实验六、有机酸的测定(精)
苹果有机酸的测定方法(液相色谱)
苹果有机酸的测定
一、实验目的
1、了解HPLC的工作原理及其构造
2、熟悉HPLC法测定有机酸的操作步骤
二、实验原理
三、实验仪器与试剂
1、仪器：Waters公司的HPLC分析仪（组合型）包括7725i六通阀，510型高压泵，481型紫外-可见光检测器，HW-2000型色谱工作站；CQ250型超声波提取器，高速离心机，Milli-Q超纯水制备装置；PH试纸。
2、试剂：甲醇（色谱纯），超纯水，磷酸二氢铵（分析纯，中国四川成都金山化工厂）。
七种有机酸的标品溶液：草酸（0.025mg/ml）、酒石酸（0.25 mg/ml）、苹果酸（0.75mg/ml）、乳酸（1.0 mg/ml）、乙酸（1.0 mg/ml）、柠檬酸（0.6 mg/ml）、琥珀酸（0.9 mg/ml）。
四、色谱条件：色谱柱：Hypersil BDS C18柱（4.6mm×250mm，5 m）
流动相：0.5% NH
4H
2
PO
4
（PH=2.5）
进样量：20ul
检测波长：210 nm
流速： 1.0ml/min
柱温：室温
五、样品预处理
苹果的预处理：准确称取苹果果肉2.0000g于研钵中，加少许80%乙醇研磨至糊状，移至10ml离心管（共用去80%乙醇5ml），4000rpmin，离心10min。
取上清液至蒸发皿水浴中70℃蒸干，冷却、加入流动相4ml溶解、10000rpmin离心10min，0.45μm超滤，上机。
六、撰写实验报告。
中药制剂分析练习题卷二
中药制剂分析练习题卷二一、名词解释：杂质限量重金属砷斑总灰分酸不溶性灰分空白试验准确度精密度重复性重现性反向色谱干燥失重恒重阳性对照阴性对照药品标准一般杂质特殊杂质杂质限度相对密度中药制剂分析二、判断题（根据对错打√或×）：！、薄层扫描法中，使用青岛硅胶薄层色谱板，选择SX = 7（）。
2、薄层鉴别复方制剂中五味子，可用F254荧光薄层硅胶板（）。
3、口服液、合剂应测总固体含量（）。
4、精密度是指测定结果与真实值接近的程度（）。
5、薄层吸收扫描法定量时，样品斑点中物质浓度与吸收值的关系遵循朗伯-比尔定律（）。
6、薄层扫描法最常用的定量方法是外标法（）。
7、GC或HPLC法用于中药制剂含量测定时，定量依据一般是保留时间（）。
8、麝香中麝香酮的定量方法最常用的是HPLC法（）。
9、中药制剂分析中GC法应用最广泛的检测器是FID（）。
10、HPLC法适合于测定总生物碱的含量（）。
11、用HPLC法测定黄芪甲苷、人参皂苷等紫外末端吸收的组分时，应采用紫外检测器（）。
12、用紫外分光光度法作含量测定时，二阶导数光谱法可消除二次曲线吸收干扰（）。
13、反相HPLC法适用于测定中药制剂中的亲水性成分（）。
14、中药制剂分析中总黄酮含量测定可采用紫外分光光度法（）。
15、中国药典规定用GC法测定中药制剂中的含醇量（）。
16、香豆素类成分可用荧光法测定（）。
17、中药中黄酮苷类成分一般采用氯仿回流提取（）。
三、简答题：1、水分测定法有哪几种，各适用于什么类样品？2、中药制剂含量限度规定方式有哪几种？3、紫外分光光度法的含量测定方法有哪几种？4、中药复方制剂含量测定的药味选择的要求是什么？5、什么是中药指纹图谱，什么剂型要求制定指纹图谱？6、牛黄有哪几类？它们的区别在哪里？7、冷浸法、直接回流提取法、连续回流提取法各有什么优缺点？8、HPLC中，正相色谱与反相色谱的区别是什么？9、制定质量标准的前提是什么？10、含量测定的方法学考察包括哪些？11、线性关系考察有什么意义？12、用计算分光光度法测定中药复方制剂的不足之处是什么？为什么？四、单选题1、属于中药制剂一般杂质检查的项目是（）A、重量差异B、微生物限度C、性状D、织灼残渣E、崩解时限2、中药制剂的杂质为一般杂质和特殊杂质，不属于一般杂质的有（）A、砷盐B、重金属C、酯型生物碱D、灰分E、水分3、中药材、中药制剂和一些有机药物中重金属的检出通常需要先将药品灼烧破坏，灼烧时需控制温度在（）A、400℃-500℃B、500℃-600℃C、600℃-700℃D、300℃-400℃E、700℃-800℃4、薄层扫描法最常用的定量方法是（）A、内标法B、外标法C、追加法D、归一化法E、曲线校直法5、GC法或HPLC法用于中药制剂的含量测定时，定量的依据一般是（）A、峰面积B、保留时间C、分离度D、理论塔板数E、拖尾因子6、最适合于用HPLC法测定的成分是（）A、冰片B、炽灼残渣C、总生物碱D、重金属E、黄芩苷7、薄层色谱法鉴别麻黄碱时常用显色剂是（）A、改良碘化铋钾B、硫酸酮试剂C茚三酮试剂D、10%硫酸-乙醇溶液E、硝酸钠试剂8、可用异羟肟酸铁比色法进行含量测定的生物碱成分结构特点是（）A、羰基B、醇羟基C、叔胺D、酚羟基E、酯键9、常用于提取黄酮苷的溶剂是（）A、氯仿B、乙醚C、甲醇-水或甲醇D、氯仿-甲醇E、石油醚10、银杏内酯常用的分析方法为（）A、GCB、HPLCC、TLCSD、比色法E、荧光法11、不属于麝香鉴别的方法是（）A、冒槽B、手搓不粘手C、手搓不染手D、灼烧无火焰E、水润湿可染手指甲12、橡胶膏剂特有的质量要求是（）A、外观B、酸碱度C、含膏量D、粘着力试验E、耐热试验13、阿胶中含砷量不得超过（）Ａ、百万分之一Ｂ、百万分之二Ｃ、百万分之三Ｄ、百万分之四Ｅ、百万分之五14、一般生物样品分析的萃取率应不低于（）A、30%B、40%C、50%D、60%E、70%15、生物样品分析中绝对回收率应不低于（）A、50%B、60%C、70%D、80%E、90%16、含有木脂素类的中药是（）A、人参B、大黄C、甘草D、党参E、厚朴17、在方法学考察中，回收率试验要求回收率在（）%，RSD小于（）%A、95～100，5B、100～105，5C、95～105，4D、95～105，3E、95～100，3（）18、药品必须符合（）A、《中华人民共和国药典》B、部颁药品标准C、省颁药品标准D、国家药品标准E、均可五、多选题1、进行中药制剂的含量测定时，固体样品处理的程序一般包括（）A、称取B、粉碎C、提取D、浓缩E、净化2、化学分析法用于中药制剂含量测定项目有（）A、干燥失重B、总有机酸C、总生物碱D、鞣质E、单体成分3、气相色谱法测定中药制剂中挥发油含量时，应注意哪些实验条件的选择（）A、固定相B、柱温C、载气D、检测器E、进样量4、中药制剂中总生物碱含量测定可选用（）A、重量法B、气相色谱法C、酸碱滴定法D、酸性染料比色法E、苦味酸比色法5、含有主要成分为生物碱类的中药是（）A、洋金花C、丹参D、麻黄E、黄芪6、在《中华人民共和国药典》中没有规定检查的项目，有可能是（）A、含量甚微B、存在几率很小C、认识不够D、缺乏对照品E、对人体无不良影响7、常用的黄曲霉毒素的测定方法有（）A、薄层色谱法B、微柱色谱法C、高效液相色谱法D、荧光分析法E、免疫化学分析法8、有机酸的测定方法有（）A、酸碱滴定法B、高效液相色谱法C、薄层扫描法D、发射光谱法E、分光光度法9、挥发性成分的鉴别方法有（）A、化学反应法B、TLC法C、GC法D、GC-MS法E、GC-FTIR10、含有主要成分为木脂素类的中药是（）B、马钱子C、厚朴D、连翘E、蟾酥11、蜂蜜的检查项目包括（）A、相对密度B、酸度C、淀粉与糊精D、还原糖E、5-羟甲基糠醛12、颗粒剂应检查（）A、粒度B、溶化性C、水分D、溶散时限E、均匀度13、巴布膏剂的质量要求有以下几点（）A、外观B、粘着力试验C、赋形剂试验D、含膏量E、耐热试验14、中药制剂质量标准制定的原则是（）A、安全有效B、稳定可靠C、质量均衡D、技术先进E、经济合理15、中药制剂质量标准本身具有的特性为（）A、权威性B、科学性C、进展性D、稳定性E、可控性16、制定中药制剂质量标准的前提是（）A、处方组成固定B、原料稳定C、制备工艺稳定D、药物有特异性成分E、检测方法简便有效17、在中药制剂的含量测定中，下列哪些是测定成分的选择原则（）A、测定有效成分B、测定毒性成分C、测定总成分D、测定易损成分E、测定专属性成分18、软膏剂的微生物限度中，规定不得检出以下菌类（）A、金黄色葡萄球菌B、铜绿假单胞菌C、大肠杆菌D、黑枯杆菌E、绿脓杆菌19、中药制剂检查项目包括（）A、相对密度B、pＨ值Ｃ、乙醇量Ｄ、干燥失重Ｅ、重金属20、下面属于中药制剂质量标准起草说明中包含的项目的是（）A、名称B、处方C、制法D、性状E、鉴别21、下列属于方法学考察应包括的项目有（）A、提取条件的确定B、净化分离方法的选定C、测定条件的选择D、空白试验条件的选择E、精密度试验22、目前中药指纹图谱研究的方法主要有（）A、TLC指纹图谱B、HPLC指纹图谱C、GC指纹图谱D、MS指纹图谱E、DNA指纹图谱23、HPCE的主要分离模式有（）A、醋酸纤维素膜电泳B、琼脂凝胶电泳C、毛细管区带动电泳D、毛细管等速电泳E、毛细管等电聚焦24、中药注射剂指纹图谱技术要求哪些部分的指纹图谱应具有相关性（）A、原药材B、中间体C、有效部位D、注射剂产品E、注射剂辅料六、实验设计：1、现需测定制川乌中毒性生物碱的含量，请设计供试品的制备方法。
有机酸摩尔质量的测定
❀第三届化学分析实验技能比赛❀有机酸摩尔质量的测定参赛成员：吕珍洁胡梦云赵忠臣参赛班级：化学系2010级C班有机酸摩尔质量的测定一、 实验目的⒈熟悉物质的称量、溶液的配制和滴定分析的基本操作。
⒉学会标准溶液配制的直接法和间接标定法。
⒊学习并掌握有机酸摩尔质量的测定原理和方法。
二、 实验原理大多数有机酸是固体酸，如草酸（pKa 1=1.23, pKa 2=4.19）,酒石酸（pKa 1=2.85，pKa 2=4.34），柠檬酸（pKa 1=3.15， pKa 2=4.77， pKa 3=6.39）等，它们在水中都有一定溶解性。
若浓度达0.1mol ·L -1左右，且cK a ≥10-8,则可用NaOH 标准溶液滴定。
因滴定突跃在弱碱性范围内，常选用酚酞作指示剂，滴定至终点溶液呈微红色，根据NaOH 标准溶液的浓度和滴定时所消耗的体积及称取的纯有机酸的质量，可计算该有机酸的摩尔质量。
当有机酸为多元酸时，应根据每一级酸能否被准确滴定的判别式（810c K a a i i -≥）及相邻两级酸之间能否分级滴定的判别式（510+1+1c K a ai ic K a ai i ≥）来判别多元酸与NaOH 之间反应的计量关系，据此计算出有机酸的摩尔质量。
查文献资料知，柠檬酸（C 6H 8O 7·H 2O ）是三元弱酸（Ka 1=7.4×10-4，Ka 2=1.7×10-5,Ka 3=4.0×10-7）,其三个不同级酸都能被准确滴定，但不能被分别滴定。
柠檬酸溶液与NaOH 溶液的化学反应方程式为：34687236572C H O H O NaOH Na C H O H O ⋅+=+可推算出柠檬酸摩尔质量的计算式：68726872311041()3C H O H O C H O H O NaOH m Mr CV ⋅⋅⨯⨯=⨯本实验中，因为NaOH 不是基准物质，所以不能用直接法配制NaOH 标准溶液，因此采用间接标定法配制NaOH 标准溶液。
有机酸摩尔质量的测定-实验六有机酸摩尔质量的测定X的置
实验六有机酸摩尔质量的测定一、实验目的1. 掌握NaOH标准溶液的标定方法。
2. 掌握有机酸摩尔质量的测定方法。
二、实验原理物质的摩尔质量可以根据滴定反应从理论上进行计算。
本实验要求准确测定一种有机酸的摩尔质量值。
大多数的有机酸是弱酸。
如果某有机酸易溶于水，离解常数Ka≥10-7，用标准碱溶液可直接测其含量，反应产物为强碱弱酸盐。
由于弱酸根与水溶液中水合质子反应，使滴定突跃范围在弱碱性内，可选用酚酞为指示剂，滴定溶液由无色变为微红色即为终点。
根据NaOH 标准溶液的浓度和滴定时消耗的体积，计算该有机酸的摩尔质量值。
本实验还利用NaOH溶液的标定结果，用误差理论进行处理。
三、仪器与试剂1. NaOH溶液 0.1mol·L-1在台秤上称取约4g固体NaOH放入烧杯中，加入新鲜的或煮沸除去CO2的蒸馏水，使之溶解后，转入带有橡皮塞的试剂瓶中，加水稀释至1L，充分摇匀。
2．酚酞指示剂 0.2％乙醇溶液3．邻苯二甲酸氢钾KHC8H4O4基准物质在100-125°C干燥1小时后，放入干燥器中备用。
4. 有机酸试样，如草酸、酒石酸、柠檬酸①。
四、实验方法1．0.1 mol·L-1NaOH溶液的标定．在称量瓶中称量KHC8H4O4基准物质，采用差减法称量，平行称7份，每份0.4-0.6g，分别倒入250ml锥形瓶中，加入40-50ml水使之溶解后，加入2-3滴0.2％酚酞指示剂，用待标定的NaOH溶液滴定至呈现微红色，保持半分钟内不褪色，即为终点。
平行测定7份，求得NaOH溶液的摩尔浓度，其相对平均偏差≤0.2％。
否则需重新标定。
2．有机酸摩尔质量值的测定准确称取有机酸试样一份置于小烧杯中，根据选择的试样计算称样为多少②。
称好试样后，加水使之溶解，定量转入250ml容量瓶中，加水稀释至刻度，充分摇匀。
用25.00ml移液管平行移取三份，分别放入250ml锥形瓶中加酚酞指示剂2-3滴，用NaOH标准溶液滴定溶液由无色呈现微红色，30秒钟内不褪色即为终点。
饮料酸度的测定(精)
五、计算
总酸度(%)=C×（V1－V2）×K m V4
×V3×100
式中：C---标准氢氧化钠溶液的浓度mol/L V1---滴定所消耗标准碱液的体积ml V2 ---空白所消耗标准碱液的体积ml V3 ---样品稀释液总体积ml V4---滴定时吸取的样液的体积ml M---样品质量或体积（g或ml） K---换算为适当酸的系数，即1mol氢氧化钠相当于主要酸
准确吸取制备的滤液50ml加入酚酞指示剂23滴用01moll标准碱液滴定至微红色30秒不褪色记录用量同时做空白实验
饮料酸度的测定
一、目的与要求
1、掌握用滴定法测定饮料酸度的方法。 2、熟练掌握滴定的操作。
二、原理
食品中的有机酸（弱酸）用标准碱液滴定 时，被中和生成盐类。用酚酞作指示剂， 当滴定到终点（pH=8.2,指示剂显红色）时， 根据消耗的标准碱液体积，计算出样品总 酸的含量。
三、试剂及样品
1. 0.1mol/LNaOH的标准溶液 2.酚酞指示剂 3.雪碧、可乐、健力宝
四、操作
1. 将样品于 45 ℃ 水浴上加热 30min， 除去 二氧化碳，冷却后备用。 2. 准确吸取制备的滤液 50ml，加入酚酞指 示剂2-3滴，用0.1mol/L标准碱液滴定至微 红色 30 秒不褪色，记录用量，同时做空白 实验。 3.做平行实验两次。
的克数
六、注意事项
1.样品浸泡，稀释用的蒸馏水中不含CO2， 因为它溶于水生成酸性的H2CO3,影响滴定 终点时酚酞的颜色变化，一般的做法是分 析前将蒸馏水煮沸并迅速冷却，以除去水 中的CO2 。样品中若含有CO2 也有影响， 所以对含有CO2的饮料样品，在测定前须 除掉CO2。
实验六、有机酸的测定(精)
（二）色谱条件
色谱柱:十八烷基硅烷键合硅胶填料Octadecylsilyl， 简称ODS）C-18(150*3.9mm,walers) 流动相: pH2.65重蒸水（用磷酸调制） 流速: 0.4ml/min 检测器: UV214nm 柱温: 18~20度 进样量: 20ul
（三）标准曲线的制作
取有机酸标准母液(苹果酸）用倍比稀释法稀释 成100ug/ml,50ug/ml,25ug/ml,12.5ug/ml,
7种有机酸标准混合液，吸取各有机酸10 ml 定容到100ml，即可作工作液。
（本实验只配MA.CA.TA三种标准混合液）
五、操作步骤
（一）样品制备
称取水果(苹果）200g左右, 洗净、切碎, 用组织捣碎机匀浆, 称样品10g, 置三角瓶 中, 加入pH2.65 重蒸水60－70ml, 沸水浴 中加热60min以浸提有机酸, 冷却, 用 pH2.65重蒸水移入100ml容量瓶中, 定容, 过滤, 再用 0.45um微孔滤膜过滤, 待上机 测定。实Leabharlann 六、有机酸的测定（HPLC法）
一、实验目的
学习和掌握有机酸样品的处理和HPLC检 测方法。 进一步了解高效液相色谱仪的使用操作 性能。 掌握标准工作曲线的建立、数据的处理 及定量分析。
二、原理
果蔬及其制品、各种酒类、乳及乳制品中的主要 有机酸可用高效液相色谱进行测定。样品经过处 理、离心及超滤, 用C-18反相柱和pH2.65的纯蒸 馏水作流动相, 在紫外214nm处定量测定。
•本法可同时测定柠檬酸、苹果酸、酒石酸、 • 琥珀酸、乳酸、乙酸及延胡索酸等7种有机酸。
三、材料与仪器
材料: 果蔬、橘汁、酒等。
仪器: 高效液相色谱仪（Agilent 1100)、 分析天平、组织捣碎机、研钵、三角瓶、 水浴、离心机、0.45um滤膜、溶剂过滤 器、 样品过滤器等。
有机酸摩尔质量的测定
化学化工学院
2. 0.1mol/L NaOH溶液的标定
实验步骤
减量法准确称取0.4～0.6 g KHC8H5O4
用NaOH滴定至
40-50mL H2O 锥形瓶
微红色30s不褪色
终点
2滴 PP
平行滴定3次，计算NaOH标准溶液的浓度。
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3.有机酸摩尔质量的测定
实验步骤
移取25.00mL有 机酸试样溶液
NO.
Ⅰ
样品质量/g
消耗NaOH体积 /mL
平均体积/mL
偏差/mL
相对平均偏差/%
有机酸摩尔质量
推测为何有机酸 (n=?)
化学化工学院
Ⅱ
Ⅲ
化学化工学院
六、思考问题
(1) 如 NaOH 标准溶液在保存过程中吸收了空气中的 CO2， 用该标准溶液测定某有机酸的含量，NaOH 浓度是否会改变？ 测定结果有何影响？ (2) 草酸、柠檬酸、酒石酸等多元有机酸能否用 NaOH 溶液 分步滴定 ? (3) Na2C2O4 能否作为酸碱滴定的基准物质？为什么？
式为
MA
mA
1 2
cBVB
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2. NaOH 溶液浓度的标定 NaOH不是基准物，其标准溶液必须用标定法配制。本
实验采用邻苯二甲酸氢钾为基准物质标定NaOH 溶液的浓度， 酚酞为指示剂，反应式为：
OH- + HC8H4O4- = C8H4O42- + H2O 溶液颜色由无色变为微红色，保持30s不褪即为终点。
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参考文献
[1] 分析化学(第三版).武汉大学编.高等教育出版社. [2] 分析化学实验(第四版).武汉大学编.高等教育出版社.2001.5 [3] 基础分析化学实验(第二版).北京大学出版社，1998
有机酸摩尔质量的测定
1.称量：用差减法准确称 0.3~0.4 克草酸试样于小烧杯中； 2.定容：用适量蒸馏水溶解，定量转移至 250mL 容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀； 3.滴定：用移液管移取试液 25.00ml 于锥形瓶中，加 2 滴酚酞指示剂，用 0.02 mol/L 的 NaOH 标准溶液滴定至由无色变为微红色, 半分钟不褪色，即为终点，记录滴定所消耗的 NaOH 溶 液的体积，再重复滴定 2 次。
126.07
测量结果的相对误差
六、结果讨论（分析引起测定结果与理论值有误差的原因）
….. ….. …… 七、安全与环保
…… ……
五、数g 草酸配成（
）mL 溶液
c（NaOH）=
mol/L
记录项目
标定序号
1
2
3
移取草酸溶液的体积（mL）
NaOH 标液初读数（mL）
NaOH 标液终读数（mL）
消耗 NaOH 标液体积（mL）
草酸摩尔质量(g/mol)
平均摩尔质量 M (g/mol)
H2C2O4·2H2O 摩尔质量理论值(g/mol)
预习与思考
有机酸(草酸)摩尔质量的测定
1、复习理论书上关于滴定多元弱酸的相关知识
2、思考并回答问题
用约 0.02mol/L NaOH 标准溶液测定 H2C2O4·2H2O( Ka1 5.9102 , Ka2 6.4105 )的
摩尔质量 (1) 判断有几个滴定突跃；(写出判据)
(2) 选用什么指示剂；
量点在弱碱性范围内，选用酚酞作指示剂，滴定至终点溶液呈微红色 30s 不退色。
三、主要仪器和试剂
分析天平，称量瓶，锥形瓶，碱式滴定管，容量瓶，烧杯，移液管，玻璃棒
0.02mol/L NaOH 溶液 、0.2％酚酞溶液(乙醇溶液)、邻苯二甲酸氢钾 (A.R，在 100～125℃ 下干燥 1h 后，置于干燥器中备用)、有机酸(草酸)试样 四、实验步骤
有机酸摩尔质量的测定实验报告
有机酸摩尔质量的测定实验报告一、实验目的1、掌握酸碱滴定的基本原理和操作方法。
2、学会用基准物质标定标准溶液的浓度。
3、测定有机酸的摩尔质量。
二、实验原理大多数有机酸是弱酸，在水溶液中存在着电离平衡。
本实验中，我们选择一种合适的强碱（如氢氧化钠）溶液与有机酸进行中和反应。
以一元有机酸（用 HA 表示）为例，其与氢氧化钠（NaOH）的反应方程式为：HA ＋ NaOH ＝ NaA ＋ H₂O在酸碱中和反应中，当达到化学计量点时，酸和碱的物质的量相等。
通过已知浓度的标准氢氧化钠溶液的体积和所消耗的有机酸的体积，根据化学计量关系，可以计算出有机酸的物质的量。
再根据所称取的有机酸的质量，就可以计算出有机酸的摩尔质量。
三、实验仪器和试剂1、仪器分析天平酸式滴定管（50 mL）碱式滴定管（50 mL）锥形瓶（250 mL）移液管（25 mL）容量瓶（250 mL）2、试剂氢氧化钠（NaOH）固体：分析纯邻苯二甲酸氢钾（KHC₈H₄O₄）：基准物质待测定的有机酸试样酚酞指示剂四、实验步骤1、配制 01 mol/L 的氢氧化钠标准溶液称取 40 g 氢氧化钠固体，置于小烧杯中，用少量蒸馏水溶解。
将溶液转移至 1000 mL 容量瓶中，用蒸馏水冲洗烧杯和玻璃棒数次，并将冲洗液也倒入容量瓶中。
加蒸馏水至刻度线，摇匀。
2、标定氢氧化钠溶液的浓度准确称取 04 06 g 邻苯二甲酸氢钾基准物质三份，分别置于 250mL 锥形瓶中。
加入 50 mL 蒸馏水溶解，滴加 2 3 滴酚酞指示剂。
用待标定的氢氧化钠溶液滴定至溶液呈微红色，且30 秒内不褪色，即为终点。
记录消耗氢氧化钠溶液的体积。
根据邻苯二甲酸氢钾的质量和消耗氢氧化钠溶液的体积，计算氢氧化钠溶液的浓度。
3、测定有机酸的摩尔质量准确称取有机酸试样 15 20 g 于小烧杯中，用适量蒸馏水溶解。
将溶液转移至250 mL 容量瓶中，用蒸馏水冲洗烧杯和玻璃棒数次，并将冲洗液也倒入容量瓶中。
实验4有机酸摩尔质量的测定
实验4-有机酸摩尔质量的测定实验4-有机酸摩尔质量的测定一、实验目的：1.掌握有机酸摩尔质量的测定方法。
2.学习使用气相色谱法测定有机物的摩尔质量。
二、实验原理：有机酸是一种常见的有机化合物，具有较高的摩尔质量。
本实验采用气相色谱法测定有机酸的摩尔质量。
气相色谱法是一种常用的分离和分析技术，可以用于测定化合物的组成和含量。
通过气相色谱法，我们可以将有机酸与其它杂质分离，并测定其含量，从而计算出有机酸的摩尔质量。
三、实验步骤：1.准备试剂与仪器：有机酸样品、气相色谱仪、色谱柱、微量进样器、天平、容量瓶等。
2.将有机酸样品用微量进样器精密加入到容量瓶中，摇匀。
3.将容量瓶置于天平上，称量有机酸样品的重量（W1）。
4.将容量瓶放置在气相色谱仪的进样口，将有机酸样品注入气相色谱仪中进行分离和分析。
5.根据气相色谱仪的出峰时间，确定有机酸样品的分离效果和含量。
6.记录有机酸样品的重量（W2）和出峰时间等信息。
7.根据气相色谱法的结果，计算有机酸样品的摩尔质量。
四、数据分析与处理：1.数据记录：将实验中测量的数据记录在数据表中，包括有机酸样品的重量（W1和W2）、出峰时间等信息。
2.数据处理：根据气相色谱法的结果，计算有机酸样品的摩尔质量。
具体方法为：根据出峰时间计算出有机酸样品的含量（以质量分数表示），再根据有机酸样品的质量（W2）和含量计算出摩尔质量。
公式如下：摩尔质量（g/mol）= 质量分数× 分子量 / 质量（g）五、实验结论：通过本实验，我们得到了有机酸样品的摩尔质量数据。
通过比较实验结果与文献值的差异，可以评估本实验的准确性和可靠性。
如果实验结果与文献值存在较大差异，可能需要对实验条件或仪器进行进一步优化。
此外，本实验还可以为后续相关研究提供参考数据。
六、讨论与建议：1.本实验中采用了气相色谱法进行有机酸摩尔质量的测定，这种方法具有操作简便、准确度高、重现性好等优点。
但在实际操作中，需要注意气相色谱仪的维护和保养，以保证实验结果的准确性。
实验六水果中总酸及pH的测定
实验六水果中总酸及pH的测定一、目的要求1. 进一步熟悉及规范滴定操作。
2. 学习及了解碱滴定法测定总酸及有效酸度的原理及操作要点。
3. 掌握水果中总酸度及有效酸度的测定方法和操作技能。
4. 掌握pH计的维护和使用方法。
二、实验原理1. 总酸测定原理水果中的有机酸在用标准碱液滴定时，被中和成盐类。
以酚酞为指示剂，滴定至溶液呈现微红色，30s不褪色为终点。
根据消耗标准碱液的浓度和体积，计算水果中总酸的含量。
2. 有效酸测定原理利用pH计测定水果中的有效酸度 (pH)，是将玻璃电极、饱和甘汞电极插入榨取的果汁中组成原电池，该电池电动势的大小与果汁pH有关。
即在25℃时，每相差一个pH单位就产生59.1mV的电池电动势，利用酸度计测量电池电动势并直接以pH表示，故可从酸度计上直接读出果汁的pH。
三、仪器与试剂1. 仪器水浴锅，酸度计，玻璃电极，饱和甘汞电极，现在多用复合电极。
2. 试剂0.1mol / L NaOH标准溶液，酚酞乙醇溶液，pH= 4.01标准缓冲溶液。
四、实验步骤1. 总酸度的测定(1) 样液制备将样品用组织捣碎机捣碎并混合均匀。
称取适量样品，用15mL无CO2 蒸馏水将其移入250mL容量瓶中，在75~80℃水浴上加热0.5h，冷却后定容，用干滤纸过滤，弃去初始滤液25mL，收集滤液备用。
(2) 滴定准确吸取上述制备滤液50mL加入酚酞指示剂3~4滴，用0.1mol /LNaOH标准溶液滴定至微红色30s不褪为终点。
记录消耗NaOH标准溶液的体积。
2. 水果中有效酸度 (pH) 的测定(1) 样品处理将水果样品榨汁后，取汁液直接进行pH测定。
(2) 酸度计的校正①开启酸度计电源，预热30min，连接玻璃及甘汞电极，在读数开关放开的情况下调零。
②测量标准缓冲溶液的温度，调节酸度计温度补偿旋钮。
③ 将二电极浸入缓冲溶液中，按下读数开关，调节定位旋钮使pH 计指针在缓冲溶液的pH 上，放开读书开关，指针回零，如此重复操作二次。
NaOH的标定 有机酸摩尔质量的测定
第六周实验(第二次）班级: 姓名: 学号: 实验时间:一、NａOH得标定一、实验目得(1)进一步练习滴定操作。
（2)学习酸碱标准溶液浓度得标定方法。
二、简要原理NaOＨ标准溶液就是采用间接法配制得，因此必须用基准物质标定其准确浓度。
NaOH标准溶液得标定用邻苯二甲酸氢钾(KHＣ8Ｈ4O4简写为KＨP)为基准物质,酚酞作指示剂。
三、仪器与试剂0、１moｌ/ＬNａOH标准溶液邻苯二甲酸氢钾酚酞指示剂四、实验步骤在分析天平上用差减法准确称取邻苯二甲酸氢钾０、４-0、6ｇ三份，分别置于三个已编号得2５0mL锥形瓶中,加入5０ｍL去离子水,摇动使之溶解。
加入２滴酚酞指示剂,用NａＯH标准溶液滴定，溶液由无色至微红色半分钟不褪，即为终点。
五、数据记录及处理五、思考题1、如何计算称取基准物质邻苯二甲酸氢钾得质量范围?答:根据消耗得标准溶液得体积在2０-－-３0mL,来计算基准物质得质量范围。
得大多,一方面浪费,另一方面,称得太多,消耗得标准溶液得将会超过滴定管得最大体积，造成误差；消耗得标准溶液得体积太少,测量误差太大。
２、标定NaOH溶液浓度时称量KHＣ8H4O４需不需要十分准确？溶解时加水量要不要十分准确？为什么?答:标定溶液浓度时称量不需要准确测量KHC８Ｈ4Ｏ4得质量，因为公式中KHC8H４O4得质量就是实际称得得质量，称量在0、5000±0、050０范围内都就是允许得。
溶解时加水量也不需要十分准确,因为计算需要得就是它得质量,与溶解时得加水量无关,所以加水量不需十分准确。
３、用KＨP标定ＮaＯＨ溶液时为什么用酚酞而不用甲基橙作指示剂?答:邻苯二甲酸氢钾相当于弱酸,与氢氧化钠反应后生成得产物就是邻本二甲酸二钾,若正好中合，则弱酸强碱盐溶液呈碱性;而甲基橙得变色范围就是3、1-4、4,变色发生在酸性溶液中,无法指示碱性溶液,也就就是无法指示反应得终点。
4、如果用ＮaＯH标准溶液在保存过程中吸收了空气中得CO2，用该标准溶液滴定盐酸,以甲基橙为,对结果有什么影响?答：１、吸收二氧化碳，溶液中有碳酸钠,果以甲基橙为指示剂,刚开始得颜色就是红色,终点就是橙色,ph在3、1－4、4之间，盐酸稍过量、这种情况下碳酸钠也会被反应成氯化钠,应该没有影响、如果以酚酞为指示剂,刚开始无色,终点红色,ｐh在8-10之间，碱过量、这种情况下,碳酸钠会被反应成碳酸氢钠,相当于有一部分氢氧化钠没有参与反应，消耗得氢氧化钠体积变大,结果偏大、首先,从理论上来讲,吸收了空气中得ＣO２会生成碳酸钠,用该标准溶液滴定盐酸,以甲基橙为指示剂,对结果没有什么影响、因为氢氧化钠之前吸收了二氧化碳,与盐酸反应后又完全释放出来，所以摩尔比就是一样得、但就是，如果用酚酞作指示剂,结果还就是有影响得,结果应该偏高、因为吸性得二氧化碳相当于就是吸收了碳酸,在滴定盐酸时，滴到酚酞变色时,二氧化碳不能完全释放出来，碳酸钠只生成了碳酸氢钠,而不会生成氯化钠,所以会造成结果得偏差、而从实际上来讲，如果装氢氧化钠瓶子得密封性很好,氢氧化钠最多也只吸收了瓶内空隙那微量得二氧化碳，对分析结果得影响可以忽略不计了,但如果吸收了外面得二氧化碳,那可想而知,与外面空气接触时,氢氧化钠标液中得水份也不知道挥发了多少,这样一来,结果得准确度就不好说了、二、有机酸摩尔质量得测定一、实验目得1、进一步熟悉差减称量法得操作。
有机酸含量的测定实验报告
有机酸含量的测定实验报告有机酸含量的测定实验报告引言：有机酸是一类含有碳元素的酸，广泛存在于自然界中的植物和动物体内。
有机酸具有多种生物学功能，如参与能量代谢、维持酸碱平衡等。
本实验旨在通过测定某种水果中有机酸的含量，了解有机酸在食物中的分布情况，为食品质量评价提供参考。
实验材料与方法：1. 实验材料：- 某种水果（例如柠檬、苹果等）- 0.1 mol/L NaOH溶液- 酚酞指示剂- 精密天平- 量筒- 锥形瓶- 烧杯- 滴定管2. 实验方法：a. 准备工作：- 将某种水果洗净并切碎，取适量的果肉放入锥形瓶中。
- 用量筒量取适量的0.1 mol/L NaOH溶液。
b. 滴定实验：- 在锥形瓶中加入适量的酚酞指示剂。
- 用滴定管将0.1 mol/L NaOH溶液滴加到锥形瓶中，直到颜色由无色变为粉红色。
记录滴定所用的NaOH溶液体积V1（单位：mL）。
- 重复上述操作3次，取平均值。
c. 计算有机酸含量：- 根据滴定实验中所用的NaOH溶液体积V1，计算出某种水果中有机酸的含量（单位：mol/L）。
实验结果与讨论：经过实验测定，某种水果中有机酸的含量为X mol/L。
这表明该水果富含有机酸，具有一定的酸味。
有机酸在食物中的存在形式多样，可以以游离酸或酸盐的形式存在。
在某种水果中，有机酸可能以柠檬酸、苹果酸等形式存在。
这些有机酸不仅赋予了水果特有的酸味，还具有促进食欲、增加食物口感等作用。
有机酸含量的测定对食品质量评价具有重要意义。
高含量的有机酸可能导致食物味道过酸，影响食品口感和消费者的接受度。
因此，在食品生产和加工过程中，需要根据有机酸含量进行调整，以确保食品的口感和品质。
本实验中所用的滴定法是一种常见的测定有机酸含量的方法。
通过滴定NaOH溶液与水果中的有机酸反应，可以确定有机酸的含量。
然而，滴定法只能测定总有机酸含量，无法区分不同种类的有机酸。
因此，在实际应用中，还需要结合其他分析方法，如色谱法、质谱法等，来进一步确定有机酸的种类和含量。
[工学]食品中有机酸的分离与测定
![[工学]食品中有机酸的分离与测定](https://img.taocdn.com/s3/m/d0ab1c61b307e87101f696aa.png)
二、试剂 草酸、柠檬酸、苹果酸、酒石酸、琥珀酸、 延胡索酸所有溶液均用重蒸馏水配制。用 10mmol/L磷酸盐缓冲溶液配制各分析样 品浓度为0.01mol/L， 4℃下保存不超过 3d,使用之前应用分离缓冲溶液稀释到所需 浓度。电泳缓冲溶液为pH6.5的 10mmol/LPBS,其中添加溴化十六烷基溴 化吡啶0.4mmol/L和β-CD15.0mmol/L. 所有溶液在电泳之前均需要用0.25um醋酸 纤维膜过滤。
六、结果计算 将同一色谱条件下得到的样品色谱图和 有机酸标准溶液色谱图进行对照，根据色 谱峰的保留时间定性。必要时可在样液中 加入一定量的某种有机酸标准液以增加峰 高方法来进行定性。根据峰面积或峰高进 行定量，再根据样品稀释倍数即可求出样 品中各有机酸的含量。 图7-3是上述色谱条件下的桔子提取液色谱 图。
三、试剂 离了交换树脂:使用阳离了交换树脂 AmberLite(一种人工合成的酚甲醛离子交 换树脂)CG120、阴离了交换树脂 AmberLite CG4B ; AmberLite IRA410。 四、仪器 气相色谱仪:装有氢火焰离了检测器，程序 升温装置。 色谱柱:填充10%SiLicone Dc560 （6080日）的3mm X 2m不锈钢柱或玻璃柱。
五 操作方法 1 样品处理 (1) 固体样品:称取5-10g样品(视有机酸含量而 定)于加有石英砂的研钵中研碎，用25 mL80% 乙醇转移到50mL锥形瓶中，于750C水浴中加热 浸提15min，在20000r/min下离心20min,沉淀 用10mL80%乙醇洗涤两次，离心分离后，合并 上清液并定容50mL。取5mL上清液于蒸发皿中， 在75℃水浴上蒸干，残渣加5mL流动相溶解，离 心，上清液经0.45um滤膜在真空下超滤后进样。 (2)液体样品:吸取5mL样液(视有机酸含量酌情 减)于蒸发皿中，在75 ℃ 水浴上蒸干，残渣加 5mL 80%乙醇溶解，离心，上清液水浴蒸十， 残渣加5mL流动相溶解，离心，上清液经 0.45um滤膜于真空下超滤后进样。
有机酸摩尔质量的测定
有机酸摩尔质量的测定一、实验目的。
1、掌握有机酸摩尔质量的测定原理和方法；2、明确多元酸滴定中的及称量过程中应注意的若干问题；3、掌握NaOH溶液的配制及标定原理和方法；4、熟练掌握称量、溶液配制及滴定分析的基本操作。
二、实验原理。
1、称量台秤：在称量之前，要先调整台秤的零点。
调整好零点后，称量时，左盘放称量物，右盘放砝码。
砝码用镊子夹取，10g 或5g以下的质量的砝码，可直接移动游码标尺上的游码。
当加减砝码到台秤指针停在刻度盘的中间位置时，台秤处于平衡状态。
称量物的质量=砝码+游码电子天平：称量时，横梁围绕支承偏转，传感器输出电信号，经整流放大反馈到力矩线圈中，然后使横梁反向偏转恢复到零位，此力矩线圈中的电流经放大且模拟质量数字显示。
此数字就是称量物的质量。
2、溶液的配制NaOH溶液的配制：因为NaOH没有基准物质，故不能直接准确配制，应用间接法配制。
其过程：计算—>称量—>溶解-->转入容量瓶，稀释至刻度线-->装瓶-->贴标签—>备用用配制好的NaOH溶液标定邻苯二甲酸氢钾基准试剂。
NaOH +KHC8H4O4 =KNaC8H4O4 + H2OC( NaOH )=m(邻苯二甲酸氢钾）*10^3/(M(邻苯二甲酸氢钾）V( NaOH ))柠檬酸溶液的配制：因为柠檬酸(C6H8O7 .H2O)能稳定存在，且摩尔质量大，可做基准物质，故可用直接法配制柠檬酸溶液。
其过程：计算—>称量—>溶解-->转入容量瓶，稀释至刻度线-->装瓶-->贴标签—>备用3、滴定分析强酸强碱以及CKa和CKb的弱酸弱碱大于或等于10^-8,均可用标准浓度的酸或标准浓度的碱进行直接滴定。
对于二元弱酸，若Ka1/ Ka2>10^5,则可分步滴定；若Ka1/ Ka2<10^5,则不可分步滴定，只能测定二元酸两步电离的总酸。
柠檬酸（C6H8O7）:Ka1=7.4*10^-4 Ka2=1.7*10^-5Ka3=4.0*10^-7 M(柠檬酸)=210.14g/mol因为：CKa1> CKa2 > Ka3>10^-8Ka1/ Ka2<10^5 Ka2/ Ka3<10^5故柠檬酸的三步电离的酸不能分步滴定，只能测其总酸量。
有机酸实验报告
有机酸实验报告有机酸实验报告引言：有机酸是一类含有羧基（-COOH）的有机化合物，具有酸性质。
本次实验旨在通过对几种常见的有机酸的实验，探究它们的酸性质、溶解性以及其他相关特性。
实验一：酸碱指示剂的使用首先，我们需要了解酸碱指示剂的作用。
酸碱指示剂是一种能够根据溶液的酸碱性质而改变颜色的物质。
常见的酸碱指示剂有酚酞、甲基橙等。
我们将使用酚酞作为酸碱指示剂，通过观察它的颜色变化来判断溶液的酸碱性质。
实验二：酸的溶解性我们将选取几种常见的有机酸，如乙酸、柠檬酸和醋酸，与水进行混合，并观察它们的溶解性。
首先，我们用酚酞作为指示剂，将少量的酸滴入水中，观察溶液的颜色变化。
如果溶液呈现红色，说明酸已经完全溶解；如果溶液呈现橙色或黄色，说明酸未完全溶解；如果溶液呈现无色，说明酸不溶于水。
实验三：酸的酸性质我们将选取乙酸和柠檬酸作为代表，通过酸碱中和反应来测定它们的酸性质。
首先，我们用酚酞作为指示剂，将少量的碱滴入酸溶液中，观察溶液的颜色变化。
当酸完全中和时，溶液由红色变为橙色，这表明酸的酸性质较强。
实验四：酸的电离度我们将选取乙酸和柠檬酸作为代表，通过电导实验来测定它们的电离度。
首先，我们将准备两个电导仪，一个用于测定纯水的电导率，另一个用于测定酸溶液的电导率。
然后，将电导仪分别插入纯水和酸溶液中，观察电导仪的示数。
如果纯水的电导率较低，而酸溶液的电导率较高，说明酸具有较高的电离度。
实验五：酸的强弱我们将选取几种常见的有机酸，如乙酸、柠檬酸和醋酸，通过酸碱中和反应来测定它们的强弱。
首先，我们用酚酞作为指示剂，将等量的碱滴入不同的酸溶液中，观察溶液的颜色变化。
如果溶液的颜色变化较快，说明酸的强度较强；如果溶液的颜色变化较慢，说明酸的强度较弱。
实验六：酸的应用有机酸在生活中有广泛的应用。
我们将以乙酸为例，介绍它的应用。
乙酸可以用作食品添加剂，如食醋；也可以用作溶剂，如醋酸乙酯；此外，乙酸还可以用于制备染料、塑料和药物等。
NaOH的标定有机酸摩尔质量的测定
第六周实验（第二次）班级：姓名：学号：实验时间：一、NaOH的标定一、实验目的（1）进一步练习滴定操作。
（2）学习酸碱标准溶液浓度的标定方法。
二、简要原理NaOH标准溶液是采用间接法配制的，因此必须用基准物质标定其准确浓度。
NaOH标准溶液的标定用邻苯二甲酸氢钾（KHC8H4O4简写为KHP）为基准物质，酚酞作指示剂。
三、仪器与试剂0.1mol/L NaOH标准溶液邻苯二甲酸氢钾酚酞指示剂四、实验步骤在分析天平上用差减法准确称取邻苯二甲酸氢钾0.4-0.6g三份，分别置于三个已编号的250mL锥形瓶中，加入50mL去离子水，摇动使之溶解。
加入2滴酚酞指示剂，用NaOH标准溶液滴定，溶液由无色至微红色半分钟不褪，即为终点。
五、数据记录及处理五、思考题1、如何计算称取基准物质邻苯二甲酸氢钾的质量范围？答：根据消耗的标准溶液的体积在20---30mL，来计算基准物质的质量范围。
的大多，一方面浪费，另一方面,称的太多，消耗的标准溶液的将会超过滴定管的最大体积, 造成误差；消耗的标准溶液的体积太少,测量误差太大。
2、标定NaOH溶液浓度时称量KHC8H4O4需不需要十分准确？溶解时加水量要不要十分准确？为什么？答：标定溶液浓度时称量不需要准确测量KHC8H4O4的质量，因为公式中KHC8H4O4的质量是实际称得的质量，称量在0.5000±0.0500范围内都是允许的。
溶解时加水量也不需要十分准确，因为计算需要的是它的质量，与溶解时的加水量无关，所以加水量不需十分准确。
3、用KHP标定NaOH溶液时为什么用酚酞而不用甲基橙作指示剂？答：邻苯二甲酸氢钾相当于弱酸，与氢氧化钠反应后生成的产物是邻本二甲酸二钾，若正好中合，则弱酸强碱盐溶液呈碱性；而甲基橙的变色范围是3.1-4.4，变色发生在酸性溶液中，无法指示碱性溶液，也就是无法指示反应的终点。
4、如果用NaOH标准溶液在保存过程中吸收了空气中的CO2,用该标准溶液滴定盐酸,以甲基橙为,对结果有什么影响?答：1.吸收二氧化碳,溶液中有碳酸钠，果以甲基橙为指示剂,刚开始的颜色是红色,终点是橙色,ph在3.1-4.4之间,盐酸稍过量.这种情况下碳酸钠也会被反应成氯化钠,应该没有影响.如果以酚酞为指示剂,刚开始无色,终点红色,ph在8-10之间,碱过量.这种情况下,碳酸钠会被反应成碳酸氢钠,相当于有一部分氢氧化钠没有参与反应,消耗的氢氧化钠体积变大,结果偏大.首先,从理论上来讲,吸收了空气中的CO2会生成碳酸钠,用该标准溶液滴定盐酸,以甲基橙为指示剂,对结果没有什么影响.因为氢氧化钠之前吸收了二氧化碳,与盐酸反应后又完全释放出来,所以摩尔比是一样的.但是,如果用酚酞作指示剂,结果还是有影响的,结果应该偏高.因为吸性的二氧化碳相当于是吸收了碳酸,在滴定盐酸时,滴到酚酞变色时,二氧化碳不能完全释放出来,碳酸钠只生成了碳酸氢钠,而不会生成氯化钠,所以会造成结果的偏差.而从实际上来讲,如果装氢氧化钠瓶子的密封性很好,氢氧化钠最多也只吸收了瓶内空隙那微量的二氧化碳,对分析结果的影响可以忽略不计了,但如果吸收了外面的二氧化碳,那可想而知,和外面空气接触时,氢氧化钠标液中的水份也不知道挥发了多少,这样一来,结果的准确度就不好说了.二、有机酸摩尔质量的测定一、实验目的1、进一步熟悉差减称量法的操作。
实验六 果蔬中含酸量的测定
实验六果蔬中含酸量的测定(中和法）一、目的及原理果蔬中含有各种有机酸，主要有苹果酸、柠檬酸、酒石酸等。
由于果蔬种类不同，含有机酸的种类也不同；同一果蔬品种，其成熟度不同，有机酸的含量也有很大差异。
果蔬中含酸量的多少亦是衡量其品质优劣的一个重要指标，它与新鲜果蔬及加工处理后成品的风味关系密切。
因此，了解其含量对鉴定果蔬品质及进行合理加工有重要作用。
通过实验，使学生了解果蔬总酸量测定的原理，学会并掌握果蔬含酸量测定的方法。
果蔬含酸量的测定是根据酸碱中和的原理，即用已知浓度的氢氧化钠溶液滴定，并根据碱溶液用量，计算出样品的含酸量。
所测出的酸又称总酸度或可滴定酸。
还有少量的酸，由于受果蔬中缓冲物质的影响，不易测出。
计算时以该果实所含的主要酸来表示，如仁果类、核果类主要含苹果酸，以苹果酸计算，其毫摩尔质量为0.067g；柑桔类以柠檬酸计算，其毫摩尔量为0.064g；葡萄以酒石酸计算，其毫摩尔量为0.075g；蔬菜中主要含草酸，其毫摩尔量为0.045g。
二、药品与器材桃、杏、葡萄、番茄、莴苣等；0.1N氢氧化钠、1%酚酞指示剂；50ml或10ml滴定管、200ml容量瓶、20ml移液管、100ml烧杯、研钵、分析天平、漏斗、棉花或滤纸、小刀、白瓷板、滴定管。
三、操作与步骤称取均匀样品20g，置研钵中研碎，注入200mL容量瓶中，加蒸馏水至刻度。
混合均匀后，用棉花或滤纸过滤到干燥的250 ml烧杯中。
吸取滤液20ml放入100mL烧杯中，加酚酞指示剂2滴，用0.1N NaOH滴定，直至成淡红色为止。
记下NaOH液用量。
重复滴定三次，取其平均值。
某些果蔬容易榨汁，而其汁液含酸量能代表果蔬含酸量，可以榨汁，取定量汁液（10ml）稀释后（加蒸馏水至20ml），直接用0.1N NaOH液滴定。
计算：VxCx折算系数 B果蔬含酸量%= ――――――― x ― x100b AV = NaOH液用量（毫升）C = NaOH液当量浓度（mol/L）A = 样品克数B = 样品液制成的总毫升数b = 滴定时用的样品液毫升数折算系数= 以果蔬主要含酸种类计算，一般苹果为0.067，柑橘为0.064，猕猴桃为0.064。
实验六有机酸摩尔质量的测定X X X
实验六有机酸摩尔质量的测定一、实验目的1. 掌握NaOH标准溶液的标定方法。
2. 掌握有机酸摩尔质量的测定方法。
二、实验原理物质的摩尔质量可以根据滴定反应从理论上进行计算。
本实验要求准确测定一种有机酸的摩尔质量值。
大多数的有机酸是弱酸。
如果某有机酸易溶于水，离解常数Ka≥10-7，用标准碱溶液可直接测其含量，反应产物为强碱弱酸盐。
由于弱酸根与水溶液中水合质子反应，使滴定突跃范围在弱碱性内，可选用酚酞为指示剂，滴定溶液由无色变为微红色即为终点。
根据NaOH 标准溶液的浓度和滴定时消耗的体积，计算该有机酸的摩尔质量值。
本实验还利用NaOH溶液的标定结果，用误差理论进行处理。
三、仪器与试剂1. NaOH溶液 0.1mol·L-1在台秤上称取约4g固体NaOH放入烧杯中，加入新鲜的或煮沸除去CO2的蒸馏水，使之溶解后，转入带有橡皮塞的试剂瓶中，加水稀释至1L，充分摇匀。
2．酚酞指示剂 0.2％乙醇溶液3．邻苯二甲酸氢钾KHC8H4O4基准物质在100-125°C干燥1小时后，放入干燥器中备用。
4. 有机酸试样，如草酸、酒石酸、柠檬酸①。
四、实验方法1．0.1 mol·L-1NaOH溶液的标定．在称量瓶中称量KHC8H4O4基准物质，采用差减法称量，平行称7份，每份0.4-0.6g，分别倒入250ml锥形瓶中，加入40-50ml水使之溶解后，加入2-3滴0.2％酚酞指示剂，用待标定的NaOH溶液滴定至呈现微红色，保持半分钟内不褪色，即为终点。
平行测定7份，求得NaOH溶液的摩尔浓度，其相对平均偏差≤0.2％。
否则需重新标定。
2．有机酸摩尔质量值的测定准确称取有机酸试样一份置于小烧杯中，根据选择的试样计算称样为多少②。
称好试样后，加水使之溶解，定量转入250ml容量瓶中，加水稀释至刻度，充分摇匀。
用25.00ml移液管平行移取三份，分别放入250ml锥形瓶中加酚酞指示剂2-3滴，用NaOH标准溶液滴定溶液由无色呈现微红色，30秒钟内不褪色即为终点。
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7种有机酸标准混合液，吸取各有机酸10 ml定容到100ml，即可作工作液。
（本实验只配MA、CA、TA三种标准混合液）
五、操作步骤
（一）样品制备
称取水果(苹果）200g左右，洗净、切碎， 用组织捣碎机匀浆，称样品10g，置三角 瓶中，加入pH2.65 重蒸水60－70ml，沸 水浴中加热60min以浸提有机酸，冷却， 用pH2.65重蒸水移入100ml容量瓶中，定
（四）样品测定：
取样品处理液20ul 进行色谱分析，以标 准色谱图进行对照，根据保留时间确定
样品中的各种有机酸。
六、计算
按下列公式计算样品中各种有机酸的含量（C）
C=N*(H/Hm)*F.50.(V/W).(1000/1000)
式中：C—各种有机酸的含量，以mg/kg(L)表示 N—20ul有机酸含量ug/20ul H—样品中某种有机酸的峰高(mm) Hm—标准溶液中某种有机酸的峰高（mm) F—稀释倍数 V—样品的定容体积（100ml) W—样品的称取量（g或ml)
三、材料与仪器
材料：果蔬、橘汁、酒等。
仪器：高效液相色谱仪（Agilent 1100)、
分析天平、组织捣碎机、研钵、三角瓶、
水浴、离心机、0.45um滤膜、溶剂过滤
器、 样品过滤器等。
四、试剂
磷酸（AR） 流动相的制备：用磷酸调节新配制的重
蒸水pH至2.65,置超声波振荡仪上排气后 用0.45um膜过滤，待用。
八、实验报告要求
预习报告：根据查阅有机酸测定文献资料及
教材写出预习报告。
实验报告：
1、各浓度标准苹果酸洗脱图
2、样品洗脱图。（要求编辑成WORD文档打印）
3、绘制标准工作曲线（在EXCEL中进行打印）。
4、结果计算报告
实验分组安排
全班以2人/组为单位，进行提取样品一份 供检测，约1小时左右。 液相系统条件设定平衡1小时左右 100ug/ml,50ug/ml,25ug/ml,12.5ug/ml,6.25ug /ml,3.125ug/ml浓度苹果酸进样，绘制工作 曲线，约1小时左右。 样品进样分析测定：1-15组轮流进样（约 20分钟/组） 系统冲洗维护。
பைடு நூலகம்
（三）标准曲线的制作
取有机酸标准母液(苹果酸）用倍比稀释法稀释
成100ug/ml,50ug/ml,25ug/ml,12.5ug/ml,
6.25ug/ml,3.125ug/ml浓度，进样量为20ul,进行分
离，并以各种有机酸的浓度对峰高（或峰面积）
分别制成标准曲线。在标准曲线的线性范围内 进行样品中各种有机酸含量的测定。
有机酸标准母液配制：分别称取苹果酸
10mg，柠檬酸10mg、酒石酸5mg，琥珀酸 20mg，延胡索酸10mg，吸取乳酸10ul，冰乙 酸10ul，置100ml棕色容量瓶中，以 pH2.65重 蒸水溶解并定容，使有机酸的浓度分别为 100,100,50,200,100,100和100mg/kg. （本实验只配苹果酸10mg，柠檬酸10mg、酒 石酸5mg定容到100ml为母液）
实验六、有机酸的测定
（HPLC法）
一、实验目的
学习和掌握有机酸样品的处理和HPLC检 测方法。
进一步了解高效液相色谱仪的使用操作 性能。 掌握标准工作曲线的建立、数据的处理 及定量分析。
二、原理
果蔬及其制品、各种酒类、乳及乳制品中的主要 有机酸可用高效液相色谱进行测定。样品经过处 理、离心及超滤，用C-18反相柱和pH2.65的纯蒸 馏水作流动相，在紫外214nm处定量测定。 本法可同时测定柠檬酸、苹果酸、酒石酸、 琥珀酸、乳酸、乙酸及延胡索酸等7种有机酸。
思考题
1、有机酸的测定 —HPLC法中样品峰的定性依 据是什么？ 2、通过本次实验要想得到分离效果较好的样
品洗脱图谱的工作条件主要取决于哪些？
3、HPLC法测定有机酸与其它方法比较有哪些 优点？
容，过滤，再用 0.45um微孔滤膜过滤，
待上机测定。
（二）色谱条件
色谱柱:十八烷基硅烷键合硅胶填料Octadecylsilyl， 简称ODS）C-18(150*3.9mm,walers)
流动相：pH2.65重蒸水（用磷酸调制） 流速：0.4ml/min 检测器：UV214nm 柱温：18~20度 进样量：20ul
本实验用样品洗脱曲线的峰面积查标准 曲线计算结果。注意单位换算。
七、注意事项
本方法的回收率试验表明，除易挥发的乙酸外， 其它有机酸的回收率都较理想。
实验中可用已知浓度的苹果酸25ug/ml,进样20ul 计算样品回收率。 上机之前对各样品及标样用0.45um膜过滤2ml左 右，并用剩余的样品测 pH值, pH小于2.5不能 上机。 手动进样时必需用力均匀，水平注入，避免进 样引起误差。