DNA定量分析检测对胸腔积液的诊断价值研究

DNA定量分析检测对胸腔积液的诊断价值研究

目的探讨细胞DNA定量分析在不明原因胸水诊断中的应用价值。方法收集本院2015年9月～2016年3月122例胸腔积液患者抽取胸水，标本制片后分别经巴氏染色行脱落细胞学检查，Feulgen染色后行细胞DNA定量分析。结果122例胸腔积液中有56例恶性胸腔积液，66例良性胸腔积液。细胞学检测恶性胸水敏感度为82.14%，特异性为98.48%，阳性预测值97.87%，阴性预测值86.67%。细胞DNA定量分析检测恶性胸水敏感度为80.36%，特异度为90.91%，阳性预测值88.24%，阴性预测值84.51%。两种方法诊断结果一致性一般（Kappa=0.473，P＜0.001），差异无统计学意义（P=1.0）。结论DNA定量分析检测是一种较敏感而特异的肺癌的筛查技术，DNA异倍体有望作为良恶性胸水诊断有价值的标志物。

Abstract：Objective To evaluate the value of DNA quantitative analysis in the diagnosis of unexplained hydrothorax.Methods A total of 122 patients with pleural effusion were collected from our hospital in September 2015～March 2016.After taking the tablets，they were stained by PAP staining and cytological examination.After Feulgen staining，cell DNA was quantitatively analyzed.Results There were 56 cases of malignant pleural effusion and 66 cases of benign pleural effusion in 122 cases of pleural effusion.The sensitivity of malignant pleural effusion was 82.14%，the specificity was 98.48%，the positive predictive value was 97.87%，and the negative predictive value was 86.67%.The sensitivity of DNA in malignant pleural effusion was 80.36%，the specificity was 90.91%，the positive predictive value was 88.24%，and the negative predictive value was 84.51%.The results of the two methods were consistent（Kappa=0.473，P＜0.001），and the difference was not statistically significant（P=1.0）.Conclusion DNA quantitative analysis is a sensitive and specific screening technology for lung cancer.DNA aneuploidy is expected to be a valuable marker for the diagnosis of benign and malignant pleural effusion.

Key words：Pleural effusion；Cytological examination；Quantitative analysis of cell DNA

近年来，肺癌已成为全球最主要的癌症死亡原因，其總患病率为130.2/10万[1]。恶性胸腔积液为肺癌常见的并发症之一，约57%的肺癌患者在初诊时已发生了远处转移[2]。故胸腔积液的良恶性鉴别在临床上具有协助疾病诊断、指导治疗的意义。目前临床上鉴别良恶性胸腔积液常依靠胸水细胞学检查，其主要依靠细胞形态学进行定性诊断，但该检查对高度增生的间皮细胞、增生性间皮细胞，肿瘤的间皮细胞和转移性腺癌细胞的鉴别诊断较为困难[3]。目前采用液基细胞学检查（liquid-based cytology，LBC）行脱落细胞学检查，较传统涂片在病理学诊断阳性率有所提高[4]。本研究应用DNA定量分析（DNA image cytometry，DNA-ICM）检测胸腔积液中的细胞异倍体，并与脱落细胞学结果相对比，以探讨该检测方法在良恶性胸腔积液中的诊断价值。

1 材料与方法

1.1研究对象收集本院2015年9月～2016年3月胸腔积液标本122例，其中男77例，女45例，年龄22～95岁，所有病例均经组织病理学、影像学、实验室检查并结合临床诊断明确。全部患者胸腔积液均同时行脱落细胞学检查和细胞DNA定量检测。1.2方法每例胸腔积液留取标本50 ml，离心涂片，根据不同检测方法制片。

1.2.1 DNA定量分析标本中加入肝素抗凝，将标本静止30 min，弃去大部分上清液，取底层沉淀物高速离心后，留取沉淀物涂片，涂片经Feulgen染色后再经全自动细胞图像分析系统（由厦门麦克奥迪医疗诊断有限公司提供）进行扫描处理。对每张玻片上所有细胞核进行扫描测定，标准对照细胞为同张玻片上的正常细胞，并检测细胞核DNA含量。分析结果：采用DI（DNA Index，DNA指数）判定，正常细胞DI等于1，病变细胞DI≥2.5，1

1.2.2细胞学检查留取标本行巴氏染色，制作3张细胞片，经病理科医生阅片后判定结果。诊断结果分为：①未见到癌细胞；②见到少许异型细胞；③见到重度不典型异型细胞；④可疑癌细胞；⑤见到癌细胞。

1.3统计学处理采用SPSS Stastistics 2

2.0软件进行数据分析，率的比较应用χ2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。同时计算灵敏度、特异度、阳性预测值及阴性预测值。

2 结果

恶性胸腔积液56例，其中非小细胞肺癌33例包括腺癌29例鳞癌3例，非小细胞肺癌未分型1例。小细胞肺癌8例，临床诊断肺癌3例。其他组系统肿瘤12例，包括肝癌1例，乳腺癌3例，盆腔恶性肿瘤1例，食管癌1例，腹膜癌1例，血液系统恶性肿瘤2例，胰腺癌1例，肾癌1例，直肠癌1例。良性胸腔积液66例。细胞学检查阴性者占61.48%（75/122），细胞学检查阳性者占38.52%（47/122）。DNA检查阳性者占41.80%（51/122），DNA检查阴性者占58.20%（71/122），见表1和图1。

2.1细胞DNA定量分析以DI≥1作为阳性界值计算，122例胸腔积液脱落细胞学检查，56例恶性胸水中DI经分析后诊断为阳性的有45例，66例良性胸水中60例DI值呈阴性。细胞DNA定量分析鉴别良恶性胸腔积液的敏感度为80.36%，特异度为90.91%，见表2。

2.2细胞学检查122例胸腔积液脱落细胞学检查，将见到少许异型细胞、重度不典型异型细胞、可疑癌细胞及癌细胞判定为阳性。56例恶性胸水检出阳性