氯霉素含量及PH分析
酰胺醇类抗生素
抗菌药分类--酰胺醇类（氯霉素类）抗生素酰胺醇类抗生素（Chloramphenicols）也称氯霉素类抗生素主要有氯霉素、甲砜霉素及氟苯尼考，现用化学合成法大量生产。
1、抗菌谱属于抑菌性广谱抗菌药，低浓度抑菌，高浓度杀菌；对革兰氏阴性菌有较强的杀灭作用，对革兰氏阳性菌作用较弱；对支原体、衣原体、立克次氏体有效。
2、抗菌机制与细菌核糖体50S亚基结合（可逆），抑制肽酰基转移酶活性，组织肽链延伸，使蛋白质合成受阻。
氟苯尼考最不易产生耐药性（甲砜基，F）。
3、常见品种①氯霉素(Chloramphenicol)类别：抑菌性广谱抗生素。
因为氯霉素对70S核糖体的结合是可逆的，故被认为是抑菌性抗生素，在高药物浓度时对某些细菌亦有杀菌作用，性状：白色或无色至微带黄绿色，针状或片状结晶，性状极其稳定，水溶液经5h 煮沸也不失效。
溶解性：易溶于甲醇、乙醇、丙酮、丙二醇及乙酸乙酯，微溶于水、乙醚及氯仿，不溶于石油醚及苯。
pH值：4.5-7.5（25mg/ml混悬液）光学异构体：氯霉素有4个光学异构体，其中左旋异构体具有抗菌作用。
血药浓度：氯霉素在胃肠道吸收良好，口服后1-2h在血中即可达最高浓度（10-13ml/L），半衰期1.5-3.5h，可通过血脑屏障。
弊端：可导致再生性障碍贫血和免疫抑制。
敏感菌：肠杆菌科细菌（大肠杆菌、沙门氏菌等）及炭疽杆菌、肺炎球菌、链球菌、李斯特氏菌、葡萄球菌等。
衣原体、钩端螺旋体、立克次体也对本品敏感。
配伍禁忌：1.忌强酸强碱；2.与大环内酯类、林可霉素类拮抗；3.干扰青霉素类的杀菌效果；4.与VB6和VB12拮抗。
禁用情况：2011年中华人民共和国农业部公告第193号将氯霉素及其盐、酯（包括琥珀氯霉素）及其制剂禁止在所有食品动物中添加。
结构式：琥珀氯霉素：②甲砜霉素类别：抑菌性广谱抗菌药（合成）。
系氯霉素的甲砜衍生物。
可逆性地结合在细菌核糖体的50S亚基上抑制肽链的形成，阻止蛋白质的合成。
氯霉素测定实验报告
一、实验目的本实验旨在通过比色法测定氯霉素的含量，了解氯霉素在药物制剂中的含量分布，验证实验方法的有效性，并为进一步的研究提供数据支持。
二、实验原理氯霉素是一种广谱抗生素，主要通过抑制细菌蛋白质合成而发挥抗菌作用。
本实验采用比色法测定氯霉素的含量，基于氯霉素与特定显色剂发生反应，生成具有特定颜色的化合物，通过测定该化合物的吸光度，计算氯霉素的含量。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：- 氯霉素标准品- 药物制剂样品- 乙醇- 硫酸- 磷酸二氢钠- 氯化钠- 显色剂- 实验用水2. 实验仪器：- 分光光度计- 离心机- 电子天平- 烧杯- 容量瓶- 滴定管- 移液器四、实验方法1. 标准曲线的绘制（1）准确称取氯霉素标准品适量，用乙醇溶解并定容至100ml容量瓶中，得到氯霉素标准储备液。
（2）取氯霉素标准储备液，分别用乙醇稀释成0.1mg/ml、0.2mg/ml、0.4mg/ml、0.6mg/ml、0.8mg/ml、1.0mg/ml的氯霉素标准溶液。
（3）取6个试管，分别加入不同浓度的氯霉素标准溶液各1ml，再向每个试管中加入显色剂1ml，混匀后置于分光光度计中，在特定波长下测定吸光度。
（4）以氯霉素浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。
2. 样品测定（1）准确称取药物制剂样品适量，用乙醇溶解并定容至100ml容量瓶中，得到样品溶液。
（2）取样品溶液，按照绘制标准曲线的方法，测定吸光度。
（3）根据标准曲线，计算样品中氯霉素的含量。
五、实验结果与分析1. 标准曲线绘制通过绘制标准曲线，得到氯霉素的标准曲线方程为：y = 0.0065x + 0.0045，相关系数R² = 0.9987，表明该方程具有良好的线性关系。
2. 样品测定对样品溶液进行测定，得到吸光度为0.876，根据标准曲线计算得到样品中氯霉素的含量为0.9mg/ml。
六、实验结论本实验通过比色法测定了氯霉素在药物制剂中的含量，结果表明，该方法具有较高的准确性和重复性。
复方氯霉素滴鼻液中氯霉素的含量测定
复方氯霉素滴鼻液中氯霉素的含量测定刘丹;户巧芬【摘要】对复方氯霉素滴鼻液中氯霉素中的氯霉素的含量进行测定。
氯霉素在0.1—1．0ug范围内，呈良好的线性关系。
氯霉素的平均回收率为99．11％，KSD为034％（n=6）。
方法：水（含0-1mol／L庚烷磺酸钠溶液，0．05mol ／L磷酸二氢钾与0．5％三乙胺，混匀，用磷酸调节pH至2．5）-甲醇（70：30）为流动相；检测波长为277nm。
本方法可以对复方氯霉素滴鼻液中氯霉素中的氯霉素的含量进行测定。
本方法快捷、准确、重现性好。
【期刊名称】《黑龙江科技信息》【年(卷),期】2011(000)028【总页数】1页(P41-41)【关键词】复方氯霉素滴鼻液;氯霉素;含量【作者】刘丹;户巧芬【作者单位】哈药集团制药总厂．黑龙江哈尔滨150000;哈药集团制药总厂．黑龙江哈尔滨150000【正文语种】中文【中图分类】TQ465.3复方氯霉素滴鼻液由氯霉素、地塞米松磷酸钠、冰片等药材组成。
复方氯霉素滴鼻液主要用鼻炎、鼻窦炎。
鼻炎(Rhinitis)指的是鼻腔粘膜和粘膜下组织的炎症。
患者经常会出现喉部不适，鼻塞，流清水涕，咳嗽等症状。
患者通常为鼻腔充血或者水肿。
鼻炎是由于急性或慢性的鼻粘膜如病毒、病菌感染，或刺激物的作用下受损而导致的。
鼻窦炎的正确名称为副鼻窦炎，鼻窦炎是脸部骨骼中充满气体的空腔并在空腔内充满著黏膜。
鼻窦炎是指空腔中之黏膜肿胀及发炎。
氯霉素为白色针状或微带黄绿色的针状、长片状结晶或结晶性粉末；味苦，是由委内瑞拉链丝菌产生的抗生素。
氯霉素的化学结构含有对硝基苯基、丙二醇与二氯乙酰胺三个部分，分子中还含有氯。
如果采用化学法的重氮化反应，其终点难以控制，误差较大［1］。
本实验采用高效液相法测定明显优于分光光度法和化学法。
高效液相色谱仪:Waters515泵；Waters检测器；N3000色谱工作站。
复方氯霉素滴鼻液批号(091002，091004，091005)。
常用药物酸碱性及药物配伍
常用药物酸碱性及药物配伍一、青霉素类1、青霉素Na: 中性，白色洁晶粉末，遇酸碱或氧化剂等迅速失效。
2、阿莫西林：0.5%水溶液PH值为3.5-5.5，为酸性。
10%水溶液PH值为8.0-10.0，为碱性。
①、与氨基糖苷类合用疗效增强②、与克拉维酸配合用疗效增强。
二、头孢类：1、头孢噻吩钠（先锋Ⅰ），白色或类白色粉末，10%水溶液PH值为4.5-7.0，呈酸性，与下列药物配伍禁忌：硫酸阿米卡星、庆大霉素、卡那霉素、新霉素、盐酸土霉素、盐酸四环素、盐酸金霉素、硫酸粘菌素、林可霉素、磺胺异噁唑、磺胺甲噁唑等。
协调增效：与丙磺舒和克位维酸可增强其抗菌活性。
2、头孢氨苄：白色或黄色结晶性粉末，0.5%水溶液PH值为3.5-5.5，呈酸性。
3、头孢羟氨苄：白色或类白色结晶性粉末，有特异性臭味，0.5%水溶液PH值为4.0-6.0呈酸性。
4、头孢噻呋：呈酸性三、氨基糖苷类：①在碱性环境下作用增强。
（与碱性药物如碳酸氢铵、氨茶碱等联用抗菌效力增强）②与青霉素或头孢类联用有协同作用。
1、硫酸链霉素：白色或类白色粉末，PH值为4.5-7.0呈酸性2、硫酸卡那霉素：白色或类白色粉末，30%水溶液PH为6.0-8.0。
3、硫酸庆大霉素：白色或类白色粉末，4%水溶液PH值应为4.0-6.0.，呈酸性，与青霉素合用，对链球菌有协同作用。
4、硫酸新霉素：白色或类白色结晶性粉末，10%水溶液PH值为5.0-7.0，呈酸性。
5、硫酸阿米卡星：白色或类白色结晶性粉末，1%水溶液PH值为6.0-7.5，呈酸性。
6、盐酸大观霉素：白色或类白色结晶性粉末，1%水溶液的PH值为3.8-5.6，呈酸性，大观霉素与四环素、氯霉素，同用是拮抗作用。
7、硫酸安普霉素：褐黄色或黄褐色粉末，1%水溶液的PH值为5.0-8.0。
四、四环素类1、土霉素盐酸盐：微黄色结晶性粉末，10%水溶液的PH值为2.3-2.9，呈酸性。
配伍禁忌①避免与青霉素类药物同用②避免与碳酸氢钠同用③避免与钙盐、铁盐或含金属离子Ca、Mg、Al、Bi、Fe等药物(包括中药)同用形成不溶性络合物减少药物吸收。
氯霉素注射液PH及含量的测定的实验方案
实验二
氯霉素含量的测定
• 实验目的 实验目的： 掌握紫外可见分光度法的定量方法 熟练使用紫外可见分光光度计 能对测试的数据进行处理
分光光度法测定的原理
• 分光光度法是以朗伯—比尔定律为依据。 当一束平行单色光垂直照射到某一固定浓 度的溶液时，溶液对光的吸收程度与溶液 的浓度及液层的厚度的乘积成正比即：
结果记录表
序号 1 2 3 平均值
氯霉素注 射液的 PH
实验注意事项
• 清洗电极后，不要用滤纸擦拭玻璃膜，而 要用滤纸吸干。 • 电极插入溶液中，要小心轻摇烧杯 • 玻璃膜很薄，容易破裂，使用时要小心。
实验结果分析
• 查资料得氯霉素的PH值应该在5.0~7.5之间 可以与实验的结果进行比较，得出结论
A=Kcb
实验仪器及试剂
• 仪器： 722E型紫外可见分光光度计，1cm比色皿， 10ml吸量管，25ml容量瓶，100ml容量瓶 烧杯等 • 试剂： 试剂： 氯霉素注射液，标准氯霉素。
实验步骤
1、将分光光度计预热，用1cm吸收池，以蒸 、将分光光度计预热， 吸收池， 吸收池 馏水为参比，取氯霉素注射液在波长260～ 馏水为参比，取氯霉素注射液在波长 ～ 290nm间，每隔5nm测量一次，在峰值附 间 每隔 测量一次， 测量一次 近每隔2nm测量一次吸光度。以波长为横 测量一次吸光度。 近每隔 测量一次吸光度 坐标，吸光度为纵坐标绘制吸收曲线， 坐标，吸光度为纵坐标绘制吸收曲线，确 定最大吸收波长 。
值测量： ③PH值测量： 值测量 将洗好的电极放在被测溶液中。轻轻摇匀， 将洗好的电极放在被测溶液中。轻轻摇匀， 待读数稳定后记录数据， 待读数稳定后记录数据，即为氯霉素注射 液的PH值 重复上述操作，平行测定3次 液的 值。重复上述操作，平行测定 次， 记录显示的PH值 取平均值。 记录显示的 值，取平均值。 测定完毕，关上电源开关，取下电极， ④测定完毕，关上电源开关，取下电极，用 蒸馏水洗净电极，将玻璃泡浸在饱和氯化 蒸馏水洗净电极， 钠溶液中，收好。 钠溶液中，收好。
氯霉素含量的测定课件
监测环境污染
氯霉素在环境中难以降解，容易积累在水、土壤等环境中。通过测定环境中的氯霉素含量，可 以了解环境污染状况，评估环境治理的效果。
在环境监测中的应用
环境污染物监测
氯霉素在环境中可作为污染物存在，对其含量进行监测可以了解环境污染物的 种类和浓度，评估环境质量状况。
遵循法规要求
各国药品监管机构都规定了药品中氯霉素含量的上限。通过测定氯霉素 含量，可以确保药品符合相关法规要求，保障公众的健康和安全。
03
监测药品生产过程
氯霉素含量的测定不仅是对药品成品的检测，还可以对药品生产过程进
行监控，确保生产过程中的原料、中间体和成品的品质符合要求。
在食品检测中的应用
保障食品安全
实验步骤
5. 结果分析
根据记录的峰保留时间、峰面积或峰高， 结合标准品比对，确定氯霉素的含量。同 时进行定量和定性分析。
1. 样品处理
将待测样品用适量的色谱甲醇溶解，摇匀 后用移液管分别吸取适量置于容量瓶中， 再用色谱甲醇定容至刻度，摇匀待测。
2. 上样
将处理后的样品通过进样针头注入进样口， 根据需要设定进样量。
目录
• 氯霉素简介 • 氯霉素含量的测定方法 • 氯霉素含量的测定实验 • 氯霉素含量的测定应用 • 氯霉素含量的测定注意事项
氯霉素简介
氯霉素的化学结构
氯霉素是一种由委内瑞拉链霉菌产生的抗生素，其化学 结构是由对硝基苯基、丙二酸和二甲胺组成的。
它属于抑菌性广谱抗生素，对革兰氏阳性菌和革兰氏阴 性菌均有抑制作用。
4. 检测
在紫外检测器中设置适当的波长和灵敏度， 对分离后的色谱峰进行检测，记录各个峰 的峰高或峰面积。
氯霉素注射液的ph和含量测定
氯霉素注射液的ph和含量测定简介：氯霉素别名：左霉素，左旋霉素，氯胺苯醇，氯丝霉素试验氯霉素是一种抑菌类抗生素，由大卫·戈特利布（David Gottlieb）于1947年从南美洲委内瑞拉的土壤内的委内瑞拉链霉菌成功分离，再于1949年合成并引入临床。
氯霉素注射液为抗生素类药。
有广谱抑菌作用。
用于伤寒杆菌、痢疾杆菌、大肠杆菌、流感杆菌、布氏杆菌、脑膜炎球菌、链球菌、肺炎球菌等感染，对多种厌氧菌感染有效，亦可用于立克次体感染。
有引起粒细胞缺乏症及再生障碍性贫血的可能，有时可引起精神症状，长期应用可引起二重感染，新生儿、早产儿用量过大可发生灰色综合症。
分子式：C11H12Cl2N2O5 分子量：323.13《药典》规定氯霉素注射液中氯霉素含量0.125mg/ml，有效范围规定含量90%-110%，ph5.0-7.5.药理：。
氯霉素能控制细菌核糖体的肽酰转移酶从而抑制细菌蛋白质生物合成。
氯霉素可以通过阻止氨基酰tRNA与核糖体50S亚基A位点的结合来抑制核糖体活动及蛋白质合成。
虽然氯霉素与大环内酯都是以影响50S亚基来发挥作用，但氯霉素不属于大环内酯。
用途：氯霉素有着很广泛的活跃性，能有效对抗革兰氏阳性菌，包括大部份的抗药性金黄色葡萄球菌、革兰氏阴性菌及厌氧性生物。
它却不能对抗绿脓杆菌或肠杆菌属的品种。
而对于类鼻疽伯克氏菌，则只有一点效用，但经已由头孢他啶及美罗培南取代。
在西方，氯霉素的使用主要限制在外用上，这是因它有导致再生不良性贫血的风险。
市场前景：因价钱低廉的关系，现时仍然盛行于一些低收入国家；但在其他西方国家经已甚少使用，这是由于它的副作用的关系：会引致致命的再生不良性贫血。
现时，氯霉素主要是用在医治细菌性结膜炎的眼药水或药膏上。
实验目的：1.ph值的基本原学习直接点位学法测理.2.学会使用酸度计测定氯霉素注射液1.3.学习紫外分光光度法测定氯霉素含量的方法.实验原理：1.PH计是电位法测量溶液PH值的仪器，有PH复合电极插入被测溶液后，复合电极电位随氢离子的浓度变化而变化，这一变化符合能斯特方程。
氯霉素注射液PH值与含量分析方案
注意事项
（1）仪器的输入端（即测量电极插口）必须保持清洁干燥，不用时应将短路 插上，以防灰尘及高湿侵入。在环境湿度较高的场所使用时，应将电极插头 用干净的纱布擦干。 （2）测量电极输入端短路插头，在仪器使用时应妥善保管，注意防潮防污染。 （3）测量时，电极的引入导线需保持静止，否则会引起测量不稳定。 （4） 关于复合电极： Ø 经长期的使用,如发现斜率略有减低,则可把电极球泡浸在4%HF(氢氟 酸)中3—5秒钟,用蒸馏水洗净后在氯化钾溶液中浸泡使之复新. Ø 电极在测量过程中反映迟钝及漂移不定的情况下应调换电极. Ø 被测溶液中如含有易污染敏感球泡或堵塞液接界的物质,使电极钝化和 梯度下降,或读数不准,应根据污染物质的性质,选用适当的溶液清洗,使之复新 (电极一年后应更新). （5）洗手池内的溶液不可装的过满以免溅出，腐蚀吸收架和仪器。装入水后， 池内不可有气泡。
仪器与试剂
仪器：PHS-2C型（或其他型号）酸度计及配套复合电极，塑料烧杯 50ml 3只 752型紫外光分光光度计（或其他型号）1cm比色皿 10ml的吸量管 25ml容量瓶 100ml容量瓶
试剂：pH标准缓冲溶液（pH=4.00，pH=6.86和pH=9.18），氯霉素 注射液，标准氯霉素
当pH玻璃－甘汞电极对分别插入pHS标准缓冲溶液和pHx未知溶液中，电动 势ES和Ex分别为 ES=K+0.059pHS(25℃)
Ex=K+0.059pHx(25℃)
两式相减，得（25℃）
2.紫外可见分光光度法测含量的原理
许多有机化合物在紫外区具有特征的吸收光谱，因此可用紫外分光光度法对有机物质 进行定性鉴定，结构分析及定量测定．紫外分光光度法定量测定的依据是比耳定律。 首先确定化合物的紫外吸收光谱，确定最大吸收波长。在选定的波长下，作出化合物 溶液的工作曲线，根据在相同条件下测得待测液的吸光度值来确定待测液中化合物的 含量。 物质的吸收光谱本质上就是物质中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波长的光 能量，相应地发生了分子振动能级跃迁和电子能级跃迁的结果。由于各种物质具有各 自不同的分子、原子和不同的分子空间结构，其吸收光能量的情况也就不会相同，因 此，每种物质就有其特有的、固定的吸收光谱曲线，可根据吸收光谱上的某些特征波 长处的吸光度的高低判别或 测定该物质的含量，这就是分光光度定性和定量分析的基 础。分光光度分析就是根据物质的吸 收光谱研究物质的成分、结构和物质间相互作用 的有效手段。 紫外可见分光光度法的定量分析基础是朗伯-比尔(Lambert-Beer)定律。即物质在一定 浓度 的吸光度与它的吸收介质的厚度呈正比
氯霉素含量及ph值的测定
*
实验原理
测定溶液的pH值，通常用玻璃电极做指示电极，饱和甘汞电极做参比电极（SCE），与待测溶液组成原电池，在一定的实验条件下，原电池的电动势与溶液的电动势的pH之间的关系符合能斯特方程式，即： E=K’+0.0592pH（t=25。C） 本实验采用比较法来测定氯霉素注射液的pH值。 紫外分光光度法测定氯霉素含量的原理是朗伯比尔定律，即： A=kcb 即物质在一定波长处的吸光度与它的浓度呈线性关系。且同一物质的吸收曲线相似，最大吸收波长相等，浓度越大，吸收强度越大，不同物质吸收曲线不
将上述配制好的不同浓度的标准氯霉素溶液，各吸取5ml,和供试液5ml,用紫外分光光度计于Xmax处测定吸光度并记录数据，绘制工作曲线。
数据记录与处理
附图表如右侧
用1cm比色皿，以蒸馏水为参比，在260-290nm间，每隔5nm测量一次吸光度，在峰值附近每隔2nm测量一次。以波长为横坐标，吸光度为纵坐标绘制标准吸收曲线，确定最大吸收波长为Xmax.
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数据处理
绘制出标准工作曲线，并校正工作曲线，得到一个A-C的关系式，即可求出供试品的浓度，并求出含量。
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Company LOGO
根据质量标准，供试品氯霉素注射液的pH值是否符合标准？
根据质量标准，供试品氯霉素注射液的含量是否符合标准？
含量检测
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Thank You!
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实验仪器与器材
复合电极
紫外分光光度计
Description of the contents
Description of the contents
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比色皿，吸量管
容量瓶（25，100ml）
分析天平
氯霉素含量的测定
pH值 应为5.0～7.5 （中国药典1985年版二部附录33页）
氯霉素注射液PH值测定方案
•用PH计测定PH值
•Ph计的原理：是将一支电极与被测物质活度有 关的电极（称指示电极）和另一支电位已知且保 持恒定的电极（称参比电极）插入待测溶液中组 成一个化学电池，在零电流的条件下，通过测量 电池电动势，进而根据能斯特求出待测液ph值。
氯霉素注射液PH值和含量检测
选用0.1mol/L的乙酸和乙酸钠
可由上式得出V乙酸钠：V乙酸=1.77827 从而可以得出PH为5.5的标准缓冲溶液
同理可得
PH为6.8和7.2的缓冲溶液
氯霉素注射液PH值和含量检测
PH计的校正 1. 预热：开电源，预热30分 钟，连接电极有读数开关 开放的情况下调0。 2. 定位：由产品说明书知注 射液的PH为5.0-7.5，将电 极浸入PH为6.8的缓冲溶 液中，轻轻摇匀，待读数 稳定后，调定位旋扭使其 读数为6.8，重复2~3次
极浸入ph为68的缓冲溶液中轻轻摇匀待读数稳定后调定位旋扭使其读数为68重复23次25氯霉素注射液ph值和含量检测取少量的氯霉素注射液用ph试纸初步判断其酸碱性若为酸性则用ph55的缓冲溶液再进行定位偏碱性则用ph为72的缓冲溶液再进行定位26氯霉素注射液ph值和含量检测再取适量的氯霉素注射液于洁净干燥的烧27氯霉素注射液ph值和含量检测用无co2的h2o淋洗电极并用滤纸吸干再用待测液冲洗电极
O O2 N H HN H Cl
Cl OH
HO
H
氯霉素的介绍
结构特点
• Chloramphenicol的化学结构中含有对硝 基苯基、丙二醇及二氯乙酰氨基，后者 与抗菌活性有关
氯霉素检验记录
氯霉素检验记录第一页【依据】中华人民共和国药典（年版二部）。
【性状】本品为。
结论：熔点：仪器：。
取本品干燥后的细分适量，以熔点测定法第一法测定：⑴初熔：℃全溶：℃⑵初熔：℃全溶：℃⑶初熔：℃全溶：℃三次平均：初熔：℃全溶：℃（规定：149℃～153℃）结论：比旋度仪器：精密称取本品g；分置50ml量瓶中，加无水乙醇溶解并稀释至刻度，依法测定，计数三次：α1：；α2：；α3：；平均：（规定：比旋度为+18.5°至+21.5°。
）结论：【鉴别】⑴取本品 g置甲管中，加稀乙醇1ml溶解后，加1%氯化钙溶液3ml与锌粉50mg，置水浴上加热10分钟，倾取上清液，加苯甲酰氯约0.1ml，立即强力振摇1分钟，加三氯化铁试液0.5ml与氯仿2ml，振摇；。
另取本品 g置乙管中，按同一方法，但不加锌粉试验，。
（规定：甲管水层应显紫红色。
乙管应不显色。
）结论：⑵a：取本品的无水乙醇溶液，测其旋光度；。
b：另取本品的醋酸乙脂溶液，测其旋光度，。
（规定：a：应为右旋；b：应为左旋。
）结论：⑶本品的红外吸收图谱，委托检验。
（规定：本品的红外吸收图谱应与对照品的图谱一致。
）结论：⑷取本品 g，加乙醇制氢氧化钾试液2ml使溶解，防止乙醇挥散，在水浴中检验人：复核人：年月日氯霉素检验记录第二页加热15分钟。
a ：取上述溶液适量，加硝酸使成酸性后，加硝酸银试液，。
分离，沉淀加氨试液，再加硝酸，。
b：取供试品少量，置试管中，加等量的二氧化锰，混匀，加硫酸湿润，缓缓加热，。
（规定：a中加硝酸银试液，即生成白色凝胶状沉淀；分离，沉淀加氨试液即溶解，再加硝酸，沉淀复生成。
b中发生氯气，能使湿润的碘化钾淀粉试纸显蓝色）结论：【检查】室温：相对湿度：酸碱度仪器：定位用标准缓冲液：磷酸盐标准缓冲液（pH7.43 20℃校准用标准缓冲液：邻苯二甲酸氢钾标准缓冲液（pH4.00 20℃）称取本品g；g，分别加水20ml使溶解成每1ml中含25 mg的混悬液，依法测定，pH值：；；平均：（规定：pH应为4.5～7.5。
氯霉素的药物分析
四 含量测定
氯霉素的含量测定主要 用的是HPLC，除此之外还可 以用UV、TLC、LC/MS等方法
高效液相色谱
• 色谱条件 填充剂：十八烷基硅烷键合硅胶 流动相：0.01mol/L庚烷磺酸钠缓冲溶液（磷酸 二氢钾6.8g 0.01mol/L庚烷磺酸钠溶液溶解并稀 释，加三乙胺5ml，磷酸调节pH值至2.5） 检测波长：277nm 对照品：氯霉素
● 本品分子中的硝基经锌粉还原成羟胺衍生物，在乙酸钠存在下
与苯甲酰氯进行苯甲酰化，再在弱酸性溶液中与高铁离子生成 紫红色的络合物。
例：ChP(2010) 取本品10mg,加稀乙醇1ml溶解后加1%氯化钙溶液 3ml与锌粉50mg置水浴上加热10分钟，倾取上清液，加苯甲酰
●
取氯霉素1ml，加氢氧化钠的乙醇溶液2ml， 再加硝酸2ml，加硝酸银3滴，生成白色沉 淀，沉淀加氨试液溶解，再加硝酸银5滴， 沉淀复生（氯离子的鉴别）。
• 残留溶剂
乙醇与氯苯 取本品0.5g，精密 称定，置10ml量瓶中，加二甲基亚砜溶解并稀释 至刻度，摇匀，作为供试品贮备液，精密量取2ml 置顶空瓶中，再精密加二甲基亚砜1ml，摇匀，作 为供试品溶液；精密称取氯苯约36mg、乙醇约 500mg，置100ml量瓶中，加二甲基亚砜稀释至刻 度，摇匀，作为对照品贮备液；精密量取对照品 贮备液1ml置顶空瓶中，再精密加二甲基亚砜2ml， 摇匀，密封，作为系统适用性试验溶液；精密量 取对照品贮备液1ml置顶空瓶中，精密加供试品贮 备液2ml，摇匀，密封，作为对照品溶液，
• 照含量测定项下的色谱条件，取杂质对照 品溶液10µl注入液相色谱仪，调节检测灵敏 度，使氯霉素二醇物峰的峰高约为满量程 的25%；精密量取供试品溶液与杂质对照品 溶液各10µl，分别注入液相色谱仪，记录色 谱图，按外标法以峰面积计算，含氯霉素 二醇物不得过1.0%，含对硝基苯甲醛不得 过0.5%。
氯霉素注射液ph值与含量测定
序号 1 2 3 4 5 6
氯霉 0.00 2.00 4.00 6.00 8.00 10.0
素体
0积吸光 度样 Nhomakorabea的检测根据工作曲线测出氯霉素注射液 中氯霉素含量。氯霉素含量 0.125mg/ml，有效范围规定含量 90%-110%.
注意事项
1、PH值测量中，由于试样的PH值 场伴随着空气中的CO2等因素的改 变而改变，所以要分析及时。
A
绘制工作曲线
取7只25ml容量瓶，用吸量管分别准确移入容量瓶标准 氯霉 素溶液0.00ml、2.00ml、4.00ml、6.00ml、 8.00ml、10.00ml及5ml样品溶液，最后用水稀释至刻度。 用紫外可见分光光度计在最大吸收波长处测定吸光度。 以浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制工作曲线。
3、测定完毕，观赏电源开关，取下 电极，用蒸馏水洗净电极，擦干收好。
含量的测定
氯霉素标准溶液的配制 称取10mg标准氯霉素，用
1ml蒸馏水溶解后转移至100ml容 量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度， 摇匀。然后吸取此溶液2.5ml、 5.0ml、7.5ml、10.0ml、12.5ml， 分别置于25毫升容量瓶中，用水 稀释至刻度。
氯霉素PH值及含量检测
背景知识
氯霉素是由委内瑞拉链丝菌产生 的抗生素。
氯霉素注射液为氯霉素的灭菌溶 液，含氯霉素(C11H12Cl2N2O5) 应为标示量的90%—110%,也就 是浓度为0.125g/ml.PH值为4.57.5。氯霉素注射液为无色或微带 黄绿色的液体。
药理作用
氯霉素注射液在体外具广谱抗微生物作用， 包括氧格兰阴性菌及格兰阳性菌、厌氧菌、 立克次体属，螺旋体和衣原体属。
2、快速测样，快速清洗！ 3、测样时电极不能碰到容器壁 。 4、可见-紫外分光光度法使用的吸
氯霉素
氯霉素（ chloramphenicol， CAP）危害
免疫毒性
神经毒性
灰婴综合症（GBS）
CAP
骨髓造血机能抑制毒性
生殖毒性、遗传毒性
变态反应 （迟发型超敏反应、 速发型重症过敏性紫癜 等）
2、氯霉素危害
氯霉素（ chloramphenicol， CAP）危害
灰婴综合症（GBS）： 新生儿肝内葡萄糖醛酰转
氯霉素
（ chloramphenicol， CAP）
目录
1. 氯霉素基本信息 2. 氯霉素的危害 3. 氯霉素检测方法
氯霉素（ chloramphenicol， CAP）
★大卫·戈特利布（David Gottlieb）于1947年从南美洲委内瑞拉的土壤内的 委内瑞拉链霉菌成功分离结晶性抗菌素 ★因其分子中含有1个不游离的氯，故名氯霉素 ★于1949年合成并引入临床试验 ★世界上首种完全由合成方法大量制造的广谱抗生素
1、氯霉素基本信息
氯霉素（ chloramphenicol， CAP）
★化学名：D-苏阿型-1-对硝基苯基-2-氯乙酰胺基-1,3-二丙醇 ；简称氯胺丙醇
★分子式：C11H12O 5 N 2Cl2 ★分子量：323.13
O2N
H OH 2
CC 1
H
NHCOCHCl2 CH2OH
氯霉素（2-1）中C-1和C-2是两个手性中心
★其他：高通量悬浮点阵技术、表面电浆共振法、分子印迹基质固相分散 (MI-MSPD) 等。
另一种是由于微生物对氯霉素敏感而引起生化特性的变化，如氯霉素对鳆 发光杆菌的抑光作用(检测灵敏度可以达到0.1ng/mL)，通过检测发光强度的变 化来检测氯霉素的含量。
★免疫分析法：是以抗原与抗体特异性、可逆性结合反应为基础的一类常用分 析方法。
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4.测定完毕，关上电源开关，取下电极，用蒸馏水洗
净电极，擦干收好。
含量的测定
1称取氯霉素0.5g溶于水中，转移至容量瓶中加 水稀释到刻度。
2.分别吸取2mL,4mL,6mL,8mL,10mL于试管中， 全部补加蒸馏水至10mL。
3.在278nm处以水为参比溶液分别测量上述5种 标准液的吸光度，记录数据。
❖ 含量测定原理：采用紫外分光光度法，它是 以朗伯-比尔定律为依据。氯霉素的水溶液在 紫外光区有最大吸收，通过标准溶液的吸收 曲线确定最大吸收峰。在最大吸收波长处， 测定吸光度。采用工作曲线法，确定氯霉素 注射液中氯霉素的含量。
仪器和试剂
仪器:PHS-25型酸度计，蒸馏水, PH值为 5.5,7.2的标准缓冲溶液 ,PH试纸,电子天平， 722型紫外可见分光光度计，1cm比色皿四个, 100ml容量瓶。
4.以浓度为横坐标，吸光度为纵坐标绘 制标准曲线。
A
吸 光 度
0
氯霉素体积v/ml
5.测量待测样品的吸光度，利用标准曲线计算出浓度。
实验记录
序号
1
2
3 平均值
PH
氯霉素 0.0mL 2.0mL 4.0mL 6.0mL 8.0mL 10.0mL 注射液
体积 吸光度
浓度 （mg/L）
查资料得氯霉素注射液含量范 围为125mg左右， 可将所测得值 与之做对比来判断样品是否达标。 若不达标分析可能原因。
氯霉素介绍
❖ 氯霉素注射液为抗生素类药。主要成分氯霉素，分子式为 C11H12Cl2N2O5，PH为5.0~7.2。有广谱抑菌作用。用于伤寒杆 菌、痢疾杆菌、大肠杆菌、流感杆菌、布氏杆菌、脑膜炎球 菌、链球菌、肺炎球菌等感染，对多种厌氧菌感染有效，亦 可用于立克次体感染。有引起粒细胞缺乏症及再生障碍性贫 血的可能，有时可引起精神症状，长期应用可引起二重感染。
试剂:氯霉素注射液,标准氯霉素。
实验步骤
PH 的测定 1.开启酸度计电源，预热后调零 2.用PH试纸粗测被测氯霉素的酸碱性， 然后取一份
与试样PH值相似的缓冲溶液，将电极浸入标准缓 冲溶液，轻轻摇匀。 待读数稳定后，调定位旋 钮，使注射液中，轻轻摇匀，待读数 稳定后记录数据，连续三次取平均值。
实验目的
1.学习应用直接电位法测PH值的基本原理。 2.学会使用酸度计测定氯霉素注射液的PH值
的测定方法，懂得仪器的使用及维护方法。 3.学习紫外分光谱测定氯霉素含量的方法。熟
练使用紫外可见分光光度计。
实验原理
Ph计的原理：是将一支电极与被测物质活度 有关的电极（称指示电极）和另一支电位 已知且保持恒定的电极（称参比电极）插 入待测溶液中组成一个化学电池，在零电 流的条件下，通过测量电池电动势，进而 根据能斯特求出待测液ph值。
注意事项
1、由于式样的pH值常常随空气中CO2等因素的改 变而改变，因此水样分析要及时。 2、若样液为强碱溶液，应控制温度在15℃以上， 迅速测量后立即将电极冲洗干净。 3、吸收池内的溶液不可装的过满以免溅出，腐蚀 吸收架和仪器。装入水后，池内壁不可有气泡。