脑膜炎奈瑟氏菌及其检测方法

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脑膜炎奈瑟氏菌及其检测方法

一、脑膜炎奈瑟氏菌

脑膜炎奈瑟氏菌(学名Neisseria meningitidis),又名脑膜炎双球菌或脑脊髓膜炎双球菌,是一种革兰氏阴性菌,主要寄居在人体鼻咽部,可通过飞沫传播。

人感染脑膜炎奈瑟氏菌将引起败血症或流行性脑脊髓膜炎(简称流脑)。

(1)败血症:该菌自鼻咽部侵入,进入血循环致人体发病。其释放内毒素引起皮肤瘀点、瘀斑为局部施瓦茨曼反应,激活补体,血清炎症介质明显增加,较其他革兰阴性菌强5-10倍,也较其他内毒素更易激活凝血系统,因此在休克早期便出现弥散性血管内凝血,及继发性纤溶亢进,进一步加重微循环障碍、出血和休克,最终造成多器官功能衰竭。

(2)行性脑脊髓膜炎:该细菌侵犯脑膜,进入脑脊液,释放内毒素等引起脑膜和脊髓膜化脓性炎症及颅内压升高,出现惊厥、昏迷等症状。严重脑水肿时形成脑疝,可迅速致死。

二、脑膜炎奈瑟氏菌检测方法

1.直接涂片检查

(1)瘀血斑:刺破瘀斑血印片,或血膜片,干燥固定后革兰染色阴性双球菌,呈肾形成对排列,可初诊。

(2)脑脊液:取脑脊液离心后沉淀物涂片,干燥固定后革兰染色,若发现中性粒细胞内或胞外革兰阴性双球菌,呈肾形成对排列,结合临床可确诊。

2.细菌培养法

将标本葡萄糖肉汤增菌培养液,直接接种于血琼脂平板、巧克力琼脂平板,置于5%-10%CO2环境中,35℃培养18-24小时后可见圆形、灰褐色、湿润、光滑、边缘整齐、直径1-2mm的小菌落,经涂片证实为革兰阴性双球菌,并进一步根据相应的生化反应等试验予以鉴定。

3.生化鉴定

主要通过氧化酶、糖类发酵以及培养生长特点进行。

①细菌形态呈肾形;

②氧化酶试验阳性;

③触酶试验阳性;

④分解葡萄糖、麦芽糖产酸不产气;

⑤荚膜多糖抗原直接凝集试验。

4.血清凝集法

根据荚膜多糖可将脑膜炎奈瑟氏菌分为A、B、C、D、X、Y、Z、29E、W135、L、H、I、K等13个血清群,其中A、B、C群最为多见,约占90%。

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5.核酸扩增法

核酸扩增技术,即聚合酶链式反应(polymerase chainreaction,PCR),其基本原理是设计、合成两条寡核苷酸,作为引物,对应于待测病原微生物某一段特异性序列的两端,然后在体外模拟DNA体内复制的过程反复扩增,使靶序列放

大上万倍甚至上百万倍而被检测出来。

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