血液常规检验标准操作规程
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昆仑泌尿外科医院检验科
临检室作业指导书
文件编号;SZKL-LJ-01
版本/修订号;1/0
主题内容
血液常规检验标准操作规程
生效日期:20150101
页码;第1 页共5 页
血液常规检验标准操作规程
1.目的:
检测分析血液中红细胞、白细胞、血小板、血红蛋白等的数量和质量,对感染、炎症、血液系统疾病等进行辅助诊断、监测治疗效果等。
2.检测项目:
迈瑞BC-2600全自动血球仪上测定血常规19项。包括:白细胞计数(WBC)、中性粒细胞数(Neut#)、淋巴细胞数(Lymph#)、中间细胞计数(MID#)、中性粒细胞比率(Neut%)、淋巴细胞比率(Lymph%)、中间细胞比率(MID %)、红细胞计数(RBC)、血红蛋白浓度(Hb)、红细胞压积(Hct)、红细胞平均体积(MCV)、平均血红蛋白量(MCH)、平均血红蛋白浓度(MCHC)、红细胞体积分布宽度变异系数(RDW-CV)、红细胞体积分布宽度标准差(RDW-SD)、血小板计数(PLT)、平均血小板体积(MPV)、血小板体积分布宽度(PDW)、血小板压积(PCT)。
3.原理:
3.1 血细胞(WBC.RBC.PLT)数量和体积检测原理:电阻抗法。
3.2白细胞分类原理:电阻抗法。白细胞脉冲的大小是由被计数细胞在溶血素中大小决定的。
3.3 血红蛋白测定:采用氰化高铁血红蛋白(HICV)比色法。
3.4 RDW、MCH、MCV、MCHC、MPV、PCT、PDW为换算项目。
3.5 HCT测定原理:血细胞产生的脉冲信号的峰值与RBC容积成正比。
4.仪器:
厂商名:深圳迈瑞公司。型号:BC-2600。
5.试剂:
厂商名:深圳迈瑞公司。
5.1清洗液:注册号:粤深药临械(准)字2013第1400051。规格:5.5L
5.2溶血素:注册号:粤深药临械(准)字2013第1400021。规格:500ML。
5.3稀释液:注册号:粤深药临械(准)字2013第1400071。规格:20L。
5.4其它:迈瑞配套试剂:E-Z酶清洁剂,控头清洁剂等
6.标本的采集与运送
6.1 标本类型:静脉血或手指末梢血。
6.2 标本要求:标本用EDTA-K2 抗凝;
静脉血标本量应达到2ml;末梢血20µl。
6.3 标本运送:室温运送,4小时内完成检测。
6.4 标本拒收标准:严重溶血、凝固、血量少、无条码、无标识的血液标本不能进行检测。
7.操作步骤:
7.1 采集病人静脉血lml,加入含有EDTA-K2的真空管中,立即颠倒混匀8次。
7.2 将质控品从冰箱取出,在室温条件下放置15分钟,充分混匀后,与样本一同测定。7.3 开机:将仪器POWER开关置于ON。仪器自动进行清洗并进行空白计数,当空白计数值在允许范围内时可检测标本。
7.4 检查各种试剂量是否正常。
7.5 充分混匀的血液置于吸样针下,按下进样开关,仪器自动进行检测。
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7.6 观察仪器测定结果及直方图,必要时应手工计数及白细胞分类。
7.7 审核结果,打印报告。
8.血细胞的显微镜检查(用于对仪器法结果可疑时的复核)
8.1 镜检标准
8.1.1 医生明确要求涂片镜检;
8.1.2 仪器提示有原始或幼稚细胞、变异淋巴细胞、有核红细胞等异常需镜检;
8.1.3 新生儿标本需涂片镜检;
8.1.4 WBC≥20×10^9/L或≤2.0×10^9/L;
8.1.5淋巴细胞≥45%,需做涂片镜检,1-4岁儿童且血细胞计数及他结果正常者除外;
8.1.6 单核细胞≥15%;
8.1.7 嗜酸性粒细胞≥10%;
8.1.8 嗜碱性粒细胞≥3%
8.1.9 PLT>500×10^9/L或<60×10^9/L;
8.2.0 提示有PLT聚集,需涂片镜检;
8.2 镜检步骤
8.2.1 血涂片的制备
8.2.1.1 在距载玻片一端1cm的位置滴加约5µl的抗凝血;末梢血直接用干净玻片蘸取。8.2.1.2 用推片使血液沿其边缘展开,与载玻片30~40度角进行推片。
8.2.1.3 涂片完成后在空气中自燃晾干。
8.2.2 血涂片的染色
8.2.2.1 染色试剂:瑞氏染色液。
8.2.2.2 染色步骤
a. 用蜡笔在血膜两头画线,然后将血涂片平放在染色架上。
b.加瑞氏染液数滴,以覆盖整个血膜为宜,染色约1分钟。
c.滴加约等量的缓冲液与染液混合,室温下染色5-10分钟。
d. 用流水冲去染液,待干燥后镜检。
8.2.2.3 镜检观察要求
a. 将湿片在高倍镜下观察涂片、染色是否良好,否则重新涂片染色。
b. 选择涂片体尾交界、细胞分布均匀不重叠部分进行镜检。
c. 在高倍镜下辨认细胞不清楚时,必须待玻片干后用油镜观察。
8.2.2.4 镜检观察的处理
a. 根据仪器报警提示的内容,确认镜下观察结果是否与仪器提示一致。
b. 发现原始及幼稚白细胞,则必须进行手工分类;如不能确定细胞种类,则报告异常细胞的比例。
c. 如果镜下发现有核红细胞,则必须对白细胞进行校正。
d. 如果镜下观察有血小板聚集,则必须手工冲池计数血小板;如果是EDTA﹒K2引起的血小板聚集,可用109mmol/L枸橼酸钠抗凝剂采集标本,结果需要进行换算。
e. 多发性骨髓瘤、冷球蛋白血症引起的红细胞聚集,可将血液用仪器稀释液稀释3倍,然后37℃水浴箱中10分钟后,立即上机检测,结果需要进行换算。
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