微生物实验

医学微生物学各论 医学微生物学实验
药学微生物学实验 医学微生物学总论 药学微生物学



医学微生物学的实验课是本课程学习中的重要环节。
医学微生物学实验课的目的：在于使学生加深和巩固对讲课内容的理解和体会，并在系统学习理论的基础上，使学生学习并掌握微生物学的基本操作技术，培养独立思考的能力，为今后的临床实践及科学研究工作打下良好的基础。
实验课考试方法：实验课分数占总分数的20％，其中包括平时成绩及考试成绩两部分，平时成绩10分，考试成绩10分，考试内容为平时实验内容。
实验一 油镜的使用方法与革兰氏染色
实验目的：掌握油镜的使用方法与革兰氏染色的方法，掌握细菌的基本形态和特殊结构。
内容及时间分配：
学时分配：讲授60分钟；示教20分钟；操作120分钟
内容：1. 油镜的使用方法
2. 革兰氏染色的方法
3. 细菌的基本形态
1）球菌：葡萄球菌，革兰氏染色阳性。
2）杆菌：大肠杆菌，革兰氏染色阴性。
3）弧菌：霍乱弧菌，革兰氏染色阴性。
4. 细菌的特殊结构
1）荚膜：肺炎球菌，成双排列，菌体四周不着色的透明圈即是荚膜所在处。经荚膜染色后，菌体与背景呈现紫色，荚膜为无色。
2）鞭毛：伤寒杆菌，菌体四周有周鞭毛。经鞭毛染色后，菌体和周鞭毛均呈紫色。
3）芽胞：破伤风杆菌，菌体细长，顶端可见一正圆形芽胞。经芽胞染色后，菌体为蓝色，芽胞为红色。
实验报告：
1、绘图说明各种形态细菌的大小、形态、排列方式，并注明染色性及放大倍数。
2、绘图说明细菌的特殊结构，并注明染色性及放大倍数。
实验二 培养基的制备与细菌的生化反应
目的：掌握培养基的制备方法与细菌生化反应的操作技术及结果判断
内容及时间分配：
学时分配：讲授60分钟；示教20分钟；操作120分钟
内容：1. 肉汤培养基
2. 固体培养基
3. 半固体培养基
4. 观察双糖铁培养基上细菌的生化反应情况
5. 单糖发酵试验：
6. 靛基质（吲哚）试验
实验报告：
1．记录双糖铁培养基、半固体培养基接种的结果（分析）；
2. 记录细菌代谢产物的观察结果（简要分析）：
单糖发酵试验、硫化氢试验、吲哚试验。
实验三 外界因素对细菌的影响
目的：掌握常用的消毒灭菌的方法
内容及时间分配：
学时分配：讲授60分钟；示教20分钟；操作120分钟
内容：
1. 高压蒸汽灭菌法对细菌的影响
2. 干烤法对细菌的影响
3. 紫外线对细菌的影响
4. 常用化学消毒剂的杀菌实验
5. 药敏实验
实验报告：
1．记录紫外线杀菌结果并分析
2. 记录化学消毒剂的杀菌效果并简要

分析
3. 记录药敏实验结果并分析

实验四 细菌的分布与毒素测定

目的：了解细菌的分布，掌握内毒素测定的方法
内容及时间分配：
学时分配：讲授60分钟；示教20分钟；操作120分钟
内容：
1. 人体皮肤表面细菌的检测
2. 人体咽喉腔中的细菌检查
3. 空气中细菌的检测
4. 水中细菌的检测
5. 内毒素测定---鲎试验
实验报告：
1．记录细菌的分布结果并分析
2. 记录内毒素测定结果并简要分析

实验五 病原性球菌及肠道杆菌的鉴定
目的：掌握病原性球菌及肠道杆菌的鉴定方法及基本实验技术
内容及时间分配：
1. 病原性球菌及肠道杆菌的鉴定方法：讲解40分。
2. 形态观察：病原性球菌及肠道杆菌标本片（7张），要求画图。40分
3. 细菌培养条件及菌落特征观察（示教）：讲解及观察，包括3种葡萄球菌，2种链球菌，大肠杆菌及肠道致病菌，30分
4. 血浆凝固酶检测：讲解及操作，15分
5. 抗链“O”检测：讲解及操作，15分
6. 生化反应实验：讲解及操作，包括葡萄糖发酵，菊糖发酵，甘露醇发酵，双糖铁发酵实验，30分
7. 观察及记录实验结果：30分
实验原理及步骤：见实验指导
注意事项：1.无菌操作 2. 做好标记 3. 废弃物放指定地点 4. 消毒液泡手
思考题：1. 请设计葡萄球菌的鉴定步骤。
2. 请设计大肠杆菌的鉴定步骤。


实验六 肥达氏反应，弧菌，分子杆菌，厌氧菌等的观察
目的：掌握肥达氏反应操作技术，了解弧菌等的形态，熟悉其生物学特性
内容：
1. 形态观察：讲解及观察，包括霍乱弧菌，结核杆菌，厌氧菌，螺旋体。要求画图。40分
2. 细菌培养条件及培养特征观察（示教）：讲解及观察，30分
3. 肥达氏反应：讲解及操作，50分。
4. 抗酸染色：讲解及操作30分
5. 梅毒螺旋体快速血浆反应素实验：讲解及操作，20分
6. 观察结果及记录：30分
实验原理及步骤：见实验指导
注意事项：1. 肥达氏反应试剂量要精确 2. 抗酸染色时勿将染液洒出 3. 观察肥达氏反应结果时勿剧烈振摇试管
思考题：谈谈你对结核杆菌的认识。


实验七 真菌鉴定技术
目的：掌握真菌鉴定技术及真菌的形态结构及培养方法
内容：
1. 真菌鉴定技术：讲解40分
2. 真菌形态观察：讲解及观察50分，包括白色念珠菌，隐球菌，青霉菌，曲霉菌，要求画图。
3. 真菌培养条件及培养特征观察（示教）：讲解及观察，30分
4. 真菌小培养：讲解及操作，30分。
5. 真菌小培养形态观察：讲解及操作30分。
6. 记录结果：20分。
实验原理及步骤：见实验指导
注意事项：1. 无菌操作 2. 消毒液泡手
思考题：真菌怎样进行生长繁殖？


实验八 病毒鉴定技

术
目的：掌握病毒鉴定技术及培养方法
内容：
1. 病毒鉴定技术：讲解60分
2. 病毒形态观察：图片讲解及观察30分。
3. 病毒培养方法及结果：讲解及操作，60分，包括鸡胚培养法。
4. 乙肝病毒鉴定法：ELISA法示教，20分
4. 记录结果：30分。
实验原理及步骤：见实验指导
注意事项：1. 无菌操作 2. 消毒液泡手
思考题：病毒怎样进行生长繁殖？