核酸概述分子生物学
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沟的深度 (nm)
小沟 大沟
1.10 0.27 0.28 1.35
0.57 1.17 0.75 0.85
0.48 1.05 0.79 0.75
0.13 0.89 0.58
2) 左手螺旋--Z型
Z型:在DNA单链中存在嘌呤与嘧啶(CGCGCG或CACACA) 交替排列的顺序时,就会出现左手双螺旋结构。在主链中各个磷 酸根呈锯齿状排列,犹如“之”字形一样,因此叫做Z型沟象。
*两性解离
呈酸性 在中性溶液中带负电荷
*溶解性
均溶于水
不溶于一般有机溶剂,在70%乙醇中形成沉淀
*粘度
DNA粘度大 RNA粘度小
*旋光性
均很强
*密度
RNA>双链DNA; 环状DNA >开环、线状DNA 单链DNA >双链DNA
*沉降速度:
RNA >环状DNA >开环、线状DNA
*核酸的紫外吸收
碱基、核苷、核苷酸和核酸在240~290nm的紫外波 段有强烈的光吸收,λmax=260nm
特点:每圈螺旋12个碱基,螺距4.46-4.47nm,h为 0.74nm,-60度旋转,碱基负倾斜-7度,直径1.81-1.84nm(B 型DNA为1.93nm),只有小沟,且窄而深(宽0.88nm,深 1.38nm),嘌呤糖苷键呈顺式(B型所有糖苷键均为反式)。
不同螺旋形式DNA分子主要参数比较
*核苷酸
*核酸
核酸的简写式:
A
3'
P
P
CG
3'
3'
P
P
T 3' P
5'
5'
5'
5'
5'pApCpTpTpGpApApCpG3'DNA
5'pApCpUpUpGpApApCpG3'RNA
5'pACTTGAACG3' 5'pACUUGAACG3'
5’→3’
5’→3’
三 核酸的理化性质 *晶形
DNA为白色纤维状固体 RNA为白色粉末状固体
四 DNA的一级结构
1 、DNA的一级结构
DNA分子中核苷酸的排列顺序,DNA顺序(或序 列)
DNA分子主要由dAMP、dGMP、dCMP和dTMP四种 脱氧核糖核苷酸所组成
DNA
一 级 结 构 模 式 图
1)DNA结构的特点:
*DNA分子是由两条互相平行的脱氧核苷酸长链盘绕
而成的。
*DNA分子中的脱氧核糖和磷酸交替连接,排在外侧,
1 OD260dsDNA=50μg/ml 1 OD260ssDNA=33μg/ml 1 OD260 RNA=40μg/ml 纯DNA A260/A280=1.8 纯RNA A260/A280=2.0
*核酸的酸解和碱解
DNA和RNA对酸或碱的耐受程度有很大差别
RNA的碱解
*酶水解
核酸水解酶:水解磷酸二酯键。 DNA水解酶(DNases):以DNA为底物 RNA水解酶(RNases):以RNA为底物的。 核酸外切酶:从一端(3′-端或5′-端)开始 核酸内切酶:从中间开始
双螺旋 A-DNA
碱基倾角 (度)
20
碱基间距 (nm)
0.26
螺旋直径 (nm)
2.6
每轮碱基数 11
螺旋方向 右
B-DNA
6
0.34
2.0
10
右
Z-DNA
7
0.37
1.8
12
左
3)Z型DNA与生物的基因调控有关 A 邻近调控 控制区-启动子 Z-DNA
转录区 不转录
B-DNA
转录
2、DNA双螺旋的稳定性
• 氢键 • 疏水作用 • 碱基堆积力 • 离子
3、 DNA结构的多态性
目前已知DNA双螺旋结构可分为A、B、C、D及Z型等数种,除 Z型为左手双螺旋外,其余均为右手双螺旋。
92%相对湿度
75%相对湿度
66%相对湿度
B型
A型
C型
DNA-RNA
杂交分子
碱基对减少
D型 E型
1) 右手螺旋
DNA结构类型和螺旋参数
结构 类型
螺旋
螺旋
(nm) 对称性
A
2.82
11
B
3.38
10
C
3.10
9.33
D
2.43
8
E
2.43
7.5
每个核苷酸残基轴(h)
和扭角轴(I)
h(nm)
I(度)
0.256
32.7
0.338
36.0
0.332
38.6
0.304
45.0
wenku.baidu.com
0.325
48.0
沟的宽度 (nm) 小沟 大沟
一 核酸
1 核酸的发现
*1868年,Miescher发现核素,是一类在白细胞中富含 磷酸酸性的物质。
*1889年,Altmann在酵母中制备了不含蛋白的核素,称之 为核酸(Nucleic acid)。 *1925-1930年,Levene确定核酸是由4种核苷酸组成;
Chargaff发现四种核苷酸并不是简单的1:1的关系。
*转化实验 1928年,Griffith等人肺炎双球菌实验(图1-1); 1944年,Avery提出转化因子是DNA(图1-2)。
*Blendor实验 1952年,Hershey进一步证明DNA是遗传物质
(图1-3)。
噬菌体模式图
2 核酸的分类与分布
90%以上分布于细胞核,
脱氧核糖核酸
构成基本骨架,碱基排列在内侧。
*两条链上的碱基通过氢键相结合,形成碱基对,它的
组成有一定的规律。
2)DNA分子的多样性
* 碱基的排列顺序,构成了DNA分子的多样性
*100bpDNA分子可能排列方式就是4100
*DNA中的碱基排列顺序是DNA分子的重要属性 *基因的功能取决于DNA的一级结构
五 DNA的二级结构
*Watson和Crick在1953年根据DNA纤维X射线晶体衍射
图,提出了DNA为右手双螺旋结构的科学假设。
*二级结构是指两条多核苷酸链反向平行盘绕所生成
的双螺旋结构。
*通常情况下,DNA二级结构分为两类:一类是右手螺旋,
如A-DNA,B-DNA;一类是左手螺旋,即Z-DNA。 1、 DNA二级结构特征
其余分布于核外如线粒体,
(deoxyribonucleic acid, DNA) 叶绿体,质粒等。
携带遗传信息,决定细胞 和个体的基因型(genotype)。
核糖核酸 (ribonucleic acid, RNA)
分布于胞核、胞液。
参与细胞内DNA遗传信息的表达。 某些病毒RNA也可作为遗传信息 的载体。
二 核酸的化学成分
磷酸
核糖
核酸→核苷酸→{
戊糖 → {
核苷 →{
脱氧核糖
嘌呤碱
含氮碱————————→{
嘧啶碱
*碱基 嘧啶碱基 嘌呤碱基
*戊糖
β-D-核糖
β-D-2-脱氧核糖
β,N糖苷键 *核苷 主要核苷有八种
N9 β1’
腺苷(AR) β1’,N9-糖苷键
N1
β1’
脱氧胞苷(dCR) β1’,N1-糖苷键