk.baidu.com的内涵 掌握根系活力测定的原理与方法
合成氨基酸和植物激素 (ABA、CTK、GA等)
H2O 无机盐
根的生长情况和活力水平直接影响地上部的生长和营养状况及产量 测定根系活力,为植物营养研究提供依据。
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二、实验原理
氯化三苯基四氮唑(TTC)是标准氧化电位为80mV的氧化还 原物质,溶于水中成为无色溶液,但还原后即生成红色而不 溶于水的三苯基甲腙 (TTF)。
生成的TTF比较稳定,不会被空气中的氧自动氧化
3
根系活力
TTC
(无色,溶于水)
脱氢酶
促进
琥珀酸 延胡索酸 苹果酸
TTF
(红色,不溶于水)
查标准曲线,求 四氮唑还原量
空白试验作参比测 红色提取液移入试管且 485nm下吸光度 用乙酸乙酯定容到10ml
7
五、实验结果
四氮唑还原强度
四氮唑还原量(mg)
(mg/g(根鲜重)/h) = [根重(g)×时间(h)]
8
六、思考题
1.植物的根与地上部分有何关系? 2.反应中加入硫酸、琥珀酸或延胡羧酸、
丙二酸 碘乙酸
抑制
4
三、实验材料
水培或砂培小麦、玉米等植物根系。
5
四、实验步骤—制作TTC标准曲线
TTC含量(μg)
0.25mL
Na2S2O4
25
乙酸乙酯 0.50mL
50
1.00mL
100
1.50mL
150
乙酸乙酯作 参比,测定 485nm下光 密度值,绘 制标准曲线
2.00mL
200
吸取0.25mL TTC 加少许 乙酸乙
苹果酸各起何作用? 3.测定根系活力时最好选择根的哪个部位?
为什么? 4.为什么要以杀死根系作为空白对照?
9
若有不当之处,请指正,谢谢!
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