第八章对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类

2. 测定的主要条件
（1）加KBr增加反应速度 若不加入溴化钾，在盐酸存在下，重
氮化反应的机理为
NaNO2+HCl→HNO2+NaCl HNO2+HCl→NOCl+H2O
NO+ ClNH2 慢
H N NO
快
N N OH
快
N N+Cl-
HNO 2 + HBr HNO 2 + HCl
NOBr + H 2O （1）K1 NOCl + H 2O （2）K2
第八章 对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类 局麻药物的分析
1. 掌握本类药物的结构、性质；代表药物的鉴别、 检查和含量测定的方法、原理与特点。
2. 熟悉主要药物的杂质结构、检查方法和含量限 度。
3. 了解影响本类药物稳定性的主要因素及体内样 品与临床检测方法。
第一节 结构与性质
一、对氨基苯甲酸酯类药物基本结构与典型药物 基本结构(含对氨基苯甲酸酯的母核)
5. 吸收光谱特征：结构中有苯环及相应的取代基与 脂烃胺侧链，有紫外和红外特征吸收。
6. 其他特性：游离碱，油状液体或低熔点固体难溶 于水，易溶于有机溶剂；盐酸盐白色结晶粉末，具 一点的熔点，易溶于水和乙醇，难溶于有机溶剂。
第二节 鉴别试验
H R1N
R1
O C OR2 重氮化-偶合反应
与重金属离子反应
C3H7 N
罗哌卡因为局
HCl 麻药，其有效构 型为S型，R型心 脏毒性较大，因 此必须对罗哌卡 因对映体纯度进 行检查和控制。
检查方法 毛细管电泳法（USP）
第四节 含量测定
一、亚硝酸钠滴定法 sodium nitrite method
1. 原理 具有游离的芳伯氨基
另外，具潜在芳伯氨基的药物，如具酰胺基 药物经水解，也可用本法测定。
进样量：10µl
供试品溶液色谱图中如有与对氨基苯甲酸对照品相应 的杂质峰，按外标法以峰面积计算，不得过0.5％。
二、盐酸氯普鲁卡因注射液中有关物质 和光解产物的检查
由于盐酸氯普卡因注射液在生产和贮藏过程中 会产生4-氨基-2-氯苯甲酸，影响疗效和使成品的颜 色，故此需要对降解产物进行检查
1. HPLC检查4-氨基-2-氯苯甲酸（USP）
2.盐酸普鲁卡因胺的鉴别 盐酸普鲁卡因胺 + H2O2 ⎯⎯Δ→异羟肟酸 + FeCl3 → 异羟肟酸铁（紫红色 → 暗棕色 → 棕黑色）
三、水解产物反应 1. 盐酸普鲁卡因的鉴别方法
盐酸普鲁卡因＋NaOH 白色↓ △ 油状物 △ 油状物消失并产生气体
使湿润的红色石蕊试纸变蓝
？＋HCl 白色↓ 过量HCl 白色沉淀溶解
3. 指示终点的方法
永停滴定法 ChP
在铂-铂电极间加一低电压 （约50mV），并串联一个 微电流计，电极浸在被滴 定的溶液中
终点前： 无过量HNO2 终点时： 有过量HNO2
无电流 有电流（使指针偏离零永停
在某一位置）
二、非水溶液滴定法
盐 酸 布 比 卡 因 的 含 量 测 定 : 取 本 品 约 0.2g ， 精 密 称 定 ， 加 冰 醋 酸 20ml 与 醋 酐 20ml 溶 解 后 ， 照 电 位 滴 定 法，用高氯酸滴定液（0.1mol/L）滴定，并将滴定的 结 果 用 空 白 试 验 校 正 。 每 1ml 高 氯 酸 滴 定 液 （0.1mol/L）相当于32.49mg的C18H28N2O •HCl。
3. 请用化学方法方法鉴别苯佐卡因、盐酸普鲁卡因、 盐酸利多卡因。
4. 取标示量为0.5g的对氨基水杨酸钠片10片，除去 糖后。精密称定得5.8580g，研细，称取1.0814g按规 定配制成100ml溶液，滤过，准确量取续滤液50ml， 加水和盐酸后，照永停滴定法滴定到终点，用去亚硝 酸钠溶液（0.1012mol/L）20.92ml，求此片剂中含 C7H6O3Na.2H2O为标示量的多少？1ml亚硝酸钠滴定液 （0.1mol/L）相当于C7H6O3Na.2H2O 21.12mg 。
标示量（%）= V ×T × F ×W ×100% W ×B
O
H
R1N
C OR2
典型药物
H2N
COOC2H5
苯佐卡因
H2N
COOCH2CH2N(C2H5)2 ·HCl
盐酸普鲁卡因
CH3(CH2)3NH
COOCH2CH2N(C2H5)2 HCl
盐酸丁卡因
H2N
COOCH2CH2N(C2H5)2 ·HCl
Cl
盐酸氯普鲁卡因
H2N
CONHCH2CH2N(C2H5)2 HCl
芳胺：盐酸 1 : 2.5～6
（3）反应温度
反应的速度加快 若温度过高 重氮盐加速分解
滴定液易分解逸失
室温（10～30℃）条件下滴定
（4）滴定速度 避免亚硝酸挥发和分解
重氮化反是分子反应，故滴定不宜过快。 中国药典：先快后慢（滴定管尖端插入液面下2/3 处，滴定液一次大部分放下，近终点时方改为 Nhomakorabea速 滴定）。
供试品溶液的色谱图中如有与2，6-二甲基苯胺保留 时间一致的色谱峰，其峰面积不得大于对照品溶液 主峰面积（0.04%），其他单一杂质峰面积不得大于 对照溶液主峰面积的0.5倍（0.5%），其他各杂质峰 面积的总和不得大于对照溶液主峰面积（1.0%）。
四、盐酸罗哌卡因的光学纯度检查
CH 3 O
NHC CH 3
盐酸丁卡因的含量测定:取本品约0.25g，精密称定， 加乙醇50ml振摇使溶解，加0.01mol/L的盐酸溶液 5ml，摇匀，照电位滴定法，用氢氧化钠滴定液 (0.1mol/L)滴定，以两个突越点体积之差计算。每 1ml氢氧化钠滴定液(0.1mol/L)相当于30.08mg的 C15H24N2O2•HCl。
2. LC-MS检查光解产物（盐酸羟基普鲁卡因）
H2N
COOCH2CH2N(C2H5)2 ·HCl Cl
三、盐酸利多卡因注射液中2,6-二甲基苯
胺及其他杂质的检查
NH2
检查方法：HPLC
H3C
CH3
供试品溶液：2mg /ml
对照溶液：0.02mg/ml
2，6-二甲基苯胺对照品溶液：0.8μg/ml
酚羟基 特性
（－）无酚羟基
（－）无酚羟基
（+）具有邻苯二 酚或苯酚结构， 除盐酸克仑特罗
弱碱性
（+）脂烃胺侧链
（+）脂烃胺侧 链，除苯佐卡因外
（+）脂烃胺侧链
水解 特性
光学 活性
（+）芳酰氨基 （－）
（+）有酯键或酰 胺键
（－）
（－）
（+）大多有手性 碳原子
1. 盐酸普鲁卡因注射液为什么会变黄？
2. 简述亚硝酸钠滴定法测定盐酸普鲁卡因含量的原 理及加入各种试剂的作用。
C4H9HN
COOCH 2CH2N(CH 3)2 + HNO2
H2O +
C4H9N NO
COOCH 2CH2N(CH 3)2
乳白色沉淀
二、与重金属离子反应
1. 盐酸利多卡因的鉴别
盐酸利多卡因
+
硫酸铜
碳酸钠
⎯⎯⎯⎯→
蓝紫色
⎯氯⎯⎯仿→
黄色
对氨基苯甲酸酯类不发生此反应
盐酸利多卡因 + CoCl 2 ⎯H⎯+ → 亮绿色细小 ↓
四、高效液相色谱法
盐酸利多卡因注射液
色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合 硅胶为填充剂；以磷酸盐缓冲液-乙腈（50：50）用 磷酸调节pH值至8.0为流动相；检测波长为254nm。理 论板数按利多卡因峰计算不低于2000。
测定法 精密量取本品适量（约相当于盐酸利多卡因 100mg），置50ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇 匀，精密量取20μl注入液相色谱仪，记录色谱图； 另取利多卡因对照品约85mg，精密称定，置50ml量瓶 中，加1mol/L盐酸溶液 0.5m使溶解，用流动相稀释 至刻度，摇匀，同法测定。按外标法以峰面积计算， 并乘以1.156，即得。
R1
C2H5 CH2CH2N(C2H5)2
R2 NHCOR4
R3
1. 芳伯氨基：重氮化－偶合反应；与芳醛缩合成 Schiff碱；易氧化变色等
2. 水解：受光线、热、碱的影响；盐酸丁卡因 →BABA，其余药物→PABA
3. 弱碱性：叔胺氮原子，生物碱沉淀剂反应，非水 溶剂滴定
4. 与重金属离子发生沉淀反应：利多卡因、布比卡因、 罗哌卡因、妥卡尼酰氨基上的氮可在水溶液中与铜离 子或钴离子络合，生成有色的配位化合物沉淀。
盐酸普鲁卡因胺
二、酰苯胺类药物基本结构与典型药物
R2
R1
NHCOR4
R3
H3C
NHCOCH2N(C2H5)2 CH3
· HCl · H2O
盐酸利多卡因
CH3 NHCO
C4H9 N
CH3 盐酸布比卡因
·HCl
CH3 NHCO
C3H7 N
CH3 盐酸罗哌卡因
·HCl
三、主要理化性质
O
R1HN
C OR2
R2 NHCOR4
与生物碱沉淀试剂反应 水解反应
R3
一、重氮化-偶合反应
具有芳伯氨基或潜在的芳伯氨基的药物
Ar
NH2
HCl NaNO2
重氮盐
OH- 橙黄～猩红色
β− 萘酚
苯佐卡因和盐酸普鲁卡因的鉴别 橙黄到猩红色沉淀
区别盐酸丁卡因
无重氮化反应，分子中有芳香第二胺结构可与 亚硝酸钠作用，生成 N-亚硝基化合物。
∵ K1 ≈ 300 K2 加入KBr，可增大被测溶液中NO+的浓度，所以