最新高三生物pcr技术复习试题讲课教案

高三生物PCR技术复习试题

一、知识回顾

聚合酶链反应法(PCR法)：PCR技术可模拟细胞核内DNA复制的天然过程，可在3～4h内使目的基因扩增上百万倍，达到肉眼可见的量，不需要放射性同位素标记就能分析、检测基因，大大提高了基因检测的灵敏度。具体过程：首先，把DNA加热，使双链分开；然后将人工合成的一段单链核苷酸即DNA引物，黏附到DNA单股螺旋上；之后按照引物就能够复制出DNA来，重复放大50次后就可以制成10亿个基因。在PCR放大过程中的关键是利用耐热DNA聚合酶使少量的DNA在短期内即能扩增数百万倍，便于分析、检测。

二、试题精练

1、PCR技术是一种DNA的扩增技术。在一定条件下，加入模板DNA、DNA聚合酶、dATP、dCTP、dGTP、dTTP可以实现DNA的扩增。据此判断不合理的是

A．dATP在DNA扩增中可以提供能量，同时作DNA合成的原料

B．dTTP完全水解后产物有胸腺嘧啶、磷酸、核糖

C．DNA扩增过程未加解旋酶，可以通过先适当加温的方法破坏氢键，使模板DNA解旋

D．CTP水解脱去两个磷酸基后是组成RNA的基本单位之一

２、多聚酶链式反应（PCR）是一种体外迅速扩增DNA片段的技术。PCR过程一般经历下述三十多次循环：95℃下使模板DNA变性、解链→55℃下复性（引物与DNA模板链结合）→72℃下引物链延伸（形成新的脱氧核苷酸链）。下列有关PCR过程的叙述中不正确的是：（）

A．变性过程中破坏的是DNA分子内碱基对之间的氢键，也可利用解旋酶实现

B．复性过程中引物与DNA模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成

C．延伸过程中需要DNA聚合酶、A TP、四种核糖核苷酸

D．PCR与细胞内DNA复制相比所需要酶的最适温度较高

3、下列有关PCR技术的叙述，不正确的是：（）

A．PCR技术经过变形、复性、延伸三个阶段

B．PCR技术可用于基因诊断，判断亲缘关系等

C．PCR技术需在体内进行D．PCR技术是利用碱基互补配对的原则

4、PCR技术扩增DNA,需要的条件是( )

①目的基因②引物③四种脱氧核苷酸④DNA聚合酶等⑤mRNA ⑥核糖体

A、①②③④

B、②③④⑤

C、①③④⑤

D、①②③⑥

5、在基因工程中，把选出的目的基因（共1000个脱氧核苷酸对，其中腺嘌呤脱氧核苷酸460个）放入PCR仪中扩增4代，那么，在PCR仪中放入胞嘧啶脱氧核苷酸的个数至少应是

A．640 B．8100 C．600 D．8640

6、对禽流感的确诊，先用PCR技术将标本基因大量扩增，然后利用基因探针，测知待测标本与探针核酸的碱基异同。下图P表示禽流感病毒探针基因在凝胶的电泳标记位置，M、N、Q、W是四份送检样品在测定后的电泳标记位置，哪份标本最有可能确诊为禽流感（）

A．M B．N C．Q D．W

7、某考古学家在西伯利亚泰加林地区的冰中，发现了一种冰冻的已灭绝的巨大动物的肌肉。他想了解该巨型动

物的DNA与现今印度大象的DNA的相似性，于是做了如下检测工作，其中正确的操作步骤及顺序是

①降低温度，检测处理后形成的杂合DNA双链区段

②通过PCR技术扩增巨型动物和大象的DNA

③把巨型动物的DNA导入大象的细胞中

④在一定的温度条件下，将巨型动物和大象的DNA水浴共热

A.②④③

B.②④③①

C.③④①

D.②④①

8.(8分)聚合酶链式反应(PCR技术)是在实验室中以少量样品DNA制备大

量DNA的生化技术，反应系统中包括微量样品DNA、DNA聚合酶、引物、

足量的4种脱氧核苷酸及ATP等。反应中新合成的DNA又可以作为下一轮

反应的模板，故DNA数以指数方式扩增，其简要过程如右图所示。

（1）某个DNA样品有1000个脱氧核苷酸，已知它的一条单链上碱基

A:G:T:C=1:2:3:4，则经过PCR仪五次循环后，将产生个DNA分

子，其中需要提供胸腺嘧啶脱氧核苷酸的数量至少是个。

（2）分别以不同生物的DNA样品为模板合成的各个新DNA之间存在差异，这些差异是

。

（3）请指出PCR技术与转录过程的三个不同之处：

①。

②。

③。

答案：（1）32 6200（2分）（2）碱基（脱氧核苷酸）的数目、比例和排列顺序不同（2分）

（3）PCR技术以DNA的两条单链为模板合成子代DNA，转录以DNA的一条单链为模板合成RNA；

PCR技术的原料为脱氧核苷酸，转录的原料是核糖核苷酸；

二者反应时的催化酶不同（或其它合理答案）

9．（7分）资料显示，近十年来，PCR技术（DNA聚合酶链式反应技术）成为分子生物实验的一种常规手段，其原理是利用DNA半保留复制的特性，在试管中进行DNA的人工复制（如下图），在很短的时间内，将DNA扩增几百万倍甚至几十亿倍，使分子生物实验所需的遗传物质不再受限于活的生物体。请据图回答：

（1）加热至94℃的目的是使DNA样品的键断裂，这一过程在生物体细胞内是通过酶的作用来完成的。通过分析得出新合成的DNA分子中，A=T，C=G，这个事实说明DNA分子的合成遵循。

（2）新合成的DNA分子与模板DNA分子完全相同的原因是

和。

（3）通过PCR技术使DNA分子大量复制时，若将一个用15N标记的模板DNA分子（第一代）放入试管中，以14N 标记的脱氧核苷酸为原料，连续复制到第五代时，含15N标记的DNA分子单链数占全部DNA总单链数的比例为。

（4）PCR技术不仅为遗传病的诊断带来了便利，而且改进了检测细菌和病毒的方法。若要检测一个人是否感染了艾滋病病毒，你认为可以用PCR扩增血液中的（）

A．白细胞DNA B．病毒蛋白质 C．血浆抗体 D．病毒核酸

答案：（1）氢，解旋，碱基互补配对原则。

（2）DNA分子中独特的双螺旋结构(或以模板DNA分子的一条链为模板进行半保留复制)

微量DNA样品

DNA互补链分离开为单链

以单链为模板合成子代DNA

循环重复