培养基的配制
实验室常用培养基的配制方法
实验室常用培养基的配制方法在实验室中,培养基是微生物生长和繁殖的重要物质基础,正确配制培养基对于实验结果的准确性和可靠性至关重要。
不同的微生物对营养物质的需求有所不同,因此需要根据实验目的和微生物的特性选择合适的培养基,并掌握正确的配制方法。
接下来,我将为大家详细介绍几种实验室常用培养基的配制方法。
一、LB 培养基(LuriaBertani 培养基)LB 培养基是一种常用于培养细菌的通用培养基,其成分包括胰蛋白胨、酵母提取物和氯化钠。
配制 1L 的 LB 培养基,所需材料如下:胰蛋白胨 10g酵母提取物 5g氯化钠 10g配制步骤:1、称取上述成分,将其放入一个干净的 1L 烧杯中。
2、加入约800ml 的去离子水,用玻璃棒搅拌,直至溶质完全溶解。
3、用去离子水将溶液定容至 1L。
4、调节 pH 值至 70(通常使用 1mol/L 的 NaOH 或 1mol/L 的 HCl 进行调节)。
5、将培养基分装到锥形瓶中,每瓶的装液量不要超过锥形瓶体积的三分之二。
6、盖上瓶塞,用报纸或牛皮纸包扎瓶口。
7、放入高压灭菌锅中,在 121℃下灭菌 20 分钟。
二、牛肉膏蛋白胨培养基牛肉膏蛋白胨培养基是一种常用的细菌培养基,适用于多种细菌的培养。
配制 1L 该培养基,需要准备以下材料:牛肉膏 3g蛋白胨 10g氯化钠 5g具体配制步骤如下:1、称取牛肉膏、蛋白胨和氯化钠,放入干净的烧杯中。
2、加入适量的去离子水,搅拌溶解。
3、定容至 1L,搅拌均匀。
4、用 1mol/L 的 NaOH 或 HCl 调节 pH 至 72 74 之间。
5、分装、包扎、灭菌,方法同上。
三、马铃薯葡萄糖培养基(PDA 培养基)PDA 培养基常用于培养真菌,尤其是霉菌。
配制 1L 的 PDA 培养基,材料如下:马铃薯 200g葡萄糖 20g琼脂 15 20g配制流程:1、将马铃薯去皮,切成小块,称取 200g,放入锅中,加入约1000ml 去离子水,煮沸 20 30 分钟,直到马铃薯块变软。
培养基配方
1. LB培养基:10 g/L胰蛋白胨(进口),5 g/L酵母提取物(进口),10 g/L NaCl。
若配制固体培养基,加入15 g琼脂粉;
2. YPD培养基:22 g/L的一水合葡萄糖,20 g/L胰蛋白胨(进口),10 g/L酵母提取物(进口)。
若配制固体培养基,加入20 g琼脂粉;
3. SC-Ura培养基:22 g/L含一水合葡萄糖,6.7 g/L YNB(无氨基酸酵母氮源),1.224g/L 氨基酸粉末(除Leu , Trp , His , Ura, Ade, Lys, Met以外的),配制相应缺陷型则补加其他7种氨基酸。
4. YPX 培养基:蛋白胨,20 g/L;酵母粉,10 g/L;木糖,20 g/L或50 g/L。
5. YPD+G418:G418:1ml/L
Leu(亮氨酸)0.38 g/L,
Ura(尿嘧啶)0.076 g/L,
100xHis(组氨酸)7.6g/L,加入10mL/L
100xTrp(色氨酸)7.6g/L, 加入10mL/L
100xAde(鸟嘌呤)7.6g/L 加入10mL/L
100xLys(赖氨酸)7.6g/L 加入10mL/L
100xMet(甲硫氨酸、蛋氨酸)7.6g/L 加入10mL/L
加入碱液调节pH至6.10左右。
若配制固体培养基,加入20 g琼脂粉;
全部氨基酸:。
培养基配方
1、PDA培养基(用于分离、培养植物内生真菌):马铃薯(去皮)200g , 葡萄糖20g , 蒸馏水1000 ml , 琼脂粉15g。
用于分离内生真菌时在倒平板之前加入已过滤除菌的氯霉素和硫酸链霉素各50 µ g/ml,用于抑制细菌的生长。
2、NA培养基(用于分离、培养植物内生细菌):牛肉膏3g,蛋白胨5g,葡萄糖2.5g,琼脂粉15g,蒸馏水1000ml,pH 7.0。
用于分离内生细菌时在倒平板之前加入已过滤除菌的放线菌酮50µg/ml,用于抑制真菌生长。
115℃,20min 灭菌。
3、LB培养基:胰蛋白胨10 g,酵母提取物5 g,NaCl 10 g 蒸馏水至1000 mL,pH=7.0;4、DSM1培养基:磷酸三钾26.631 g(pH=7.0),二水柠檬酸三钠9.999 g,硫酸镁0.2465 g,硫酸铵19.821 g,牛肉膏3 g,NaCl 5 g,胰蛋白胨10 g,葡萄糖1 g 蒸馏水至1000 mL,pH=7.0;5、DSM2培养基:磷酸三钾26.631 g(pH=7.0),二水柠檬酸三钠9.999 g,硫酸镁0.2465 g,硫酸铵19.821 g,牛肉膏3 g,NaCl 5 g,细菌学蛋白胨10 g,葡萄糖1 g 蒸馏水至1000 mL,pH=7.0;6、Msgg培养基:磷酸钾5 mmoL/L(pH7.0),MOPs 100 mmoL/L(pH7.0),MgCl2 2 mmoL/L,CaCl2 700 mmoL/L,MnCl2 50 µM,FeCl3 50 µM,ZnCl2 1 µM,VB1 2 µM,甘油0.5 %,谷氨酸0.5 %,色氨酸50 µg/mL,苯丙氨酸50 µg/mL,蒸馏水1000 mL,pH 7.0。
7、N%NA培养基:牛肉膏3.0 g,细菌学蛋白胨10 g,NaCl 5 g,琼脂粉N*10 g,8、BGM1培养基:牛肉膏3 g,胰蛋白胨10 g,NaCl 5 g,磷酸三钾26.631 g(pH7.0),二水柠檬酸三钠9.999 g,硫酸镁0.2465 g,硫酸铵19.821 g,葡萄糖1 g,蒸馏水1000 mL,pH 7.0。
培养基的配制过程
培养基的配制过程1.材料准备:配制培养基需要准备一系列的材料,包括溶液、固体成分和试剂。
常见的溶液成分有蛋白胨、蔗糖、葡萄糖、酵母提取物等。
固体成分通常包括琼脂、琼脂糖或者琼脂葡萄糖。
试剂则包括酸碱试剂、染色剂等。
2.秤重和称量:根据配方,使用准确的天平将所需的材料进行称量。
确保称量的准确性,以避免配制出来的培养基浓度不合适。
3.溶解固体成分:将固体成分加入适量的蒸馏水中,并通过搅拌等方法将其充分溶解。
4.调整pH值:测定溶液的pH值,并根据实验需求进行调整。
通常使用盐酸或氢氧化钠进行酸碱调节。
5.添加其他成分:根据实验需求,将其他需要的溶液成分添加到培养基中。
比如,添加抗生素、试剂等。
6.蒸馏水补足体积:根据所需体积,使用蒸馏水补足培养基的总体积。
在此过程中,需使用一种无菌的容器。
7.烧瓶或培养皿灭菌:将配制好的培养基倒入烧瓶或培养皿中,并进行灭菌处理。
灭菌的方法包括高压灭菌器、滤过消毒器、微波炉等。
8.装瓶和标记:将灭菌好的培养基倒入培养瓶中,并进行标记。
标记应包括培养基的配制日期、配方、pH值等重要信息。
在配制培养基的过程中,需要注意以下几个关键点:1.保持无菌:在配制培养基的过程中,需要使用无菌的材料和操作台,以避免杂菌的污染。
同时,注意避免培养基与外界环境接触,以防止污染。
2.准确称量:为了确保培养基的配制浓度准确,需要使用准确的天平进行称量。
避免因称量不准确而导致培养基浓度上下起伏,影响到微生物的生长。
3.pH值调节:培养基的pH值对微生物的生长有重要影响,因此在配制培养基时,需要测定pH值,并根据实验需求进行调节。
4.灭菌处理:在配制好的培养基倒入培养瓶中之前,必须进行灭菌处理,以杀灭可能存在的微生物。
灭菌方法有多种,可以根据实验需求和设备条件选择适当的灭菌方法。
总结起来,培养基的配制过程需要准备材料、秤重和称量、溶解固体成分、调整pH值、补足体积、灭菌处理、装瓶和标记等步骤。
在配制过程中需要注意无菌、准确称量、pH值调节和灭菌处理等关键点。
培养基配制的过程和注意事项
培养基配制的过程和注意事项一、培养基配制的基本步骤1. 材料准备:首先,需要准备培养基所需的各种原料和试剂。
常用的培养基原料包括蛋白胨、葡萄糖、琼脂等。
此外,还需要准备适量的水和试剂的称量工具。
2. 称量试剂:按照配方中的比例,准确地称取所需的试剂。
在称量过程中,应注意保持实验环境的清洁,并使用洁净的称量工具,以避免试剂受到污染。
3. 溶解试剂:将称取好的试剂溶解于适量的水中。
在溶解过程中,可以通过搅拌或加热的方式促进试剂的溶解。
溶解完毕后,应检查溶液的透明度和均匀性,确保试剂充分溶解。
4. 调整pH值:根据具体的培养基配方,使用酸碱溶液调整培养基的pH值。
通过逐滴加入酸碱溶液,并经过搅拌均匀,逐步调整pH 值至所需范围。
在调整pH值的过程中,应注意避免过度调节,以免对培养细胞产生不良影响。
5. 加热消毒:将配制好的培养基加热至沸腾,保持沸腾状态持续5-10分钟,以达到消毒的目的。
在加热过程中,应注意避免溢出和烧焦,同时要保持试剂的充分混合。
6. 灭菌冷却:将消毒完毕的培养基冷却至适宜的温度,通常为45-50摄氏度。
在冷却过程中,应避免引入环境中的微生物污染,可使用无菌工作台或灭菌过滤器进行操作。
7. 分装保存:将冷却好的培养基分装到无菌培养皿或试管中,并密封保存。
在分装过程中,要注意避免试剂接触到外界空气,以防止污染。
二、培养基配制的注意事项1. 实验环境要保持清洁,操作过程要注意无菌操作,以避免试剂受到污染。
2. 在配制过程中,应准确称取试剂的质量,并按照配方中的比例进行配比,以保证培养基的质量和配方的准确性。
3. 在试剂溶解和调整pH值时,应充分搅拌均匀,确保试剂充分溶解和均匀混合。
4. 加热消毒时,应注意控制加热时间和温度,以避免试剂烧焦或溢出。
5. 冷却过程中,要避免污染和细菌的侵入,可使用无菌工作台或灭菌过滤器进行操作。
6. 培养基的分装要在无菌条件下进行,并尽快密封保存,避免试剂受到外界空气和微生物的污染。
常用培养基配制方法
常用培养基配制方法:(1)基础盐培养基(MSM):(NH4)2SO42.0g,MgSO4·7H2O0.2g,CaCl2·2H2O 0.01g,FeSO4·7H2O0.001g,Na2HPO4·12H2O1.5g,KH2PO41.5g,蒸馏水1000 mL。
(2)LB培养基:蛋白胨10g,酵母提取物5g,氯化钠5g,蒸馏水1000 mL,pH7.5。
(3)高氏合成1号培养基:硝酸钾1g,磷酸氢二钾0.5g,硫酸镁0.5g,氯化钠0.5g,硫酸亚铁0.01g,可溶性淀粉20g,蒸馏水1000mL。
(4)查彼氏培养基:硝酸钠2g,氯化钾0.5g,硫酸镁0.5g,磷酸氢二钾1g,硫酸亚铁0.01g,蔗糖30g,蛋白胨0.5g,蒸馏水1000mL。
(5)马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA):马铃薯200g,葡萄糖20g,琼脂20 g,蒸馏水1000mL。
将无病马铃薯洗净去皮切碎,加蒸馏水1000mL,煮沸0.5 h,纱布过滤,滤液加蒸馏水补足1000mL,再加入葡萄糖,然后分装三角瓶灭菌备用。
(6)铵察氏琼脂培养基:氯化铵2g,氯化钾0.5g,硫酸镁0.5g,磷酸氢二钾1g,硫酸亚铁0.01g,蔗糖30g,蛋白胨0.5g,琼脂20g,蒸馏水1000 mL。
(7)克氏合成1号琼脂培养基:磷酸氢二钾1g,碳酸镁0.3g,氯化钠0.2 g,硝酸钾1g,硫酸亚铁0.01g,碳酸钙0.5g,葡萄糖20g,琼脂20g,蒸馏水1000mL。
(8)葡萄糖天门冬素琼脂培养基:葡萄糖10g,天门冬素0.5g,磷酸氢二钾0.5g,琼脂20g,蒸馏水1000mL。
(9)葡萄糖酵母膏琼脂培养基:葡萄糖10g,酵母膏10g,琼脂20g,蒸馏水1000mL。
(10)瓦氏肉汁琼脂培养基:蛋白胨5g,葡萄糖10g,牛肉膏10g,氯化钠5g,琼脂20g,蒸馏水1000mL。
(11)淀粉琼脂培养基:可溶性淀粉10g,碳酸镁1g,磷酸氢二钾0.3g,氯化钠0.5g,硝酸钠1g,琼脂20g,蒸馏水1000mL。
培养基配方及配置
培养基配方及配置
一般来说,培养基的配方包含基础培养基、添加剂和调节剂。
基础培养基是指提供生物体基本生长必需的基本成分,包括能源物质、有机和无机原料、氮源、矿质元素和缓冲物质等。
常用的基础培养基有
LB培养基、MS培养基等。
添加剂是指用于满足特定实验需求的成分,如抗生素、抗菌剂、激素、维生素等。
添加剂的种类和浓度根据实验目的的不同而有所差异。
调节剂是指用于调节培养基pH值、渗透压、表面张力等物理化学性
质的成分,如缓冲液、pH调节剂等。
以下是一个常用的细菌培养基LB的配方及配置:
1.基础培养基成分:
- 水:900ml
-蛋白胨:10g
-酵母提取物:5g
-NaCl:5g
2.添加剂:(可根据实验需求进行必要的添加)
- 抗生素(如氨苄青霉素):100μg/ml
- 抗菌剂(如氯霉素):25μg/ml
3.配制方法:
-将蛋白胨、酵母提取物和NaCl加入水中,并搅拌混合均匀。
- 将培养基溶液倒入容量瓶中,加水至1000ml,并混合均匀。
-调节pH值至7.0-7.2(一般使用缓冲液进行调节)。
-用自制滤纸过滤器滤过,将溶液分装至培养皿或试管中。
-如需添加抗生素或抗菌剂,将相应的药物加入培养基中,并充分溶解。
-培养基装瓶后可以高温高压灭菌,或使用滤器过滤进行无菌处理。
以上是一个简单的LB培养基的配方和配置流程,不同实验需要可能
会有所调整和变化。
在设计培养基配方时,需要结合具体实验目的和生物
体的特性来确定合适的成分和浓度,并注意配制和保管过程中的无菌操作,以确保培养基的质量和有效性。
各种培养基配方范文
各种培养基配方范文培养基是一种用于微生物培养的基础物质,能够为微生物提供所需的营养和环境条件。
不同的微生物在其生长过程中需要不同的养分和环境条件,因此培养基的配方需要根据微生物的需求来进行调整。
下面是几种常见的培养基配方。
1.大肠杆菌液体培养基配方:-蛋白胨或复合氮源:10g-酵母浸出物:5g-葡萄糖:1g-NaCl:5g-K2HPO4:2g-MgSO4:0.2g-pH调节至7.0后加水至1000mL2.牛心提取物琼脂糖培养基配方:-牛心提取物:3g-高级琼脂糖:15g-葡萄糖:10g-NaCl:5g-pH调节至7.0后加水至1000mL3.玉米浸出物琼脂糖培养基配方:-玉米浸出物:4g-高级琼脂糖:15g-酵母浸出物:1g-NaCl:5g-pH调节至7.0后加水至1000mL4.LB琼脂糖培养基配方:-液体LB培养基:10mL-高级琼脂糖:15g-NaCl:5g-pH调节至7.0后加水至1000mL 5.血寒养基配方:-羊血:50mL-肉浸出物:3g-酵母浸出物:3g-肉汤培养基:1L-红细胞素:5g-高级琼脂糖:3g-pH调节至7.0后加水至1000mL6.厌氧培养基配方:-肉浸出物:5g-酵母浸出物:5g-NaCl:5g-蒸馏水:900mL- 加入0.1%的L-cysteine:10mL-pH调节至7.0后用氮气替换空气注意事项:-培养基中的成分应严格按照配方比例加入,并保持无菌。
-配制好的培养基需要高温高压灭菌以保证无菌。
-不同的微生物可能对一些成分非常敏感,需要根据实际情况进行微调。
-培养基的pH值应根据微生物环境要求进行调整,一般在7.0左右。
-配好的培养基应存放在4℃的冰箱中,避免阳光直射以防止成分分解。
这只是一些常见的培养基配方,不同的微生物有不同的需求,可以根据具体的情况进行配方的调整。
在实际使用中,还需要根据微生物的特性和实验目的来选择合适的培养基。
培养基的配制方法
培养基的配制方法培养基是微生物学、生物学等实验中将微生物培养的一种物质基质,它提供了微生物生长所必需的营养和环境条件。
培养基的配制方法主要包括选择基质、添加营养成分、调节pH值、灭菌和包装等步骤。
以下是一般的培养基配制方法及注意事项。
1.选择基质培养基的基质可以选择为水或含有必要营养成分的溶液。
一般情况下,使用蒸馏水或双蒸馏水作为基质是比较常见的选择。
2.添加营养成分培养基中必须添加适当的营养成分,以满足微生物的生长需求。
常用的营养成分有碳源、氮源、无机盐、维生素和生长因子等。
常用的碳源有葡萄糖、蔗糖、麦芽糖等,常用的氮源有氨基酸、酵母浸出物、肉浸出物等。
此外,还可以根据微生物的特殊要求增加一些其他的营养成分。
3.调节pH值pH值对于微生物的生长十分重要,大多数微生物的最适生长pH在6.5-7.5之间。
因此,培养基在配制过程中需要进行pH值的调节。
可以使用酸碱溶液(如HCl和NaOH)进行pH调节,并通过使用pH试纸或pH计监测pH值。
4.灭菌培养基的灭菌工作非常重要,它可以防止杂菌的污染。
常用的灭菌方法有高压灭菌、干热灭菌和滤过灭菌等。
高压灭菌是指将配制好的培养基放置在高压锅中,经过高温高压的处理。
干热灭菌是将配制好的培养基放置在烘箱中进行加热处理。
滤过灭菌是将培养基通过0.22um的无菌滤膜过滤,以去除微生物。
灭菌后,需要用无菌操作将培养基倒装入无菌培养器皿中。
5.包装灭菌后的培养基需要进行包装保存,以防止污染。
常用的包装方式有试管包装、琼脂平板包装和瓶装包装等。
试管包装是将培养基倒入试管中,用苏打棒打破试管口,并通过注封的方法密封试管。
琼脂平板包装是将培养基倒入无菌琼脂平板中,并使用无菌的平板封口膜密封。
瓶装包装是将培养基倒入无菌玻璃瓶中,用无菌胶塞封闭瓶口。
在配制培养基的过程中,还需要注意以下几点:1.保持操作环境无菌,使用无菌操作台、无菌器具和无菌操作方法。
2.注意各种添加物的浓度,不可过量或过少。
培养基配方及配制方法
培养基配方及配制方法培养基是一种用于细菌、真菌、酵母等微生物的生长和繁殖的基质。
不同的微生物对培养基的要求不同,因此配方也会有所差异。
下面是一种常用的培养基配方及配制方法。
1.碳源:常见的碳源包括葡萄糖、果糖、麦芽糖等。
碳源的添加能够提供微生物的能量和碳原子。
2.氮源:常见的氮源包括氨基酸、尿素、硝酸盐等。
氮源的添加能够提供微生物生长所需的氮元素。
3.矿物质:常见的矿物质包括钠、钾、氯等。
矿物质的添加能够提供微生物生长所需的微量元素。
4.生长因子:一些微生物对特定的生长因子具有依赖性,例如维生素和氨基酸等。
5.pH缓冲剂:常见的pH缓冲剂有磷酸盐缓冲液、琼脂等,用于调节培养基的pH值。
6. 凝固剂:常见的凝固剂包括琼脂、Agar等,用于使培养基变成固体状。
培养基配制方法:1.按照配方将所需的各种成分加入适量的蒸馏水中。
注意要先将一些难溶的固体成分溶解后再加入。
2.配制的过程中要注意无菌操作,使用无菌的容器和仪器,避免细菌及其他微生物污染。
3.将配制好的培养基混合均匀,使各个成分充分溶解。
可以通过搅拌或加热溶解等方法进行混合。
4.调节培养基的pH值。
使用酸碱试剂(如盐酸和氢氧化钠)进行调节,直到达到适合所需微生物生长的pH值范围。
5.如果需要固体培养基,可以加入适量的凝固剂(如琼脂)。
溶解后加入培养基中,然后将培养基煮沸消毒使凝结。
6.将配制好的培养基装入适量的培养皿或试管中。
7.灭菌处理。
使用高压灭菌器或自动培养箱等设备进行灭菌处理,以杀死培养基中的微生物。
通过以上步骤,就可以得到配制好的培养基。
根据不同的微生物要求和实验需要,可以调整培养基的成分和浓度,以获得最适合微生物生长和繁殖的环境。
培养基配方及配制方法
培养基配方及配制方法培养基是一种用于寄养和培养细胞、微生物、组织等生物体的基质。
其配方的选择和配制方法对于不同的生物体和研究目的有很大的差异。
以下是一般常用的培养基配方及简单的配制方法:1. LB培养基(Luria-Bertani)LB培养基是常见的用于大肠杆菌等细菌的培养基,其配方包括:- 1% 蛋白胨(tryptone): 添加营养源和能量- 0.5% 酵母粉(yeast extract): 提供维生素和生长因子-1%NaCl(氯化钠):调节渗透压-蒸馏水:使混合液体稀释至所需体积配制方法:将蛋白胨、酵母粉和NaCl加入蒸馏水中,调整pH至7.0,将混合液体加热至溶解,过滤杂质,如需固化则加入1.5%的琼脂。
2. YPD培养基(Yeast extract-Peptone-Dextrose)YPD培养基常用于酵母菌的培养,其配方包括:- 1% 酵母提取物(yeast extract): 提供维生素和生长因子- 2% 蛋白胨(peptone): 为细菌提供碳源和能量- 2% 葡萄糖(dextrose): 为细菌提供碳源和能量-蒸馏水:使混合液体稀释至所需体积配制方法:将酵母提取物、蛋白胨和葡萄糖加入蒸馏水中,调整pH至7.0,将混合液体加热至溶解,过滤杂质,如需固化则加入2%的琼脂。
3. DMEM培养基(Dulbecco's Modified Eagle's Medium)DMEM培养基是常用的哺乳动物细胞培养基,其配方包括:-10%胎牛血清(FBS):提供生长因子和营养物质- 1% 青霉素-链霉素溶液(Penicillin-Streptomycin Solution): 防止细菌污染- 1% L-谷氨酰胺(L-Glutamine): 提供细胞代谢所需的基础物质-DMEM基础培养液:包括氨基酸、维生素等成分-蒸馏水:使混合液体稀释至所需体积配制方法:将胎牛血清、青霉素-链霉素溶液、L-谷氨酰胺和DMEM基础培养液加入蒸馏水中,调整pH值至7.4,混合均匀即可。
培养基的配制及使用记录
培养基的配制及使用记录一、引言在微生物学实验过程中,培养基的配制及使用记录是非常重要的实验步骤之一、正确的培养基配制可以提供适宜的营养物质和环境条件,促进微生物的生长和繁殖。
本文将详细介绍培养基的配制和使用记录,以及注意事项和实验结果的记录。
二、培养基的配制1.根据实验需要选择合适的培养基配方。
常见的培养基有肉汤培养基、浓缩肉汤培养基、天然培养基、合成培养基等。
2.按照培养基配方准确称取所需的物质,如蛋白胨、葡萄糖、酵母粉等。
3.将物质加入蒸馏水中,并用玻璃棒搅拌均匀,直至溶解完全。
4.调整pH值。
使用pH计将溶液的pH值调整到所需范围内,通常为6.8-7.25.配制完毕的培养基通过高温高压灭菌器进行灭菌,保持高温高压一段时间。
6.灭菌后的培养基应待其冷却到室温后使用或储存,避免细菌的再度污染。
三、培养基的使用记录1.填写培养基使用记录表。
记录培养基的配制日期、配制者、培养基批号等信息。
2.记录每次使用的培养基的用量。
可通过称重器或容量杯进行测量,确保使用的培养基量能满足实验需要。
3.记录每次使用的细菌菌种名称和数量。
用标准测量容器或移液器进行测量和记录。
4.注意培养基的贮存条件。
培养基应存放在阴凉、干燥、无菌的环境中,避免阳光直射或高温暴晒。
四、注意事项1.在培养基的配制和使用过程中,要严格遵守无菌操作规范,防止微生物的污染。
2.注意培养基的保存时间,过期的培养基会导致细菌的生长受阻。
3.培养基使用完后应及时清洗容器并进行消毒处理,以防止细菌的残留和传播。
4.注意培养基的pH值和温度控制,过高或过低的pH值和温度会影响微生物的生长和繁殖。
五、实验结果的记录1.记录每次实验的细菌生长情况,包括菌落形态、菌液浑浊程度以及生长速度等。
2.对于培养基配制不当或实验操作失误导致的异常结果,要仔细记录并分析原因,以便调整实验方法和改进配制过程。
六、结论培养基的配制和使用记录是微生物学实验的重要步骤之一,正确的配制和使用可以提供适宜的环境条件促进微生物的生长和繁殖。
培养基的配制
一、用品的准备:
1、无菌物品:盐水瓶数个(能装1000ml液体),盐水胶塞数个,1000ml 超滤器。 2、培养基专用量筒1000ml 1个,三角烧瓶1个,手动压力表1个。 3、超纯水或三蒸水1L。 4、培养基1包/L,青霉素及链霉素各10万单位/L,HEPES、碳酸氢钠。
二、注意事项:
1、配制培养基前应紫外灯照射培养室及超净工作台30分钟。 2、抽负压时压力表不能超过-15KPa。 3、使用此批次培养基前,应吸取少量培养基放进培养箱进行培养,确定无 细菌生长后方可使用。 4、短时间内不)
• 氯化钠:8克;氯化钾:0.2克; • • • • Na2HPO4·12H2O:3.489克;KHPO:0.2克。 加入蒸馏水,定溶到1000ml。 调pH7.2~7.4。 分装、高压消毒。
培养基的配制方法
培养基的配制方法培养基的配制方法是在实验室中作为微生物培养的基础,可以提供适当的营养物质和环境条件来促进微生物的生长和繁殖。
正确的配制培养基是进行微生物实验和研究的关键步骤之一。
下面将详细介绍培养基的配制方法。
1. 准备配制培养基所需的原料和仪器:- 食品级蛋白胨粉或胨蛋白水解物:提供微生物所需的氨基酸和营养物质。
- 食品级琼脂:用于凝固培养基。
- 蔗糖或葡萄糖:提供微生物的碳源。
- 盐:提供微生物生长所需的必需离子,如钠、钾、镁等。
- pH试纸或pH计:用于调节培养基的酸碱度。
- 常温和高温灭菌器:用于灭菌培养基。
- 烧杯、容器、磁力搅拌器和称量仪器:用于容器和搅拌培养基。
2. 测量和称量:- 根据所需的培养基成分和浓度,测量所需的蛋白胨量、琼脂量、蔗糖或葡萄糖量以及盐的量。
- 将测量好的原料放入烧杯中。
3. 加入适量的水:- 加入适量的去离子水或纯净水,将配方溶解。
4. 调节酸碱度:- 使用pH试纸或pH计来检测培养基的酸碱度。
- 如果需要调节酸碱度,则可以使用盐酸或氢氧化钠等脆性酸碱溶液加入培养基中以达到目标pH值。
5. 搅拌混合:- 将培养基溶液放入磁力搅拌器中。
- 开启搅拌器并搅拌溶液直到完全混合。
6. 灭菌:- 将配制好的培养基倒入适当容器中,如烧杯或琼脂培养皿。
- 对于常见的液体培养基,使用常温灭菌器在121摄氏度下高压灭菌20-30分钟。
- 对于琼脂培养基,使用高温灭菌器在121摄氏度下高压灭菌15-20分钟。
7. 倒盖和保存:- 等待培养基凝固后,盖上并标记培养基的名称、配方和配制日期。
- 将培养基保存在冰箱中或冷藏库中,在4摄氏度下保存。
总结一下,培养基的配制方法包括准备原料和仪器,测量和称量原料,加入适量的水,调节酸碱度,搅拌混合,灭菌和保存。
注意对于不同的微生物,培养基的配方可能会有所不同,需要根据具体的实验目的和需求进行调整。
正确配制培养基对于获得准确的微生物培养结果至关重要。
常用培养基配方范文
常用培养基配方范文培养基配方是微生物学研究的基础,它们提供了养分和条件,促进微生物的生长和繁殖。
常用培养基配方有多种,以下是几个常用的配方范文。
一、莱文斯坦-鲍德尔培养基(Luria-Bertani agar)配方:成分:1.蛋白胨:10克2.酵母提取物:5克3.食盐:10克4.琼脂:15克5.蒸馏水:1000毫升6.高氯酸钠(0.1M):2毫升(pH7.2)制备方法:1.将蛋白胨、酵母提取物和食盐加入蒸馏水中,加热至溶解。
2.加入琼脂并搅拌均匀,再加入高氯酸钠调节pH值。
3.煮沸1~2分钟,然后分装入培养皿中。
注意事项:1.注意消毒操作,以防止污染。
2.琼脂的煮沸时间通常为15~20分钟。
二、营养琼脂培养基(Nutrient agar)配方:成分:1.蛋白胨:5克2.细胞色素:1克3.维生素B1:0.1克4.卵黄:10克5.食盐:5克6.琼脂:15克7.蒸馏水:1000毫升制备方法:1.将蛋白胨、细胞色素、维生素B1、卵黄和食盐加入蒸馏水中并加热溶解。
2.加入琼脂并搅拌均匀。
3.煮沸1~2分钟,然后分装入培养皿中。
注意事项:1.注意消毒操作,以防止污染。
2.煮沸时间可根据需要适当延长,但不要超过20分钟。
三、马尿素琼脂培养基(MacConkey agar)配方:成分:1.蛋白胨:17克2.硼砂:1.5克3.细胞色素:2.5克4.氯化钠:5克5.水合甲基红:0.03克6.钴绿:0.015克7.红绿二色砂:0.15克8.琼脂:13.5克9.蒸馏水:1000毫升制备方法:1.将蛋白胨、硼砂、细胞色素、氯化钠、水合甲基红、钴绿和红绿二色砂加入蒸馏水中并加热溶解。
2.加入琼脂并搅拌均匀。
3.煮沸1~2分钟,然后分装入培养皿中。
注意事项:1.注意消毒操作,以防止污染。
2.此培养基适用于选择肠道革兰氏阴性杆菌。
以上是常用的几个培养基配方范文,供参考使用。
在制备培养基时,需要注意消毒操作,以防止污染。
另外,不同微生物对培养基的要求也有所不同,可以根据实际需要进行配方的修改和优化。
培养基 配制方法
培养基配制方法
培养基的配制方法是根据不同微生物的生长要求来确定的。
下面是一般的培养基配制方法:
1. 准备所需成分:根据所需的培养基成分,准备好相应的化学品和试剂,如氨基酸、糖类、盐类、维生素等。
2. 称量和溶解:按照配方中各成分的比例和浓度,称取相应的化学品,并加入适量的蒸馏水或去离子水中溶解。
3. 调节pH 值:使用pH 仪或pH 纸检测溶液的pH 值,并根据需要,用盐酸或氢氧化钠等酸碱溶液调节pH 值,使其符合要求。
4. 加热和消毒:将配制好的培养基溶液倒入试管、烧杯等容器中,并加热至沸腾,持续煮沸几分钟以杀灭其中的微生物。
5. 经冷却和灭菌:将煮沸后的培养基放置自然冷却至室温,并使用高压灭菌器或培养器进行灭菌处理,以确保培养基的无菌性。
6. 添加营养补充物:在无菌培养基冷却后,根据需要可以添加营养补充物,如血清、酵母提取物等,以满足特定微生物的生长需求。
7. 盛装分装:将配制好的培养基倒入无菌试管、琼脂瓶或平板上,根据需要冷却凝固成固体或保持为液体状态。
8. 贮存和标签:将分装好的培养基密封保存在低温冰箱或冷库中,并在容器上贴上标签,注明培养基的名称、配方、pH 值和贮存日期等信息。
以上是一般培养基的配制方法,不同类型的培养基可能还有其他特殊的步骤和要求。
在配制过程中要注意无菌操作,以确保培养基的纯净度。
实验室常用培养基的配制方法
实验室常用培养基的配制方法实验室中常用的培养基种类繁多,每一种培养基的配方也各有不同。
下面将介绍几种常见的培养基的配制方法。
1. Luria-Bertani (LB) 培养基:LB培养基通常用于大肠杆菌等细菌的培养。
其主要成分包括蛋白胨、酵母浸膏和食盐。
下面是LB培养基的配制方法:-将10克蛋白胨、10克酵母浸膏和10克食盐加入到1升蒸馏水中。
-用玻璃棒搅拌溶解,然后倒入培养瓶中。
-使用自动压力灭菌器或高压灭菌锅将培养基置于121摄氏度下高压下灭菌20分钟。
-灭菌后,培养基冷却至室温后即可使用。
2.孟德尔培养基:孟德尔培养基常用于植物细胞培养。
其主要成分包括盐类、碳源和维生素。
下面是孟德尔培养基的配制方法:-将所需的盐类(例如硫酸镁、硝酸钾)按照指定比例称量,并加入到1升蒸馏水中。
-添加适量的碳源(例如葡萄糖或蔗糖)以提供能量。
-加入维生素溶液,通常可以购买到已配制好的维生素混合液。
-搅拌溶解后,用自动压力灭菌器或高压灭菌锅将培养基置于121摄氏度下高压下灭菌20分钟。
-灭菌后,培养基冷却至室温后即可使用。
3.YPD培养基:YPD培养基可以用于酵母菌的培养。
其主要成分包括酵母提取物、葡萄糖和酵母浸膏。
下面是YPD培养基的配制方法:-将10克酵母提取物、20克葡萄糖和20克酵母浸膏加入到1升蒸馏水中。
-使用玻璃棒搅拌溶解,然后倒入培养瓶中。
-使用自动压力灭菌器或高压灭菌锅将培养基置于121摄氏度下高压下灭菌20分钟。
-灭菌后,培养基冷却至室温后即可使用。
4. Brain Heart Infusion (BHI) 培养基:BHI培养基可以用于细菌和真菌的培养。
其主要成分包括脑提取物、心脏提取物、肉浸膏和葡萄糖。
-将37克BHI粉末加入到1升蒸馏水中。
-使用玻璃棒搅拌溶解,然后倒入培养瓶中。
-使用自动压力灭菌器或高压灭菌锅将培养基置于121摄氏度下高压下灭菌20分钟。
-灭菌后,培养基冷却至室温后即可使用。
培养基配方及配制方法
培养基配方及配制方法一、培养基配方常用的培养基是复合培养基,包含有机成分和无机成分两部分。
其中,有机成分提供微生物所需的碳源、氮源和能源等,无机成分提供微生物所需的无机盐和微量元素等。
以下是一个典型的复合培养基配方:有机成分:1.蛋白胨:提供氮源和碳源;2.葡萄糖:提供碳源和能源;3.酵母提取物:提供维生素和微量元素。
无机成分:1.磷酸盐缓冲液:提供pH缓冲效果;2.硝酸盐:提供氮源和无机盐;3.氯化钠:提供无机盐;4.磷酸氢二钾:提供缓冲效果和无机盐;5.硫酸镁:提供镁离子。
二、培养基配制方法1.准备容器:使用无菌烧瓶、试管、培养皿等容器,并用高压蒸汽灭菌器进行灭菌处理。
2.称量成分:按照配方中的比例,准确称量有机成分和无机成分。
3.溶解有机成分:将蛋白胨、葡萄糖和酵母提取物分别加入适量的蒸馏水中,通过搅拌或加热溶解均匀。
4.准备无机成分溶液:将磷酸盐缓冲液、硝酸盐、氯化钠、磷酸氢二钾和硫酸镁按照配方中的比例加入适量的蒸馏水中,通过搅拌溶解均匀。
5.校正pH值:使用pH计测定培养基的pH值,如有需要,可以用盐酸或氢氧化钠调节pH值至合适的范围。
6.加入蛋白胨溶液:将溶解好的蛋白胨溶液加入无机成分溶液中,并通过搅拌均匀。
7.加入葡萄糖溶液:将溶解好的葡萄糖溶液加入已配制好的培养基中,并通过搅拌均匀。
8.加入酵母提取物:将酵母提取物溶液加入培养基中,并通过搅拌均匀。
9.调节体积:根据实验需要,可以添加蒸馏水或其他添加剂来调节培养基的体积和浓度。
10.灭菌处理:将配制好的培养基进行高压蒸汽灭菌处理,保证培养基的无菌状态。
以上就是一个典型的培养基配方及配制方法的示例,只是其中的一个例子,不同的微生物可能需要不同的培养基配方和配制方法。
在实验中,根据具体的需求调整培养基的配方,确保能满足微生物的生长需求,并通过灭菌处理保证培养基的无菌状态。
146种常见培养基的配方
146种常见培养基的配方培养基是微生物学实验中常用的一种重要实验工具,通过调配合适的培养基,可以提供微生物生长所需的营养物质,从而促进微生物菌落的繁殖和生长。
下面将介绍一些常见的培养基配方,涵盖了常用的总结培养基、选择性培养基和不同微生物类群的专用培养基。
1.琼脂肉汤培养基(NB)-牛肉脱脂粉5g-酵母提取物2.5g-琼脂12g- 蒸馏水 1000ml2.大肠杆菌复合培养基(LB)-液体培养基-蛋白胨10g-酵母提取物5g-NaCl5g- 蒸馏水 1000ml-琼脂板-蛋白胨10g-酵母提取物5g-NaCl5g-琼脂15g- 蒸馏水 1000ml3. 肠杆菌选择性琼脂培养基(MacConkey琼脂培养基)-蛋白胨17g-紫胆汁盐1.5g-普鲁士蓝盐1.5g-琼脂12g- 蒸馏水 1000ml4. 脱氧胆盐琼脂培养基(Deoxycholate Agar)-脱氧胆酸钠20g-普鲁士蓝盐0.8g-蛋白胨7.5g-琼脂12g- 蒸馏水 1000ml5.阿米巴选择性琼脂培养基(KV培养基)- 鸡蛋清 20ml- 中性红溶液 12ml-NaCl0.5g-纤维素0.25g- 盐酸 1ml-琼脂15g- 蒸馏水 1000ml6. 革兰氏阳性菌选择性琼脂培养基(Mannitol Salt Agar)-蔗糖10g-氯化钠75g-酵母提取物5g-麦芽提取物1g-琼脂15g- 蒸馏水 1000ml7. 维生素富集琼脂培养基(Burkholder's Basal Salt Medium)-NaNO31g-KCl0.5g-MgSO4·7H2O0.2g-CaCl2·2H2O0.02g-FeSO4·7H2O0.01g-琼脂14g- 蒸馏水 1000ml8. 三氯化铁琼脂培养基(Cetrimide Agar)-硫酸镁0.8g-氯化钴0.05g-氯化锌0.01g-氯化亚铁0.03g-三氯化铁0.03g-比色琼脂糖15g- 过滤蒸馏水 1000ml9. 库氏四甲基铵琼脂培养基(Chapman Agar)-高氯酸钠5g-脲7.5g-酵母提取物2g-海藻酸钠20g-紫胆汁盐0.25g-琼脂12g- 蒸馏水 1000ml10. 还原格兰氏琼脂培养基(Reduced Gram-negative Broth)-蛋氨酸0.5g-异亮氨酸0.5g-半胱氨酸0.5g-菜碱0.5g-胀氨酸0.5g-琼脂7g- 蒸馏水 1000ml这些是其中的一部分常见的培养基配方,涵盖了常用的总结培养基、选择性培养基和不同微生物类群的专用培养基。
简述配制培养基的基本步骤及注意事项
简述配制培养基的基本步骤及注意事项配制培养基是在实验室中进行细胞培养和微生物培养的重要步骤。
正确的配制培养基对于细胞和微生物的生长和繁殖至关重要。
下面将简述配制培养基的基本步骤及注意事项。
一、准备培养基所需的原料和试剂配制培养基所需的原料和试剂包括蛋白胨、酵母提取物、葡萄糖、盐酸、硝酸钠等。
在备用的容器中准备好这些原料和试剂,确保其纯度和质量。
二、称量原料和试剂按照所需的培养基配方,准确称量所需的原料和试剂。
注意要使用准确的称量工具,并遵循准确的称量方法,以确保配制的培养基的准确性和一致性。
三、溶解原料和试剂将称量好的原料和试剂逐一加入适量的蒸馏水中,并充分搅拌溶解。
溶解过程中要注意控制溶解温度和时间,避免结晶或沉淀的产生。
四、调节pH值根据培养基配方的要求,使用盐酸或硝酸钠等酸碱溶液逐渐调节培养基的pH值。
调节过程中要注意使用准确的pH计,并逐渐添加酸碱溶液,以避免pH值过大或过小。
五、加入其他添加物根据具体需要,可以添加抗生素、染料或其他添加物来增强培养基的特定功能。
添加时要注意添加的量不能过多,以避免对细胞或微生物的生长产生不良影响。
六、灭菌配制好的培养基需要进行灭菌处理,以杀死其中可能存在的细菌、真菌或其他微生物。
常用的灭菌方法有高温高压灭菌和过滤灭菌。
要选择适合的灭菌方法,并严格按照操作规程进行灭菌处理。
七、保存和使用灭菌后的培养基应尽快冷却并储存在无菌条件下。
使用时要注意避免污染,使用无菌的培养皿或试管,并采取无菌操作,以确保培养基的纯净度。
在配制培养基的过程中,我们需要注意以下几点:1. 严格按照培养基配方的要求进行操作,避免原料和试剂的误用或误量。
2. 使用纯净的蒸馏水和高质量的原料和试剂,以确保培养基的质量和纯度。
3. 在配制过程中要注意溶解的充分和均匀,避免结晶或沉淀的产生。
4. 调节pH值时要小心操作,逐渐添加酸碱溶液,以避免pH值的剧烈变化。
5. 添加其他添加物时要谨慎,避免添加过多或添加不当。
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20130102-B。
EMB琼脂培养基
原理 EMB培养基含有伊红和美蓝两种染料作为指示 剂。蛋白胨提供细菌生长发育所需的氮源、维生素 和氨基酸,乳糖提供发酵所需的碳源,磷酸氢二钾 维持缓冲体系,伊红 Y 和美蓝抑制绝大部分革兰氏 阳性菌的生长。琼脂是凝固剂。大肠杆菌可发酵乳 糖产酸造成酸性环境时,这两种染料结合形成复合 物,使大肠杆菌菌落带金属光泽的深紫色,而与其 他不能发酵乳糖产酸的微生物区分开。沙门氏菌形 成无色菌落。金黄色葡萄球菌基本上不生长。
培养基的分类
微生物分类: 选择性培养基 鉴别培养基
如何正确选择培养基
1.根据细胞生长特点
2.根据发酵方式 液体培养基 固体培养基
3.从生产实践和科学试验的不同要求选择 种子培养基 发酵培养基 4.从经济效益方面选择生产原料
培养基的配制原则
1.选择适宜的营养物质
2.营养物质浓度及配比合适 3.控制pH条件(7.20-7.40)
苏琬晴,2015-10-13
什么是培养基?
培养基(Medium)是供微生物、植物和动物组
织生长和维持用的人工配制的养料,培养基一般
都含有水、氮源、无机盐碳源、生长因子。
培养基的分类
化学分类:
天然培养基 组合培养基
半组合培养基
培养基的分类
物理分类:
固体培养基
半固体培养基 液体培养基
脱水培养基(商品培养基)
量筒、搅拌子、药匙等。
进行浓配液的配制,其中5mol/L氢氧化钠溶液可根据使用量配制,并 使用洁净的3L量杯盛装待用。
培养基配制过程
培养基配制
进行B2115室注射用水冷点的灭菌及冷却的开启。 进行B2110室注射用水冷点的灭菌及冷却的开启,并使用洁净20L装
液桶加入已冷却的注射用水20L。
培养基主要成分及其作用
亚硒酸钠:谷胱甘肽过氧化酶的辅因子,拥有抗
过氧化物的能力,从而提高细胞在无血清培养基 中的生长速率和活性。
NaHCO3:使细胞代谢产生的CO2 及时溢出培养瓶,
再通过稳定调节恒温箱中的CO2 浓度 (5%)与培
养基中的NaHCO3的含量使pH处于平衡状态。
P188:降低机械剪切力对细胞
制定配液计划,确定目标储罐。 进行配制罐、储罐及过滤支路的CIP。 养基配制罐CIP后,将滤芯安装至目标过滤器,进行滤芯的浸润与完整 性测试。 进行储罐带过滤支路的SIP,并确保滤芯在灭菌过程中没有承受反压及 0.3bar以上的正压。 准备好所需的洁净20L装液桶、10L不锈钢桶、3L量杯、500ml蓝盖瓶、
预定容至设定值后,弹出调整pH值窗口,使用5mol/L氢氧化钠溶
液调整培养基pH至设定值,盖上人孔并拧紧,点击窗口中的确认
按钮,进入定容步序,定容后培养基配制完成,进入定容后的搅拌 倒计时。
清理配液现场,将剩余物料分类放回相应的货架存放,用纯化水擦
拭工作桌面及地面,将垃圾分类放好,用纯化水冲洗配液用器具至 洁净无泡沫。
注意事项
1.氢氧化钠溶液配制会产生大量的热量,故需预先配制放置到室温后使用。 2.配制过程使用的常温注射用水是指冷却至35℃以下的注射用水 3.大豆蛋白胨加入后也会影响观察,故留在最后加入。 4.胰岛素、抑酞酶容易降解失去效用,而且加入后会产生泡沫,影响培养 基澄清度观察,故留在最后加入。
… …补充
培养基批号
培养基批号命名的方式为 YYYYMMDD-A/B/C/D
例1:2013年1月1日配制的培养基分别过滤到2#、3#培 养基储罐,若过滤次序为先2#后3#,则2#储罐的培养 基批号为20130101-A,3#储罐的为20130101-B。
例2:2013年1月2日配制的培养基先后过滤到2个50L装
其他:P188,Hepes等
培养基主要成分及其作用
葡萄糖:是细胞的功能物质和主要碳源物质,然而 其浓度过高则会产生大量乳酸,因而需要对其进行 浓度控制。
谷氨酰胺:是细胞的功能物质和主要氮源物质,然
而当其浓度过高则会产生大量的代谢物氨,因而也 需对其进行浓度控制。
胰岛素:是细胞重要的生长因子,能够刺激葡萄糖 的利用以及RNA、蛋白质和磷酸和合成。
4.原料来源的选择
5.灭菌/过滤处理
水:注射用水 氮源:大豆蛋白胨 无机盐:柠檬酸铁、 L-精氨酸单盐酸盐、硫酸锌七水
培 养 基
合物、硫酸铜溶液、亚硒酸钠溶液、碳酸氢钠等
碳源:葡萄糖 生长因子: L-谷氨酸、L-谷氨酰胺、DL-苏氨酸、L丝氨酸、L-天冬氨酸、L-胱氨酸、叶酸、维生素C、 维生素B6、胰岛素、抑肽酶
进行配制罐pH变送器的校准,完成后将pH电极安装到配制罐上。 将配制罐称重模块清零。
根据配液量进行配液参数设置,运行培养基配制程序。
预加水完毕后,弹出加料提示窗口,直接关闭提示窗口,按顺序称取 所需的物料通过配制罐上的人孔投到配制罐中进行溶解。
培养基配制过程
物料添加完毕后,盖上人孔并拧紧,点击控制界面上三角形叹号图 标,重新弹出加料提示窗口,点击确认,进入预定容步序。
培养基主要成分及其作用
Hepes:对细胞无毒性作用,它是一种氢离子缓冲剂, 能够长时间控制恒定的pH范围。 F12:完全培养基,含有细胞生长所需成分,为细胞 提供充足养分。 DMEM:是一种含各种氨基酸和葡萄糖的培养基。
酚红(包含在完全培养基中):pH指示剂,当pH小
于6.8,呈黄色时,当pH大于8.4时,呈红色。