如何做不同检测系统的比对_2014

EP9-A2实施过程

一、仪器熟悉阶段 二、方法比对试验操作 三、初步数据检查 四、线性回归 五、计算预期偏倚及其可信区间 六、结果解释以及内部性能标准比较
一、 仪器熟悉

1.1仪器熟悉阶段

对待评方法和参比方法者必须熟悉以下工作：
操作 保养程序 样本准备方法 校准和监控功能
图4偏倚图-----单个结果差值对二种方法的均值
如果比较方法不是参考方法：
差异图：（单个试验方法结果—单个比较方法结果）对（试验方法均值+比较 方法均值）/2
比较方法为非参考方法
12
8
4
0 0 50 100 150 200 250 300
-4
-8
-12
第一次数据 第二次数据
图4偏倚图-----单个结果差值对二种方法的均值
如果比较方法是参考方法：
差异图：（观察到的单个试验方法结果—观察到的单个比较方法结果）对比 较方法均值
比较方法为参考方法
12
8
4
0 0 50 100 150 200 250 300
-4
-8
-12
第一次数据 第二次数据
3.4 检查组间离群值检查



超过2.5%（1个样本）的离群点，应调查是否存在干扰、人为错误或 仪器故障。 如果有几个分析物同时在同一仪器设备上评价出现明显偏差的样本的 其它分析物的结果，同时也应检查同一分析批的质量控制结果。 如未能查到明显原因则应停止实验，或另做40个新样品。
五、计算预期偏倚及其可信区间

5.1 线性回归法（当数据通过适合范围和均匀 离散度的检查）

残差

在Y轴方向上数据点与回归线之差 是测量围绕回归线的数据点的“离散度”。

标准误（Sy,x）是这些残差的标准差

线性回归
300 y = 1.002x - 0.429 R²= 0.986
250
200
150

精密度实验之后进行方法比对实验
Hale Waihona Puke Baidu
一天最多能选择并测定8个标本。 在熟悉仪器后，每天只能检测4个标本，在10～15 天内完成。 将患者标本分布在不同天内和不同批内更好。

精密度实验和方法比对实验同时进行



2 ． 7 数据收集

分析系统误差

仪器显示存在误差时收集的数据需成文，但在最后的数 据分析中不要包括在内。 记录任何操作者造成的有文件的误差，但在最后的数据 分析中不要包括在内。
分部偏倚法


r≥0.975（或r2≥0.95）则可认为X值取值范围合适。可用简单的直线回 归来估计斜率和截距。 如果r2≤0.95，则必须扩大数据浓度分布范围，再重新分析全部数据。 如果取值范围无法扩大，则可采用分部偏倚法代替回归方法来评价平 均偏倚。
3.6方差齐性检查
四、线性回归
1
2
3

2 ．5 样本测定序列

顺序中的浓度应尽可能随机排列 参比方法和待评方法可以有不同的开始顺序 指定第一次测定顺序，按反向顺序检测第二次（双 份）。

反向顺序可以减少交叉污染及漂移的影响。

2 ．6 时间和期限

最好使用测定当天的标本。 应在分析物稳定的时间段内测定。 对于全部标本，均应在两小时内测定完毕。 如储存标本，必须确保样本的稳定性，对两种方法 用同样的方式储存样本。
如何做不同检测系统 检验结果的比对
浙江省人民医院检验中心 胡庆丰
概述

为了提供优良的检验品质


-完整的质量体系 -定时的仪器校准 -稳定的质量控制 -优秀的室间质评

从而获得良好的检验结果
然而相同样本在多个相同或相似的仪 器上的检验结果常常存在较大的差异
不同仪器间存在差异的原因


3.5 X值合适范围的检验




对数据有必要作出一些假设，才能保证回归分 析的结果有效。 假设之一是X值没有误差。在临床实验室，这是 不可能的，因为每一个检测都存在内在误差。 但是如果数据的取值范围足够宽，则此种误差 对回归结果的影响可以忽略不计。 X值的取值范围是否够宽，可用相关系数r做粗 略的估计。

1.2 项目熟悉与校准：


按说明书规定周期、系统改变、试剂批号更改使 用校准品（溯源性） 目标是测定值与校准品指示值一致 测定值超出校准品指示值1/4PT应及时调整系数

1.3 检测系统评估


临床可报告范围（线性范围） 生物参考区间 线性 不准确度 (室间质评) 不精密度
二、方法学比对试验
分析方法的因素 ：
（1）使用不同的分析方法学； （ 2）分析前因素对样本的影响，包括不同类型测 量系统之间样本处理上的差异。 （3）分析方法之间不精密度上的差异；


校准方面的因素
（1）测量程序之间在校准上的差异； （2）不同批号校准物之间存在赋值误差和互通 性变异； （3）不同实验室场所同时使用降解率不同校准 物批号； （4）不同体外诊断厂家不同测量程序校准物的 互通性的差异；
y = 1.003x - 0.628 R²= 0.990
200
150
100
50
0 0 50 100 重复检测均值 150 200 线性 (重复检测均值) 250 300
B1：重复检测均值的散点图
第一张图是 （待评方法的双份测定均值）为Y对 （参比方法的双份 测定均值）为X的散点图。 使XY轴的原点和刻度一致，作一条通过原点，斜率为1的直线。
比对方法的选择

假定当测量系统最初引入到实验室已采取定量 测定系统可比性更综合的确认（CLSI EP9A2)。

比较不同检测系统不精密度的大小，最大CV 和最小CV之间的差异是否小于2倍。


如小于2倍，可使用国家标准（WST 407-2012 医 疗机构内定量检验结果的可比性验证指南）。 如大于2倍，则参照CLSI EP9-A2。
比较方法非参考方法
15
10
5
0 0 50 100 150 200 250 300
-5
-10
-15 比较方法非参考方法
如果比较方法是参考方法：
差异图：（试验方法均值—比较方法均值）对比较方法均值
比较方法为参考方法
15
10
5
0 0 50 100 150 200 250 300
-5
-10
-15 比较方法为参考方法
三、初步数据检查



3.1 组内双份测定的离群值检查 3.2 数据作图 3.3 线性关系的目测检查 3.4 方法间离群值的目测检查 3.5 X值合适范围的检验 3.6 方差齐性检查
3.1 方法内双份测定的离群值检查


分析时要用到两种方法： 1）计算每个样品双份测定差值的绝对值：
图2、试验方法均值对比较方法均值所有结果
300 y = 1.006x - 0.634 R²= 0.986 250 y = 0.997x - 0.227 R²= 0.985 200
150
100
50
0 0 50 第一次数据 100 第二次数据 150 200 250 线性 (第一次数据) 300
线性 (第一次数据)

具有比待评方法更好的精密度； 可能的情况下，不受已知干扰物质的干扰； 使用与待评方法相同的单位； 可能的情况下，有可溯源。

参比方法:

参考方法
新方法和参考方法间的测定差值作为偏倚

不是参考方法
新方法测定的真值不能被确定，两方法间测定
差值不能作为偏倚而仅仅是差值而已

2．3 测定范围





仪器及试剂因素
（1）校准后机上试剂的降解； （2）当同一方法用于一台以上的仪器时，使用不 同试剂批号，或不同包装、运输或储存条件； （3）仪器分析参数的差异，如不同仪器之间使用 相同试剂而稀释比例和温浴时间 （4）仪器漂移/故障；


CLIA’88
4、化验结果的比较 如果实验室对某一项目的测定采用两种相似的方 法，则所在组室的负责人必须每年两次对有关的化验 结果进行比较工作

建议增加样本数



用待评方法和参比方法对每一患者样本各作两 份测定

每份样品必须有足够量

（1）能够用待评方法作双份测定 （2）能够用参比方法作双份测定 （3）如果需要应能继续进行追踪实验。 可见样本至少要在5次检测量以上

样本量不足时

混合样本


一个患者得不到所需的样本量 可以将两个（但不能多于两个）病史相同，被测物浓度 也大致相近的患者标本混合使用 如果样本是全血，需要进行血清学配型 混合过程由于平均化可能掩盖了特殊性或者样本特定的 偏倚而导致两种方法比较的乐观假象
术语和定义

可比性：

不同检测系统或不同检验方法对一批病人标本测定结果的一 致程度。 同一项目应用不同的检测系统按照特定的要求进行测定，按 照统计学原理，将不同检测系统的测定结果进行比较的过程。 是可比性的基础，可比性是溯源性的目标。 临床检验结果准确，具有跨时空的可比性，是防病治病的需 要，也一直是临床检验领域的工作目标。


医学决定水平范围内评价待评方法。 分析物浓度应尽可能分布在测定范围内均匀分布。

应尽可能使至少50％样本的测定结果处于实 验室的参考区间之外
参比方法的测定范围应大于等于待评方法的范围


2．4 样本数

为了满足上述标准要求，至少需分析40个样本 将提高统计估计值的可信度， 增加了把未预计的干扰物发生的影响包括在内的机 会。
B2：所有结果的散点图
第二张图是以每个结果以实验方法的结果为Y，比较方法的结果为X的散点图。 使XY轴的原点和刻度一致，作一条通过原点，斜率为1的直线。
3.3 线性关系的目测检查
目测方法间离群值
图3、均值差异与二种方法的均值 如果比较方法不是参考方法：
差异图：（试验方法均值—比较方法均值）对（试验方法均值+比较方法均值）/2
5.6 检验程序的质量保证
如何进行仪器间的比对


可以利用采集的稳定的患者标本进行可比性检 验。 在例外的情况，非患者标本的材料可以用于可 比性检验。
CLSI

EP9-A2 第22卷第19册
用患者样本进行方法比对及偏倚评估：批准指南— —第二版
WST

407-2012
医疗机构内定量检验结果的可比性验证指南

DXi=︱xi1-xi2︱ DYi=︱yi1-yi2︱ 计算每个方法双份测定的差值绝对值的均值

取各方法的平均绝对差值的四倍作为每个方法的“ 可接受”限

2）如果任一绝对差值超过此限（X或Y） 用标准化（相对）绝对差值进行另外的计算， 以相对差值均值的4倍作为标准化的检测界限。
4
2 1
线性回归 线性 (线性回归)
100
50
0 0 50 100 150 200 250 300

5.2 当数据未通过适合范围检查时，使用分部 个别差异法计算平均偏倚（分区偏倚法）

结果比对：


溯源性


偏差：

单次测量值与真值之差。 指多次测量均值与真值之差。 测定结果的标准差与平均值的百分比值，通常用 CV%表示。

偏倚：


变异系数：

CLSI EP9-A2介绍



本指南便于估计两种方法在不同样本浓度下的 偏倚（预期的差异）。 理想情况下，应该待评方法与参考方法相比较 但通常状况下，参比方法为目前使用的常规方 法。此时，关注的是待评方法是否是现行方法 的合适替代者。 如果参比方法同厂家使用的方法相同，那么就 可以把实验结果与厂家的声明进行统计学比较 ，以确定性能是否可以接受。

2、1 样本准备

按照实验室操作规范和制造商的推荐收集和处理患 者标本。

储存


储存时间和条件取决于待测成份的稳定性 如果可能，避免储存标本。 如果一个标本被拒收，要记录拒收原因。

拒收标本


2．2 参比方法

实验室当前使用的方法 生产厂家声明的方法 公认的参考方法

参比方法应该做到如下几点：

人为误差


其他不一致数据的处理

没有查出错误的不一致双份数据时，也应记录 而不是剪辑。
不能确定原因时，则应在数据表上保留原始数据， 进行离群值的检验 任何需要删除的数据均应仔细形成文件并保留，记 录所发现的原因和问题。


删除数据的文件化


2.8 质量控制



实验中应遵循实验室和/或制造商的常规质量控制 程序。 保留质控图，任一方法出现失控时应重新测定，直 到达到要求的样本数为止。 整个实验必须有室内质量控制，失控时必须重做实 验。
3
5
3.2 数据作图

1、重复检测均值的散点图 2、所有结果的散点图 3、偏倚图--均值差异与二种方法的均值 4、偏倚图--单个结果差值对二种方法的均值 这四张图可用来判定非线性关系，离群值，试 验和参比方法比较的非齐性方差。

图1、试验方法均值对比较方法均值
300
重复检测均值
250