水中微量铁的测定—邻菲啰啉分光光度法

实验3-1 水中微量铁的测定—邻菲啰啉分光光度法
学院/专业/班级：_____________________________________ 姓名：
实验台号：_________ 合作者：____________________ 教师评定：____________
【实验目的】
1. 了解分光光度计的基本构造和使用方法；
2. 学习分光光度法测定微量铁的原理及方法；
3. 学习用origin等绘图软件绘制吸收曲线及标准工作曲线方法。

【实验原理】
【实验仪器及试剂】
仪器：
分光光度计（厂家及型号：___________________________）；1 cm比色皿2个；50 mL容量瓶8个；吸量管；移液管；量筒；废液杯等
试剂：
铁标准工作溶液：________mg ⋅L -1
邻菲啰啉溶液：5 g ⋅L -1（15/85V /V O H CH CH O H 232=） 盐酸羟胺溶液：100 g ⋅L -1 HAc-NaAc 缓冲溶液：pH=4.6
【实验步骤】（条件实验中酸度和显色剂用量的选择不做）
1. Fe 2+
标准系列溶液和待测试样的配制
在8个50 mL 容量瓶（编好号码*）中，用吸量管依次加入铁标准工作溶液____、____、____、____、____、____mL 及____mL 待测水样（待测水样平行做2份），然后在所有容量瓶中分别加入1 mL 盐酸羟胺溶液，摇匀后放置1 min ，再分别加入1.5 mL 邻菲啰啉溶液和5 mL HAc-NaAc 缓冲溶液，用水定容摇匀后放置10分钟后测定。

2. Fe 2+-邻菲啰啉络合物吸收曲线的绘制及测定波长的选择
以试剂空白（指加入标准工作溶液0.00 mL 的容量瓶，即1号瓶）为参比溶液，用已配好的系列标准溶液（2-6号瓶）中的某一个溶液（选择任意一瓶均可，但是习惯选择系列中次浓的溶液，即5号瓶）为待测液，采用____cm 比色皿，分别测定波长为480、490、500、505、510、515、520、530、550、580 nm 时的吸光度。

以波长为横坐标, 吸光度为纵坐标绘制吸收曲线，并从曲线上求出最大吸收波长λmax 。

3. 标准曲线的绘制
调节波长至λmax 处，用____cm 比色皿，以试剂空白为参比溶液，按浓度由低到高的顺序依次测定标准系列溶液（2-6号瓶）的吸光度。

以浓度c （mg ⋅L -1）为横坐标，吸光度A 为纵坐标绘制校正曲线。

4. 未知水样中铁含量的测定
于λmax 处，用____cm 比色皿，以试剂空白为参比溶液，测定待测水样（7和8号瓶）的吸光度，通过标准曲线及试样稀释倍数，计算待测水样中铁的含量（mg ⋅L -1）。

【数据记录与处理】
1. Fe 2+-邻菲啰啉配合物吸收曲线的绘制：
表1. Fe 2+-邻菲啰啉配合物在不同波长下的吸光度值
λmax =____ nm
图1. Fe2+-邻菲啰啉络合物吸收曲线（图打印成适当大小，贴在此处）
2. 标准曲线及待测水样的测定：
表2. 标准系列及待测水样吸光度的测定
图2. Fe的标准曲线（图打印成适当大小，贴在此处）
拟合方程：____________________________________; 相关系数：____________
3. 待测试样中Fe含量计算（利用拟合方程求算，注意稀释倍数，以mg L-1表示）
【思考与讨论】
1. 为什么本法测定的是水样中二价和三价铁的总量？如果欲分别测定二价和三价铁的含量，利用本实验的仪器及试剂，可否有办法能够从理论上实现？
2. 本实验显色反应过程中，各种试剂的加入顺序是否有要求？为什么?
3. 吸光度测定时参比溶液的作用是什么？本实验可否用蒸馏水代替试剂空白？
4. 本实验的标准曲线是否应该过原点？如果不过说明什么问题？
5. 本实验中各种试剂加入的量哪些需要非常准确，哪些只要基本准确就可以？
6. 根据自己的实验数据，计算测定波长下的摩尔吸收系数。

7. 实验结果应该保留几位有效数字？。