氨基比林咖啡因片(脑清片)致死性研究及对其有效成份进行配比优化

３、 致死量正式试验：
根据预试验结果可知各配方的０％死亡剂量和１００％死亡剂量，按孙氏改进的Ｋａｅｒｂｅｒ法分别测定脑清片、氨基比林和咖啡因的半数致死量。（孙氏改进的Ｋａｅｒｂｅｒ法见机能学实验课本Ｐ６２）。
４、 重复以上实验，减少实验误差，提高可信度。
５、 结果分析：
将氨基比林和咖啡因的半数致死量之比与脑清片中的配比进行比较，推测单独考虑致死性时脑清片中配比的合理性。并依此确定二期实验方案。
成绩：
山东大学医学院
药理学实验设计
题 目：氨基比林咖啡因片（脑清片）致死 性研究及对其有效成份进行配比优化
设计者： 刘娉婷（20062304020）
脑清片的成分为氨基比林和咖啡因，氨基比林原作为常用解热镇痛药，后由于副作用较大，现临床已基本不用了，咖啡因是中枢兴奋剂，长期使用会导致依赖性，故不可长期服用。
2、报道分析：资料调查显示服用脑清片致死患者并非罕见，脑清片说明书未明确标注该药致死率，即对病人无警告提醒。 患者常因已对该药产生依赖性和耐受性，当疼痛再次发作时大量服用导致中毒甚至死亡。目前该药被广泛用于临床及日常用药镇痛，因此对该药致死性进行研究对临床用药具有重要的现实意义。
2.年老伴心、肝、肾等并发症，使用利尿剂者，使用本品易致肾损害，应慎用。
3.氨基比林可引起粒细胞减少，长期或大剂量使用本品应注意检查血象。
【孕妇及哺乳期妇女用药】尚不明确。
【老年患者用药】 老年患者减量或慎用。
【药物相互作用】 尚不明确。
【贮藏】遮光，密闭保存。
教师签字：
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因此，本次实验拟解决以下两个问题：
1） 一期实验中，测量氨基比林和咖啡因单独作用于同种实验动物时各自的半数致死量；两者半数致死量与脑清片中的配比进行比较，推测单独考虑致死性时脑清片中配比的合理性。
2） 如一期实验结果显示脑清片配比不合理，则进行二期实验探索两种成分的最佳配比，并对此最佳配比的药效进行简单实验评估。
４、 成都市61 种抗感冒药成分调查及分析(四川大学华西医学中心药理教研室,四川成都 610044)
５、 水龙骨镇痛抗炎有效部位的筛选 王玉亮1 ,张磊2 ,辛海量3 (1. 上海交通大学农业与生物学院,上海200240 ;2. 第二军医大学药学院生药教研室)
６、 清胆汤抗炎、解热、镇痛的实验研究（蔺想成 马武开 南京中医药大学(210029)）
2009年 5 月 15 日
立题依据（主要说明本研究的目的、意义、国内外研究现状及主要参考文献）
一、 研究原因：
1、新闻报道：08年某日中午，长春一名16岁的女孩吃脑清片用可乐冲服，吃完药半个小时后突然出现抽搐、口吐白沫等症状，在送到医院时已不治身亡。
据了解，大量服用脑清片可以致人死亡，以前曾有过这样的悲剧发生--山东安丘市的牛某(女)，曾服用脑清片100片后身亡，尸检分析，死者确因脑清片所致急性中毒死亡。
2、 二期实验采用正确的实验方法和步骤选择出单纯考虑对小鼠致死性时两种成分的较好配比，再结合药效学研究选择出针对小鼠的最佳配比。 预期结论
如果脑清片两种成分作用于小鼠能够选出最佳配比，即可以对其配比进行优化，可推测对人来说脑清片中两种成分的配比也可通过临床实验优化其配比。
教师评语
2、氨基比林咖啡因片(脑清片)说明书
【药品名称】
通用名：氨基比林咖啡因片
曾用名：脑清片
本品为复方片剂，其主要成份为：氨基比林 150mg，咖啡因 40mg。
【性状】本品为白色片。
【药理毒理】本品为解热镇痛药。氨基比林为吡唑酮类解热镇痛抗炎药，能抑制下丘脑前部神经元中前列腺素E1的合成和释放，恢复体温调节中枢感受神经元的正常反应性而起退热作用;氨基比林还能抑制炎症局部组织中前列腺素的合成和释放、稳定溶酶体膜、影响吞噬细胞的吞噬作用，而起到抗炎作用。咖啡因作为中枢兴奋药，能兴奋大脑皮层，提高对外界的感应性，并有收缩脑血管加强氨基比林缓解头疼的效果，协同解热镇痛作用。
附：1、咖啡因及氨基比林致死性概述：
急剧过量咖啡因，通常超过250毫克就能够导致中枢神经系统过度兴奋。咖啡因过度兴奋的症状包括：烦躁、神经过敏、兴奋、失眠、脸红、尿液增加、胃肠紊乱、肌肉抽搐、思维涣散、心跳不规则或过快以及躁动。摄取极大剂量的咖啡因会导致死亡。对于实验鼠，咖啡因的半数致死量为192毫克每千克体重。咖啡因半数致死量取决于体重和个人敏感程度。
氨基比林解热镇痛作用较强，因能引起骨髓抑制以及能形成亚硝胺致癌物质，故单用制剂已淘汰。临床常用的是其复方制剂。氨基比林于1893年合成，20年代以后陆续有人发现服用此药的病人发生了口腔发炎、发热、咽喉痛等症状，化验检查时发现末梢血中白细胞，特别是粒细胞减少。经过调查证明氨基比林能引起严重的白细胞减少症，导致种种感染。到1934年仅美国就有1981人死于本病。到1938年，美国把该药从法定药物目录中删去。
３、 仪器设备：灌胃器 、电子天平等。
实验方法（详细写明实验步骤，尤其动物分组、给药途径和剂量、观察指标及数据处理等）
一期试验：分别测试脑清片、氨基比林和咖啡因的半数致死量
１、 随机分组：
取体重18-20g小鼠40只，称重编号，按体重随机分为4组，每组10只，雌雄各半。第一组为空白对照组（生理盐水给药组）；第二组为脑清片给药组；第三组为氨基比林给药组；第四组为咖啡因给药组。
三、 部分参考文献：
１、 灯盏乙素对对乙酰氨基酚和脂多糖致小鼠肝功能损伤和致死率的影响。(广西中医学院·药学院,广西南宁 530001)
２、 小鼠实验性镉中毒的病理学变化(河南科技大学动物科技学院,河南洛阳471003)
３、黄药子及配伍当归含药血清对肝细胞毒性的实验研究(哈尔滨医科大学附属第一医院·哈尔滨150001 1黑龙江中医药大学·哈尔滨150040)
二期实验：探索氨基比林与咖啡因的最佳配比
此期实验建立在一期实验结果之上，大体思路和方法如下：
１、 单纯考虑致死性
取小白鼠100只，随机分为10组，根据一期实验数据及常规解热镇痛药中氨基比林与咖啡因的配比合理设置9组不同配比，剩下一组为对照组，按照一期实验中方法测定不同配比对小鼠的半数致死量。选出半数致死量相对较高的五组进行药效试验。
பைடு நூலகம்
２、 药效测定
脑清片的主要作用为解热镇痛，进行药效测定采用小鼠醋酸扭体法测定筛选出的五种配比药物的镇痛效果，以干酵母混悬液背部皮下注射至小鼠发热模型测试解热效果，对药效和致死性进行综合分析，选出氨基比林和咖啡因的最佳配比。
醋酸扭体实验中观察五个不同配比给药组及空白组给药后抑制醋酸所致的疼痛作用，给药30min后各鼠均腹腔注射１％醋酸0.2ml/只，观察10min内扭体反应（腹部内凹、后肢伸展、臀部抬高）小鼠只数，计算各配比镇痛百分率。
２、 致死量预实验：
采用灌胃法，经口一次给药，给药前禁食4-8h，但不限制饮水。四组实验动物除空白组外均分为3个剂量组，按一定剂量（待定）给小鼠灌胃，观察14d，记录各动物给药剂量、给药只数、死亡只数及现象。找出各配方的最大耐受量及最小致死量，由公式求得相邻两组间的剂量比值r , b 为最小致死剂量, a 为最大耐受量。若某一配方按上述剂量给药后没有找到最大耐受量(0 %死亡剂量) 或最小致死剂量(100 %死亡剂量) ,则按r 再降低或增大一个剂量组到找出最高、最低致死量范围再进行正式试验。
3.肝损害，大剂量使用氨基比林可致肝损害，产生黄疸、肝炎等。
4.其他。本品可引起头痛、头晕、耳鸣、视神经炎等中枢神经系统疾病;氨基比林可致粒细胞减少。
【禁忌】
1.胃肠道出血患者禁用。
2.消化道溃疡者禁用。
【注意事项】
1.不能耐受非甾体类抗炎药或大剂量使用非甾体类抗炎药者、年老、有胃肠出血史、溃疡史，或同时使用糖皮质激素、抗凝血药者易造成胃肠道损害，应慎用。
二、 立题依据：
资料显示， 氨基比林咖啡因片中主要含两种成分（氨基比林和咖啡因），这两种成分单独过量应用均可导致死亡。国内外已经有对这两种成分致死率的单独研究。但未发现对这两种成分配合应用时致死性的相关研究。
氨基比林临床应用时主要发挥其解热镇痛作用，咖啡因因对中枢神经系统有兴奋作用，能够使减轻头痛的药的功效提高40%，并能使身体更快的吸收这些药品缩短起作用的时间。因此，很多非处方治疗头痛的药品中包含有咖啡因。据调查，目前市场上大量解热镇痛抗炎药物中同时含有氨基比林和咖啡因两种成分，但两者的配比各不相同，可见，对于两者同时应用的最佳配比目前还没有做过确切研究。
王晋颖（20062304030）
姚国富（200623040 ）
周 炜（200623040 ）
专 业：医学影像专业
班 级：06级4班
联系电话：13256734506
注：以上文献主要来源于中国期刊全文数据库 实验材料（包括动物的品种、规格、数量和来源；药品的名称、规格和来源；仪器设备等）
１、 实验动物：昆明系健康小白鼠２４０只，体重18-22g，雌雄各半，雌性未产无孕。
２、 药品与试剂：脑清片、氨基比林、咖啡因多量分别用蒸馏水溶解备用，溶解浓度xx（待定）。
干酵母至小鼠发热实验中对五个不同配比给药组及空白组给药后立即于背部皮下注入20%酵母悬液10ml/kg，然后0.5、1、2、4、6、8、10h各测肛温一次，分析五组解热效果。
预期结果及分析
１、 一期实验考虑到市场上常规解热镇痛药中氨基比林和咖啡因配比的 多样性，预测脑清片中氨基比林和咖啡因的配比不一定为最佳配比。但考虑实验动物（小白鼠）与人对这两种成分耐受性的不同，不可单从实验中对小白鼠的致死性上对临床用药做出定论，而应结合临床开展进一步的研究。
【适应症】用于缓解感冒、上呼吸道感染引起发热、头痛等症状，亦可用于神经痛、风湿痛、牙痛。