T淋巴细胞在wave中高密度快速培养 CN

合集下载
  1. 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
  2. 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
  3. 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
7
భ 1. ፕ᰸ञ䔸⮳㜙ߗ土䛼╻∗ᣖ‫ݥ‬஗⮳ WAVE Bioreactor System 2/10ȡ
ₓๅ喌Cellbag⩎➘ࣼᏃ஗䲍፧▤≪喌ञД౗̯͙ന‫ڪ‬㶺͜Ⴭ ⣟10Լ҂囗ម෍喌ञД䭼ѽᣔ⻼䛾⮳㺰ⅱ঻ന‫⁐้⋡ڪ‬䒛尢 яВ䒛尢⮳䰯㺰ȡҺັ喌̯͙10L⮳Cellbagന‫ڪ‬ञД⩗ѽ㜢 0.5 L⮳‫݌‬໺҂囗ᐯ໺喌♥ऽ䮾Ɐ⩎䪮ߏ‫ڔ‬᫟凋⮳ന‫ڪ‬ഩ‫ݟ‬ᰯ ㏷⮳5Lന‫ڪ‬҂囗ȡᏃ⩗WAVE Bioreactor㈪㐎⮳㜙ߗ土䛼╻∗ ߎ㘬喌ञД౗㐣ᠰჵ䬜㈪㐎⮳ऻᬥ䓭‫ݟ‬䲍፧倇⮳㏵㘍ჵᏕȡ Ꮓ䄔∗ᘾ‫ݟ‬喌ࢢҮ㷚ម෍⮳ T ㏵㘍ఏ䖆яᝅ㶗಺➨ᒰ̼ऻ 㔻䛶⩗̼ऻ⮳᧼ҋₔ俓喌♥㔻̼䃩᭞ॕ䔸᠘Һັ CD8 䭢ᕖ 喈CD8+喉ȠCD4+Ƞ㗮⭓⊧⋕ᝅ䖆яԝ亟⮳T㏵㘍へ喌T㏵㘍 ⓯≪঻ម෍⮳࣎⤵᭞Ⱗѫ⮳ȡ䔈Ύ㶗ᬽᱛ᪶䃩䔟⮳⩗ν჻ 䯵⮳ๅগ㵯 T ㏵㘍⮳ម෍ₔ俓ञД⩗ν‫ڥ‬Ѕ T ㏵㘍ω㓓喌Ύ ञД⩗ν‫ڥ‬Ѕ⮳⓯≪ₔ俓ȡᱛឯᱞᏃ⩗䯵͜‫∗ڢ‬Ү⩗ WAVE Bioreactor System 2/10䛶⩗䔍㐜╻∗ന‫ڪ‬ὐᐾᄨT㏵㘍⮳ម ෍喌ѵ̼࠴᠛㏵㘍⮳䔸᠘Ƞᩥ㣦঻≆⋓ȡ
T㏵㘍‫঻≪⓯ڼ‬㏵㘍ఏၿ⩎ϖ
౗せ11๘喌Ү⩗Dynal MPCⷰ䧰 (Invitrogen)ϽDynabeads䮓࣪ ㏵㘍喌⩗ߏ5%ϩ㵯⌴⮳PBS≆⋓喌Д1×106㏵㘍/ml䛼᫟ᣔ⻼ ౗ग़᰸200 U/mL IL-2⮳2 mL᫟凋ന‫ڪ‬ഩ͜ȡ㏵㘍̼आ‫⓯ݩ‬ᝅ ⩗᫟⮳CD3/CD28 DynabeadsД3:1喈ⷰ⤏喚T㏵㘍喉℃Һ‫⓯ڼ‬ ≪18‫ݟ‬20 hȡᩥ䯵̹⌴ᎥҮ⩗CBA Th1/Th2㏵㘍ఏၿ䄄‫Ⰱݱ‬ (BD Biosciences)≺჉㏵㘍ఏၿ⩎᜿ⅣᎢ喌ᵨᢝࢱੵ䄣ᬽΕ䕉 䓶≰ᐾ㏵㘍ЙܵᲿȡIL-2ȠIL-4ȠIL-5ȠIL-10ȠINF-Ż঻TNF-Ź ⮳⊂Ꮥ≺჉᭞ᐩ⿺౗ᄨ⃾⻼㏵㘍ఏၿ⮳ᴶ۵ᰡ㏮ഩⵯ̹ȡ
㐂᳋
ᝀЛጡ㏾ᄨνWAVE Bioreactor⩎➘ࣼᏃ஗͜㈪㐎͜T㏵㘍ម ෍⮳ळ⻼᧼ҋₔ俓䔊㵻εчࡅ喌䔈䛻ᝀЛ᣿ӊ⮳㐂᳋Ე㜙Ү ⩗ग़᰸ᰯ᫟䒞Х❷ᱛ2.61⮳WAVE Bioreactor System 2/10⮳͓ ͙1 L঻̯͙5 L ⮳T㏵㘍ന‫➘ڪ‬ȡ2.61❷ᱛ⮳䒞Х‫ڦ‬᰸ᩨ䔊⮳ ⍘Ꮥߏ☜ᣖ‫ݥ‬᫨ᐾ喌ञДჍ⣟䲍፧㇭⶝⮳⍘Ꮥᣖ‫ݥ‬喌䔈ᄨν Cellbag⩎➘ࣼᏃ஗͜Ү⩗ᄾ҂囗ന‫ڪ‬ᬥᅓ‫ڥ‬䛼㺰ȡₓๅ喌㜙 ߗ䔍㐜╻∗ᣖ‫ݥ‬Ύ㷚ᬽ᭭ᩨ䔊喌ఏͩ⃾⁐ന‫ڪ‬ഩ㒝ᢑ䘬᭞Д ᩥ㣦̯͙ࢄ⁐҂囗ᐯ໺喌♥ऽ供̹䔊㵻㶔᫈ȡఏₓ喌Cellbag ⩎➘ࣼᏃ஗‫ڴ‬҂囗⮳∑ߗⅧ䔋̼щ䊴䓶̯͙ࢄ⁐㶔᫈҂囗 喈ັ50 mL喉喌Ү㏵㘍ന‫ڪ‬⣞඲ᰣߏ甘჉ȡ⩠ν‫ڦ‬᰸ᰯ᫟⮳ 2.61❷ᱛ䒞Х喌ᩥ㣦঻঻㶔᫈㷚้͙ܵͩᓝᄾ⮳㶔᫈/ᩥ㣦喌 䭼ѽε㏵㘍൤౗⊝␱䓶␓㛋‫ڴ‬ᝅ非䓶䓶␓㛋⮳䷽䮘ȡ⩗2.61 ❷ᱛ䒞Х䔊㵻ε้䶨侻䃰ⵃ里喌㐂᳋᭭⹩̽ͺ‫❷ݼ‬ᱛ⮳䒞Х Ⱗ℃喌㏾䓶 7 ๘⮳ന‫ڪ‬ऽ㏵㘍⩎䪮℃Д‫ݼ‬ຬ 60% 喈㐂᳋⇐᰸ ᭭⹩喉ȡ͓͙1 L⮳ന‫⋡ڪ‬Ү⩗Ⱗऻ⮳䊦໺ന‫ڪ‬ഩѵ⩗̼ऻ⮳ ᥶ߗὐᐾᎢ㵻ന‫ڪ‬喚ᝅ㔴౗᪣͙ന‫ڪ‬䓶彡Ү⩗10 rpm঻6°࠯ 䕎᥶ߗ喌ᝅ㔴᥶ߗ䕎Ꮥ঻㼁ᏕϽᐯ໺ᬥ⮳10 rpm঻6°䔿⌿᣿ 倇‫ݟ‬ന‫ڪ‬㐂᲎ᬥ⮳17 rpm঻7°ȡ ᫟凋ܵ⻪⮳ PBMCs 䔊㵻䃐᪟喌㶗ᒰळ͙㏵㘍⮳㶗䲑ᴶ䃟㯺 ⮬Ƞ≪ߊ঻๖ᄾ/҂囗へ喌Ꭵ⩗CD3/CD28⓯≪ⷰ⤏䲈ᔰന‫ڪ‬ ͓๘ȡ䔈⃤ᬥ䬣⶝Ԍⷰ⤏̽㏵㘍ͺ䬣㉖ჵᣔ㼕ᎥҮ T ㏵㘍䓭 ‫ݟ‬ᄨ᪟⩎䪮ᱎ喌౗䒛尢‫ ݟ‬System 2/10 ‫ݼ‬䓭‫ݟ‬䋢๎⮳㏵㘍᪟ 喈̯㝛౗せ3‫ݟ‬4๘喉ȡᄨν1 L঻5 L⮳ന‫ݚܵ⋡ڪ‬Ү⩗1.25 × 108 ঻2.77 × 108 MNCҋͩ䊦໺࣎᫈ȡ౗⓯≪ᬥ喌ᄨν͓͙ 1 L⮳ന‫⋡ڪ‬CD3+T㏵㘍⮳⮭ܵ℃ͩ76%喌ᄨν5 L⮳ന‫ͩ⋡ڪ‬ 72%喌‫͜ڥ‬๖้᪟᭞CD25䭣ᕖ喈ࢢ๠≪喉喈㶗1喉ȡఏₓ喌 CD3+T ㏵㘍౗ᐯ໺ᬥ䃐テ⮳᪟䛾ᄨ 1 L ঻ 5 L ⮳ന‫ͩݚܵ⋡ڪ‬ 9.5 × 107 ঻1.88 × 108 ㏵㘍ȡ౗๖㏕5๘⮳ന‫ڪ‬ऽ喌CD3+T㏵ 㘍㏳ܵጡ㏾෍ߏ‫ ݟ‬90% Д̹喌̓܏ͽᝯ᰸䔈ϊ㏵㘍䘬㶗䓭 CD25喌䃰ᬽ倇Ꮥ⮳⓯≪ȡ
Ϻ㏼
౗҂‫ڴ‬喌̯ᬕ T ㏵㘍आ҂̽ំ࣎䕁ॷ㏵㘍㐂ष喌 T ⋺ጣ㏵㘍 ᅠ㷚⓯≪Ꭵ㷚䄠ᄫ෍⃅ȡ T ㏵㘍㷚⓯≪ऽщ㏾ࢵ➘⤵Ƞ⩎➘ ঻㶗಺⮳ᩨइ喌࠴᠛㏵㘍๖ᄾ෍ߏȠ㏵㘍ఏၿܵ⇻঻ CD25 㶗䲑㶗䓭ⅣᎢ⮳̹䄲ȡ䕉䓶ឹT㏵㘍̽‫ڠ‬఩჉ࡅ⮳ំCD28঻ ំ CD3 ࢄ‫ٺ‬䮵ំ҂⮳㐂षञД౗҂ๅὐ᠎‫⫚ټ‬Ꮓゃ喈 1 喉ȡ T ㏵㘍ञД㷚ന‫ڪ‬౗䲈ₑ⮳㶺ၿᝅ̸㼁⨥͜喌ѵന‫➘ڪ‬䓭‫ݟ‬ 2×10 9㏵㘍Д̹䰯㺰̼ङ̯͙㶺ၿ喌䔈᭭㦆෍ߏε㕆᱿঻ߢ ߗ䛾ȡఏₓ喌ͩε␐䋢ߎ㘬ᕖ T ⋺ጣ㏵㘍ञ‫⩎ڼ‬ម෍⮳䰯 㺰喌̯͙ᔚ䕎Ƞञᩭ๖̓ञ䲏甘჉⮳㏵㘍ന‫⩎ڪ‬ϖጔ㞩ₒइ ᓆᬔ⯹䛼㺰ȡₓๅ喌Ύ䔚ܶ䰯㺰᫟⮳ឯᱞД᰸᩷‫۾‬ᅀ㕆᱿Ƞ ന‫ڪ‬ഩ঻ጔҋᑩᏕへȡ WAVE Bioreactor System 2/10喈భ1঻2喉ञД㷚⩗νϩT㏵㘍 ⮳ന‫ڪ‬喌̓ञДᒷშᭂ㣦ᓆ‫ڦ‬᰸䲍፧倇≪ߊ⮳䊴䓶 1×10 ㏵ 㘍/mL⮳㏵㘍ჵᏕ喈2-4喉ȡఏ̯ͩ⁐ᕖ⮳Cellbagന‫ڪ‬㶺ᐾ⩎ ➘ࣼᏃ஗䶳‫ٷ‬㏾䓶ᩭᄳ▜㣻喌ႲЛ䲍፧䔱ष䄧ັ㏵㘍⇪⫆へ 䖮‫ټ‬ϓࣸ←ᴂ⮳‫ڢ‬䩝Ꮓ⩗ȡ
17
Ꮓ⩗జ౟
㏵㘍ម෍
౗WAVE Bioreactor System 2/10͜⮳T㏵㘍ന‫ڪ‬
PVCᐥ䪮バ䌞㷚䔍ᣔ‫ݟ‬VueLife㶺⮳FLL喌Ꭵ㷚ᬏ㣻☹ᣔ‫ݟ‬Feed 㶔᫈╻∗バ䌞㏳Хȡ౗㏵㘍䕉䓶䛼ߊ≰䒛尢‫ڢݼ‬䬜CO2ᣖ‫ݥ‬ ஗Ꭵ๨Ѿ䔊ऒ঻‫ܩ‬ऒ阜⅃䓶␓஗ȡ䄲㞱̸䕉ᣔ๣Үന‫ڪ‬ഩ㶺 ͜⮳᫟凋ന‫ڪ‬ഩᄵ‫⮳҈ޘ‬㏵㘍ۡ‫ڔ‬Cellbag喌♥ऽჵᄰVueLife 㶺ȡគᐯ䔊ऒ঻‫ܩ‬ऒ阜⅃䓶␓஗Ꭵᐯ໺᥶ߗ喈10 rpm঻6°᥶ ߗ㼁Ꮥ喉ȡ⃾๘㶔‫ڔߏٴ‬᫟凋⮳ന‫ڪ‬ഩД㐣ᠰ㏵㘍ჵᏕ๖㏕ ͩ0.5×106㏵㘍/mLጕढ喌Ⱓ‫ݟ‬䓭‫ݟ‬Cellbag⩎➘ࣼᏃ஗⮳ᰯ๖ ҂囗♥ऽᐯ໺╻∗喈ᄨν 2 L ⮳ Cellbag ╻∗ 1L 喌ᄨν 10 L ⮳ Cellbag╻∗5 L喉ȡᄨν╻∗⮳せ1๘喌⃾24 h㒝ᢑ0.35͙҂ 囗⮳ന‫ڪ‬ഩ喈̯㝛౗せ 5 ‫ ݟ‬7 ๘ᐯ໺╻∗喉ȡ♥ऽ╻∗䕎Ꮥ 㷚䔿⌿᣿倇‫ ݟ‬0.75 ͙ന‫ڪ‬҂囗喌Ꭵᰯ㏷䓭‫ ݟ‬1.0 ͙ന‫ڪ‬҂囗 Д㐣ᠰ䅦⅗䚟㘩๖㏕ͩ 2 mM 喌㦐㤳㈅๖㏕ͩ 0.5 g/L ȡ╻∗ ᭞Дࡹ䔍㐜ὐᐾ㜙ߗ䔊㵻喌౗᪣͙ന‫ڪ‬䓶彡͜ࢄ⁐㶔᫈҂ 囗ͩ50 mLȡന‫ڪ‬ഩ㶺ञД䮾ᬥ䕉䓶ᬏ㣻☹ᣔჍ⣟ᰣᢑ喌Д 㐣ᠰ̯͙ᬏ㣻ჵ䬜⮳㈪㐎ȡᒂ╻∗䕎⢶䓭‫ݟ‬0.75͙ന‫ڪ‬҂囗 ᬥ喌 IL-2 ⮳⊂Ꮥ㷚᣿倇‫ ݟ‬300 U/mL 喌ᒂ╻∗䕎⢶䓭‫ ݟ‬1 ͙ന ‫ڪ‬҂囗ᬥ喌IL-2⮳⊂Ꮥ᣿倇‫ݟ‬500 U/mLȡ㏵㘍⃾๘䕉䓶̯͙ ᬏ䦷〞ऒᬏ㣻अᵦ喚仅‫ٷ‬᣿倇᥶ߗ䕎Ꮥ‫ݟ‬20 rpm 1 minД⶝ Ԍ⌦ष౶࠯ȡ䛶⩗ᴶ۵⮳टⰫ㨌ᴂ㞡ᣁ䮓∄䔊㵻≪㏵㘍䃐 ᪟喈5喉ȡᠸ⚖ࢱੵ䄣ᬽΕ喌⃾๘౗BioProfile™ 100+ܵᲿЙ (Nova Biomedical)̹≺჉㦐㤳㈅Ƞ΢䚧⯿঻䅦⅗䚟㘩ⅣᎢ喌 ౗ ABL5 㵯⅃ܵᲿЙ喈 Radiometer 喉̹≺჉ pH Ƞ CO 2঻ O 2Ⅳ Ꭲȡ
16
㏵㘍ម෍
Ꮓ⩗జ౟
᱿᫈঻᫨∄
䲈ₑന‫͜ڪ‬T㏵㘍⮳⓯≪
᫟凋⮳喈ᰯ้48 h喉ჵᏕᷞᏕܵ⻪⮳঻࣪䮓ࢄᵧ㏵㘍⮳ϩๅ গ㵯ࢄᵧ㏵㘍喈PBMCs喛3H Biomedical喉⩗ߏε5%☜๠≪ ϩ㵯⌴⮳⸦䚧⯿㑂ۡ⋡喈 PBS 喉喈 C15-020 喛 PAA Ⴭ侻დ喉 ≆⋓Ƞ䃐᪟Ꭵ䕉䓶≰ᐾ㏵㘍Й㶗ᒰȡ䃐テCD3+ T㏵㘍ᕪ᪟喌 Д1×10 6㏵㘍/mL⮳㏵㘍⊂Ꮥ㷴䒬‫ݟ‬ग़᰸䶳☜⮳T㏵㘍ന‫ڪ‬ഩ ⮳䔾⅃ᕖ VueLife™ ന‫ڪ‬㶺 (American Fluoroseal) ͜喌ന‫ڪ‬ഩ ͩCellGro™ DC (CellGenix)ߏ5%ϩ㵯⌴Ƞ1%GlutaMAX™ 100× (Invitrogen)Ƞ1%⮳䲁䰸䨭䰸㉏(Invitrogen)Ƞ0.8%Έ䚟ࡹ㘠⅗ 䚧喈200 mg/mL喛BioPhausia喉঻100 U/mL⮬Ϻ㉏-2 (IL-2喛 Proleukin™喛Novartis)ȡDynabeads™ ClinExVivo™ CD3/CD28 ⷰ⤏(Invitrogen)̽㏵㘍ᠸ⚖3:1⮳℃Һ喈ⷰ⤏喚T㏵㘍喉౗阜 ⅃͜ग़᰸5%CO 2⮳37°Cന‫ڪ‬ム͜‫ڠ‬ന‫ڪ‬2‫ݟ‬3๘ȡ౗せ3๘喌 䃐᪟㏵㘍喌♥ऽັ᳋䓭‫Ⱍݟ‬ᴶ㏵㘍᪟݈㏵㘍㷚䒛尢‫ݟ‬Cellbag ⩎➘ࣼᏃ஗喈ᄨν2 L⮳Cellbag๖㏕ͩ1×108㏵㘍喌ᝅᄨν10 L⮳Cellbagͩ2×10 ㏵㘍喉ȡັ᳋㏵㘍᪟䒲ѽ喌ीVueLife㶺ߏ ‫ڔ‬ᰣ้⮳ന‫ڪ‬ഩ喌Д 0.5×10 6㏵㘍 /mL ⮳㏵㘍⊂Ꮥ㐖㐜ന‫ ڪ‬1 ‫ݟ‬2๘ȡ
Cellbag ᩥ㣦バ䌞
MLL
䕉䓶㶔᫈∤
̸䕉ᣔ๣
FLL
ന‫ڪ‬ഩ㶺
ᩥ㣦╻∗䙼Х喚
MLL MLL FLL ⵴㘥バ FLL
䕉䓶ᩥ㣦∤
MLLபைடு நூலகம்
Ꮞ⋡㶺
భ 2. ग़᰸╻∗ᣖ‫ݥ‬஗喈̹᫨喉঻╻∗バ䌞㏳Х喈̺᫨喉⮳ WAVE Bioreactor System 2/10ȡ
๣⮳䔱ᒂѼ㒝ȡCellbagന‫ڪ‬㶺䔍ᣔຬⰧ‫ڢ‬バ䌞喌Ү⩗CO2⌦ षᣖ‫ݥ‬஗喈CO2MIX20喉‫ڔٴ‬5% CO2喌ᄵ土䛼࣪⯝ᒁ䰥ȡᄵ ന‫ڪ‬ഩҮ⩗╻∗∤䒛尢‫ݟ‬Cellbag⩎➘ࣼᏃ஗͜喌䃭㒝᥶ߗ䕎 Ꮥͩ10⁐/min喈rpm喉Ƞ᥶ߗ㼁Ꮥ6°喌♥ऽᐯ໺ߏ☜঻᥶ߗ 2hr喌ДᎢ㶐ന‫ڪ‬ഩ⮳⍘Ꮥ঻pHȡ䰯㺰⶝ԌSystem 2/10ជⰇ 㶗䲑⮳⍘Ꮥ⩤Ჰ̽Cellbag⩎➘ࣼᏃ஗ͺ䬣ᣔ㼕㞞ຬȡ
Cellbag 㶔᫈バ䌞
MLL MLL ⵴㘥バ FLL MLL MLL
FLL FLL
Cellbag ⩎➘ࣼᏃ஗喚
㏵㘍
ന‫ڪ‬ ഩ㶺
㶔᫈∤Feed ᩥ㣦∤Harvest 土䛼╻∗ὐಆ ञ䄲㞱㙉
∤䊴ᣖᠸ䧝 Ꮞ⋡㶺
➘᫈╻∗䙼Х喚
MLL
VueLife㶺͜⮳㏵㘍
8
۵ึ╻∗バ䌞
⃾͙ന‫ڪ‬䰯㺰͓ຆ╻∗バ䌞㏳Х喈భ2喉ȡ̯ຆ䔍ᣔ‫ݟ‬ Cellbag⩎➘ࣼᏃ஗⮳Feed㶔᫈バ䌞喌क̯ຆ䔍ᣔ‫ݟ‬Harvest ᩥ㣦バ䌞ȡバ䌞㏳Х㷴䙼ັ̺喚Male Lureᣔ๣喈MLL喉䙼Х 㷚Ⴘ㷴౗͓ᵨ50‫ݟ‬70 cm䪮Ƞ⮳⵴㘥バ䌞͓〞喈EW-9580205; Cole-Parmer喌3.2/6.4 mm喈ID/OD喉喉喌Ꭵ౗䔱ᒂ⮳౟᫨ ⩗㐀ፕᄵバ䌞఩჉౗ᣔ๣̹ȡᄵ㏾䓶倇ࢺ▜㣻⮳̯ຆ╻∗バ 䌞㏳Х͜⮳̯͙㏾䓶̸̯͙䕉ᣔ๣(BD connecta; BD Medical) 䔍ᣔ‫͓ݟ‬ᵨ PVC ᐥ䪮バ䌞喈ፕ Lure ᣔऒ঻ MLL 喛 Sarstedt or Baxa)喌Ͻ㔻ܵ‫̽ݚ‬ന‫ڪ‬ഩ঻VueLife㶺䔍ᣔȡ⵴㘥バ䌞⮳क ̯〞㷚Ⱓᣔ䔍ᣔ‫ ݟ‬Cellbag ⩎➘ࣼᏃ஗̹㶔᫈バ䌞⮳ FLL ᣔ ऒȡ͓ᵨ PVC バ䌞ܵ‫ݚ‬㷚䔍ᣔ‫ݟ‬क̯ᵨ⵴㘥バ䌞⮳͓Ӗ喛 ̯͙̽ᩥ㣦バ䌞⮳ FLL 〞ऒ䔍ᣔ喌क̯ᵨ䔍ᣔ‫ݟ‬Ꮞ⋡㶺喈భ 2喉ȡ
Ꮓ⩗జ౟
㏵㘍ម෍
T⋺ጣ㏵㘍 ౗WAVE ⩎➘ࣼᏃ஗͜⮳ᔚ䕎倇ჵᏕ╻∗ന‫ڪ‬
ᱛឯᱞᏃ⩗ͩҮ⩗ WAVE2/10 ⩎➘ࣼᏃ஗㈪㐎╻∗⩎ϖ䓭‫ݟ‬ 6×1010ϩT㏵㘍᣿ӊ̯⻼ञ䲏甘჉⮳ጔ㞩ȡ㷚ម෍⮳T㏵㘍ञ ДԌᠰ⩎➘႕ߎ㘬Ꭵ㘬๎㷚䛼᫟⓯≪Д⩎᜿๖䛾⮳㏵㘍ఏ ၿȡ̽䲈ᔰന‫ڪ‬㶺Ⱗ℃喌䕉䓶Ү⩗WAVE Bioreactor㈪㐎౗㕆 ᱿঻ߢߗߊ̹⮳᜿ᱛ㞱㏕᭭♥Ꮓᒁߎν̯⁐ᕖCellbag™⩎➘ ࣼᏃ஗⮳᧼ҋクࢄ঻㜙ߗ⮳ന‫ڪ‬ഩ㒝ᢑȡङ䰯ำ⤵̯͙ന‫ڪ‬ 㶺ᅠञД㣦ᓆ倇㏵㘍ჵᏕ喌Ͻ㔻‫۾‬ᅀεϓࣸ←ᴂ⮳䷽䮘喌Ꭵ ౗ന‫ڪ‬㐂᲎ᩥ㣦㏵㘍ᬥⰰ࣪⊂㑘ₔ俓ȡ
۵ึWAVE 2/10⩎➘ࣼᏃ஗
ᠸ⚖⩗ᝦ᝺‫ڻ‬Ⴘ㷴ፕ᰸╻∗ᣖ‫ݥ‬஗喈PERFCONT2E喉⮳WAVE Bioreactor™ System 2/10 (䒞Х❷ᱛ2.61)ȡፕ᰸╻∗䓶␓஗⮳ 2L Cellbag঻10 L Cellbagܵ‫ݚ‬㷚⩗ν1 L঻5 L⮳╻∗ന‫ڪ‬ȡ౗ Cellbag⩎➘ࣼᏃ஗Ƞ╻∗バ䌞㏳Х঻Ꮞ⋡㶺ͺ䬣⮳ᝯ᰸䔍ᣔ 䘬᭞౗⩎➘Ⴘ‫ڗ‬ᴋ‫ڴ‬䔊㵻ᝅ䕉䓶ᬏ㣻☹ᣔ喈STF-IRCᬏ㣻バ䖂 ☹ᣔᱩ, GE喉ȡ̯͙5 L⮳㶺ၿ喈Hyclone™ HyQtainer; Thermo Scientific 喉喌ग़᰸〉ߏ 200 U/mL IL-2 ঻ 0.02% Pluronic™ (Invitrogen)⮳T㏵㘍ന‫ڪ‬ഩ喌㷚䔍ᣔ‫➘ݟ‬᫈╻∗㏳Х⮳̯ᵨᐥ 䪮バ䌞Ꭵᗛᠱ౗System 2/10̹᫨ȡᩥ㣦╻∗㏳Х㷚䔍ᣔ‫̯ݟ‬ ͙20 L⮳Ꮞ⋡㶺喈M*BAG-20L喉喌̓⵴㘥バ㷚ᩭ㒝౗㵄ߗ∤
相关文档
最新文档