药物分析简答题

甾体
1、分类：可的松、黄体酮、睾丸素、雌二醇
2、鉴别：
一般反应
＊显色反应
⊕与强酸反应
⊕官能团反应
＊TLC
＊衍生化反应
IR 法：炔雌醇和黄体酮IR(p.249～250)衍生化反应
COCl
+KOH O
C
HO O
雌激素
H2SO4乙醇
呈黄色
H2O or 稀H2 SO4
桃红色
共热稀释再加热加水
max max
λ 465nm溶解 +第一步第二步硫酸亚铁铵
中国药典
采用本法测定炔雌醇片及复方炔诺酮片、复方炔诺
孕酮滴丸、复方左炔诺孕酮片中的炔雌醇的含量抗
生素类药物
1、抗生素（ antibiotics ）
在低微浓度下即可对某些生物（病原微生物）
的生命活动有特异抑制作用的化学物质的总称
2、分类：
β –内酰胺类、氨基糖苷类、四环素类、大环内酯
类、多烯大环类、多肽类
+KCl+H 2O
3、来源：
生物合成、半合成、化学合成
炔雌醇m.p.201℃
CH3CH3
CO CNOH
+2HO NH 2+2H O
2
O N
黄体酮HO双肟 m.p.238℃
3、杂质检查：
“乙炔基”的检查：
采用 AgNO3-NaOH 滴定法
电位滴定法
指示电极：玻璃电极
参比电极：饱和甘汞电极 (玻璃套管内装饱和 KNO3 液 )
药典附录中表示： C CH 中氢置换法电极
系统：玻璃 -KNO3 盐桥 -饱和甘汞
4、含量测定：
（1）、 UV 法
（2）、四氮唑比色
法异烟肼法4、抗生素的特点：化学纯度较低、活性组分易发生变异、稳定性差
原因：生产工艺复杂，发酵过程不易控制，易受污染
5、抗生素的质量分析：
采用生物学法与物理化学法
鉴别：理化方法、微生物法
检查：水分、异常毒性、热原、细菌内毒素、降压物质等
含量 / 效价测定：
微生物法：与临床疗效吻合，灵敏度高，但操作复杂费时；
理化方法：准确度与专属性较高，且操作简便，但与临床疗效有偏差
（一）β –内酰胺类
1、化学结构
O NHNH 2O H N N
C C
+
N O N
INH △4-3- 酮
I s onicotinic
acid Hydrazide
Kober 反应比色法青霉素类： 6-APA 为母核
头孢菌素类：7-ACA 为母核
2、主要理化性质
酸性 (羧基 )：酸性较强（ pKa 2.5-2.8）临床常用其碱金属盐（水溶性好）
UV（共轭）：
青霉素类：苯环取代基
头孢菌素类：母核有共轭结构
旋光性：有多个手性碳
稳定性 (内酰胺 )：
干燥条件较稳定，溶液不稳定
氧化剂、酸、碱
青霉素酶、金属离子降解失效
3、鉴别
1）羟肟酸铁反应：
β–内酰胺类羟肟酸显色
2）茚三酮反应
α- 氨基蓝紫色
3）双缩脲反应
β–内酰胺类紫色
4）光谱法（ U V、NMR）
5）色谱法（ H PLC、TLC）
头孢利定的NMR 鉴别法(JP14)
取本品 50mg 溶于 0.5ml 重水中，测定 NMR 光谱时，应
显示
δ= 3.8 附近单峰信号
δ= 6.9～ 7.5 多重峰信号
δ=7.9～9.0 多重峰信号
头孢氨苄鉴别的 TLC条件
CHP（ 2000 ）
5mg/ml 2μ l硅胶G0.1mol/L枸橼酸液
-0.2mol/LNa2HPO4- 丙酮 (120:80:3) 0.1% 茚三酮溶液显色
BP（ 1999）
0.4%(W/V) 1μ 硅l烷化硅胶HF254
15.4% NH4Ac(pH6.2)-丙酮 (85:15)
254nm 检出
4、特殊杂质检查：
聚合物、有关物质、异构体等
举例：
头孢他啶中聚合物测定-------- 色谱条件与系统适用
性试验
流动相A：含 3.5%硫酸铵的0.01mol/L 磷酸盐缓冲液
蓝色葡聚糖2000
理论板数应不低于900，拖尾因子在0.75～ 1.5，葡聚糖凝胶 G-10， 254nm检测
头孢他啶中聚合物测定----------- 色谱条件与系统适
用性试验
流动相 B： 0.01%十二烷基硫酸钠溶液
峰面积的 RSD应小于 5.0%，葡聚糖凝胶G-10，254nm 检测
头孢呋辛酯中有关物质和异构体的检查
色谱条件：
ODS分析柱；
0.2mol/L 磷酸二氢铵 -甲醇（ 62:38）为流动相；
流速 1ml/min ；
检测波长278 nm 。

系统适用性试验：
头孢呋辛酯 A， B 异构体之间、头孢呋辛酯 A 异构体与头孢呋辛酯△ 2- 异构体之间的分离度应大于
1.5；
理论板数按头孢呋辛酯 A 异构体峰计算，应不低于1500。

有关物质
供试品溶液：0.2mg/ml( 流动相溶）
对照溶液 :供试品溶液，加流动相稀释成6 g/ml 对照溶液进样20 l ，调节仪器灵敏度，使主成分峰高约为记录仪满量程的 10%
取供试品溶液和对照品溶液各20 l，分别注入
液相色谱仪，记录色谱图至主峰保留时间的 2.5倍
供试品溶液如显杂质峰，量取各杂质峰面积的
和，不得大于对照溶液主峰的面积
5、含量测定
碘量法：
原理：青霉素与头孢菌素本身不与碘反应，但其碱
性降解产物可消耗碘
反应分两步进行：
水解反应(按化学计算量进行)
氧化 -还原反应(无定量关系，受温度、 pH 值和时间等因素影响，应严格控制反应条件并采用标准品
平行对照测定 )
空白试验 : 因样品中杂质会消耗碘，故应作空白试
验。

空白试验与经典空白试验不同：
加入样品，不加碱；
其余试剂（醋酸盐缓冲液，碘液，硫代硫酸钠）都
要加碱。

试验条件 :（ I2 氧化）
弱酸性（ pH4.5）碱↑I2 → IO3- + I-酸↑某些药物与碘生成复盐沉淀
温度（ 24～ 26℃），温度＞ 38 ℃时未水解的供试品
亦消耗碘
反应时间：（ 20 分钟）， 20 分钟后，耗碘量随时
间的变化较小
特点：灵敏度高：样品 : 碘 = 1 : 8 反应条
件、实验操作要求高电位配位滴定法（汞量
法）
原理：青霉素不与汞盐反应，其碱性降解产物可与
Hg2+络和。

Hg ++ 2R - SH(RS) 2 Hg + 2H+
方法说明：
a、空白试验与碘量法类似，加样品，不加 NaOH
b、
与碘量法相比，汞量法不需对照试验
其他常用方法
酸碱滴定法：应用广泛
HPLC法：应用广泛
硫醇汞盐法
青霉素咪唑
青霉烯酸硫醇汞盐（λmax 324～345nm）HgCl2
羟肟酸比色法
NH2OH H+
β –内酰胺类Fe3+红色
（例） ----------- 阿莫西林克拉维酸钾片
测定法：
取本品 10 片，置 1000ml 量瓶中，加水适量，振摇
使溶解，加水稀释至刻度，摇匀，精密量取10ml ，置50ml 量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，滤过，取
续滤液 10 l 注入液相色谱仪，记录色谱图；
另取阿莫西林对照品与克拉维酸对照品各适量，加
水溶解，制成每1ml 中含阿莫西林0.5mg 和克拉维酸0.25mg 的混合溶液，同法测定。

按外标法以峰面积分别计算供试品中C16H19N3O5S
和C8H9NO5 的含量。

（二）氨基糖苷类
1.化学结构
都是以氨基环醇与氨基糖缩合而成的苷；
分子结构中都含有多羟基；
均为碱性抗生素；2、主要理化性质
碱性 (氨基 )：临床应用其硫酸盐溶
解度 (氨基、羟基 )：水溶性旋光
性 (糖 )：（糖）：有多个手性碳稳
定性 (苷 )：强酸、碱条件均可水解
3、鉴别
茚三酮反应：具羟基胺类，α -氨基酸性质
链霉素 +水和茚三酮蓝紫色
N-甲基葡萄糖胺（ Elson-Morgan ）反应：
链霉素
水解
N-甲基葡萄糖胺
乙酰丙酮
对二间氨基苯甲醛
OH
红色
麦芽酚（ Maltol) 反应： (链霉糖特有 )
OH -8-羟基喹啉NaOBr
重排或 a 萘酚
链霉素链霉胍橙红
硫酸盐反应
CHO
H
C
4、检查
+
N
链霉素中链霉素 B 的检查
N
N
CH 3CH 3CH3CH3
BP：薄层色谱法（杂质对照品法）
庆大霉素 C 组分测定（系统适用性试验）
色谱柱： ODS
检测波长：
330nm （邻苯二甲醛柱前衍生）
流动相：H2O-HAc-MeOH 配制的庚烷磺酸钠溶液(0.2M) ，必要时调节甲醇的含量。

要求： NC2 ≥ 2000，C2a 峰和 C2 峰的分离度应符
合要求，重复进样 RSD<2.0%
5、含量测定
微生物法、 HPLC法
（三）四环素类
1.化学结构
2、主要理化性质
两 性： -OH ：酸性 N(CH3)2：碱性
与酸、碱均
可成盐
临床多用盐酸盐
稳定性：易发生异构化，降解等反应，性质不稳定
旋光性
与金属离子络合：酚羟基、烯醇基与 Ca2+、 Mg2+
络合显色
酚羟基、烯醇基与 Ca2+、 Mg2+ 络合显色
酸性（ pH< 2） C 环脱水 脱水四环素
碱 性
C 环开环，形成内酯
异四环素
H
N(CH 3) 2
(CH 3)2N
H
A
OH
pH2.0~6.0
A
OH
CONH 2
CONH 2
OH OH
O
O
差向异构
体
R
CH 3 OH
R
CH 3
R
CH 3
H
D
C
B
H
2O
D
C
B
D
C
B
OH
O
OH
OH
O
OH
OH
OH
O
脱水四环素类
OH R''' H CH 3
R
R''' H CH 3
CH 3
N
CH
N
3
3. 鉴
别
OH
OH
CONH 2
O
CONH 2
1）浓硫酸反应
O
OH
OH
OH
OOH
O
OH O
O
2）FeCl3 反应： （酚羟基） 显红色 ~褐色
3） TLC 、 HPLC
4）荧光：（含共轭双键）紫外灯照射下产生不同颜 色荧光 4. 检 查 TLC 、 HPLC 法
杂质吸收度（降解产物颜色较深） 5. 含 量 ChP 、 USP ：
HPLC 法 JP ：
比色法
高分子杂质的检查
内源性：药物自身聚合物
来源于生产过程、贮存过程、使用不当
外源性：蛋白、多肽、多糖及其与药物的结合物。

来源于发酵过程 临床应用其硫酸盐 杂质控制方法
凝胶色谱法：葡聚糖凝胶
Sephadex G-10
巴比妥类药物
结构与鉴别 :⊙碱性条件下煮沸，水解后鉴别
⊙络合反应
巴比妥类药物在水中发生电离
直接利用酰胺基上的活泼氢与重金属离子络合 ＊银盐反应
＊钴盐反应
利用稀醇型与铜盐反应
铜盐反应产物
: 巴比妥类生成紫色或紫色沉淀 ; 硫代巴比妥生成绿色
丙二酰脲类鉴别
(1)取供试品约 0.1g ，加碳酸钠试液 1ml 与水 10ml ，振摇 2min ，滤过，滤液中逐滴加入硝酸银试液，即
生成白色沉淀，振摇，沉淀即溶解；继续滴加过量的硝酸银试液，沉淀不再溶解
(2)取供试品约 50mg ，加吡啶溶液 (1→ 10)5 ml ，溶解后，加铜吡啶试液 1ml ，即显紫色或生成紫色沉淀 . 钠盐鉴别
(1) 焰色反应
(2) 醋酸氧铀锌反应
+ 2+ -
Na +Zn +3UO 2+9CH 3 COO+9H 2O
NaCH 3COO ·Zn(CH 3COO)2·3UO 2(CH 3COO)2·9H 2O
特殊杂质检查
取本品 0.20g，加水 10ml ，煮沸搅拌 1min ，放冷，滤过后，取滤液 5ml，加甲基橙指示液 1 滴，
不得显红色
乙醇溶液的澄清度检查方法
取本品 1.0g，加乙醇5ml ，加热回流3min，溶液应澄清中间体Ⅱ、Ⅲ等乙醇中不溶物
中性或碱性杂质
副产物： 2-苯基丁酰脲或分解产物不溶于NaOH T.S.
而溶于醚
苯巴比妥的含量测定
（1）取本品约 0.2g，精密称定，加甲醇 40ml 使溶解，再加新鲜配制的 3％无水碳酸钠溶液 15ml ，照
电位滴定法，用硝酸银滴定液（0.1mol/L ）滴定即得。

（2）每 1ml 硝酸银滴定液（0.1mol/L ）相当于 23.22mg 的C12H12N2O3
注射用硫喷妥钠
*取装量差异项下的内容物，混合均匀，精密称取
适量 (约相当于硫喷妥钠 0.25g)，置 500ml 量瓶中，摇匀，量取此溶液用 0.4% NaOH 溶液定量稀释制成每
1ml 中约含 5μg的溶液；
* 另取硫喷妥对照品，精密称定，加0.4%NaOH 溶液溶解并定量稀释制成每1ml 中约含 5μg的溶液。

*用 1cm 吸收池，于 304nm 波长处分别测定吸收度，以 0.4% NaOH 溶液作空白。

根据每支的平均装量计
算。

每 1mg 的硫喷妥钠相当于 1.091mg 的C11H19N2NaO2S 芳酸及其酯类药物
特点： (1)均有苯环、羧酸或其酯(2)水杨酸类和苯甲酸类结构中的羧基
直接与苯环相连
(3)除了酸性基团外，各自具有本身的
官能团
(4)分子中苯环、羧酸和取代基的相互
影响，使芳酸的酸性强度各有不同鉴别：
（ 1）三氯化铁反应
（ 2）重氮化偶合反应
具体方法见芳香胺类药物的鉴别
ONa ONa OH（ 3）氧化反应
CO 2COONa
+
COOH
甲芬那酸＋ H2 SO4深蓝色H
加压，
黄色并产生绿色荧光
（ 4）异羟肟酸铁反应（最后是紫色）
（ 5）水解产物的反应
（ 6）分解产物的反应
（ 7） UV 特征吸收
（ 8） IR 吸收光谱
特殊杂质的由来与方法检查
COOH COONa
OCOCH3OH
2NaOH CH3COONa H2O ⊙2NaOH生产工艺：H SA SO、溶液的澄清度、苯Na酚、SO炽灼残渣2H、O
24242
重金属、易碳化物
⊙PAS-Na
间氨基酚
（1） Ch.P样品 3.0g用乙醚提取，加入H2O，用HCl 滴定液（ 0.02mol/L) 滴定，生成杂质·HCl（转溶
入 H2O 相，甲基橙指示剂）。

滴定液不得过0.30ml （2） USP HPLC法
NaH2PO4(0.05mol/L)-Na2HPO4(0.05mol/L)-CH3OH( COONa COONa
含氢氧化四丁基铵 1.9g)(425： 425：150)
254nm 检测NaOH NaAc H 2O
内标：磺胺
OH
OCOCH 3
⊙羟苯乙酯
2NaOH H SO NaSO2H O 供试品自身对2照法 4 BP（1998）反相2 TLC4 高低浓2度对比法
取羟苯乙酯丙酮液 1.0%和 0.01%，2ul， 254nm 查
荧光，前一个任何第二个斑点的大小和强度不应
超过后一个乙醇作用：溶解ASA；防止 ASA在水溶液中滴定过
程易水解
中性乙醇：对指示剂 (酚酞 )而言为中性，可消除滴定
误差
本法特点：简单
注意点：若SA 不合格，不宜采用本法
水解后剩余滴定法
USP23方法：取本品约1.5g，精密称定，准确加 NaOH
液(0.5mol/L)50.0ml ，水浴上煮沸 15min ，放冷，以酚
酞为指示剂，用 H2SO4 液 (0.25mol/L) 滴定剩余的NaOH，并将滴定结果用空白试验校正。

每1ml 的NaOH 液 (0.5ml/L) 相当于 45.04mg 的 C9H9O4
两步滴定法
用于 Aspirin 片测定，片剂中有稳定剂
为了避免枸橼酸、酒石酸这些酸类的干扰，采用两
步滴定法
第一步： NaOH C滴定OH所有的酸：ASA， CA， TA，SA，
⊙氯贝丁酯
对氯酚（ 0.0025%）挥发性杂质（ 0.5%）GC 法 5%SE-30 2m 160℃， N2 FID
杂质以归一化法求得
含量测定
⊙酸碱滴定法第二步：
HAc
O
OH
以 ASA及其制剂为例
苯甲酸
水杨酸pKa 2.98酸性较强
羧酸邻位 -OH，吸电子基
团，使酸性增加；并有氢
键，更增加了其极性
因此，可采取直接滴定法直接滴定法
pKa 3~6 的药物溶于中性醇 ,可直接用 NaOH 滴定pKa 6~9 的药物要用非水溶液滴定法
COOH COONa
⊙双相滴定法
中性乙醇
H 2O
NaOH
Ch.P 2005 用于苯甲酸钠的测20℃以下定
OCOCH 3 OCOCH 3
苯甲酸钠为芳酸碱金属盐，易溶于水；苯甲酸不
溶于水，不利于终点的正确判断
因此，利用苯甲酸能溶于有机溶剂的性质，采用
双相滴定法
⊙柱分配色谱 -紫外分光光度法
ASA capsule 等制剂除用上述两步滴定法外，最
好用色谱法，可以分离酸性杂质和辅料以及稳定剂等，
经分离后同时测定 ASA与 SA
如 USP用柱分配色谱 -UV 测定 ASA Capsule
pKa 4.20
⊙HPLC
阿司匹林栓：测定法咖啡因乙醇溶液4mg/ml
对照品溶液： ASA对照品 (约 0.15g) --------
50.0ml
2.0ml50.0ml
供试品溶液：取本品 5 粒，精密称定()， 40--50
℃微温熔融，不断搅拌下冷却至室温，
精密称取适量 (ASA约 0.15g) (W)
芳香胺类药物
化学性质：
1.芳伯氨基：重氮化－偶合反应；与芳醛缩合成
Schiff 碱；易氧化变色等
2.水解：受光线、热、碱的影响；盐酸丁卡因→ BABA，其余药物→ PABA
3.弱碱性：叔胺氮原子，生物碱沉淀剂反应，非水
溶剂滴定
4.溶解性：游离碱，油状液体或低熔点固体难溶于
水，易溶于有机溶剂；盐酸盐白色结晶粉末，具一
点的熔点，易溶于水和乙醇，难溶于有机溶剂。

共性： 1. 水解
2.醋酸乙醇 / 硫酸醋酸乙酯
特性： 3. 对乙酰氨基酚＋三氯化铁
4.弱碱性：叔胺氮原子＋生物沉淀剂→沉淀
5.酰胺氮原子与金属离子络合显色
鉴别试验
（一）重氮化－偶合反应Na2[Fe(CN) 5H 2O] +NO Na 2[Fe(NO)(CN)5]+H 2O Na 2 [Fe(CN) 5 H 2O] +NO
芳伯氨基：苯佐卡因、盐酸普鲁卡因、盐酸普鲁卡
因胺。

NaNO2/HCl 碱性β -萘酚有色Na2[Fe(CN) 5H 2O]+ H2N OH
Na 2[Fe(CN) 5 H 2 O]+ H2N OH
偶氮染料（橙黄到猩红色）
潜在芳伯氨基：对乙酰氨基酚、醋氯苯砜
盐酸或硫酸加热水解NaNO2/HCl
H 2N 2(NC) 5FeNa 2OH+H 2O
碱性β -萘酚有色偶氮染料（红色）（二）与三氯化铁反应（蓝紫色）与铜和钴离子反应（具有芳酰胺结构的，如盐酸利多
卡因）
（1）硫酸铜 / 碳酸钠试液→蓝紫色配合物→显黄色（溶于氯仿）
氯化钴 / 酸性溶液→亮绿色细小钴盐沉淀↓2.羟肟酸铁盐反应（具有芳酰胺结构的，如盐酸普
鲁卡因胺）浓过氧化氢 / 加热至沸羟肟酸三氯化铁羟肟酸铁（紫红色）
3. 与汞离子反应
芳酰胺类，如盐酸利多卡因硝酸汞 / 硝酸，煮沸（黄色）
对氨基苯甲酸酯类，如苯佐卡因硝酸汞/硝酸，煮沸（红色或橙黄色）
（四）水解产物反应
1.盐酸普鲁卡因＋ 10％氢氧化钠溶液→白色↓
（加热变为油状物）继续加热蒸气（二乙氨基乙醇）↑（能使润湿的红色石蕊试纸变为蓝色）
加热至油状物消失放冷、加盐酸白色↓（能溶于过量的盐酸）
2.苯佐卡因＋氢氧化钠试液煮沸乙醇
加入碘试液 / 加热黄色↓（碘仿臭气）
（五）制备衍生物测熔点
1.盐酸利多卡因三硝基苯酚三硝基苯酚利多卡因
盐酸布比卡因三硝基苯酚布比卡因2.盐酸丁卡因25％硫氰酸铵溶液 /5％醋酸溶液
丁卡因硫氰酸盐
NHCOCH
3NHCOCH3
特殊杂质检查
（一）对乙酰氨基酚中的特殊杂质
3
+ FeCl
与颜色：
中间体对氨基酚的Fe有
+
3HCl
乙醇溶液的澄清度
3
色氧化产物在乙醇中显橙红色或棕色。

（比浊，比色）
有关物质：中间体、副产物及分解产物（例：
对氨基酚、对氯乙酰苯胺、 O-乙酰基对乙酰氨基酚、OH O
偶氮苯、氧化偶氮苯、苯醌和醌亚胺等）3
药典规定：以对氯乙酰苯胺为对照品， TLC限度检查。

对氨基酚
乙酰化不完全或贮藏不当引起水解－毒性较大并有
色泽
（三）与金属离子反应
苯乙胺类
检查方法： 取本品 1.0g ，加甲醇溶液（ 1→2）20ml
化学性质
溶解后，加碱性亚硝基铁氰化钠试液
1ml ，摇匀， 弱 碱+ -性：
+
N N NHCH 2CH 2NH 2
[N 2] Cl
O NHCH H 2CH 2NH 2
放置 30min ；如显色，与对乙酰氨基酚对照品
1.0g Cl Ar-NHCOR+H 2 Ar-NH 2+RCOOH
加对氨基酚 50μg 用同一方法制成的对照液比较，
不 △
+
Ar-N 2+Cl -+NaCl+2H 2O
得更深（ 0.005%）。

Ar-NH 2+NaNO 2+2HCl
酚羟基特性：
CH(OH)CH 2NH(CH 3)3
注：对氨基酚对照溶液不稳定， 应临用前新鲜配制。

CH(OH)CH 2NH(CH 3)3
邻苯二酚（或苯酚）结构，与金属离子络合呈色；
（二）盐酸普鲁卡因注射液中对氨基苯甲酸的检查 在空气中或遇光、热易氧化，色泽变深；在碱性溶
限度：水解产物对氨基苯甲酸，不得超过 1.2%。

液中更易变色。

检查方法： TLC 法，对氨基苯甲酸对照品对照，
对二
甲氨基苯甲醛溶液显色。

光学活性：手性碳原子，具有旋光性。

亚硝酸钠滴定法
苯环取代基特性：如盐酸克伦特罗芳伯氨基；
条件：
1、加入适量溴化钾加快反应
H
H
2
2、加入过量盐酸 1:2.5---6
CNH
C 3 室温 10℃～ 30℃
OH
CH 3
4、滴定管尖端插入液面下滴定
HO 终点指示方法： 1、永停法
2、外指示剂法（碘化钾－淀粉） 比色法
芳伯氨基的重氮化－偶合反应生成有色偶氮染料
－－专属性差
盐酸普鲁卡因与 1,2-萘醌 -4-磺酸钠溶液反应生成棕红色化合物
－－适用于盐酸普鲁卡因及其制剂的常规分析快速荧光测定
盐酸普鲁卡因胺结构中的芳伯氨基与荧胺反
应，生成荧光物，可在 λ400nm 、 λ485nm 波长处测定荧光强度
－－较重氮化法灵敏、 简便，适用于普鲁卡因胺制剂的测定 高效液相色谱法
以苯甲酸为内标，可以同时测定盐酸普鲁卡因注射液中的普鲁卡因及其降解产物对氨基苯甲酸 （PABA ），不需分离提取，准确简便。

色谱条件（色谱柱、流动相、检测器）
测定方法（供试品溶液、对照品溶液的制备，进样量，计算方法）
紫外、红外吸收特性进行定性、定量分析。

鉴别试验
氧化反应（酚羟基，易被碘、过氧化氢、铁氰化钾
氧化呈现不同颜色）
肾上腺素 -------棕红色多聚体
盐酸异丙肾上腺素 ------------- 淡红色溶液
重酒石酸去甲肾上腺素 ----------溶液为无色或仅显微
红色或淡紫色
肾上腺素或盐酸异丙肾上腺素
------明显的红棕色
或紫色
鉴别试验
（ 1）与亚硝基铁氰化钠反应重酒石酸间羟胺的脂肪伯氨基
重酒石酸间羟胺
（ 2）双缩脲反应含量测定
1、非水溶液滴定法－弱碱性
冰醋酸为溶剂
醋酸汞消除氢卤酸的干扰
结晶紫为指示剂 （盐酸甲氧明的指示剂为
萘酚苯甲醇，也可电位法指示终点）
若碱性较弱则加醋酐使突跃明显
2、溴量法
基本原理：
3、比色法
测定原理：
4、提取酸碱滴定法
原理：溶解性－盐酸盐或硫酸盐可溶于水，游离碱不溶于水，溶于有机溶剂。

方法：供试品溶于水或矿酸，加入适量碱性试剂使药物游离，用适当的有机溶剂提取，将提取液蒸干，残渣中加中性乙醇溶解，用标准酸滴定液直接滴定（或在提取液中加定量过量的标准酸滴定液，
蒸去有机溶剂后，再用标准碱滴定液回滴定） 。

5、荧光分光光度法
基本原理：肾上腺素含有的邻苯二酚结构，被弱
氧化剂氧化，生成肾上腺素红，发生转位为
N- 甲基
杂环类药物
吡啶类药物
弱碱性： 吡啶环 N 原子为碱性原子， 吡啶环 pKb 为 8.8（水中）
尼克刹米：除了吡啶环上的 N 原子外，吡啶环 β位被酰氨基取代，遇碱水解释放二乙胺。

Chp2005 鉴别：取本品 10 滴，加氢氧化钠试液 3ml ，加热，即发生二乙胺的臭气， 能使湿润的红色石蕊试纸变蓝色。

还原性：异烟肼吡啶环
γ位被酰肼所取代，有OH 较强 OH
的还O 原性，可被不同的氧化剂氧HO 化，也可与某些含
OH
-
有羰基的化合物发生缩合反应。

-O N + HO N
R
R
-3,5,6- 三羟基吲哚（ THI ）。

6、高效液相色谱法
高效分离，高灵敏度和高选择性－可用于制剂常规
分析，临床药物监测和体内药物动力学研究。

Br
H
H
+3Br
Br
C CH 2 NHCH 3 +3HBr
C CH NHCH
3 2
2
OH
OH HO
HO Br
Br 2 +2KI 2KBr+I 2
I 2+2Na 2SO 3
2NaI+Na 2
S O
4 6。