弧菌科及检验培养碱性环境动力制动试验刘涛.ppt

一、生物学性状
（三）抗原构造与分型
根据O抗原不同，现已有139个 血清群，其中O1群、O139群引起 霍乱。
根据表型差异，O1群霍乱弧 菌可分为两个生物型：古典生物型 和El Tor生物型。
一、生物学性状
（四）抵抗力
El Tor生物型和其它非01群霍 乱弧菌，在外环境中的生存力较 古典型为强，本菌不耐酸、不耐 热。
最适生长温度为30~37℃ • 在碱性胨水中经6~9h增菌 • 可形成菌膜
培养特性
• TCBS琼脂平板: 0.5~2.0mm大小，蔗糖不 发酵而呈蓝绿色菌落
• 普通血平板: 不溶血或只产生α溶血
• 从腹泻患者中分离到的菌株95%以上在 我妻（wagatsuma）琼脂上产生β溶血现
象，称为神奈川现象（Kanagawa
3.分离培养
碱性蛋白胨水或选择培养基（thiosulfate-citrate-bile-sucrose, TCBS）增 菌。
4.血清学鉴定
玻片凝集反应。
• 粘丝试验:将0.5%去氧胆酸钠水溶液与
霍乱弧菌混匀制成浓菌液，1min内悬液 由混变清，变得粘稠，以接种环挑取时 可以拉出丝来，霍乱弧菌呈阳性。
（二）生பைடு நூலகம்学特性
1. 形态
– 革兰阴性菌， – 有鞭毛（极毛） – ，无荚膜，无芽胞
2. 抗原结构
– 耐热的菌体（O）抗原，具有群特征性，副 溶血性弧菌的O抗原有13种
– 鞭毛抗原，不耐热，无型特异性
3．培养特性
• 营养要求不高 • 在无盐培养基上不能生长，最适合生长的
氯化钠浓度为3.5%，超过8%不能生长 • 最适pH为7.7~8.0，但pH9.5时仍能生长，
五、防治原则
控制传染源 切断传播途径：改善社区环境，加强水源
管理
提高易感者免疫力：疫苗预防接种 治疗关键：及时补充液体和电解质，预防大
量失水导致的低血容量性休克和 酸中毒。
第二节 副溶血性弧菌
嘉兴市秀城区某餐厅因承办婚宴发生一起食物
中毒事件。 2004年4月28日中午12时左右，婚宴10桌，100
1961年开始的第七次世界性霍乱大流行 至今已波及五大洲140个以上的国家和地区， 报告病例数在400万以上，目前尚无停息的迹 象。它们由埃尔托生物型引起。
流行病学概况
1992年10月印度和孟加拉相继发生 一种新型霍乱暴发和较大流行，这型霍乱 随后在亚洲传播，至今已有印度、巴基斯 坦、孟加拉、中国、泰国、马来西亚、缅 甸、尼泊尔、新加坡、斯里兰卡、香港等 国家和地区报告发生O139霍乱病例。 2003年，WHO报告45个国家111575例病 例——O139群霍乱弧菌引起。
水样腹泻），大量水分和 电解质丧失，引起低容量 性休克和肾衰竭（死亡率 高达60％）。
霍乱患儿
二、致病性与免疫性
（三）免疫性
感染霍乱弧菌后，机体可获 得牢固免疫力。
SIgA起主要作用。
四、微生物学检查法
1.标本
污染的水样、食物和粪便，病人肛试子
2.直接镜检
悬滴法观察细菌呈穿梭样运动；涂片 可见G－弧菌，鱼群状排列。
• 血平板：E1Tor可产生溶血素，古典生物 型霍乱弧菌不产生可溶性溶血素，不出 现透明溶血环。但能产生一种蛋白分解 酶可使血液消化出现草绿色环。绵羊红 细胞溶解试验常作为两个生物型鉴别的 方法之一。
（三）生化反应 发酵多种糖，迟缓发酵乳糖，不分解阿 拉伯糖、水杨酸； 氧化酶（+） 明胶酶（+） DNA（+） 硝酸盐还原（+）吲哚（+）
phenomenon, KP）
• 嗜盐性选择平板: 较大，圆形，隆起，稍浑浊， 半透明或不透明，无粘性
• SS平板: 扁平，无色半透明，蜡滴状菌落，有 辛辣味，不易 刮下，48h后牢固粘着培养基上， 部分菌株不能生长
人就餐。从当日17时起，就餐人群开始出现病人， 至次日11时，中毒病人31人，罹患率为31％。症状 主要为腹痛、腹泻、恶心、呕吐等胃肠道症状。
副溶血性弧菌广泛生存近岸海水和鱼贝类 等食物中，温、热地带较多。我国华东 沿海该菌的检出率为57.4～66.5％，尤 以夏秋季较高。海产鱼虾的带菌率平均 为45～48％，夏季可高达90％。腌制的 鱼贝类带菌率也可达42.4％。
弧菌科及检验
培养碱性环境 动力制动试验
刘涛
弧菌属（Vibrio）
细菌是一大群菌体短小，弯曲成 弧形的革兰阴性菌
第一节 霍乱弧菌
Vibrio cholerae
流行病学概况
烈性肠道传染病霍乱的病原菌 19世纪初至今已引起7次世界性大流行。
1817～1923年的百余年间，在亚、非、欧、 美、澳等发生的六次世界性霍乱大流行—— 皆由古典生物型引起。
一、生物学性状
（一）形态与染色
G－，弧型或逗点状，单 鞭毛；液体中，运动非常活泼， 呈穿梭样；涂片中，排列整齐， 呈鱼群状。
生物学性状
霍乱弧菌鱼群状排列
一、生物学性状
（二）培养特性
耐碱不耐酸；在pH8.8～9.0的 碱性蛋白胨水、碱性琼脂平板 上生长良好。
碱性琼脂平板上：圆形，较大， 扁平、无色透明、似水滴状菌落 TCBS上，形成较大菌落，黄色
二、致病性与免疫性
（一）致病物质
1.霍乱肠毒素
霍 A亚单位 乱 肠 毒 素 B亚单位
腺苷酸环化酶活性增高，使细胞 内cAMP水平升高，主动分泌 Na+、K+、HCO3－和水，导致严 重的腹泻与呕吐。
与小肠粘膜上皮细胞GM1神经节 苷脂受体结合，介导A亚单位进 入细胞。
二、致病性与免疫性
（一）致病物质
• (1)原理：霍乱弧菌分解色氨酸生成吲哚，并能
使硝酸盐还原为亚硝酸盐，当加入硫酸后生成 亚硝酸吲哚，呈红色反应。
(2)方法：将待检菌接种于蛋白胨水中，置35℃ 孵育24h，加入浓硫酸数滴，观察结果。 (3)结果：呈红色者为阳性。 (4)应用：霍乱弧菌呈阳性反应，但本试验并非
霍乱弧菌所特有。凡能产生吲哚并还原硝酸盐 为亚硝酸盐的细菌，均可呈现阳性反应。
2.鞭毛、菌毛
鞭毛运动有助于细菌穿过肠粘膜表面粘 液层而接近肠壁上皮细胞。
普通菌毛是细菌定居于小肠所必须的因 子。
二、致病性与免疫性
（二）所致疾病
霍乱：烈性肠道传染病，为我国的甲类 法定传染病。
传 染 源：患者及无症状感染者 传播途径：粪-口途径，通过污染的
水源或食物 临床表现：剧烈的腹泻和呕吐（米泔