白喉棒状杆菌、溃疡棒状杆菌和假结核棒状杆菌的鉴定程序

白喉棒状杆菌、溃疡棒状杆菌和假结核棒状

杆菌的鉴定程序

IDENTIFICATION OF CORYNEBACTERIUM DIPHTHERIAE , CORYNEBACTERIUM ULCERANS AND CORNYNEBACTERIUM PSEUDOTUBERCULOSIS

ISSUE NO :2 ISSUE DATE:03.02.06 ISSUED BY :Standards Unit, Evaluations and

Standars Laboratory

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索引

索引 (2)

修订程序 (3)

本文件主要内容 (4)

介绍 (4)

毒素

特征

鉴定原则

1 安全事项 (6)

2 目标菌株 (6)

3 鉴定 (7)

4 报告 (9)

5 参考资料(略)

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修订程序

本文件检索标号BSOP ID 2

本文件标题白喉棒状杆菌、溃疡棒状杆菌和假结核棒状杆菌的鉴定程序每一标准操作程序都有一个独立的修订记录.当前本文件的修订记录列在本页. 每一份调整文件都由实验室的校对人员来更新.

修订数/ 日期废弃的

发行号

插入的

发行号

页码涉及的章节修订

2/

03/02/2006 1.1 2 7

8

11

章节1

章节3.3

章节6

从DH Green Book参考

表格内的试验步骤

增加联系方式

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白喉棒状杆菌、溃疡棒状杆菌和假结核棒状杆菌的鉴定程序

文件主要内容:

本sop介绍如何把咽喉、皮肤和其它部位的分离出来的棒状杆菌属鉴定到白喉棒状杆菌、溃疡棒状杆菌和假结核棒状杆菌种水平。这些细菌可以从临床典型咽部白喉或皮肤白喉以及其它少见的临床感染病例中分离到。并且重视由棒状杆菌属产生的毒素。

介绍

本sop介绍4种试验用于病原菌棒状菌属的初步鉴定，并且建议将这些病原菌送往上一级参考实验室进行确诊试验和毒素试验。

对于那些不产生毒素的棒状杆菌属请参考BSOP ID 3－李斯特菌属、没有毒素棒状杆菌属和其它没有芽孢的革兰阳性杆菌鉴定。

毒素2，3

目前研究表明白喉棒状杆菌群包括：白喉棒状杆菌、假结核棒状杆菌和溃疡棒状杆菌。其中白喉棒状杆菌包括4中生物型：gravis，mitis，intermedium和belfanti。

特征

棒状杆菌属是革兰阳性杆菌，通常细菌末端呈棒状，菌体有时成单或成双。有些菌体染色不均匀呈珠状。所使用的培养基包括血和亚碲酸钾，比如Hoyle亚碲酸盐培养基是一种很好的选择性鉴别培养基。白喉棒状杆菌在Hoyle亚碲酸盐培养基培养16-18h后呈现极微小的灰色或黑色菌落，培养48h后产生特征性菌落。潜在的产毒型棒状杆菌株也可以在血平板上生长。不同菌株的菌落形态是不同的。溃疡棒状杆菌和假结核棒状杆菌可以在血平板上产生轻微的溶血。尽管白喉棒状杆菌可以在营养琼脂上生长，但加入血清或全血有利于提高它的生长速度。

白喉棒状杆菌、假结核棒状杆菌和溃疡棒状杆菌是一种兼性厌氧，没有芽孢、没有荚膜，抗酸阴性的细菌。这些菌株没有动力，但触酶阳性。

溃疡棒状杆菌和假结核棒状杆菌都是尿素阳性，这可以和白喉棒状杆菌区分。这些菌株内包含了phage－borne白喉毒素基因，可以产生毒素。毒素型的菌株可以引起白喉或白喉样的疾病。对于可能产毒素的棒状杆菌株应当尽快送往参考实验室进行毒素的检测。通过PCR来扩增白喉毒素基因上的亚组可以用来检测毒素基因（白喉毒素的结构基因），尽管不能确定一定产生毒素。

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PCR是一种快速的试验，可以在接受到菌株后3-4小时内完成检测。毒素确诊试验还要结合毒素的表型试验。

鉴定原则

通过最初培养基上的菌落形态、革兰染色和4种初步试验可以在4个小时内初步鉴定产毒素型的棒状杆菌。附加的确诊试验需要使用商品化的试剂盒并结合毒素试验。建议将怀疑的菌株送往当地的CDC进行确诊试验和毒素检测。本SOP不建议使用Albert染色，因为异染颗粒不是特异性针对白喉棒状杆菌。

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