耐万古霉素肠球菌基因分型及耐药性分析

ＤＯＩ：

１０．１３６０２／ｊ．ｃｎｋｉ．ｊｃｌｓ．２０１９．０７．０６

·临床实验研究·

耐万古霉素肠球菌基因分型及耐药性分析

程晨１

，谭枝微１

，刘颖梅２

，纵帅３

，姜飞３

，谢硕硕１

，顾兵１，３

（１．徐州医科大学医学技术学院，江苏徐州２２１００４；２．北京中日友好医院临床微生物与感染实验室，北京１０００２９；３．徐州医科大学附属医院检验科，江苏徐州２２１００２）

摘要：目的　明确万古霉素耐药肠球菌（ｖａｎｃｏｍｙｃｉｎｒｅｓｉｓｔａｎｔｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｉ，ＶＲＥ）耐药基因型别及耐药性，指导临床用药。方法　

收集北京中日友好医院２０１６年１０月至２０１７年１０月临床分离的１７株ＶＲＥ，

Ｖｉｔｅｋ２Ｃｏｍｐａｃｔ全自动细菌鉴定及药敏分析系统检测其对临床常用１４种抗菌药物的敏感性，

Ｅ ｔｅｓｔ法确证其对万古霉素和替考拉宁的药物敏感性；ＰＣＲ法检测１７株ＶＲＥ的耐药基因ｖａｎＡ、

ｖａｎＢ、ｖａｎＣ１、ｖａｎＣ２／３，并经测序验证。结果　１７株ＶＲＥ均为耐万古霉素屎肠球菌，均对环丙沙星、左氧氟沙星、莫西沙星、青霉素１００％耐药，对利奈唑胺、替加环素、奎奴普丁／达福普汀等敏感；其耐药基因型均为ｖａｎＡ型，其中有４株ｖａｎＢ表型－ｖａｎＡ基因型。结论　所收集的ＶＲＥ均对万古霉素高水平耐药，耐药型均为ｖａｎＡ型，应加强临床分离株的耐药监控，合理使用抗菌药物。关键词：万古霉素耐药肠球菌；Ｅ ｔｅｓｔ法；

聚合酶链反应；耐药基因型中图分类号：

Ｒ４４６．５ 文献标志码：ＡＧｅｎｏｔｙｐｅａｎｄａｎａｌｙｓｉｓｏｆｄｒｕｇｒｅｓｉｓｔａｎｃｅｆｏｒｖａｎｃｏｍｙｃｉｎｒｅｓｉｓｔａｎｔｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｉ

ＣＨＥＮＧＣｈｅｎ１，

ＴＡＮＺｈｉｗｅｉ１，ＬＩＵＹｉｎｇｍｅｉ２，ＺＯＮＧＳｈｕａｉ３，ＪＩＡＮＧＦｅｉ３，ＸＩＥＳｈｕｏｓｈｕｏ１，ＧＵＢｉｎｇ１，３（

１．ＳｃｈｏｏｌｏｆＭｅｄｉｃａｌＴｅｃｈｎｏｌｏ

ｇｙ，ＸｕｚｈｏｕＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｘｕｚｈｏｕ２２１００４，Ｊｉａｎｇｓｕ；２．ＣｌｉｎｉｃａｌＭｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙａｎｄＩｎｆｅｃｔｉｏｎＬａｂｏｒａｔｏｒｙ，Ｃｈｉｎａ ＪａｐａｎＦｒｉｅｎｄｓｈｉｐＨｏｓｐｉｔａｌ，Ｂｅｉｊｉｎｇ１０００２９；３．ＣｌｉｎｉｃａｌＬａｂｏｒａｔｏｒｙ，ｔｈｅＡｆｆｉｌｉａｔｅｄＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＸｕｚｈｏｕＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｘｕｚｈｏｕ２２１００２，Ｊｉａｎｇｓｕ，Ｃｈｉ ｎａ）

Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｔｏｉｄｅｎｔｉｆｙｔｈｅｇｅｎｏｔｙｐｅａｎｄｄｒｕｇｒｅｓｉｓｔａｎｃｅｏｆｖａｎｃｏｍｙｃｉｎｒｅｓｉｓｔａｎｔｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｉ（ＶＲＥ）ｆｏｒｇｕｉｄｉｎｇｔｈｅｃｌｉｎｉｃａｌ

ｍｅｄｉｃａｔｉｏｎ．Ｍｅｔｈｏｄｓ　ＳｅｖｅｎｔｅｅｎＶＲＥｓｔｒａｉｎｓｉｓｏｌａｔｅｄｆｒｏｍＣｈｉｎａ ＪａｐａｎＦｒｉｅｎｄｓｈｉｐＨｏｓｐｉｔａｌｆｒｏｍＯｃｔｏｂｅｒ２０１６ｔｏＯｃｔｏｂｅｒ２０１７ｗｅｒｅｃｏｌｌｅｃｔｅｄａｎｄｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ，

ａｎｄｔｈｅｓｕｓｃｅｐｔｉｂｉｌｉｔｉｅｓｔｏｆｏｕｒｔｅｅｎｃｏｍｍｏｎｌｙｕｓｅｄａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌｄｒｕｇｓｗｅｒｅｄｅｔｅｃｔｅｄｂｙＶｉｔｅｋ２ＣｏｍｐａｃｔＡｕｔｏ ｍａｔｉｃＢａｃｔｅｒｉａｌＩｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎａｎｄＤｒｕｇＳｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙＡｎａｌｙｓｉｓＳｙｓｔｅｍ．ＴｈｅｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｉｅｓｔｏｖａｎｃｏｍｙｃｉｎａｎｄｔｅｉｃｏｐｌａｎｉｎｗｅｒｅｃｏｎｆｉｒｍｅｄｂｙＥ ｔｅｓｔ．ＴｈｅｒｅｓｉｓｔａｎｔｇｅｎｅｖａｎＡ，ｖａｎＢ，

ｖａｎＣ１ａｎｄｖａｎＣ２／３ｉｎｔｈｅｓｅｖｅｎｔｅｅｎＶＲＥｓｔｒａｉｎｓｗｅｒｅｄｅｔｅｃｔｅｄｂｙＰＣＲａｎｄｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｗｅｒｅ

ｃｏｎｆｉｒｍｅｄｂｙｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇ．Ｒｅｓｕｌｔｓ　ＡｌｌｔｈｅｓｅｖｅｎｔｅｅｎＶＲＥｓｔｒａｉｎｓｗｅｒｅｃｏｎｆｏｒｍｅｄｔｏｂｅｖａｎｃｏｍｙｃｉｎ ｒｅｓｉｓｔａｎｔｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓａｎｄｃｏｍ

ｐｌｅｔｅｒｅｓｉｓｔａｎｔｔｏｃｉｐｒｏｆｌｏｘａｃｉｎ，ｌｅｖｏｆｌｏｘａｃｉｎ，ｍｏｘｉｆｌｏｘａｃｉｎ，

ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｎ，ｂｕｔｓｅｎｓｉｔｉｖｅｔｏｌｉｎａｚｏｌａｍｉｎｅ，

ｔｅｇｉｃｙｃｌｉｎｅａｎｄｑｕｅｎｕｐｔｉｎｅ／ｄａｆｏｓ ｔｉｎｅ，ｅｔｃ．ＴｈｅｒｅｓｉｓｔａｎｔｇｅｎｏｔｙｐｅｏｆｔｈｅｓｅｖｅｎｔｅｅｎｓｔｒａｉｎｓｗａｓａｌｌｖａｎＡ，

ｏｆｗｈｉｃｈｆｏｕｒｗｅｒｅｖａｎＢｐｈｅｎｏｔｙｐｅ ｖａｎＡｇｅｎｏｔｙｐｅ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ　ＴｈｅＶＲＥｓｔｒａｉｎｓｃｏｌｌｅｃｔｅｄｉｎｔｈｉｓｓｔｕｄｙｗｅｒｅａｌｌｈｉｇｈｌｙｒｅｓｉｓｔａｎｔｔｏｖａｎｃｏｍｙｃｉｎ，ａｎｄｔｈｅｄｒｕｇｒｅｓｉｓｔａｎｔｇｅｎｏｔｙｐｅｗａｓｖａｎＡ，ｓｏｔｈｅｍｏ

ｎｉｔｏｒｉｎｇｆｏｒｄｒｕｇｒｅｓｉｓｔａｎｃｅｏｆｃｌｉｎｉｃａｌｉｓｏｌａｔｅｓａｎｄｒａｔｉｏｎａｌｕｓｅｏｆａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓｓｈｏｕｌｄｂｅｓｔｒｅｎｇｔｈｅｎｅｄ．

Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｖａｎｃｏｍｙｃｉｎｒｅｓｉｓｔａｎｔｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｉ；Ｅ ｔｅｓｔｍｅｔｈｏｄ；

ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ；

ｄｒｕｇｒｅｓｉｓｔａｎｔｇｅｎｏｔｙｐｅ

１９８８

年英国首次报道万古霉素耐药肠球菌（ｖａｎｃｏｍｙｃｉｎｒｅｓｉｓｔａｎｔｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｉ，ＶＲＥ），随后１９９３年北美，１９９４年新加坡［１

］均报道当地ＶＲＥ的出现，ＶＲＥ已经在全球范围内成为院内感染的重要病原菌之一。ＶＲＥ还存在将万古霉素耐药性传递到金黄色葡葡球菌的危险，导致万古霉素耐药金黄色葡萄球菌（ｖａｎｃｏｍｙｃｉｎ ｒｅｓｉｓｔａｎｔＳｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓａｕｒｅｕｓ，

ＶＲＳＡ）的出现［２

］。近年来，中国ＶＲＥ的流行率相比欧美较低，但在中国各地都有报道［３ ４

］，需对ＶＲＥ进

行密切监测并控制其播散。此篇研究对分离出的

ＶＲＥ菌株进行耐药表型和基因型研究，

从而了解其流行情况，为临床治疗提供依据。

１　材料与方法１．１　

菌株来源　１７株ＶＲＥ菌种均来自２０１６年１０月至２０１７年１０月北京中日友好医院临床微生物与感染实验室鉴定后的冷冻保存菌株，标本来源包括尿液１０株，全血２株，胆汁１株，腹水１株，血导管

基金项目：国家自然科学基金（８１８７１７３４）；江苏省卫生计生委科研项目（Ｈ２０１６３１）

。 作者简介：

程晨，１９９６年生，男，硕士研究生，临床检验诊断学专业；谭枝微，１９８５年生，女，硕士研究生，主管技师，临床检验诊断学专业。程晨撰写论文，参与实验；谭枝微参与实验，为共同第一作者。

通信作者：顾兵，博士，副研究员，Ｅ ｍａｉｌ：ｇｂ２００３１１２９＠１６３．ｃｏｍ。